调宁蛋白在Oddi括约肌表达及在胆结石形成中的作用

目的研究平滑肌收缩调控蛋白－调宁蛋白在胆结石动物Ｏｄｄｉ括约肌中的表达，从分子水平上阐明胆结石形成的机制。方法饲予豚鼠高胆固醇饮食，分别在３０天和６０天取出Ｏｄｄｉ括约肌，应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和蛋白质免疫印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ）检测动物Ｏｄｄｉ括约肌调宁蛋白基因的表达水平。结果发现在结石形成过程中，调宁蛋白基因的表达水平逐渐下降，３０天组和６０天组的调宁蛋白含量和ｍＲＮＡ水平均比对照组低，且６０天组比３０天组低，而另一调控蛋白肌球蛋白的表达水平无明显变化。结论调宁蛋白表达水平的下降，可能使Ｏｄｄｉ括约肌的张力增加，加重胆汁淤滞，促使胆结石的形成。     

P53,Bcl-2与Bax蛋白在胃癌组织中的表达

①目的 探讨P53,Bcl-2与Bax蛋白在胃癌组织中的表达及意义。②方法 应用免疫组化技术，检验45例胃癌组织、21例胃溃疡组织中P53，Bcl-2,Bax蛋白的表达。③结果 胃癌组织中P53，Bcl－2，Bax蛋白的阳性表达率分别为42．2％，4．4％、93．3％，胃溃疡组织中的阳性率分别为0，0，52．4％，P53与Bax表达在胃癌及胃溃疡组织中的表达差异有显著性（uc＝4．48，6．35，P＜0．01），Bcl－2蛋白在胃癌及胃溃疡组织中的表达差异无显著意义（uc＝0．50，P＞0．1）。④结论 P53，Bax蛋白的表达与胃癌的发生可能有关。     

缺铁与胆囊结石形成关系的研究

本文检测了 110例 (男 32 ,女 78)胆囊结石病人的血清铁水平 ,低于正常值者 31例 ,占 2 8 2 % ;其中女性 2 5例 ,占80 6 % ,男性仅 6例 ,占 19 4%。铁在肝脏的酶代射过程中扮演着重要角色 ,因此 ,缺铁可能改变胆固醇的代谢 ,增强胆囊结石的形成。     

RT-PCR检测NK1mRNA在哮喘豚鼠气道表达的研究

目的 应用RT-PCR半定量法检测哮喘豚鼠气道神经激肽1受体(NK1)mRNA表达的相对含量.方法 用卵蛋白超声雾化法制作哮喘豚鼠模型,随机分成正常对照组及诱喘组.RT-PCR技术检测(NK1)mRNA,图像分析测定(NK1)mRNA的相对含量.结果 诱喘组(NKl)mRNA的相对含量较正常组明显增多.结论 NK1参与了卵蛋白诱发哮喘的发病机制.     

骨形成蛋白在慢性化脓性中耳炎豚鼠中耳粘膜的表达

目的 :了解骨形成蛋白 (Bonemorphogeneticprotein ,BMP)在豚鼠化脓性中耳炎中耳粘膜的表达及定位 ,为研究BMP在慢性中耳炎炎症转归及在鼓室硬化中的作用提供实验依据 .方法 :2 6只豚鼠麻醉后 ,在无菌条件下于右耳经鼓膜注射 1× 1 0 8·L-1 的金葡菌液 1 0 0 μL ,左耳作正常对照 ,制成慢性化脓性中耳炎模型 ,4 5d后用BMP单克隆抗体免疫组化染色对炎症中耳粘膜BMP的表达进行分析 .结果 :中耳粘膜实验组 (n=2 5 )和对照组 (n =2 5 )BMP阳性细胞数分别为 (39.0 4± 5 .34)和 (9.2 4± 1 .83) (t=2 7.1 6 ,P <0 .0 1 ) ,慢性炎症作用下中耳粘膜BMP表达较正常粘膜明显增强 ,阳性细胞主要位于增生小血管周围 .结论 :实验证实BMP在化脓性中耳炎时参与中耳粘膜的炎症反应 ,并可能对中耳炎引起的中耳粘连以及鼓室硬化的发生有一定作用     

P27kip1蛋白在甲状腺乳头状癌的定量表达及其与P53的关系

目的 探讨P27^kip1蛋白在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中定量表达的临床意义及其与p53的关系。方法 应用SP免疫组织化学方法和图像分析技术检测P27^kip1和P53蛋白的表达。结果 甲状腺滤泡性腺瘤（TFA），各种不同临床病理分期的PTC的P27^kip1蛋白阳性细胞的平均积分光密度值（AODV）依次递减，具有统计学意义（P＜0．01），而单位面积阳性细胞个数（NPA）在TFA与PTC（Ⅰ期），PTC（Ⅱ期）与PTC（Ⅲ-Ⅳ期）中差别不显著（P＞0．05）。在PTC中，p53表达阴性组的P27^kip1蛋白的AODV显著高于p53表达阳性组（P＜0．01）。结论 P27^kip1在PTC发生和发展过程中发挥重要的作用，其蛋白水平和／或结合P53蛋白表达情况具有重要的临床价值。     

釉鞘蛋白在小鼠牙胚发育中的时空表达

目的:观察釉鞘蛋白(ameloblastin)在小鼠牙胚发育中表达的时空顺序及分布,探讨釉鞘蛋白在釉质发育矿化中的作用。方法:采用原位杂交的实验方法,观察釉鞘蛋白在牙胚发育的增殖分化期、分泌初期及分泌期的表达。结果:釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期表达为阴性,分泌初期细胞内及新生釉基质中开始出现弱阳性表达;至分泌期,细胞内及新生釉基质中均呈强阳性表达。成熟釉质中无釉鞘蛋白mRNA的阳性表达。结论:本实验从分子水平上进一步明确了釉鞘蛋白的时空表达,并推测釉鞘蛋白可能介导了釉质的发育矿化,它与牙齿发育、釉基质矿化反应等过程密切相关。     

丙型肝炎病毒核心蛋白基因的表达载体构建及在酵母中的表达

目的：为探讨丙型肝炎病毒（HCV）核心（core）蛋白的功能，在真核生物酵母细胞中表达HCV核心蛋白基因。方法：用多聚酶链反应（PCR）的方法在HCV全长质粒pBRTM／HCV为膜板扩增HCV核心蛋白基因，克隆到pGEM－T载体中，双酶切后回收连接到酵母表达质粒pGBKT7中表达。提取酵母蛋白质，进行十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）和Western免疫印迹分析。结果：成功构建HCV核心蛋白基因酵母表达载体，Western免疫印迹显示了HCV核心蛋白在酵母细胞中表达。表达产物在胞内存在，分子量22000ku左右。结论：HCV核心蛋白在酵母中表达成功。     

子痫前期患者血清STOX1、sFlt-1 与病情及妊娠结局的关系

目的 探讨子痫前期（PE）患者血清STOX1、可溶性Fms 样酪氨酸激酶-1（sFlt-1）与病情 及妊娠结局的关系。方法 选取2017 年6 月—2018 年6 月于天津市南开医院接受治疗的PE 患者92 例,其 中50 例轻度PE 患者作为轻度PE 组、42 例重度PE 患者作为重度PE 组,另选取同期在该医院进行产检的健 康妊娠女性50 例作为对照组。比较3 组研究对象的平均动脉压、24 h 尿蛋白定量、血清STOX1、sFlt-1 水 平及妊娠结局,分析PE 患者血清STOX1、sFlt-1 水平与平均动脉压、24 h 尿蛋白定量的相关性,分析PE 患 者不良妊娠结局的影响因素。结果 重度PE 组和轻度PE 组平均动脉压、24 h 尿蛋白定量及血清STOX1 和sFlt-1 水平高于对照组（P <0.05）,重度PE 组高于轻度PE 组（P <0.05）;重度PE 组胎儿死亡、羊水污 染≥Ⅲ度、胎儿宫内窘迫、HELLP 综合征、胎盘早剥、子痫、心衰及肺水肿发生率均高于对照组和轻度PE 组（P <0.05）;轻、重度PE 组的血清STOX1、sFlt-1 水平与平均动脉压、24 h 尿蛋白定量均呈正相关（P <0.05）; 不同平均动脉压、24 h 尿蛋白定量、STOX1 及sFlt-1 的不良妊娠结局发生率比较,差异有统计学意义（P <0.05）。 结论 PE 患者血清STOX1、sFlt-1 水平与病情及妊娠结局密切相关。     

The Study on the Relationship between the Expression ofCalponin and Gallstone Formation

Calponin,aconstituentofsmoothmusclethinfilaments,isconsideredtobeanimportantmodulatorofsmoothmusclecon-traction.Itinhibitsactin-activatedmyosinATPaseactivityandsmoothmusclemotili-ty.lftheexpressionlevelofcalponinde-creasestocertainextent,itsabilitytoin-hibitsmoothmugclecontractionwillde-creasetoo.Inaddition,calponinisregulat-edbythephosphorylationanddephosphory-lation.Becausecalponinisasmoothmusclespecificproteininthecontrolofsmoothmusclefunction4thereweremanyreportsonitsimplication.Cholelit…     

豚鼠卵巢组织片和分离的窦前卵泡玻璃化冷冻效果比较

目的：比较分析不同玻璃化冷冻配方对豚鼠卵巢组织片和单个窦前卵泡形态、存活率及体外发育能力的影响。方法：取5周龄雌性豚鼠卵巢,实验分新鲜对照组、组织片A液毒性组、组织片B液毒性组、卵泡A液毒性组和卵泡B液毒性组,及相应的冻融组,即组织片A液冻融组、组织片B液冻融组、卵泡A液冻融组、卵泡B液冻融组,共9组行毒性试验和冷冻保存。各组卵巢组织片行HE染色形态学观察,分离窦前卵泡经锥虫蓝染色活力测试并行体外培养。结果：A液冻融组和B液冻融组豚鼠卵巢组织片HE染色光镜观察可见大部分卵泡形态正常,A液组和B液组异常窦前卵泡数与新鲜对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在分离的窦前卵泡锥虫蓝染色活力测试中,冻融卵巢组织片A组的卵泡复苏率（为66．1％）显著低于（P〈0．05）冻融卵泡B液组（为78．5％）和新鲜对照组（为87．5％）;其余组别之间差异无统计学意义。体外培养卵泡发育情况组织片冷冻组比卵泡冷冻组差,以A液组尤甚,第6天存活卵泡数目不足（为20．0％）,与新鲜对照组（为60．0％）及卵泡B液冻融组（为50．0％）相比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：玻璃化冷冻法能较好地冷冻保存豚鼠卵巢组织片和分离的窦前卵泡,而单个豚鼠窦前卵泡玻璃化冷冻优于卵巢组织片的玻璃化冷冻;B液较A液更适合豚鼠卵巢卵泡的玻璃化冷冻保存。窦前卵泡的体外培养证明玻璃化冷冻复苏卵泡具有一定的继续发育能力。     

过量谷氨酸钠对豚鼠视网膜内突触小泡蛋白表达的影响

目的探讨过量谷氨酸钠对豚鼠视网膜内突触小泡蛋白表达的影响及其意义。方法实验组给予腹腔注射谷氨酸钠3g·kg-1·d-1,连续7d,对照组注射等量生理盐水,分别在注射后10天取材。采用免疫组织化学方法和图像分析技术,对两组豚鼠视网膜内突触小泡蛋白的免疫反应产物进行检测。结果对照组豚鼠视网膜内突触小泡蛋白的表达为强阳性,主要定位在外网状层和内网状层,实验组视网膜相应区域内阳性反应产物表达的光密度值明显低于对照组(P<0．01)。结论过量谷氨酸可明显抑制视网膜突触小泡蛋白的表达,这可能是造成视觉功能障碍的重要原因。     

哮喘豚鼠气道内NK-1R mRNA表达及其含量的研究

目的:研究哮喘豚鼠气道内神经激肽1受体(NK-1R)mRNA的分布及相对含量.方法:用卵蛋白超声雾化法制作哮喘豚鼠模型;原位杂交技术检测NK-1R mRNA,光镜观察其在气道内表达的部位.图像分析测定NK-1R mRNA的相对含量.结果:哮喘组NK-1R mRNA表达程度明显高于正常组;NK-1RmRNA分布于气管上皮细胞上层细胞表面、黏膜下层、血管周围上皮细胞、炎性细胞的表面和平滑肌细胞、腺体细胞表面.结论:NK-1R参与了卵蛋白诱导的哮喘豚鼠发病机制.     

Effect of Antisense MBD1 Gene Eukaryotic Expression Plasmid on Expression of MBD1 Gene in Human Biliary Tract Carcinoma Cells

DNAmethylationhasavarietyofimportantfunctionsintheregulationofgeneexpression[1].ManystudiesdemonstratedthatthepathogenesisofbiliarytractcarcinomawascloselyassociatedwiththeaberrantDNAmethylationstatusoftumorrelatedgenes.TheaberrantstatusofDNAmethylationincludedthehypomethylationofonco genesandthehypermethylationoftumorsuppres sorgenes(TSG).IncreasingtheexpressionofTSGandimprovingthefunctionofTSGbyelimi natingitshypermethylationstatusmaybeanewwaytotreatbiliarytractcarcinoma.Toexplorether…     

丙酸氯倍他索脂质体的制备和豚鼠湿疹模型药效学研究

目的:制备丙酸氯倍他索(CP)脂质体并考察其稳定性,以及对豚鼠湿疹模型的药效学研究。方法:采用旋转薄膜蒸发法制备CP脂质体,考察样品中主药含量,粒径,包封率等指标的初步稳定性。并采用高倍镜下真皮炎症细胞浸润数进行不同制剂对豚鼠湿疹模型的药效学研究。结果:样品主药含量为(100.84±2.0)%,平均粒径(140.5±56.8)nm,包封率为(90.1±2.3)%。初步稳定性考察结果提示在三种不同储存留样条件下,样品含量、粒径、包封率等关键指标均无明显改变。豚鼠湿疹模型药效学研究结果表明:脂质体组与乳膏组在真皮炎症细胞计数上差异有统计学意义。结论:所制制剂包封率较高,稳定性良好,疗效高于上市乳膏。     

养肝利胆颗粒对豚鼠胆囊胆固醇结石成石率和血浆胆囊收缩素含量的影响

目的：探讨养肝利胆颗粒对豚鼠胆囊胆固醇结石成石率和血浆胆囊收缩素含量的影响。 方法：80只豚鼠随机分为正常组、模型组、养肝利胆颗粒组和熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid．UDCA）组。除正常组外。采用高胆固醇致石食饵诱发法建立豚鼠胆结石动物模型，并于造模当天开始灌胃治疗，养肝利胆颗粒组予养肝利胆颗粒1．81g／（kg·d），UDCA组予UDCA30．12mg／（kg·d），模型组和正常对照组灌胃等容量的生理盐水，连续7周。疗程结束后观察各组豚鼠一般情况变化和胆囊成石率，并用放射免疫法检测血浆胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）的含量。 结果：养肝利胆颗粒能明显改善胆结石豚鼠的一般情况及行为学体征，但不能恢复到正常水平。模型组豚鼠成石率（82．35％）明显高于正常对照组（5．26％）（P〈0．01），养肝利胆颗粒组和UDCA组豚鼠成石率分别为27．78％和38．89％，均明显低于模型组（P〈0．05）。模型组血浆CCK含量较正常对照组明显降低（P〈0．01）．养肝利胆颗粒组和UDCA组血浆CCK含量虽低于正常对照组，但均高于模型组，差异有统计学意义（P〈0．01）。养肝利胆颗粒组和UDCA组血浆CCK含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）。 结论：养肝利胆颗粒能显著降低豚鼠胆结石的成石率，其作用机制可能与养肝利胆颗粒能提高豚鼠血浆CCK含量有关。     

Experimental study on mRNA and protein expression of urokinasetype plasminogen activator in human brain gliomas

Thediscoverythattumorcellscansynthesizeurokinasetypeplasminogenactivator(uPA)wasfirstmadebyAstedtetal[l:.TheuPAactivityiscloselyrelatedtothemalignantbiologicalbehavioroftumors.RecentstudieshaveshownthathumanuPAgeneislocatedatthechromosome1Oandcomprises1lexons.TheuPAmediatedfibrinolyt-icsystemplaysapivotalroleintheprocessofinva-sionandmetastasisingastriccarcinomas,lungcar-+clnomasandbreastcarcinomasetcL2j.ByusingNorthernblothybridizationandimmunohis-tochemicalmethods,theretrospectiveandcom…     

哮喘豚鼠肺组织PKC的表达及对TXA2释放的影响

目的：探讨蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）在哮喘发病中的作用。方法：采用卵蛋白雾化吸入致敏哮喘模型，在诱发哮喘２４ｈ后放射性同位素标记方法测定哮喘豚鼠肺组织总ＰＫＣ活性及膜活性变化，采用免疫组织化学的方法检测肺组织ＰＫＣ的表达，体外检测ＰＫＣ活化剂ＰＭＡ和抑制剂Ｈ－７对肺组织血栓烷Ａ２（ＴＸＡ２）释放的影响。结果：①哮喘组肺组织ＰＫＣ活性显著增加；②ＰＭＡ引起了肺组织ＴＸＡ２的释放的增加，而Ｈ－７则抑制了ＰＭ     

豚鼠椎基底动脉缺血-再灌注对耳蜗损伤的实验研究

目的：探讨椎基底动脉缺血－再灌注耳蜗组织损伤方式有其可能的损伤机制。方法：选用耳廓反射灵敏，体得300－500g的健康杂色豚鼠72只，随机分成6组，即正常对照组，假手术组，缺血30min组，再灌汪1h、6h、24h组。各组动物分别于手术前有处死前分别测试ABR、耳蜗标本HE染色病理检查、耳蜗电镜检查、测定耳蜗组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量、耳蜗组织诱导型－氧化氮合酶（iNOS）免疫组化。结果：缺血组及再灌汪各组脑干诱发电位（ABR）发生明显异常，咯波潜伏期明显延长，阈值升高（P＜0．01）；外毛细胞变形，细胞超微结构改变；耳蜗组织MDA含升高、SOD活力降低；iNOS在耳蜗组织表达明显增强。结论：在底动脉缺血－再灌注损伤呵引起豚鼠ABR各波潜伏期延长和阈值增高，可造成耳蜗毛细胞及血管纹等组织病理损伤。耳蜗组织SOD活力下降及MDA升高参与了椎基底动脉缺血－再灌注耳蜗损伤。耳蜗组织在正常情况下，血管纹、毛细胞及螺旋神经节细胞均有iNOS弱阳性表达，在缺血及再灌注期间iNOS表达增强。