双氢青蒿素阻断食蟹猴疟原虫孢子增殖期发育研究

用双氢青蒿素在食猴疟原虫－大劣按蚊猴疟模型中的试验结果提示，给感染猴一次性口服４０ｍｇ／ｋｇ双氢青蒿素之后，５ｈ内疟原虫总数变化不明显，配子体数量仍继续增加，各期原虫形态观察无改变，但用药后１．５ｈ吸血感染蚊胃内平均卵囊感染数开始明显下降，５ｈ蚊胃未发现卵囊，结果提示，双氢青蒿素不仅具有速效杀灭疟原无性体，复燃率低，剂量少的特点，而且用药后能快速降低食蟹猴疟原虫传疟按蚊蚊胃卵囊感染数，用药５ｈ后可     

双氢青蒿素阻断食蟹猴疟原虫孢子增殖期发育研究

用双氢青蒿素在食蟹猴疟原虫－大劣按蚊猴疟模型中的试验结果显示：给感染猴一次性口服４０ｍｇ／ｋｇ双氢青蒿素之后，５ｈ内疟原虫总数变化不明显，配子体数量仍继续增加，各期原虫形态观察无改变。但用药后１．５ｈ吸血感染蚊胃内平均卵囊感染数开始明显下降，５ｈ后蚊胃未发现卵囊。结果提示：双氢青蒿素不仅具有速效杀灭疟原虫无性体、复燃率低、剂量少的特点，而且用药后能快速降低食蟹猴疟原虫传疟按蚊蚊胃卵囊感染数，用药５ｈ后可阻断吸血蚊疟原虫孢子增殖期的发育。     

广西凭祥一株食蟹猴疟原虫生物学特性的研究

目的 :观察 1991年 10月在中越边境广西凭祥购买的 1只野生食蟹猴 ( M4 )体内发现的疟原虫。方法 :将疟原虫血传给健康的切脾熊猴 ( M6) ,在猴体内的疟原虫配子体在 64个 /10 0 WBC时 ,给大劣按蚊叮咬感染 ,确定孢子增殖期 ,当蚊唾腺发现子孢子时 ,阳性蚊叮咬健康的熊猴 ( M5)后第 8d开始采血观察 ,确定红前期的时间。血内发现疟原虫后开始每 4 h采血 1次的定时观察 ,确定红内期裂体增殖周期及红内期各期疟原虫形态特征。结果 :该株猴疟原虫的孢子增殖期为 11d,红前期为 8d,红内期的裂体增殖周期为 4 8h。早晚期滋养体与人间日疟原虫形态相似 ,被晚期滋养体寄生的红细胞明显胀大 ,阿米巴样活动明显 ,可见薛氏小点 ,成熟的裂殖体内通常可见裂殖子 10— 15个。结论 :试验结果证实 ,该株猴疟原虫为食蟹猴疟原虫并定名为 CVH株 ( Plasmodiumcynomolgi CVH)。     

感染食蟹猴疟原虫B株大劣按蚊的寿命

用食蟹猴疟原虫B株（Plasmodiumrynomolgibastianellii，简称B株猴疟）子孢子接种的恒河猴肝内可长期存在休眠体[1]。因此，B株猴疟一按蚊一恒河猴系统是研究疟疾复发及抗疟根治药常用的实验模型。大劣按蚊对B株猴疟很敏感[2]，了解其感染蚁的寿命对选择大批量收集子孢子的恰当时间有重要意义。材料和方法食蟹猴疟原虫B株1984年由中山大学从英国引进，1987年引入本实验室。大劣按蚊海南株为我室建立的自然交配繁殖种群，本试验用3－5日龄蚊。恒河猴捕自四川涪陵地区．体重3—3．5kg。在血传接种B株猴疟的供血猴原虫血症显著期，供大劣按…     

青蒿琥酯阻断恶性疟传播的研究

目的 观察青蒿琥酯（ATS）对恶性疟原虫配子体的作用。 方法 31例外周血含恶性疟原虫无性体和配子体的志愿者分为ATS组（15例）、奎宁（QN）组（10例）和安慰剂组（6例）。ATS组于第0、6和24 h口服青蒿琥酯片各200 mg,第3～6天100 mg/d;QN组口服硫酸奎宁片,每天3次,500 mg/次,连服7 d;安慰剂组口服复合维生素B片,每天3次,2片/次,连服7 d。每例患者每天检查外周血恶性疟原虫配子体密度,并于服药后第1、7、14、21和28天抽取静脉血人工感染大劣按蚊,检测其感染恶性疟原虫子孢子情况。 结果 服药后ATS组恶性疟原虫配子体相对密度迅速下降,第7、14和21天分别为(12.5±3.3）%、（1.2±0.4）%和（0.3± 0.1）%,转阴时间为（22.0±1.4） d;QN组第7、14和21天恶性疟原虫配子体相对密度分别为（173.9±47.0）%、（112.5±45.4）%和（32.5±17.8）%,转阴时间为（32.5±2.1）d,两组间转阴时间差异有统计学意义（t=4.731,P＜0.01）;安慰剂组住院后恶性疟原虫配子体相对密度有所下降。患者血液人工感染大劣按蚊试验显示,服药第14天,ATS组、QN组和安慰剂组的子孢子阳性率分别为0、35.0％和48.7％。子孢子相对感染强度, ATS组第7和14天分别为18.2%和0;QN组第7、14和21天分别为142.0%、98.6%和20.3%。安慰剂组第1、7、14、21和28天子孢子感染强度较稳定, 均为100%(6/6)。 结论 口服ATS 6 d总量1 000 mg对阻断恶性疟传播有良好的作用。     

广西凭一株食蟹猴疟原虫生物学特性的研究

目的：观察１９９１年１０月在中越边境广西凭祥购买的１只野生食蟹猴（Ｍ４）体内发现的疟原虫。方法：将疟原虫血传给健康的切脾熊（Ｍ６），在猴体内的疟原虫配子体在６４个／１００ＷＢＣ时，在劣按蚊叮咬感染，确定孢子增殖期，当蚊唾腺发育子孢子时，阳性蚊叮咬健康的熊猴（Ｍ５）后第８天开始采血观察，确定红前期的时间。血内发现疟原虫后开始每４ｈ采血１次的定时观察，确定红内期裂体增殖周期及红内期各期疟原虫形态特征。     

感染食蟹猴疟原虫的大劣按蚊血淋巴和胃水解物氨基酸分析

大劣按蚊感染食蟹猴疟原虫B株后第10d,血淋巴内的蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、鸟氨酸、赖氨酸含量均较对照组低。第9d蚊胃水解物分析结果表明,感染蚊胃中的多数氨基酸含量增加,其中缬氨酸、蛋氨酸、酪氨酸的含量是对照组3倍以上,氨基酸的总量比对照组高70％以上。     

食蟹猴疟原虫B株配子体对蚊媒感染力的观察

接种食蟹猴疟原虫B株(Plasmodium cynomol-gi bastianellii,简称B株猴疟)子孢子的恒河猴肝细胞内可长期存在休眠体。因此,B株猴疟—按蚊一恒河猴系统对根治药研究有重要价值。传统的观点认为疟原虫成熟配子体在血液内保持对蚊媒的感染力可长达数十日之久。Hawking等认为配子体一     

食蟹猴疟原虫B株配子体对不同龄斯氏按蚊的感染性

实验结果表明，食蟹猴疟原虫Ｂ株配子体对不同龄斯氏按蚊的感染性存在着差异，随着蚊龄的增长，感染度下降，尤其在不佳感染时间血餐者，这种差异更为明显。因此，在疟疾实验研究中，以选用３～８日龄斯氏按蚊为佳。     

按蚊中肠前酚氧化酶原与约氏疟原虫卵囊黑化的关系

目的　分析约氏疟原虫卵囊黑化期间按蚊中肠内前酚氧化酶原 (Prophenoloxidase ,PPO)的变化 ,探讨中肠PPO与疟原虫卵囊黑化的关系。　方法　解剖分离约氏疟原虫感染前和感染后 3、5、7、11和 15d斯氏与大劣按蚊中肠 ,匀浆后经SDS PAGE和转膜 ,以抗烟草天蛾PPO的抗体进行免疫印迹分析 ,并于感染后第 5d开始在镜下观察约氏疟原虫卵囊黑化情况 ,直至第 15d止。　结果　斯氏与大劣按蚊中肠在约氏疟原虫感染前和感染后的不同时期经免疫印迹均可检测到 1条分子质量约为 67ku的PPO阳性蛋白带 ,但感染后的PPO蛋白带比感染前明显增强 ,而且同时间点大劣按蚊中肠PPO蛋白带比斯氏按蚊明显 ,尤其在感染的后期大劣按蚊中肠PPO蛋白带明显比斯氏按蚊增强 ;在感染后 7d可见大劣按蚊中肠内发育的约氏疟原虫卵囊部分黑化 ,在 15d时可见疟原虫卵囊完全黑化。　结论　按蚊中肠PPO含量增加 ,尤其是长时间内维持在较高水平与约氏疟原虫卵囊黑化密切相关。     

青蒿琥酯与萘酚喹联用延缓恶性疟原虫抗性实验研究

目的 探讨青蒿琥酯与萘酚喹联用是否能延缓恶性疟原虫抗性。方法 用青蒿琥酯与萘酚喹联用(A组)和单用青蒿琥酯(B组)间断刺激体外连续培养的恶性疟原虫，在接触药物前后不同时间用Reickmann体外微量测定恶性疟原虫的敏感性，同时观察每次接触药物后恶性疟原虫恢复正常生长时间。结果 A组用药前及用药后65d青蒿琥酯／萘酚喹的ID50分别为2．42／37．81、1．70／26．73nmol／L。B组用药前及用药后68、129d青蒿琥酯的ID50分别为9．60、30．61nmol／L和85．10nmol／L。A组接触药物后恶性疟原虫第1、2次恢复正常生长时间分别为24、37d，第3次接触药物后连续观察90d，疟原虫未能恢复正常生长。B组疟原虫平均恢复正常生长时间为16．7d。结论 可用体外间断药物刺激培育抗青蒿琥酯恶性疟原虫；青蒿琥酯与萘酚喹联用能有效延缓恶性疟原虫抗性。     

大劣按蚊血细胞对约氏疟原虫卵囊黑化作用的观察

大劣按蚊感染约氏疟原虫后第５ｄ和第１５ｄ，电镜下分别观察退变的卵囊周围血细胞的反应。结果表明：感染后第５ｄ卵囊发育较小，卵囊周围即可见血细胞附着；第１５ｄ卵囊有些已明显空泡化，其外周可见较多血细胞，血细胞内、血细胞和卵囊之间、甚至卵囊内有许多微管结构之颗粒及其它颗粒，有些卵囊已黑化，其外周仍可见到血细胞的残骸及黑色素样颗粒。提示对约氏疟原虫不易感的大劣按蚊引起囊退变后可引致血细胞趋附，后者可释放颗粒物质或许还有其它物质，这对包被形成和卵囊黑化起着重要的作用。     

食蟹猴疟原虫和恶性疟原虫两种抗原检测不同疟区人群中间接荧光抗体的实用性

[目的 ]比较食蟹猴疟原虫 (P c.)和恶性疟原虫 (P f.)两种抗原在不同疟区人群疟疾抗体检测的实用性。 [方法 ]1997年 5～ 10月在海南省间日疟和恶性疟混合流行区及河南省单纯间日疟区用P c 和P f 两种抗原测试人群疟疾抗体。 [结果 ]在海南省间日疟和恶性疟混合流行区P c 和P f 两种抗原检测人群疟疾间接荧光抗体阳性率分别为 37 4%和 31 3% ,其阳性符合率为 83 9% ;河南省单纯间日疟流行区的P f和P c两种抗原阳性率分别为 2 3 0 %和 9 7% ,阳性GMRT分别为 42 9%和 2 9 3%。 [结论 ]间日疟和恶性疟混合流行区P f和P c两种抗原均可用于人群疟疾抗体的检测 ,而单纯间日疟地区则以P c 抗原为优。     

双氢青蒿对约氏疟原虫在蚊体内发育的影响

目的：观察双氢青蒿素（dihydroqinghaosu，DQHS）对约氏疟原虫在斯氏按蚊体内发育的影响。方法：受染疟原虫小鼠一次性经口灌喂不同浓度DQHS药液后，供蚊虫吸血，应用光镜和电镜观察对照组和用药组的疟原虫在蚊体内的发育情况。结果：DQHS对疟原虫配子体有一定的抑制作用，其作用强度与配子体成熟程度和用药剂量不同有关。未成熟配子体对药物较敏感；随着药物剂量的增加，卵囊和子孢子的阳性率和密度随之逐渐下降；但180mg或240mg／kg用药组对子孢子密度的影响的差别无显著性意义。电镜观察60mg／kg作用16h后，用药组的蚊胃上卵囊（12d－13d解剖蚊），出现膜受损，甚至胞质空泡化。120mg／kg药量对蚊体内3日龄卵囊作用16h，卵囊仍继续发育，比较对照组和用药组的卵囊和子孢子密度, 两组间差别无显著意义(P > 0. 05) ; 两组卵囊超微结构形态亦无明显差异。结论: DQHS 影响约氏疟原虫配子体感染性而减少蚊媒传播, 但对蚊体内子孢子增殖期不起直接的抑制作用。     

建立疟疾近期复发动物模型的研究Ⅳ.食蟹猴疟原虫子孢子感染恒河猴的近期复发

按照实验设计,用食蟹猴疟原虫子孢子感染恒河猴,待原虫血症出现,然后用咯萘啶 6mg/kg、蒿甲醚 10 mg/kg 和氯喹 20 mg/kg 联合治疗 3 d,清除红内期原虫,观察 100 d内的近期复发情况。如复发则再给予联合治疗。接种子孢子50个的猴M192和55×10~2个的猴 M193无近期复发,而接种子孢子 11×10~3 个的猴 M194 于治疗后 47 d复发 1次,接种子孢子 55×10~4 个的猴M 195分别于治疗后 30 d、37 d和 51 d 出现复发。结果显示,接种子孢子数量宜在 11×10~3 个以上。本研究实际上已对前实验研究进行了总的验证,并且实现了总体设计的预定目的,用引自越南的食蟹猴疟原虫建立了近期复发动物模型。