HPLC测定独一味中木犀草素的含量

目的:建立独一味中木犀草素含量测定的HPLC方法。方法:Diamonsil C18(5μm,250×4.6 i.d.mm,迪马公司);流动相:甲醇—水—磷酸(60∶40∶0.4);流速:1ml/min;温度:35℃;检测波长为350 nm。结果:木犀草素在100.12~800.96 ng范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999,独一味药材平均回收率为97.95%,RSD为0.97%。结论:HPLC测定独一味中木犀草素结果准确可靠、快速、灵敏、重现性好。     

独一味微丸中木犀草素含量的HPLC测定法

目的建立独一味微丸中木犀草素含量的测定方法.方法用高效液相色谱法测定了木犀草素含量,色谱柱:Diamonsil(钻石)C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50),流速:1.0 ml/min,测定波长:350 nm.结果平均回收率99.8%(RSD=2.32%,n=5),线性关系r=0.999 9,重复性RSD=1.03%(n=5),精密度RSD=1.31%(n=5).结论方法稳定、可靠,可作为该制剂的质量控制方法.     

木犀草素对宫颈癌细胞增殖、迁移及Ras-MAPK通路的影响

目的探讨木犀草素对宫颈癌细胞增殖、迁移及Ras-MAPK通路的影响。方法设宫颈癌细胞株Si Ha组、木犀草素低、中、高剂量组(木犀草素剂量分为1. 0、2. 0、4. 0μg/ml),以上各组每孔设6个平行样,培养72 h。培养结束后,检测各组Si Ha宫颈癌株细胞活力、细胞凋亡水平、细胞迁移能力、RAS、PERK1/2 RNA水平以及MMP-9、Cyc D1、VEGF蛋白水平。结果木犀草素低、中、高剂量组OD值、存活率、穿膜数、RAS、PERK1/2 RNA表达水平、MMP-9、Cyc D1、VEGF蛋白表达水平低于Si Ha组,凋亡率水平高于Si Ha组(P0. 01);木犀草素中、高剂量组OD值、存活率、穿膜数、RAS、PERK1/2RNA表达水平、MMP-9、Cyc D1、VEGF蛋白表达水平低于木犀草素低剂量组,凋亡率水平高于木犀草素低剂量组(P0. 01);木犀草素高剂量组OD值、存活率、穿膜数、RAS、PERK1/2 RNA表达水平、MMP-9、Cyc D1、VEGF蛋白表达水平低于犀草素中剂量组,凋亡率高于犀草素中剂量组,随着木犀草素剂量逐渐增加,各剂量组OD值、存活率、穿膜数、RAS、PERK1/2 RNA表达水平、MMP-9、Cyc D1、VEGF蛋白表达水平率明显降低,凋亡率水平明显增加,剂量—效应关系明显(P0. 01)。结论木犀草素能有效促进宫颈癌细胞凋亡,抑制宫颈癌细胞增殖迁移;其机制与木犀草素抑制Ras-MAPK信号通路中RAS、PERK1/2及其下游MMP-9、Cyc D1、VEGF的表达有关。     

木犀草素对脑胶质瘤细胞氨肽酶N活性影响

目的探讨木犀草素对脑胶质瘤细胞氨肽酶N活性影响机制。方法本研究采用酶抑制动力学方法,研究了木犀草素对氨肽酶N的抑制作用、抑制类型和抑制动力学常数,并进行了脑胶质瘤U87细胞的凋亡生长抑制试验。结果木犀草素能够诱导了脑胶质瘤U87细胞的凋亡,并呈现一定的剂量依赖性,当浓度≥10μmol时,与阳性对照bestatin相比差异有统计意义(P<0.05),求得半细胞凋亡率IC50为(61.23±2.13)μmol;此外木犀草素是一种可逆的竞争型氨肽酶N抑制剂,半抑制率IC50为(70.85±2.05)μmol,抑制常数Ki为(24.83±0.14)μmol;失活动力学时间进程分析表明,木犀草素能快速与氨肽酶N发生作用并迅速降低酶的活性。结论木犀草素是一个竞争性的氨肽酶N抑制剂,使氨肽酶N的活性降低,对诱导了脑胶质瘤U87细胞的凋亡起到重要作用。     

木犀草素—钙的制备及体外抗氧化活性研究

目的:合成木犀草素钙配合物并研究其抗氧化活性。方法:利用单因素实验设计制备木犀草素钙配合物,用UV、IR和TG-DTA等手段进行了结构的表征;采用分光光度法测定木犀草素及其钙配合物清除超氧自由基和羟基自由基的能力;用HPLC法测定清除DPPH自由基的能力。结果:木犀草素-Ca的组成为:C_(15)H_9O_6Cr(COOCH_3)_2(H_2O)_2·2H_2O;木犀草素、木犀草素-Ca及Vc对超氧阴离子清除的IC50值分别为20.00×10~(-6)mol/L,3.070×10~(-6)mol/L和9.12×10~(-6)mol/L;对羟自由基清除的IC50值分别为22.07×10~(-6)mol/L,3.10×10~(-6)mol/L和16.24×10~(-6)mol/L;对DPPH自由基清除的IC50值分别为47.51×10~(-5)mol/L,11.25×10~(-5)mol/L和13.06×10~(-5)mol/L。结论:木犀草素-Ca对超氧自由基、羟基自由基和DPPH自由基均表现出了较强的清除能力,具有较好的开发前景。     

油橄榄叶提取物中4种抗氧化活性成分的筛选和含量测定

目的建立油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)中抗氧化活性成分的筛选和HPLC含量分析方法。方法色谱柱:Sinochrom ODS-BP柱(250 mm×4.6 mm,5μm);检测波长:230 nm、345 nm;流动相:水:乙腈(v:v,75:25);流速:1 ml/min;柱温:30℃,MS采用电喷雾电离负离子化模式检测;在优化的色谱条件下,采用HPLC-DPPH法筛选OLE中抗氧化活性成分和含量测定;通过HPLC-MS所测得的精确相对分子质量,结合保留时间、紫外光谱图和参考文献对目标化合物进行确证。结果方法的检出限为0.42~1.90μg/ml、回收率为91.90%~106.01%、精密度、稳定性、重复性的RSD%均小于3%;4种抗氧化活性成分是:橄榄苦苷、羟基酪醇醋酸酯、芹菜素-7-O-葡萄糖苷和木犀草素-7-O-葡萄糖苷。结论本方法能够简单、快速、准确地筛选和测定OLE 4种抗氧化活性成分的含量。     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时分析多种单花蜜中黄酮类成分

目的建立基于固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中20种黄酮类成分的方法,并应用于多种不同蜜源单花蜜中黄酮类成分的差异研究。方法蜂蜜样品经水溶液超声提取,14000×g离心5 min,取上清液经MAX固相萃取柱净化,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液作为流动相梯度洗脱,电喷雾电离,在多反应监测模式下检测,外标法定量。结果20种目标化合物线性范围宽、线性关系良好,相关系数均大于0.9969;在100、250和500μg/L 3个加标水平下方法加标回收率为76.2%~108.6%;日内精密度为0.50%~4.34%;日间精密度为2.51%~6.71%(n=6)。16种不同蜜源单花蜜中黄酮类化合物分布具有明显差异,其中小茴香蜂蜜中槲皮苷含量最高(165 ng/g);红桉树蜂蜜(186 ng/g)和麦卢卡蜂蜜(304 ng/g)中木犀草素含量高;荞麦蜂蜜、小茴香蜂蜜、麦卢卡蜂蜜和雪脂莲蜂蜜中山奈酚含量较高(113~257 ng/g);雪脂莲蜂蜜、麦卢卡蜂蜜、向日葵蜂蜜和薰衣草蜂蜜中白杨素含量较高(136~213 ng/g),麦卢卡蜂蜜中生松素(473 ng/g)和短叶松素(684 ng/g)远高出其它来源单花蜜。结论该方法具有前处理简便、测定灵敏、准确、重现性好的特点,适用于各类蜂蜜中黄酮类物质的定量分析,为单花蜜的差异分析与质量评价建立了更多科学数据与应用基础。     

木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

目的：合成木犀草素-Cr（Ⅲ）,考察木犀草素及木犀草素-Cr（Ⅲ）对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,确定抑制类型。方法：在无水乙醇中,用木犀草素与醋酸铬搅拌合成木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物;用IR、UV、TG—DTA结合元素分析对结构进行表征,考察在不同的pH值和温度的条件下a一葡萄糖苷酶的酶活力,测定两者对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并采用双倒数作图法研究其动力学特性。结果：合成的木犀草素-Cr（Ⅲ）配合物的分子组成为：C15H9O6Cr（COOCH3）2（H2O）2·2H2O;酶的最适作用pH值为5．0,温度为55℃;木犀草素及其配合物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的IC50值分别为1．496mmol／L、0．2320mmol／L,抑制类型为竞争型α-葡萄糖苷酶抑制剂。结论：木犀草素与Cr^3＋结合后,增强了对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为木犀草素-Cr（Ⅲ）的进一步研究打下了良好的基础。     

木犀草素对肝纤维化的防护作用及其机制

木犀草素是一种广泛存在于多种植物中的黄酮类化合物.现代研究证实,木犀草素存在多种药理作用,主要表现在抗菌、抗炎、抗氧化、免疫调解等.其对保护肝纤维化方面的作用也较突出,其主要机制可能与木犀草素能够抑制肝脏胶原表达合成和抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的增殖、活化有关.结合国内外对木犀草素及肝纤维化的研究资料,笔者对木犀草素对肝纤维化的防护作用及其机制做进一步阐述和说明.     

木犀草素提高机体耐缺氧能力研究

目的 探索木犀草素的抗缺氧作用,为抗缺氧新药物的研制提供思路。方法 将40只昆明（KM）雄性小鼠分为4组,每组10只,连续灌胃（0.5%羧甲基纤维素钠溶液、25、50和100mg/kg木犀草素溶液）15d,进行常压密闭缺氧实验,记录小鼠存活时间（survivaltime,ST）、检测小鼠血清以及心、肝等组织的谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)和总超氧化物歧化酶(total-superoxidedismutase,T-SOD)活力,总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC),丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量,观察木犀草素对常压缺氧小鼠的保护作用。结果 与对照组相比,木犀草素中、高剂量灌胃给预组小鼠在常压密闭缺氧条件下的常压缺氧密闭时间（the survival time, ST）、标准耐缺氧时间（standard hypoxia tolerance time,STT）和校准后的标准耐缺氧时间（adjusted standard hypoxia tolerance time,ASTT）...