辐射生物薄膜促进创面修复的动物和临床实验

目的:探讨新鲜人羊膜去除绒毛膜干燥后修剪成薄厚各种的单层类型,经塑膜包装后再经γ射线辐射的辐射生物薄膜,在创伤创面修复中对创面的保护和促进愈合作用。方法:①动物实验:2001-03/2002-03在哈尔滨医科大学第一临床医学院急诊创伤实验室完成。选取Wister优质大鼠40只,麻醉后背部脱毛,浸入沸水中8s,致背部烫伤,烫伤面积相当于鼠体表面积的15%～20%,镜检相当于深Ⅱ度创面。每只大鼠的烫伤创面分别贴敷辐射生物薄膜和常规油纱,用纱布间断缝于创缘。术后3d去除敷料,暴露对比分别观察贴敷辐射生物薄膜和油纱后的创面愈合情况。于烫伤后4,6,8,10,12d活杀取材,各8只,对创面愈合情况进行组织学及电镜检查。②临床观察:选取2001-11/2004-11哈尔滨医科大学第一临床医学院急诊创伤外科的130例烫伤患者,共150个创面,其中手术供皮区创面60个,浅Ⅱ度创面50个,深Ⅱ度创面40个。手术供皮区创面:取皮厚度0.5～0.8mm,面积0.5%～4.0%。供皮区取皮后压迫止血,取皮创面对称贴敷辐射生物薄膜和油纱,15d后进行创面的检查换药处置。浅Ⅱ度创面:面积0.25%～3.0%。创面常规清创后,对称贴敷辐射生物薄膜和油纱,2d后进行创面的检查换药处置,对贴敷辐射生物薄膜侧的创面行半暴露疗法,对贴敷油纱侧的创面仍行包扎换药。深Ⅱ度创面:面积0.5%～3.0%。具体方法同浅Ⅱ度创面。如创面干燥,贴敷辐射生物薄膜侧行半暴露疗法,直至创面愈合;如创面渗液较多,给予有孔辐射生物薄膜重新包扎,待渗出停止时再行半暴露疗法。油纱侧检查换药后,仍行创面包扎疗法。结果:动物实验:中途无脱落。创面愈合情况:①大体观察:伤后4,6d贴油纱侧和辐射生物薄膜侧毛发均未长出,炎性水肿逐渐吸收。油纱侧创面伤后12d仍可见灶性小溃疡;而辐射生物薄膜侧创面伤后8d即可见大量毛发生长,伤后10,12d全部创面均愈合,皮肤具有弹性,毛发规则丛生,与正常表皮无区别。②光镜所见:贴油纱侧的创面,伤后4,6d表皮内大片凝固性坏死,真皮内大量急性炎细胞浸润,间质水肿,血管扩张充血。伤后12d创面仍有灶性溃疡,真皮层少量毛囊、毛根、毛发再生;而贴辐射生物薄膜侧的创面伤后10,12d,表皮角质层、透明层、真皮乳头层、网状层均不见炎细胞浸润,水肿细胞完全消失,纤维走形正常,属于正常皮肤组织状态。③扫描电镜观察:贴油纱侧创面伤后12d,创面中心为坏死结痂,大量炎性渗出物及白细胞存在,覆盖创面表面的为无结构状的坏死组织;而贴辐射生物薄膜侧的创面伤后12d,可见规则的角化层,毛发发育良好,毛囊数量较多,毛发成束存在。④透射电镜:贴油纱侧的创面伤后12d,细胞结构模糊不清,系创面坏死组织,其中夹杂着大量中性白细胞;而贴辐射生物薄膜侧的创面伤后12d,可见部分表皮和真皮全层,棘细胞排列整齐,颗粒层呈扁平排列,核质稀疏,角质颗粒较多,角化完全,似正常皮肤。临床观察:按实际处理分析,150个创面中,贴敷辐射生物薄膜侧脱落6个,其中浅Ⅱ度创面2个,深Ⅱ度创面4个。①不同程度创面皮肤愈合时间贴辐射生物薄膜侧比贴油纱侧平均提前时间:供皮区创面四五天犤(17±1.5),(21±1.5)d犦;浅Ⅱ度创面五六天犤(9±2),(12±2)d犦;深Ⅱ度创面七八天犤(14±1.5),(21±1.5)d犦。②深Ⅱ度创面细菌学检查结果:烫伤后8d,贴辐射生物薄膜侧的创面无细菌生长,贴油纱侧的创面细菌生长明显。结论:辐射生物薄膜制品行塑膜包装储存,拆装即用,操作简单,使用方便。经动物实验和临床治疗观察,辐射生物薄膜为手术供皮区和各种程度创伤创面的修复提供了一种良好的保护条件和环境。     

复层人羊膜覆盖治疗深Ⅱ度烫伤创面的动物实验

背景：已证实单层人羊膜覆盖对浅度烧伤创面有一定的治疗作用,但仍存在很多不足。目的：观察自制复层辐射人羊膜覆盖治疗对鼠深Ⅱ度烫伤创面的效果。设计、时间及地点：随机分组,自身及组间对照动物实验,于2006-12/2007-05在哈尔滨医科大学第一临床医学院动物实验中心进行。材料：成年清洁级Wistar大鼠50只,随机分为伤后4,6,8,10,12d组5组,每组10只。复层辐射人羊膜为自制,将新鲜人羊膜去除绒毛膜后,将羊膜层干燥,制成无孔及有孔的复层薄膜,再经γ射线辐射后塑膜包装。方法：所有动物背部脱毛,麻醉后浸入沸水中8s致背部烫伤,制备深Ⅱ度烫伤模型。将每组创面积2等分,分别贴敷复层辐射人羊膜和油纱进行对照观察。主要观察指标：在伤后4,6,8,10,12d取材,观察创面大体愈合情况,光镜、扫描电镜、透射电镜观察创面组织学变化,并进行创面细菌学检查。结果：50只大鼠全部进入结果分析。①贴敷油纱的创面：可见坏死物和痂皮,伤后12d时肉眼仍见灶性小溃疡,光镜下见生真皮层少量毛囊、毛根、毛发再生,扫描电镜下见创面中心为坏死结痂,周边见少量毛发,大量炎性渗出物及白细胞存在,透射电镜显示细胞结构模糊不清。细菌学检查结果显示创面细菌生长明显。②贴敷复层辐射人羊膜创面：伤后10,12d时创面愈合,肉眼见毛发规则丛生,和正常皮肤无区别,光镜、扫描电镜、透射电镜观察均显示伤后12d时表皮各层均为正常皮肤组织。细菌学检查结果显示创面无细菌生长。结论：复层辐射人羊膜能能有效地保护鼠烫伤创面,促进创面的上皮生长,避免创面感染,缩短鼠深Ⅱ度烫伤创面的愈合时间。     

人羊膜生物敷料对鼠烫伤创面的保护作用

目的：研究单层辐射人羊膜对模型鼠烫伤创面敷盖治疗的疗效及愈合各阶段创面的组织学变化。方法：观察了40只Wistar鼠深Ⅱ度烫伤创面。将单层辐射人羊膜和油纱对照贴敷创面进行观察。采用了活杀取材及电镜扫描检查法。结果：模型鼠创面用人羊膜贴敷侧比对照侧提前愈合。而且愈合创面外观是毛发规则丛生，皮肤具有弹性，表皮各层均为正常皮肤组织像。结论：经动物实验，此膜无免疫排斥现象，无毒、无菌、无刺激性。而且能防止创面水分、电解质和蛋白质的丢失。增强模型鼠的抵抗能力，避免感染，加速愈合。是治疗鼠烫伤刨面的良好敷料。     

人羊膜生物敷料对鼠烫伤创面的保护作用

目的 研究单层辐射人羊膜对模型鼠烫伤创面敷盖治疗的疗效及愈合各阶段创面的组织学变化. 方法观察了 40只 Wistar鼠深 II度烫伤创面.将单层辐射人羊膜和油纱对照贴敷创面进行观察,采用了活杀取材及电镜扫描检查法. 结果模型鼠创面用人羊膜贴敷侧比对照侧提前愈合.而且愈合创面外观是毛发规则丛生,皮肤具有弹性,表皮各层均为正常皮肤组织像. 结论经动物实验,此膜无免疫排斥现象,无毒、无菌、无刺激性.而且能防止创面水分、电解质和蛋白质的丢失,增强模型鼠的抵抗能力,避免感染,加速愈合.是治疗鼠烫伤创面的良好敷料.     

解毒烧伤膏对深Ⅱ度烫伤创面愈合中肿瘤坏死因子α及表皮细胞生长因子表达的调控

目的：烫伤创面给予解毒烧伤膏治疗后，观察肿瘤坏死因子α及表皮细胞生长因子在愈合过程中表达水平的变化。方法：实验于2004-09／11在中山大学北校区实验动物中心完成。选取广东产成年杂种猪8只，用自制恒温恒压水浴循环烫伤仪建立猪深Ⅱ度烫伤模型，于猪背部两侧以98℃热水烫12s，各制作一个直径8cm的圆形创面。一侧为解毒烧伤膏治疗侧，创面外用解毒烧伤膏，1次／d，另一侧为空白对照侧。用免疫组织化学方法结合图像数据分析，分别在烫伤后第1，3．5，7，9，11天检测肿瘤坏死因子α及表皮细胞生长因子表达水平的变化。结果：实验纳入猪8只，均进入结果分析。①猪深Ⅱ度创面烫伤后不同时间两侧的大体观察：解毒烧伤膏治疗侧创面愈合时间明显比空白对照侧提前[分别为（8．0&;#177;0．4），（10．3&;#177;0．6）d，P〈0．05]。②猪深Ⅱ度创面烫伤后不同时间两侧的病理学观察结果：伤后第1天解毒烧伤膏治疗侧开始有基底层细胞增生，第5天可见明显增生的表皮细胞，细胞胞体较大，排列紧密，由单层上皮细胞向复层上皮细胞转化，并以毛囊区附近增生活跃。而空白对照侧第2天开始有局部细胞增生，至第7天增殖明显，细胞体积较小，分布疏松，以单层上皮细胞为主。③猪深Ⅱ度创面烫伤后不同时间肿瘤坏死因子α免疫组织化学观察结果：肿瘤坏死因子α在解毒烧伤膏治疗侧和空白对照侧于伤后的表达均有两个高峰，空白对照侧高峰时间分别为伤后第3天和第9天，解毒烧伤膏治疗侧的第1个高峰也是伤后第3天，峰值略低于空白对照侧（17．71&;#177;3．32，17．79&;#177;3．43．t=1．37，P〉0．05），第2个高峰则位于伤后第7天，较空白对照侧明显提前（P〈0．01）。早期肿瘤坏死因子α主要表达在中性粒细胞．后期主要表达在单核细胞，部分血管内皮细胞亦见表达。④猪深Ⅱ度创面烫伤后不同时间表皮细胞生长因子免疫组织化学观察结果：解毒烧伤膏治疗侧在伤后第1天开始表达（7．32&;#177;1．79），主要位于基底细胞．第5天显著表达（18．18&;#177;3．46），第7和9天维持高水平表达。空白对照侧在伤后第1天基本无表达（2．31&;#177;1．12），第3天表达较弱，细胞数量少．于第7天表达出现高峰（18．26&;#177;3．56），并于第9和11天维持高水平表达。表皮细胞生长因子在解毒烧伤膏治疗侧的表达明显早于空白对照侧（t=2．21-3．95，P〈0．01）。结论：解毒烧伤膏能够促进表皮细胞生长因子在创面修复的早期表达，并抑制肿瘤坏死因子α在创面修复后期的过度表达，有利于创面愈合。     

应用单层人羊膜预防面部创面后瘢痕畸形的发生

对颜面105个创伤创面对照贴敷人羊膜和油纱,进行临床观察。发现颜面浅II度创面用人羊膜治疗侧比用油纱治疗侧平均提前愈合四五天;颜面深II度创面用人羊膜治疗侧比用油纱治疗侧平均提前愈合五六天。单层辐射人羊膜可防止创面感染,缩短创面的愈合时间,降低颜面瘢痕畸形的发生。     

防疤烧伤膏对烫伤创面的促愈合效应

目的 在观察防烧伤膏疗效基础上，进一步研究该药对烫伤创面的促愈合作用，并探讨其可能机制。方法 4只小型猪背部各制备9个面积为2.54cm^2的深Ⅱ度烫伤创面，并将创面随机分为3组（每组12个创面），即防疤烧伤膏治疗组，凡士林治疗组，空白对照组，以创面面积、创面组织增殖细胞核抗原（PCNA）检测及组织学检查评价各级治疗效果。结果 伤后11d防疤烧伤膏治疗组创面面积缩小为（0.10&;#177;0.03)cm^2，明显小于凡士林组[(0.81&;#177;0.54)cm^2,=t=-3.22,P&;lt;0.05]和空白对照组[(0.70&;#177;0.21)cm^2，t=-6.93,P&;lt;0.05]；PCNA检测显示伤后7，11d各组创面组织均为强阳性表达；组织学检查表明伤后7d防疤烧伤膏治疗组的创面纤维组织生长多于凡士林组和空白组，伤后11d防疤烧伤膏治疗组创面已基本愈合，而凡士林组和空白对照组仍残留部分创面。结论 防疤烧伤膏促进烫伤创面愈合的作用表现为溶解创面痂皮，促进纤维组织和表皮生长。     

胶原蛋白海绵在多种创面修复中的应用

目的：探讨胶原蛋白海绵在不同类型创面上有无促进创面愈合的作用。方法：选择56例患有不同类型创面的患者，用胶原蛋白海绵敷贴于取皮区、Ⅱ度烧伤、慢性溃疡创面上或填塞于压疮所致的窦道的底部为实验组．常规治疗为对照组；观察愈合的经过、愈合的时间，并作组织病理学检查。结果：14例取皮区创面使用胶原蛋白海绵的愈合时间是(2．86&;#177;0．86)d,对照组为(4．14&;#177;0.86)d，两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0.01；Ⅱ度烧伤创面治疗组愈合时间是(6．75&;#177;1．39)d．对照组为(10．63&;#177;1．19)d．两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；肉芽创面、慢性溃疡创面、压疮创面总显效率83．3％，总有效率100％；组织病理：对照组肉芽组织中可见较多内皮细胞增生形成的实性细胞簇及扩张的新生毛细血管．在毛细血管周围有散在新生的纤维母细胞。可见大量的胶原纤维形成，胶原纤维排列无序，部分融合。实验组早期及中期成纤维细胞及毛细血管数量明显多于对照组，成纤维细胞转化为纤维细胞的时期较对照组早，胶原纤维的产生增加，排列更有序。结论：胶原蛋白海绵对创面修复及愈合，加速肉芽组织的生长、促进慢性溃疡和压疮创面生长等方面均有显著的作用。     

鸸鹋油对大鼠浅Ⅱ度烧伤创面愈合中组织修复的影响

目的：应用聚维酮碘和鹂鹋油治疗大鼠浅吱烧伤，并比较两种药物对创面愈合过程中组织修复的影响。方法：实验于2003—01／04在南方医科大学南方医院完成。108只Wistar大鼠随机分为单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组和鸸鹋油治疗组，每组36只。实验时将脱毛区置于70℃恒温水浴中15s，制成10％体表面积浅Ⅱ度烫伤模型(经病理切片证实，本文统称为烧伤)。各组创面分别用生理盐水纱布、聚维酮碘纱布、鸸鹋油纱布覆盖，无菌纱布包扎固定后放回笼中分笼饲养，换药1次／d。观察创面愈合率及愈合时间。各组动物分别于伤后1，3，5，10，14d取创面组织，常规苏木精-伊红染色，观察病理组织学变化；免疫组织化学链霉素-卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法检测创面组织增殖细胞核抗原的表达，以标记指数法测定增殖细胞核抗原阳性细胞数，以评估组织创面的修复情况。结果：108只大鼠全部进入结果分析。①创面愈合时间：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显缩短【(12．67&;#177;0．82)，(15．33&;#177;0．82)，(14．00&;#177;0．89)d，F=15．00，P&;lt;0．01】。②创面愈合率：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显升高【第7天：(73．94&;#177;4．46)％，(20．30&;#177;3．85)％，(30．71&;#177;4．90)％；第10天：(88．45&;#177;4．13)％，(40．10&;#177;3．14)％．(63．45&;#177;4．21)％；第14天：(98．93&;#177;1．68)％，(78．67&;#177;3．99)％，(90．41&;#177;3．09)％；F=443．96，P&;lt;0．01】。③病理切片显示鸸鹋油能减轻烧伤创面早期的炎症反应，组织学分析显示鸸鹋油可促进创面的再上皮化和表皮各层的分化。④增殖细胞核抗原在创面组织标本中的表达量：鸸鹋油治疗组比单纯烧伤组、聚维酮碘治疗组明显升高【第5天：(81．83&;#177;4．57)％，(32．50&;#177;3．08)％，(34．33&;#177;2．58)％；第10天：(78．00&;#177;3．00)％，(19．16&;#177;3．71)％，(21．83&;#177;4．53)％；第14天：(65．00&;#177;8．29)％，(11．16&;#177;2．63)％，(15．00&;#177;2．78)％；F=962．40，P&;lt;0．01】。随时间推移明显下降(F=95．63，P&;lt;0．01)。结论：鸸鹋油能加速大鼠烧伤创面组织修复细胞的增殖，加快创面再上皮化，促进创面愈合。     

单层人羊膜对颜面创面的保护作用

新鲜人羊膜去除绒毛膜后，将羊膜层干燥，修剪成型，制成不同规格塑膜包装。再经γ射线辐射，成为单层辐射人羊膜（简称羊膜）。将其作为覆盖物用于颜面创伤时创面临床治疗，具有良好的保护创面作用。１对象与方法应用于颜面创伤１０５例，其中浅Ⅱ度创面７５例，深Ⅱ度创面３０例。方法：浅II度创面常规清创，对称贴敷羊膜和油纱，薄层敷料固定，１d后检测，贴敷羊膜创面行半暴露。深Ⅱ度创面常规清创，对称贴敷羊膜和油纱，较厚敷料固定。２d后检创，如创面干燥可行半暴露。如创面渗液较多，可更换羊膜重新贴，待干燥时，再行创面半暴露…