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目的检测肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor/scatter factor , HGF)对血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts, AF)表型转化及迁移的影响,探索其在血管外膜重构中的可能作用.方法体外培养AF,以不同剂量(0、20、40、80 ng/ml)HGF刺激AF及40 ng/ml HGF刺激AF不同时间(0、4、16、24小时),蛋白免疫印迹方法(Western blotting)分析不同条件刺激后AF中α-平滑肌肌动蛋白(α-SM actin)的表达变化;用transwell检测不同浓度HGF对AF迁移的影响.结果 HGF可上调AF中α-SM actin表达,呈一定剂量依赖性和时间依赖性;40 ng/ml HGF可明显促进AF迁移,迁移细胞数目在一定范围内随着HGF浓度增加而增加.结论 HGF能诱导AF表型转化为肌成纤维细胞(myofibroblasts, MF),促进AF迁移,在血管外膜重构中可能具有一定作用. 相似文献
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肝细胞生长因子对血管外膜成纤维细胞表型转化及迁移的作用 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 检测肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor/scatter factor,HGF)对血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts,AF)表型转化及迁移的影响,探索其在血管外膜重构中的可能作用。方法 体外培养AF,以不同剂量(0,20,40,80ng/ml)HGF刺激AF及40ng/ml HGF刺激AF不同时间(0,4,16,24小时),蛋白免疫印迹方法(Western blotting)分析不同条件刺激后AF中α-平滑肌肌动蛋白(α-SM actin)的表达变化,用transwell检测不同浓度HGF对AF迁移的影响。结果 HGF可上调AF中α-SM actin表达,于一定剂量依赖性和时间依赖性;40ng/ml HGF可明显促进AF迁移,迁移细胞数目在一定范围内随着HGF浓度增加而增加。结论 HGF能诱导AF表型转化为肌成纤维细胞(myofibroblasts,MF),促进AF迁移,在血管外膜重构中可能具有一定作用。 相似文献
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血管紧张素Ⅱ诱导血管外膜成纤维细胞产生结缔组织生长因子 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 研究血管外膜成纤维细胞(AF)能否产生结缔组织生长因子(CTGF),以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对CTGF的影响。方法 组织贴片法培养WKY大鼠主动脉AF,经AngⅡ(10^-7~10^-9mol/L)处理,应用免疫细胞化学和Western blot的方法,观察CTGF的表达,及AT1受体阻断剂氯沙坦和AT2型受体阻断剂PD123319干预后的CTGF表达。结果 免疫细胞化学显示AF表达CTGF,AngⅡ可以诱导AF以及其上清液中CTGF表达增加。Western blot显示AngⅡ诱导CTGF表达呈剂量和时间依赖性。10^-7mol/L AngⅡ刺激24h诱导AF产生CTGF作用最强。AngⅡ诱导CTGF表达增加作用可以被氯沙坦阻断,而不受PD123319影响。结论 AngⅡ通过AT1受体诱导CTGF合成。 相似文献
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目的探讨17β-雌二醇(E2)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的血管外膜成纤维细胞(VAF)增殖的影响。方法将培养的血管外膜成纤维细胞分4组:对照组,单纯bFGF组,单纯E2组,bFGF+E2组。用3H-Tdr掺入反映细胞DNA合成3、H-Proline掺入反映细胞的胶原合成状况;用Western Breeze检测血管外膜成纤维细胞中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的蛋白表达及活性。结果bFGF使血管外膜成纤维细胞DNA合成增加18~23倍、胶原合成增加17~21倍、细胞数目增加18~22倍,E2可使bFGF的这些促血管外膜成纤维细胞增殖效应降低约50%。bFGF使VAF中ERK蛋白表达量增加350%,使ERK磷酸化蛋白表达量增加120%,E2使bFGF诱导的VAF中ERK蛋白表达量下降44%,ERK磷酸化蛋白表达量下降22%;E2使bFGF诱导的VAF中MKP-1的蛋白表达量增加154%。结论E2可抑制bFGF诱导的VAF增殖,其抑制VAF增殖与抑制VAF中ERK蛋白表达,降低ERK活性,促进MKP-1表达有关。 相似文献
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骨桥蛋白在血管外膜中的表达及其对外膜成纤维细胞迁移的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因在血管外膜成纤维细胞中的表达,并探讨其对外膜成纤维细胞迁移活动的影响。方法 采用培养大鼠胸主动脉的外膜成纤维细胞作为对照组,用适量的转化生长因子β1(TGFIβ1)刺激作为刺激组。分别抽提两组细胞总RNA,进行定量PCR和Northern blot检测分析。通过反义核酸转染技术运用Transwell观察OPN对外膜成纤维细胞迁移的影响。结果 (1)体外培养的大鼠血管外膜成纤维细胞在基础状态下表达一定水平的OPN mRNA,在TGFIβ1诱导下,其OPN mRNA转录水平显著增高;(2)外膜成纤维细胞转染OPN反义核酸后,其对应Transwell上室的迁移细胞数目明显低于单纯TGFβ1刺激组,而OPN正义、错配义组无此变化。结论(1)血管外膜是产生OPN的潜在源泉;(2)OPN对外膜成纤维细胞的迁移起趋化作用。 相似文献
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碱性成纤维细胞生长因子在肝细胞癌中的表达及意义 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 探讨bFGF在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法 使用免疫组化SABC法检测41例肝细胞癌手术切除标本及5例外伤性肝破裂肝切取标本。结果 正常对照组bFGF均为阴性。肝细胞癌组bFGF阳性率为70.7%(29/41)。bFGF表达与患者年龄、性别、AFP是否阳性、HBsAg是否阳性无关(P>0.05);而与肝癌分化程度、有无癌栓、包膜是否完整有关。在高侵袭转移组与低侵袭转移组间,bFGF阳性率分别为86.4%和52.6%,差异具有显著性(P<0.05)。结论 bFGF在肝细胞癌中高表达,可以作为判断肝癌恶性程度及转移潜能的参考指标。 相似文献
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经皮冠状动脉腔内成形术 (PTCA)已广泛地应用于冠心病的治疗 ,但术后 3~ 6个月内的高再狭窄率(30 %~ 5 0 % )严重影响了其临床的有效应用。关于再狭窄的发病机制仍有许多不明之处 ,目前认为再狭窄可能是新生内膜增生和不利的血管重构共同作用的结果[1] 。血管外膜过去被认为是无活性的 ,近来研究发现冠脉损伤后伴随有外膜的激活 [2 ,3] 。血管外膜成纤维细胞 (vascular adventitial fibroblasts,VAF)具有增殖、迁移、表型转化及合成大量细胞外基质的能力 ,因而在促冠脉损伤后重构及再狭窄的发生中发挥重要作用。本文就此作一综述。1 … 相似文献
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为了评价转染血管紧张素Ⅱ1型受体反义核苷酸对血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ受体亚型mRNA表达,及细胞内核酸蛋白质的合成水平的作用。采用逆转录-聚合酶链反应克隆血管紧张素Ⅱ1型受体cDNA序列(476bp),将克隆cDNA反向插入PLXSN,构建一完整的含血管紧张素Ⅱ1型受体的质粒,并转染入培养的血管外膜成纤维细胞,逆转录-聚合酶链反应和免疫印迹鉴定其转染后血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白表达。比较血管紧张素Ⅱ10^-7mol/L刺激24h后的转染及非转染的血管外膜成纤维细胞血管素Ⅱ受体各亚型mRNA表达、细胞内核酸蛋白质的合成水平。转染组血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白表达量显著减少,对照组相比差异显著(P<0.01)。血管紧张素Ⅱ10^-7mol/L刺激24h后,与对照组血管外膜成纤维细胞相比,转染组血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达明显减少,血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA表达明显增加(P<0.01),但两组间核酸和蛋白合成均无显著差异(P>0.05)。提示反义核苷酸封闭后,血管外膜成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRAN表达显著抑制,同时血管紧张素Ⅱ受体Ⅱ型mRNA上调。单纯封闭血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA并不能有效阻断血管紧张素Ⅱ介导的血管外膜成纤维细胞生长。 相似文献
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成纤维细胞生长因子受体在肾间质成纤维细胞的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
在肾小管间质纤维化的发生发展过程中,损伤和再生的肾小管上皮细胞可以合成和分泌多种细胞因子和生长因子,成纤维细胞生长因子(FGF)就是其中的一种。研究FGF的靶细胞或细胞受体(FGFR),对于揭示FGF在肾小管间质纤维化中的作用有重要意义。1 材料和方法1.1 材料 Wistar大鼠,雌性,体重200~250g(北京医科大学实验动物提供)。并选用了1996年至1997年北京医科大学病理系肾穿刺标本有增生硬化性改变的肾小球肾炎20例,均伴有肾小管间质纤维化,5例轻度系膜增生性肾小球肾炎作为对照。1.… 相似文献
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高糖刺激人肾脏成纤维细胞肝细胞生长因子和c-met的表达及其意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 在体外高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时观察其肝细胞生长因子(HGF)和c-met的表达。方法 将人肾脏间质成纤维细胞分别培养于不同浓度的葡萄糖中,于24h后用RT-PCR方法检测HGF、c-met和1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)mRNA的转录水平,用不同浓度的HGF刺激细胞来观察PAI-1mRNA的表达。结果 高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有HGF、c-met表达,之后表达逐渐下降,而PAI-1在此之后出现表达上升。同时外源性HGF可以抑制PAI-1mRNA的表达。结论 HGF在肾脏中是潜在的一种抗纤维化的细胞因子,可以通过降低PAI-1的表达,从而促进细胞外基质的降解。 相似文献
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目的 研究肝细胞生长因子及其受体在骨髓干细胞移植治疗中的表达情况 ,评价其作用。方法 大鼠 30只 ,其中 15只接受了冠状动脉前降支结扎以引起前壁心肌梗死 ,另外 15只同时还进行了骨髓单个核细胞心肌移植。术后不同时间点心脏取材检测肝细胞生长因子及其受体的表达。结果 心肌梗死之后心肌组织肝细胞生长因子及其受体表达水平增加 ;同时接受骨髓单个核细胞心肌移植治疗没有进一步增加肝细胞生长因子的表达 ,但其受体的表达水平进一步显著增加 (P <0 0 1)。结论 骨髓单个核细胞心肌移植治疗能够增加肝细胞生长因子受体的表达水平。 相似文献
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肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)又称离散因子,最初是作为促大鼠肝细胞有丝分裂原而被发现的[1].最初分泌的HGF是无活性的,需激活变成它的活化形式才能发挥其生物学作用;尽管肝细胞生长因子激活因子(hepatocyte growth factor activator,HGFA)能够激活前HGF且在血浆中的浓度较高,但其在体内复杂微环境中的作用及其调节机制尚不完全清楚. 相似文献
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目的通过小鼠尾静脉高压注射的方法在肝细胞中建立持续、高效表达外源性肝细胞生长因子(HGF)的体系,探讨其在肝细胞凋亡中的作用机制。方法通过尾部静脉注射pCMV-HGF质粒,检测肝组织中HGF表达的高峰。实验动物分为模型组、pcDNA3保护组、pCMV-HGF质粒保护组和生理盐水对照组,Western blot检测tBid、细胞色素C在各组肝细胞质及线粒体中的表达情况。结果在小鼠尾静脉快速大量注射质粒4h后肝脏中即有外源性HGF表达,8h达高峰。D-GalN/LPS可诱导明显的细胞凋亡,pCMV-HGF保护组tBid及细胞色素C的表达明显减少。结论通过小鼠尾静脉高压注射的方法在肝细胞中建立持续表达外源性HGF的体系,通过抑制Bid的活性片段tBid表达和细胞色素C释放来减轻凋亡蛋白的激活。 相似文献
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目的观察风湿性心脏病慢性心房颤动(简称房颤)患者右心耳肝细胞生长因子(HGF)及受体(c-Met)表达的变化。方法将术中获取右心耳的27例风湿性瓣膜病患者分为2组,其中窦性心律(简称窦律)组8例,慢性房颤组19例,另选先天性心脏病患者8例(均为窦律)作为对照组,以β-肌动蛋白(β-actin)为内参照基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RealtimePCR)技术测定心房组织中HGF、c-MetmRNA的含量,用免疫组织化学方法评价HGF及c-Met的蛋白表达情况。结果与对照组和窦律组比较,慢性房颤组HGF表达显著下降(P<0.01)。而风心窦律组与对照组无差异。c-MetmRNA的表达三组无差异。结论慢性房颤患者心房组织HGF的表达显著降低,而其受体c-Met在房颤患者心房组织中未见明显变化。 相似文献
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目的探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met在活动性和非活动性溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜组织的表达意义。方法采用免疫组化SABC法检测活动性和非活动性UC患者以及对照组肠镜活检组织中HGF、c-Met表达;SP法检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果对照组、活动性UC组、非活动性UC组HGF阳性表达率分别为25%、88%、100%;c-Met阳性表达率分别为25%、92%、100%;组间比较有显著性差异,P均〈0.05;HGF、c-Met在UC结肠黏膜表达与PCNA过表达正相关(r分别为0.648、0.645,P均〈0.05)。结论HGF及其受体c-Met可能在UC结肠炎症黏膜修复中起作用。 相似文献
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HGF在大肠癌中的表达及其与淋巴管生成及转移的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在大肠癌淋巴管生成及转移中的作用。方法应用免疫组织化学(SABC)法检测52例大肠癌、20例大肠息肉组织和20例正常对照组织中HGF的表达,并应用podoplanin标记淋巴管,检测各组织中的淋巴管密度,结合大肠癌患者的临床病理资料,分析其相关性。结果大肠癌组织中HGF被染成棕黄褐色,其阳性表达率和相对表达量均明显高于大肠息肉组织和正常大肠组织[75%、30%、15%;(0.36±0.07)、(0.24±0.06)、(O.23±0.06),P〈0.01]。其微淋巴管密度(LMVD)也明显增多[(4.13±1.99)、(2.59±1.46)、(2.40±1.44),P〈0.01]。大肠癌组织中HGF的相对表达量和LMVD两者间呈正相关。39例HGF表达阳性的大肠癌,其LMVD明显大于HGF蛋白表达阴性者[(4.25±2.13)w(2.73±1.54),t=3.051,P=0.003]。HGF和LMVD的表达与大肠癌患者年龄、性别及肿瘤分化程度无关(P〉0.05),但与Dukes分期(P=0.034,P=0.006)、淋巴管有无转移明显相关(P=0.015,P=0.001)。结论HGF与大肠癌的淋巴管生成及转移有一定的相关性,并可能通过直接或间接促进淋巴管增生,从而促进肿瘤细胞的淋巴转移。 相似文献
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目的:探讨急性心肌梗塞(AMI)患者血清肝细胞生长因子(HGF)水平变化的临床意义。方法:入选58例AMI患者(发病<3h组n=22,3-12h组n=36)于入院即刻采静脉血,测心肌酶谱、高敏感性C-反应蛋白(hs-CRP),同时测定20例性别年龄与之相匹配的健康体检者(对照组)的上述指标。结果:入院时AMI组的血清HGF浓度(1635.8±327.0)pg/ml,较正常对照组的(721.8±67.9)pg/ml明显增高(P<0.001),AMI发病3h内血清HGF水平就比正常对照组显著升高(917.6±73.6)pg/mlvs.(721.8±67.9)pg/ml(P<0.001)。AMI患者血清HGF浓度与hs-CRP呈显著正相关(r=0.45,P<0.001)。结论:AMI患者血清HGF浓度升高,可能与AMI的炎症反应有关;有望成为诊断早期AMI的一个新指标。 相似文献