槲寄生内生菌发酵产物抗平滑肌细胞增殖和抗菌作用初步研究

目的：初步研究槲寄生内生真菌发酵产物的药理作用，为解决槲寄生等寄生药用植物的资源短缺问题提供新的研究思路。方法：从槲寄生中分离出内生真菌，对发酵产物进行了平滑肌细胞增殖的影响和对细菌的抑制作用实验研究。结果：从槲寄生中分离到JF、A1、G6等11株内生真菌；G6对牛主动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖有抑制作用；JF、A1发酵产物具有较广谱的抗菌活性，对革兰氏阳性细菌如表皮葡萄球菌，革兰氏阴性细菌如产气肠杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌等均具有较强的抑制作用。结论：槲寄生内生真菌发酵产物同槲寄生一样具有抗动脉粥样硬化作用，并且还具有明显的抑菌作用．值得进一步深入开发研究。     

槲寄生内生菌发酵产物抗平滑肌细胞增殖和抗菌作用初步研究

目的:初步研究槲寄生内生真菌发酵产物的药理作用,为解决槲寄生等寄生药用植物的资源短缺问题提供新的研究思路。方法:从槲寄生中分离出内生真菌,对发酵产物进行了平滑肌细胞增殖的影响和对细菌的抑制作用实验研究。结果:从槲寄生中分离到JF、A1、G6等11株内生真菌;G6对牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖有抑制作用;JF、A1发酵产物具有较广谱的抗菌活性,对革兰氏阳性细菌如表皮葡萄球菌,革兰氏阴性细菌如产气肠杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌等均具有较强的抑制作用。结论:槲寄生内生真菌发酵产物同槲寄生一样具有抗动脉粥样硬化作用,并且还具有明显的抑菌作用,值得进一步深入开发研究。     

槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用

目的：研究槲寄生内生真菌在槲寄生寄生过程中的作用。方法：将槲寄生8个不同部位的组织进行外植体培养，分离纯化其内生真菌,利用CMC平板培养和DNS法筛选出具有较高纤维素酶活性的菌株；将槲寄生寄生的膨大部位进行组织切片，染色观察其内生真菌的组织分布。结果：槲寄生体内分布着丰富的真菌菌丝；从槲寄生各组织部位共分离出83株内生真菌；初步筛选得到38株可降解纤维素的菌株，19株降解纤维素能力较强，其中10株分离自槲寄生寄生的膨大部位。结论：内生真菌分泌纤维素酶可降解枫杨树的细胞壁及细胞间隙组织，协助槲寄生的吸器穿透枫杨树组织，帮助槲寄生在枫杨树上寄生。     

槲寄生总生物碱的抗肿瘤作用

槲寄生总生物碱的抗肿瘤作用王庆端,刘梅筠,王东阳,齐建英,张覃沐(河南省医学科学研究所药理室郑州450052)槲寄生Viscumcoloratum(Komar.)vakai为桑寄生科植物。目前·国外对该植物进行了大量化学及药理方面的实验研究;发现所含主要有效成分为lectin,槲寄生毒肽,生物碱及iscador等有效成分￣[1,2];iscador及生物碱具有明显的抗肿瘤作用￣[3,4]。为了使这一传统中药进一步开发利用,我们对该植物中提取的总生物碱部分进行了抗动物....     

槲寄生碱抗肿瘤作用的研究

目的通过体内、体外实验研究槲寄生碱的抗肿瘤作用。方法体外实验采用MTT法测定槲寄生碱对食管癌细胞株(Eca109)生长的抑制作用。取对数生长期的肿瘤细胞培养24h后加入含不同浓度槲寄生碱培养液;作用24h后倾去上清液,加入MTT;4h后吸去上清液,加入二甲亚砜(DMSO);30min后测吸光度(A)并计算抑制率;体内实验将制备的肿瘤细胞悬液,以0.2mL/只的量接种于小鼠右前肢腋部皮下,24h后将已接种的小鼠随机分组。各组均连续给药7d,停药后1～3d将小鼠拉颈处死,剥取瘤块称重,计算抑瘤率。结果体外实验证实槲寄生碱对肿瘤细胞生长有显著的抑制作用;体内实验证实槲寄生碱可抑制肿瘤生长、延长荷瘤动物的生存期。结论槲寄生碱具有抗肿瘤作用。     

人参内生真菌的分离及其抗肿瘤活性研究

目的：从人参中分离获得人参内生真菌,并初步探讨其代谢产物粗提物的抗肿瘤活性。方法：研究利用筛选培养基从6年生人参中分离内生真菌,并利用小琼脂块培养法和分子生物学方法对获得的人参内生真菌进行鉴定,利用MTT法检测其体外抗肿瘤活性。结果：从人参中共计分离得到内生真菌28株,其中2株活性较好。结论：从药用植物人参中分离得到的人参内生真菌具有潜在的抗肿瘤活性,为进一步开发抗肿瘤药物提供新的研究对象。     

长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究

首次报道从长春花Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅｕｓ （Ｌ．）Ｇ．Ｄｏｎ茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏ－ｒｕｍ。为该植物的一种内生真菌,并用ＴＬＣ和ＨＰＬＣ对该菌的９７ＣＧ３菌株培养物进行了分析。初步结果表明该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。     

华泽兰内生真菌的分离及其抑菌、抗肿瘤活性

目的研究华泽兰内生真菌的分离及其抑菌、抗肿瘤活性。方法采用组织分离法分离内生真菌,通过形态学观察和其ITS(5.8S)序列的分子生物学方法鉴定内生真菌,KB纸片法和MTT法分别对内生真菌代谢产物的乙酸乙酯提取物进行抑菌实验和体外抗肿瘤实验,PCR法分析和检测内生真菌PKS和NRPS基因。结果从中分离得到8株内生真菌,分别鉴定为禾谷镰刀菌、间座壳属、链格孢属、层生镰刀菌、葡萄座腔菌属小新壳梭孢、细极链格孢、首都叶点霉。菌株EC102、EC103、EC107、EC108、EC111对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、面包酵母都具有很好的抑菌活性,EC102、EC107、EC108、EC109对人乳腺癌细胞株有较好的抗肿瘤活性。从华泽兰内生菌株中发现4个NRPS基因片段和1个PKS基因片段。结论分离得到的内生真菌具有潜在的抑菌和抗肿瘤活性,且能产生NRPS基因和PKS基因。     

红树植物内生真菌GT6105发酵产物的化学成分

目的从红树植物内生真菌中寻找具有酶抑制活性的次生代谢产物。方法利用各种柱层析手段,结合各种波谱方法分离鉴定红树植物内生真菌GT6105的化学成分。结果从红树植物内生真菌GT6105发酵液中分离纯化了12个化合物邻苯二甲酸二乙基己酯(1),阿魏酸(2),3,5-二羟基甲苯(3),邻苯二甲酸丁酯(4),2-羟基-3-苯丙酸(5),2,3-二羟基甲苯(6),3,4,5-三羟基甲苯(7),5-甲氧基-2,3-二羟基甲苯(8),对羟基苯甲酸(9),2,2-二甲基-1-苯并吡喃-6-醇(10),2,2-二甲基-6-羧基-苯并吡喃(11),4-(4-甲酰-2-甲氧-1-苯氧基)丁酸(12)。结论化合物12为首次从天然界分得,化合物2、10和11具有较弱的酶抑制活性。     

黄芪内生真菌发酵液中有效成分的初步研究

目的:对黄芪内生真菌发酵液进行成分研究。方法:将分离得到的黄芪内生真菌28株,按优化的发酵条件发酵培养8天,滤除菌体,得发酵液。对发酵液不同方法分别处理后,进行黄芪皂苷类、黄芪多糖类和黄芪黄酮类成分检测研究。结果:黄芪皂苷类成分检测中Salkowski反应、TLC检测、HPLC检测都没有阳性结果;黄芪黄酮类成分检测,颜色反应也不明显;黄芪多糖类检测为阴性结果。结论:单一黄芪内生真菌发菌液中没有检测到黄芪有效成分。     

地黄内生真菌促生作用的初步研究

目的:筛选出促进地黄生长的内生真菌,并初步研究其促生作用.方法:通过4株分离自地黄的内生真菌与地,黄无菌苗及地黄盆栽苗的共生实验,以苗重,叶绿素含量和根冠比为指标筛选出促进地黄生长的内生真菌,通过PC比色法测定真菌分泌IAA的能力并研究内生真菌的促生作用.结果:通过共生实验,发现4株真菌中,Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ显著促进盆栽地黄生长(P<0.05),与该菌共生的地黄无菌苗平均增长量是对照组正常生长地黄的1.25倍,并显著提高叶片中的叶绿素含量(P<0.01).通过salkowski比色法表明Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ分泌IAA,LAA浓度的峰值约可达到5.712 mg·L-1.结论:Ceratobasidium属内生真菌-菌Ⅳ促进地黄生长.     

铁皮石斛内生真菌的分离及其体外抑菌和抗肿瘤活性初步研究

目的分离铁皮石斛Dendrobium officinale内生真菌,研究内生真菌的分布并初步探讨和筛选具有抑菌和抗肿瘤活性的特异菌株。方法利用组织分离法和分子生物学方法分离、鉴定内生真菌;以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌作为受试对象,采用对峙法和管碟法分别对内生真菌及其发酵代谢产物的醋酸乙酯萃取相进行抑菌实验;采用MTT法对内生真菌代谢产物醋酸乙酯萃取相进行体外抗肿瘤活性检测。结果从铁皮石斛中分离得到28株内生真菌,分子鉴定结果显示,分离的内生真菌归属于10个属,其中镰刀菌属为优势属。抑菌实验结果显示28株内生真菌中,有7株至少能对1种指示菌有抑菌作用,其代谢产物的醋酸乙酯萃取相对3种指示菌和Hep G2细胞具有不同程度的抑制作用。结论铁皮石斛内生真菌种群丰富,从中分离得到的内生真菌具有潜在的抑菌和抗肿瘤活性,为进一步开发抑菌、抗肿瘤候选药物奠定基础。     

水仙内生真菌的分离及抑菌和抗肿瘤活性研究

目的 分离纯化水仙根茎中的内生真菌,并对分离得到的真菌进行抑菌和抗肿瘤活性筛选。方法 用组织分离法分离纯化水仙内生真菌后,以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、大肠杆菌Escherichia coli、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae和人肝癌细胞HepG2作为受试对象,采用滤纸片法和MTT法对内生真菌菌株发酵液的醋酸乙酯提取物进行抑菌和抗肿瘤活性检测。结果 从水仙根茎共分离到18株内生真菌,各菌株发酵液的醋酸乙酯提取物对4种供试细菌和HepG2细胞都有抑制作用。在质量浓度10 mg/mL时,SX-R202和SX-S102对大肠杆菌和绿脓杆菌抑菌圈直径分别达到18 mm和20 mm;在质量浓度1 mg/mL时,SX-R201、SX-R202、SX-R203和SX-R204对HepG2细胞增殖抑制率分别为（86.0±1.1）%、（89.8±1.3）%、（62.9±0.9）%和（90.6±1.0）%。结合形态学特征和分子生物学鉴定确定SX-R201为尖孢镰刀菌属Fusarium sp. 菌株、SX-R202和SX-R203为青霉属Penicillium sp. 菌株、SX-R204和SX-S102为曲霉属Aspergillus sp. 菌株。结论 水仙内生真菌的抑菌和抗肿瘤效果明显,值得进一步研究。     

红树林木果楝属植物可培养内生真菌的多样性及其代谢产物抗肿瘤活性

从3种红树林木果楝属植物材料的枝、叶及果皮中经反复分离纯化获得24株真菌,采用rDNA-ITS序列分析技术对菌株进行了种属鉴定,结果表明它们分属于3纲9目11科14属;并发现不同种属、不同产地的木果楝属植物内生真菌在种群组成和数量上存在差异,其中拟茎点霉属Phomopsis、炭疽病菌属Colletotrichum在3种植物材料中均分离得到。采用MTT法对菌液乙酸乙酯提取物进行体外抗肿瘤活性评价,发现15株真菌菌液乙酸乙酯提取物表现出良好的体外抗肿瘤活性,值得进一步研究和开发。     

内生真菌与天然产物研究进展

内生真菌生境独特,分布广泛,是发现新颖结构化合物的理想资源。植物是药用植物的主要材料,药用植物体内有大量内生真菌分布,内生真菌对药用植物的生长及活性成分的形成都有影响,如名贵中药血竭的形成需要内生真菌的参与,中药材的道地性可能也与内生真菌有密切关系。从内生真菌中发现活性成分所面临的一个重要问题是:随着野生中药资源及其生境遭到破坏,伴生的内生真菌也会随着大量消失,由此可能对中药长远发展产生重大影响,但这一现象尚未引起人们足够的重视。     

南海红树林内生真菌5094代谢产物研究

目的 研究南海红树林内生真菌5094的代谢产物.方法 采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构.结果 从南海红树林内生真菌5094的菌体中分离得到6个代谢产物.经波谱解析,分别为:1,4-二羟基-7-甲基-9,10-蒽醌(1),大黄素甲醚(2),大黄素-1,6-二甲醚(3),Chrysophanol (4),1,4,6-trihydroxy-2-methoxy-7-methylanthracene-9,10-dione(5),大黄素(6).初步药理活性显示化合物1对口腔癌细胞KB,KBv200的抗肿瘤活性值分别为5.5和10.2 μmol.结论 所有化合物均首次从南海红树林内生真菌5094中分离得到.     

红果槲寄生抗肿瘤有效部位的确定

目的:确定红果槲寄生[Viscum coloratum(Kom.)Nakai f.Rubroaurantiacum Kitag,VCR]的抗肿瘤有效部位。方法:以S180实体瘤小鼠作为动物模型,以抑瘤率为考察指标,对红果槲寄生75%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位:石油醚萃取部分、氯仿萃取部分、乙酸乙酯萃取部分、正丁醇萃取部分以及水层部分分别进行了抗肿瘤活性筛选。将接种肿瘤的昆明小鼠在成瘤后按照瘤体大小随机分为7组,阳性对照组于ip环磷酰胺,给药剂量为100 mg·kg-1,其他试验组于同一时间ig给药,每天1次,给药剂量按生药量计为14.2 g·kg-1,空白对照组给予相同剂量的空白溶剂,连续给药8 d。结果:红果槲寄生提取物能明显抑制小鼠S180实体瘤生长,其中正丁醇萃取物组,平均抑瘤率为48.8%;氯仿萃取物组,平均抑瘤率为44.1%。结论:正丁醇和氯仿萃取部分抗肿瘤活性较强,为红果槲寄生抗肿瘤有效部位。     

麻口皮子药内生真菌及其次生代谢产物的研究

目的研究麻口皮子药内生真菌及其次生代谢产物。方法采用组织切块培养法和划线分离法培养分离麻口皮子药中内生真菌,并通过形态和分子鉴定的方法鉴定菌种。内生真菌的发酵物采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为3,4-二羟基苯甲酸甲酯(1)、3,4-二甲氧基苯乙醇(2)、(2E)-(2R)-2,3-dihydroxypropyl-3-(4-methoxy-2-oxo-2H-pyran-6-yl)-2-butenoic acid ester(3)、对羟基苯乙醇(4)、(6S)-6-[(1S)-1-羟基戊基]-4-甲氧基-5,6-二氢吡喃-2-酮(5)、β-谷甾醇(6)、豆甾-4-烯-3-酮(7)。结论所有化合物均为首次从该内生真菌中分离得到。     

内生真菌生物转化提高滇重楼皂苷含量及抗肿瘤作用研究

目的 研究内生真菌Fusarium-C39生物转化提高滇重楼药材皂苷类化学成分的含量,并增强重楼对癌细胞增殖的抑制作用,初步探讨主要甾体皂苷的生物转化机制。方法 将内生真菌Fusarium-C39分别与滇重楼药材固体发酵和与重楼总皂苷提取物液体发酵,比较发酵前后重楼总皂苷和重楼皂苷I、II、VII的含量变化及对肝癌HepG2细胞、肺癌A549细胞和结肠癌HT-29细胞增殖抑制作用的差异;采用UPLC/Q-TOF-MS技术研究发酵前后重楼皂苷类化学成分的变化,并结合甾体皂苷生物合成途径推测内生真菌Fusarium-C39生物转化提高重楼皂苷含量的机制。结果 与滇重楼药材相比较,发酵物中的重楼总皂苷、重楼皂苷I、II和VII的含量显著提高,对3种癌细胞增殖的抑制作用显著增强;人参皂苷Th、pseudoproto-Pb和parisyunnanoside B为Fusarium-C39菌株生物转化提高重楼皂苷I、II和VII含量的主要前体物质,它们在Fusarium-C39菌株的作用下发生了C26糖基水解和环化反应,分别生成了重楼皂苷I、II和VII。结论 内生真菌Fusarium-C39可生物...     

南海红树林内生真菌ZH-4d代谢产物研究

目的：研究南海红树林内生真菌ZH-4d的代谢产物。方法：采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。结果：从南海红树林内生真菌ZH-4d的培养液中分离得到6个代谢产物。经波谱解析,分别为citrinin（1）,tenellic acid C（2）,tenellic acid A（3）,terretonin（4）,echinulin（5）,（E）-4,6-dimethoxy-3-[4-oxo-5-(prop-1-enyl)-4H-pyran-2-yl]-isobenzofuran-1（3H）-one（6）。初步药理活性显示化合物1对口腔癌细胞KB,KBv200的抗肿瘤活性分别为0.08,0.09 mmol·L^-1。结论：所有化合物均首次从南海红树林内生真菌ZH-4d中分离得到。