γ-氨基丁酸对胰腺癌SW1990细胞生长及VEGF表达的影响

目的观察γ-氨基丁酸（GABA）对胰腺癌SW1990细胞生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用MTT法和流式细胞术（FCM）检测GABA对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响,放射免疫分析法检测cAMP含量,RT—PCR检测VEGF mRNA表达,Western blot检测VEGF蛋白含量。结果GABA促进胰腺癌SW1990细胞生长,抑制细胞凋亡,同时促进细胞内cAMP增加。随着GABA浓度增加（80～320μmol／L）,VEGF mRNA及蛋白表达明显增加。结论GABA影响胰腺癌细胞增殖、凋亡和血管形成,可能参与调节肿瘤的生长与转移。     

γ-氨基丁酸及B受体在胃癌SGC-7901细胞中表达及对细胞迁移能力的影响

目的 观察GABA,GAD65,GABABR1在胃癌SGC-7901细胞中的表达及对细胞迁移能力的影响.方法 RT-PCR、IF及Western印迹检测胃癌细胞SGC-7901中GABA、GAD65及GABABRI mRNA及蛋白表达;不同浓度GABA,Baclofen及CGP35348作用于胃癌细胞SGC-7901细胞24h,transwell细胞迁移小室检测细胞迁移能力的变化.结果 GAD65,GABABR1 mRNA及蛋白表达于SGC-7901细胞中;GABA,GABABR1及GAD65蛋白定位于SGC-7901细胞胞膜、胞质;与空白组比较,随着GABA浓度的增加,细胞迁移能力增强;5μmol/L及50 μmol/L baelofen作用后,亦可促进细胞迁移;而随着CGP35348浓度的增加,细胞穿膜数量减少(P＜0.01).5μmol/L baclofen对细胞的迁移促进作用可被100 μmol/L的CGP35348逆转.结论 GABA及其B受体在SGC-7901细胞中的高表达可促进细胞迁移.     

羽扇豆醇对胰腺癌细胞株SW1990及γδT细胞生长的影响

目的:探讨羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990及γδT细胞生长的影响.方法:采用本实验室体外扩增人外周血γδT细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的羽扇豆醇在不同时间段对人γδT细胞和人胰腺癌细胞SW1990生长的影响.本实验分3组:空白对照组、溶剂对照组和实验组,时间段分24、48、72h组.结果:羽扇豆醇浓度在0.4-200μg/mL时羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990在24、48、72h各组与空白对照组和溶剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).而24、48、72h3组比较差异无统计学意义.γδT细胞培养7d从扩增前的3.61%增加到80.2%,羽扇豆醇对γδT细胞在24、48、72h随浓度的增加先增值后抑制作用.24h与空白对照组和溶剂对照组比较差异无统计学意义.48、72h各组与空白对照组和溶剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:羽扇豆醇对人胰腺癌细胞SW1990有抑制作用,对γδT细胞随着浓度增加有先促进后抑制作用.     

γ-氨基丁酸对胰腺癌细胞增殖及转移作用的实验研究

目的 观察γ-氨基丁酸(GABA)对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞周期及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达的影响.方法 应用不同浓度(0～320 μmol/L)GABA干预SW1990细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期.RT-PCR检测细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果 GABA促进胰腺癌SW1990细胞的生长,使G0/G1细胞减少,S期和G2/M细胞增多.320μmol/L的GABA干预细胞后的A570值为1.11±0.03,较无GABA干预组的0.56±0.01显著增加(P<0.01);G0/G1细胞为(46.18±1.12)%,较无GABA干预组的(87.29±1.34)%显著减少(P<0.01);MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA及蛋白表达分别为8.6、6.8、10.5、8.4,较0～40μmol/L组显著增加(P<0.05).结论 GABA能促进SW1990细胞增殖和MMPs的表达.     

高盐饮食对更年期焦虑症小鼠γ-氨基丁酸A受体mRNA表达的影响

目的探讨高盐饮食对更年期焦虑症小鼠γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)mRNA表达的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、4%高盐饮食组、8%高盐饮食组。其中4%高盐饮食组、8%高盐饮食组经高盐饮食干预1个月后,检测行为学及海马GABAAR mRNA表达情况。结果与模型组的开放臂进入次数(OE)+封闭臂进入次数(CE)、OE%、开放臂时间(OT)%比较,4%高盐饮食组、8%高盐饮食组均有统计学意义(P0.05)。与空白组比较,模型组、4%高盐饮食组、8%高盐饮食组GABAAR mRNA表达明显降低(P0.05);与模型组比较,4%高盐饮食组、8%高盐饮食组GABAAR mRNA表达明显降低(P0.05)。结论高盐饮食可能通过影响神经递质GABA受体的表达加重更年期焦虑症。     

溃疡性结肠炎T细胞亚群及γδ—T细胞的表达

目的：探讨溃疡性结肠炎（ＵＣ）患者外周血Ｔ细胞亚群及γδ－Ｔ细胞的表达在ＵＣ发病中的作用，方法用流式细胞仪双染法检测１３例正常人，１０列活动性溃疡结肠炎（ＡＵＣ）及１２例非活动性溃疡性结肠炎（ＩＡＵＣ）患者外周血及ＰＨＡ刺激后的Ｔ细胞亚群及γδ－Ｔ细胞的表达，结果：ＰＨＡ刺激后，ＣＤ４细胞在ＡＵＣ及ＩＡＵＣ组均较对照组显著增加（Ｐ均〈０．０５）；ＡＵＣ及ＩＡＵＣ组间差异无显著性，但ＡＵＣ组的ＣＤ４     

γ-氨基丁酸,受体药理学及对心血管活动的调节

<正> 一、Y—氨基丁酸(GABA)是脑内重要的抑制性递质。 1950年Roberts和Awapara发现在哺乳动物正常脑内的GABA浓度特别高, 但其生理意义不明。1954年Florey从牛脑中提取出一种含有未知物的溶液,能抑制螯虾牵张感受器神经元产生冲动,并对抗乙酰胆碱对豚鼠及家兔回肠的收缩作用。1957年     

γδT细胞对肺部感染气道防御的影响

γδT细胞表达TCR受体由γ和δ链组成，在抗感染免疫应答中发挥重要作用，本文就肺炎克雷白菌，单核细胞增生性李斯特氏菌，结核分枝杆菌及病毒等肺部感染时，γδT细胞在气道防御机制中的作用作扼要综述，旨在阐明γδT细胞在肺部感染时对气道防御的影响。     

γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白在老年胰腺导管腺癌患者胰腺癌组织中的表达与其临床意义

目的 研究γ-氨基丁酸A型受体相关蛋白(GABARAP)的表达及其临床意义.方法 应用MaxVision免疫组化法,检测60例老年胰腺导管腺癌根治手术患者的胰腺癌组织和癌旁正常胰腺组织中GABARAP的表达,并研究GABARAP与老年胰腺导管腺癌患者临床病理因素之间的关系.结果 GABARAP在胰腺导管腺癌组织中的阳性...     

γ-氨基丁酸对呼吸系统的作用

γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyricacid,GABA)是哺乳动物中枢神经系统重要的抑制性神经递质之一,也存在于肺等周围组织。GABA受体主要分为A型和B型两类。GABA和GABA_B受体激动剂对调节肺功能具有重要作用,它们可以抑制气道对各种炎性介质的反应,包括神经诱导的胆碱能和速激肽介导的平滑肌收缩、微血管渗漏、过敏性支气管痉挛及咳嗽等反应:因此GABA及选择性GABA_B受体激动剂对治疗呼吸系统疾病具有重要价值。     

肿瘤坏死因子-α对人胰腺癌细胞CXCL8及其受体表达的影响

目的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可以促进多种细胞因子和化学趋化因子的分泌,从而参与肿瘤的进展和转移。为探讨胰腺癌微环境调节机制,本课题研究了TNF-α对于胰腺癌细胞CXCL8基因表达和蛋白分泌及其受体CXCR1和CXCR2的影响。方法应用real-timePCR和ELISA方法检测4株胰腺癌细胞株PANC-1、CFPAC-1、Aspc1和Bxpc3。结果①Real-timePCR结果显示TNF-α刺激胰腺癌细胞后CXCL8mRNA相对表达量呈浓度依赖性。而从时间曲线分析,CXCL8mRNA的相对表达量以12h为显著,随后逐渐下降。②选取12h为时间点,检测10ng/mlTNF-α对PANC-1、Aspc-1、BxPc3细胞CXCL8mRNA相对表达量,结果显示PANC-1(14.31±4.80),Aspc-1(13.01±3.11)和Bxpc3(116.74±37.33)细胞CXCL8mRNA相对表达量较对照组显著增高(P<0.05)。③10ng/mlTNF-α刺激胰腺癌细胞72h后,胰腺癌细胞上清液中CXCL8浓度较阴性对照组(0ng/mlTNF-α)显著增加(P<0.05)[CFPAC-1细胞为(2689.95±79.40)ng/mlvs(2048.51±62.25)ng/ml;Bxpc3细胞为(1866.07±869.83)ng/mlvs(1308.92±850.29)ng/ml;Aspc-1细胞为(2077.19±344.13)ng/mlvs(1861.17±427.74)ng/ml;PANC-1细胞为(1624.10±420.77)ng/mlvs(1179.27±273.84)ng/ml]。④Real-timePCR检测10ng/mlTNF-α刺激BxPc3细胞CXCR1(0.68±0.056)和CXCR2(0.38±0.051)mRNA相对表达量下降(P<0.01),CF-PAC-1、PANC-1和Aspc-1细胞CXCR1和CXCR2表达未见明显改变(P>0.05)。结论 TNF-α通过促进CXCL8mRNA表达和分泌参与胰腺癌微环境的调节。     

γ-氨基丁酸B受体在CCl4诱导肝纤维化大鼠中的表达

目的:探讨γ-氨基丁酸(GABA)B受体在肝纤维化大鼠中的表达.方法:SD大鼠,腹腔注射50%CCl4制备大鼠肝纤维化模型.从第6周开始,每周1次取大鼠肝组织,得到不同肝纤维化程度的肝脏标本.一部分标本40g/L甲醛固定,常规石蜡包埋,连续4 μm切片,做组织病理学染色(HE、Masson)和免疫组织化学(α-SMA),以确定不同肝纤维化水平.另一部分标本-80℃保存用于提取肝脏RNA,逆转录得到cDNA,设计GABA(B)受体、α-SMA、TGF-β、胶原Ⅰ、胶原Ⅲ的引物,做实时荧光定量PCR,分析GABA(B)受体的表达与大鼠肝纤维化程度的相关性.结果:建模7 wk时,α-SMA、TGF-β、胶原Ⅰ和胶原Ⅲ较6 wk分别增加19.2倍、2.1倍、37.5倍和183.5倍.GABA(B)受体基因表达也明显升高,升高量达到116.2倍.6 wk对照组GABA(B)受体基因表达是模型组的2倍.到12wk初步形成假小叶时,只有α-SMA和胶原Ⅰ增加显著,分别为21.6倍和20.1倍.TGF-β和胶原Ⅲ变化不明显.其他时间点基因表达与6 wk模型相比无明显变化.结论:GABA(B)受体可能参与了肝纤维化的发生.在肝纤维化晚期,细胞外基质的合成主要以胶原Ⅰ为主,胶原Ⅲ次之.α-SMA的表达与肝纤维化水平呈正相关.     

γ-氨基丁酸对人肝细胞株基因表达的影响

目的:观察γ-氨基丁酸(GABA)对人肝细胞株Huh-7基因表达的影响.方法:将10μmol/L GABA与Huh-7细胞共同孵育24h,以PBS处理的Huh-7细胞为对照,提取mRNA,并逆转录成cDNA.与芯片杂交,根据杂交信号强弱筛选相关基因.结果:共筛选出27条差异表达的基因,其中11条基因表达下调,16奈基因表达上调,这些基因主要是与细胞增殖、凋亡及免疫功能相关,另外还有部分基因功能不详.结论:GABA对肝细胞基因表达谱有一定作用,GABA可能参与肝细胞功能的调控.     

人胃癌组织中γ-氨基丁酸含量及其受体和谷氨酸脱羧酶的表达

γ-氨基丁酸（γ—aminobutyric acid，GABA）是脊椎动物脑内一种重要的抑制性神经递质，与GABAA、GABAB、GABAC受体结合后发挥作用。符氨酸脱羧酶（glutamate decarboxylase，GAD）有两种异构体（即GAD65，GAD67），是合成GABA的主要限速酶。近年来的研究表明，GABA还广泛存在于外周组织，包括胃肠道，参与胃肠黏膜细胞分裂、分化、成熟的调节。GABA与胃癌关系研究少有报道。本研究探讨GABA及其受体在人胃癌组织中的表达及可能意义。     

生长抑素2型受体基因转染对胰腺癌细胞蛋白表达的影响

目的 探讨生长抑素2型受体(hSSTR2)基因转染对胰腺癌细胞PANC1蛋白表达的影响,以寻找新的胰腺癌敏感治疗靶点.方法 利用前期构建的腺病毒载体Ad.CMV.hSSTR2.GFP将hSSTR2全长cDNA导入胰腺癌细胞PANC1.采用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)技术分离并筛选转染hSSTR2的实验组、空载体对照组以及空白组胰腺癌细胞之间差异表达蛋白,用反射式基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)技术对差异蛋白进行鉴定.结果 hSSTB2成功地转染了胰腺癌细胞,获得了hSSTR2阴性和阳性表达的PANC1荧光差异蛋白表达图谱,经DeCyder v6.5软件分析,共有18个差异在1.3倍以上的蛋白质点,经质谱鉴定得到13个蛋白质.低表达的蛋白7个,为GMP合酶、磷酸化应激诱导蛋白、谷氨酸脱氢酶、Septin-11、波形蛋白、异柠檬酸脱氢酶α亚基、线粒体内膜易位酶;高表达蛋白6个,为真核延长因子1α1、丙酮酸激酶异构体M2型、烯酰-CoA水合酶、转录调节因子1-β、Mitofilin、HSP105.结论 hSSTR2基因转染胰腺癌细胞PANC1后引起蛋白表达发生变化,这些差异蛋白功能涉及到糖、脂肪、核酸代谢以及细胞生长调节和细胞凋亡等,从而为寻找新的胰腺癌敏感治疗靶点奠定基础.     

γδT细胞的免疫调节功能及对巨噬细胞的调节作用

γδT细胞是近年来备受关注的T细胞,虽然占体内淋巴细胞的少数,但其免疫调节功能却不容忽视.γδT细胞具有调节性T细胞的表型,属于调节性T细胞的一种,研究发现对巨噬细胞的调节作用可以通过细胞-细胞直接/间接接触或释放抑制性细胞因子产生.本文简要综述γδT细胞的免疫调节功能及对巨噬细胞的调节作用.     

系统性红斑狼疮患者外周血γ/δ T细胞的表达作用及受体多态性

目的 探讨γ／δT细胞在自身免疫病中的表达、作用及受体多态性。方法 ①检测正常对照、系统性红斑狼疮（SLE）活动期和稳定期患者各12例的外周血总γ／δ、Vγ1、Vγδ2细胞的表达情况。②用γ／δ细胞特异性抗原刺激外周血单个核细胞（PBMC）,了解该细胞在SLE患者中功能情况。③用分子生物学单链构象多态性（SSCP）方法分析SLE患者γ／δTCR的δ链基因及其第3互 补决定区（CDR3）长度的多态性。结果 SLE活动期患者的γ／δT细胞及亚群数量明显减少,而稳定期患者则正常。经抗原刺激后SLE的γ／δT细胞均无增生。SLE患者δ链CDR3基因表达有一定的限制性,全部患者均表达Vδ2,Vδ2的CDR3绝大多数都为克隆表达。结论 γ／δT细胞数目与SLE活动性相关,在其发病中可能起抑制性T 细胞的作用并存在功能缺陷。SLE患者TCRδ基因虽存在一定限制性表达,但尚不能肯定为某一特异性抗原刺激γ／δT细胞增生而引起SLE发病。     

结肠癌患者外周血γδT细胞Tim-3、PD-1表达及其临床意义

背景:肿瘤的发生与免疫系统功能密切相关,共刺激分子异常表达与执行固有免疫功能的γδT细胞功能异常有关。T细胞免疫球蛋白和黏蛋白分子-3(Tim-3)和程序性死亡分子-1(PD-1)是重要的负性共刺激分子,与相应配体结合后可影响T淋巴细胞免疫功能,从而介导肿瘤细胞免疫逃逸。目的:初步探讨结肠癌患者外周血γδT细胞表面Tim-3、PD-1表达及其临床意义。方法:选取2017年12月—2018年6月苏州大学附属第一医院44例住院结肠癌患者,采集术前外周血标本,40名健康志愿者作为对照组,以密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测γδT细胞表面Tim-3、PD-1表达,分析两者表达与结肠癌临床病理特征的相关性。结果:结肠癌患者外周血Tim-3~+、PD-1~+、Tim-3~+PD-1+γδT细胞比例均显著高于健康志愿者(P 0. 05),并与肿瘤体积和TNM分析呈显著正相关(P 0. 05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、有无远处转移则无明显相关性(P 0. 05)。结论:结肠癌患者外周血γδT细胞表面Tim-3、PD-1表达明显升高并与肿瘤临床病理分期相关,有可能成为评估结肠癌发生、发展的客观指标。