喉癌患者外周血CK19mRNA及CK20mRNA的表达

目的研究喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达,探讨其I临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测喉癌患者术前外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达。结果48例喉癌患者外周血中CK19mRNA阳性率为37．5％（18／48）,CK20mRNA阳性率45．8％（22／48）。10例肿瘤组织中CK19mRNA阳性率为100％（10／10）。CK20mRNA阳性率80％（8／10）;10例声带息肉患者外周血为阴性对照,CK19mRNA阳性率为10％（1／10）,CK20mRNA阳性率为0。结合临床病理资料,喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA表达与喉癌T分期、临床分期及淋巴结转移存在相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用巢式RT—PCR技术,对喉癌患者外周血单个核细胞CK19mRNA和,或CK20mRNA的检测,在分子生物学水平对喉癌细胞对周围组织的浸润及局部扩散提供了参考,有助于指导临床治疗。     

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的：分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达水平，探讨其临床病理意义。方法：随机选择和收集53例上皮性恶性肿瘤患者的外周血，应用巢式RT－PCR法联合检测其CK19、CK20mRNA表达情况，另取15例上皮性肿瘤组织的为阳性对照，15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果：53例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为35．8％（19／53，CK20阳性率41．5％（22／53），两者至少1项阳性者69．8％（31／53）。15例肿瘤组织中CK20阳性率为100％（15／15），CK19阳性率86％（13／15）；15例阴性对照CK19阳性2例，CK20阳性1例，结合肿瘤的临床病理资料分析，肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度，临床分期及淋巴结转移存在明显的相关性，而与肿瘤患者的年龄，性别，肿瘤分化程度无明显相关。结论：CK19、CK20mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。     

RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK-19mRNA的表达

目的探讨乳腺癌患者外周血中CK-19 mRNA的表达,建立检测外周血早期诊断乳腺癌微转移的方法.方法采取65例乳腺癌和37例乳腺良性疾病患者的外周血,分离其有核细胞后进行细胞总RNA的抽提,运用巢式RT-PCR技术进行CK-19 mRNA的检测.结果以巢式RT-PCR终产物出现460 bp带定为阳性.65例乳腺癌患者CK-19 mRNA有24例表达,总阳性率为36.92%.37例乳腺良性疾病者CK-19 mRNA无一例表达.两组有统计学意义 (χ2=7.41,P<0.001).结论 RT-PCR可以用于临床检测乳腺癌患者外周血中微转移,有可能成为判断预后和指导治疗的指标.     

实时定量RT-PCR检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及其临床价值

目的：以细胞角蛋白19（CK19）mRNA作为基因标志，建立实时定量RT—PCR方法（QRT—PCR）检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞，并探讨其在乳腺癌微转移监测及预后预测中的临床应用价值。方法：采用QRT—PCR方法．检测102名正常献血员、177例乳腺原发癌患者及12例有远处转移的乳腺癌患者外周血有核细胞的CK19 mRNA水平。结果：正常对照组、原发乳腺癌组及远处转移组CK19 mRNA的中位数分别为67、542和1082。原发乳腺癌组与另外两组比较，CK19 mRNA平均水平差异具有显著性（P〈0．05）；以正常对照组CK19 mRNA的最大值497拷贝／ml血作为阳性阈值。原发乳腺癌患者外周血肿瘤细胞阳性检出率为52．0％，与正常对照组（0）比较差异具有显著性（P〈0．05），远处转移组肿瘤细胞阳性检出率（83．3％）显著高于r原发乳腺癌组（P〈0．05）；原发性乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平及肿瘤细胞阳性率在临床病理因素各组间差异无显著性，但随着临床分期的增加，患者外周血CK19 mRNA水平呈递增趋势。结论：QRT—PCR方法定量检测乳腺癌患者外周血CK19 mRNA水平可早期发现血行播散的肿瘤细胞，应用于临床可指导个体化治疗方案的选择和疗效的动态监测，同时有望成为有价值的预后预测指标。     

乳腺癌患者外周血CEA mRNA的表达

目的　检测乳腺癌患者外周血CEAmRNA的表达 ,建立取材于外周血早期诊断乳腺癌转移的方法。方法　用巢式RT -PCR检测乳腺癌患者和乳腺良性肿瘤患者的外周血中CEAmRNA的表达。结果　 5 6例乳腺癌患者CEAmRNA有 2 1例表达 ,阳性率为 3 7.5 0 % ;42例乳腺良性疾病者CEAmRNA没有一例表达。两组有高度显著性差异 (χ2 =2 0 .0 4 ,P <0 .0 1 )　结论　巢式RT -PCR检测CEAmRNA阳性结果提示其具有形成转移的倾向 ,并可作为判断预后的辅助参考指标     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.     

CK20mRNA在胃癌患者外周血中的表达及及其临床意义

目的：研究胃癌患者外周血中CK20mRNA表达以判断癌细胞有无血行播散。方法：采用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）的方法,对胃癌30例,原发性肝细胞肝癌5例、对照组（非癌肿）10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因CK20mRNA进行检测。结果：对照组（非癌肿）10例及原发性肝细胞肝癌5例手术前、后外周血中CK20mRNA均为阴性表达。胃癌组30例,外周血中CK20mRNA手术前阳性表达率26．7％（8／30）,手术后48小时阳性表达率则为33．3％（10／30）。胃癌外周血中CK20mRNA的阳性表达率与细胞病理分化程度无关,与UICC病理贫苦无关,但与肝脏转移有关。结论：胃癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可作为癌细胞血行播散的标志;有助于判断胃癌的预后;有助于鉴别原发性肝细胞肝癌和胃癌肝转移。胃癌手术中应采用“不接触肿瘤的游离技术”以养活癌细胞的播散。     

CK20mRNA在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可否作为肿瘤细胞血行播散的标志.方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测34例大肠癌患者术前、术后外周血中细胞角蛋白（CK20mRNA）.结果对照组（非癌肿）20例及原发性肝细胞肝癌6例外周血中CK20mRNA均为阴性表达.大肠癌组34例,手术前外周血中CK20mRNA阳性表达率为64.17%,手术后72h外周血中CK20mRNA阳性表达率为67.65%.大肠癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达率与肿瘤细胞病理分化程度无关,与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关.结论大肠癌患者外周血中CK20mRNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志,有助于大肠癌预后的判断.手术操作会促使肿瘤细胞向血液中播散,手术过程中应加强预防措施以减少癌细胞的播散.     

宫颈癌外周血CK-19mRNA的表达及临床意义

目的 以角蛋白CK-19为标记，测定宫颈癌患者外周血CK-19mRNA的表达和相关循环癌细胞的存在及其临床意义。方法 45例病理诊断为I-Ⅲ期的宫颈癌患者，以35例妇科良性病变患者为对照组，用RT-PCR分析其外周血CK-19mRNA的表达。结果 45例宫颈癌患者，其中31例外周血CK-19mRNA表达阳性，35例对照组中无1例表达CK-19mRNA。结论 宫颈癌外周血中的CK-19mRNA来自恶性宫颈细胞，外周血中CK-19mRNA的阳性表达是循环宫颈癌细胞的敏感指标之一，可作为宫颈癌预后的有价值的指标，对宫颈癌的合理治疗具有重要临床指导意义。     

Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周中的表达及其在胃癌诊断及预后方面的价值。方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89 例胃癌患者及健康对照外周血中SurvivinmRNA 和CK19 mRNA 的表达情况,并利用统计学方法分析血清Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌中的诊断和预后价值。结果 RT-PCR 结果发现胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 的表达均高于健康对照组;ROC 曲线显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 为胃癌有效诊断分子靶点;χ2检验显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 与胃癌患者的TNM 分期呈正相关;Kaplan-Meier 生存曲线显示Survivin 和CK19 双阳性组的胃癌患者术后5 年生存率低于其他各组。结论 胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 表达水平增高,是胃癌早期诊断和判断预后的潜在分子指标。     

CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA在非小细胞肺癌患者外周血微转移中的表达和意义

【目的】研究非小细胞肺癌外周血CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA的表达及联合检测的临床意义。【方法】采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测59例NSCLC患者、31例肺良性疾病患者及20例健康志愿者外周血CK19mRNA、LUNXmRNA及巢式RT-PCR检测CEAmRNA的表达。【结果】59例NSCLC患者外周血CEAmRNA、CK19mRNA、LUNXmRNA阳性率分别为23.7%（14/59）、33.8%（20/59）、57.6%（34/59）。31例肺良性疾病及20例健康志愿者外周血上述三者的阳性率分别为3.2%（1/31）、12.9%（4/31）、0%（0/31）;0%（0/20）。统计结果显示：LUNXmRNA与临床分期、细胞分化程度有关,CEAmRNA与病理类型有关。【结论】CEAmRNA、CK19mRNA和LUNXmRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移的标志物。CEAmRNA对判断病理类型有一定临床意义。LUNXmRNA表达阳性率与肺癌TNM分期、细胞分化程度有关。     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

CK19mRNA在甲状腺肿瘤中的表达及意义

目的探讨CK19mRNA在甲状腺癌和甲状腺良性肿瘤中的表达情况及意义。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）技术检测42例甲状腺手术新鲜标本的CK19mRNA的表达。用光密度扫描仪测定并计算样品的CK19／／3．actin比值,代表CK19mRNA表达的相对含量,并与术后病理检查结果比较。结果在甲状腺癌中CK19mRNA阳性率为95．0％,在甲状腺良性肿瘤中CK19mRNA阳性率为45．5％,两者的阳性率比较有统计学意义（P〈0．01）,且恶性肿瘤组CK19mRNA的表达率高于良性肿瘤组。表达CK19mRNA病例的半定量观察结果显示,恶性肿瘤组的CK19mRNA表达明显高于良性肿瘤组,两者的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CK19mRNA在甲状腺肿瘤的表达可视为恶性肿瘤的标志,在良恶性甲状腺肿瘤的鉴别中具有重要应用价值。     

实时荧光定量RT—PCR检测乳腺癌患者外周血CK19及hMAMmRNA表达的临床意义

目的动态监测乳腺癌患者外周血液中CK19及hMAMmRNA的表达,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术,动态检测40例经病理证实的乳腺癌及10例健康对照组外周血液中CK19及hMAM的表达。结果40例乳腺癌循环血液中CK19及hMAM的表达显著高于正常人群。在治疗过程中,乳腺癌患者循环血液中上述指标表达的阳性率呈下降趋势。不同分期乳腺癌在治疗前、中期的表达无显著性差异,但在治疗后期不同分期乳腺癌表达的阳性率差异有统计学意义（CK19：P=0．044;hMAM：P=0．005）,对持续阳性的乳腺癌患者,其复发转移率较高,差异有显著性统计学意义（P〈0．001）。结论实时荧光定量PCR技术可检测出各期乳腺癌患者外周血中CK19及hMAM的表达,有较高的敏感性和特异性,在判断乳腺癌预后、监控复发中的应用具有一定的可行性。     

动态检测乳腺癌患者外周血中CK19表达的临床研究

目的动态检测乳腺癌患者外周血细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）的表达并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术（flow cytometry,FCM）动态检测32例乳腺癌、10例乳腺良性疾病及10例健康人外周血CK19的表达。结果32例乳腺癌患者外周血CK19阳性的总表达率为29.73%;外周血CK19的表达与TNM分期呈显著相关（P〈0.05）;与肿瘤大小、淋巴结有无转移、HER-2、ER、PR的表达均无相关性（P〉0.05）;IV期与I、II、III期之间有统计学意义。CK19表达预测远处转移敏感性高达100%,特异性为96.3%;10例良性患者及10例健康人外周血均无CK19表达。结论乳腺癌患者外周血CK19可以作为检测乳腺癌远处转移的敏感特异性指标。     

CK19 mRNA 逆转录聚合酶链反应检测循环乳腺癌细胞

目的:评估细胞角质蛋白CK19 mRNA检测对乳腺癌诊断的应用价值.方法:Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者各77例,40例非肿瘤志愿者.每例取1.5 ml外周静脉血,小量血总RNA快速抽提纯化,RT-PCR扩增产物作琼脂糖凝胶电泳并测序,对比其在不同分期乳腺癌中的阳性率.结果:琼脂糖凝胶电泳和测序证实扩增产物为目的片段.Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性率分别为19.48%(15/77)和40.26%(31/77),显著高于正常对照的5%(2/40)(P=0.037,P=0.001),且Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CK19 mRNA阳性率显著高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者(P=0.005).结论:CK19 RT-PCR是检测乳腺癌循环肿瘤细胞的较好方法,对治疗决策可能有指导意义.