锰对神经细胞内质网应激信号分子的影响

目的 观察锰对大鼠脑片神经细胞内质网应激信号分子的影响及其与细胞凋亡的关系. 方法 以胎大鼠脑片为模型,用400μmo/L锰分别处理脑片612、18、24 h后,检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）的释放量,神经细胞凋亡率以及脑片中GRP78、CHOP及caspase 12的表达. 结果 随着锰处理时间的增加,脑片细胞损伤明显,LDH释放量,细胞凋亡率和GRP78、CHOP及caspase 12的表达均逐渐上升. 结论 锰可以时间依赖性地活化内质网应激信号分子,促使细胞凋亡.     

锰对大鼠脑片的损伤及对细胞α-突触核蛋白表达的影响

目的研究锰对脑多巴胺神经细胞的毒性作用,重点观察α-突触核蛋白与细胞凋亡的改变。方法利用体外脑片培养模型,用不同浓度氯化锰(0,25,100,400μmol/L)处理脑片24 h后,观察脑片中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞改变,培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放量,细胞凋亡率以及α-突触核蛋白的表达。结果随着Mn处理浓度的增加,脑片神经细胞损伤逐渐加重。与对照组比较,锰处理脑片导致TH阳性细胞数明显减少,LDH释放量、细胞凋亡率以及α-突触核蛋白的表达均明显增加。结论锰对多巴胺神经细胞有毒性作用,并且锰可以通过诱导α-突触核蛋白过表达而造成神经细胞损伤。 更多还原     

α-突触核蛋白与帕金森病

α-突触核蛋白是一种中枢神经系统突触前表达的可溶性蛋白,与帕金森病的发病有密切的关系.α-突触核蛋白在各种生理,环境因素的影响下异常表达和聚集,通过一系列的氧化应激等生化反应,产生了对神经元的毒性作用,从而参与了帕金森病的发生.对α-突触核蛋白的化学性质,聚集的机制及其影响因素的了解与研究,将会十分有利于帕金森病的预防和治疗.     

百草枯引起神经元α-突触核蛋白寡聚化并向细胞核易位的时间依赖性研究

[背景]百草枯(PQ)作为散发性帕金森病(PD)的环境毒物之一可引起α-突触核蛋白(α-syn)异常聚集,但在其构象变化及亚细胞定位的研究有限.[目的]探讨PQ对多巴胺能神经元中α-syn构象以及亚细胞定位的影响.[方法]选取48只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,模型组腹腔注射PQ(15 mg·k...     

氟化钠诱导成骨细胞内质网应激特征

目的观察内质网应激在染氟成骨细胞中的特征,探索氟能否直接引起成骨细胞内质网应激。方法 2.5、5、10、20、40、80mg/L氟化钠染毒原代培养成骨细胞,并设立空白对照组和衣霉素阳性对照组。24h后Western blot检测成骨细胞内重链结合蛋白(heavy-chain binding protein,BIP)、X盒结合蛋白-1(X box binging protein1,XBP-1)、生长抑制DNA损伤基因(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP,也称GADD153)、蛋白质二硫键异构酶(protein disulfideismoerase,PDI)表达水平。结果各染毒组PDI蛋白表达量与空白对照与比较差异无统计学意义,XBP-1从10mg/L氟化钠组起表达明显高于空白对照组,并随氟剂量表达量增加。从2.5mg/L氟化钠组起骨细胞中的BIP表达高于对照组(P0.05);从10mg/L氟化钠组起,各氟染毒组的CHOP与β-actin的比值比对照组高(P0.05)。结论氟能够引起成骨细胞内质网应激。     

内质网应激在脓毒症大鼠心肌损伤中的作用

目的：研究内质网应激与脓毒症大鼠心肌损伤的关系。方法：35只雄性sD大鼠采用随机数字表法分为假手术组（n=7）和模型组（n=28）,模型组下设2、6、12、24h四个时相点,每个时相点7只。采用自动生化分析仪检测大鼠血CK—MB及cTnI水平。采用HE染色检测心肌损伤情况,免疫组化技术检测心肌组织ERS标志物GRP78蛋白表达。结果：（1）模型组大鼠6、12、24h血清CK—MB及cTnI均较对照组显著升高（P〈0．05）;各时相点病理改变明显;（2）心肌组织中GRP78蛋白表达在2h即较对照组升高,并呈逐渐增加趋势（P〈0．05）;（3）GRF78表达与心肌损伤具有显著正相关（r=0．711,P〈0．05）。也与血清cTnI水平呈显著正相关（r=0．612,P〈0．05）。结论：脓毒症启动了ERS,并且ERS与心肌损伤、血eTnI水平呈正相关关系。ERS可能在脓毒症大鼠心肌损伤中起重要作用。     

内质网应激途径在天花粉蛋白诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的:探讨内质网应激在天花粉蛋白诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡过程中的作用,进一步分析天花粉蛋白诱导凋亡的作用机制。方法:以不同浓度天花粉蛋白分别处理Hela细胞24、48、72 h后,采用MTT法检测细胞的活性,流式细胞术检测细胞凋亡,并用RT-PCR及实时荧光定量PCR分析天花粉蛋白对内质网应激标志分子GRP78和CALPAIN基因表达的影响。结果:天花粉蛋白对HeLa细胞的生长具有抑制作用,对照组Hela细胞体外生长活跃,实验组分别经20、40、80μg/ml TCS处理24、48、72 h后,细胞生长均不同程度地受到抑制,呈时间-浓度依赖性。流式细胞直方图上亦出现特征性的亚二倍体峰(sub-G1 peak),随着天花粉蛋白浓度的增加,内质网应激分子GRP78和CALPAIN的表达逐渐增强。结论:天花粉蛋白可诱导宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,内质网应激作为细胞凋亡的重要途径参与了天花粉蛋白诱导的HeLa细胞凋亡。     

石棉暴露下内质网应激在肺泡上皮细胞凋亡中的作用机制

目的探讨石棉暴露下内质网应激在细胞凋亡中的作用机制。方法应用石棉处理A549细胞,免疫荧光染色免疫法和免疫印迹法观察内质网应激(ERS)相关蛋白与促凋亡基因的变化。结果石棉暴露下,ERS相关蛋白Bip、IRE-1α和GRP94,以及促凋亡基因BAX、BAK蛋白表达均上调,且与石棉暴露时间呈正相关。结论内质网应激参与了石棉诱导的细胞凋亡。     

内质网应激与金属毒作用机制关系的研究进展

内质网应激是指细胞内质网钙稳态失衡或蛋白质加工运输障碍,生理功能发生紊乱时的一种亚细胞器应答反应,主要表现为未折叠蛋白反应。内质网应激反应是细胞适应的一种自身保护机制,但持续的或剧烈的应激反应却能激发程序性细胞死亡。内质网应激可以由多种干扰内质网功能的病理生理改变以及其他环境因素变化引起,金属化学物也是重要的诱发内质网应激的外界环境因素。内质网应激作为一种适应和保护机制,研究内质网应激在金属毒性中的作用有助于探讨毒作用机制和化学防护剂的开发。本研究在描述内质网应激与铅、镉、汞、铁、锰、铬等金属毒性关系的基础上,发现不同金属诱导内质网应激具有明显的时间效应和剂量效应特点,基本表现为早期诱导,晚期恢复或抑制;低剂量激活,而高剂量抑制。这为探讨金属毒性机制提供给了新的靶点。     

Nrf2对锰致GSH合成障碍的调控作用

锰（manganese, Mn）是一种常见的环境和职业污染物,其主要的毒作用部位是脑。锰神经毒性的主要病变部位位于黑质、纹状体、苍白球和尾状核等,主要表现为锥体外系神经受损。其主要机制之一是由于体内氧化-抗氧化系统的失衡,产生大量的ROS（reactive oxygen species, ROS）引起氧化损伤。谷胱甘肽（Glutathione, GSH）是体内重要的抗氧化物质,锰中毒时可以导致GSH合成障碍。核转录因子NF-E2相关因子2（Nuclear Factor-Erythroid 2 Related Factor 2, Nrf2）是一类具有抗氧化特征的转录因子,具有提高内源性GSH水平的作用。本文拟从锰暴露途径和神经毒性、锰与氧化应激、锰中毒对GSH的影响、Nrf2信号通路对锰致GSH合成障碍的调控四个方面作以综述。     

-硫辛酸对糖尿病大鼠内质网应激介导影响

目的探讨α-硫辛酸对内质网应激介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响。方法选择SD雄性健康大鼠50只,体重250~300 g,用链脲佐菌素建立糖尿病模型,实验设对照组,糖尿病组,α-硫辛酸低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg灌胃12周),对照组和糖尿病组每日给予等量生理盐水灌胃,测定大鼠血糖、心功能、心脏指数及左心室指数;原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡;western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)与C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)的蛋白表达。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖[(26.15±4.24)mmol/L]和心功能左室舒张末压(LVEDP)[(9.57±1.16)mm Hg]均升高(P<0.05),右心室收缩压(LVSP)[(62.45±4.10)mm Hg]、±dp/dt_max[(4 502.32±238.92)mm Hg/s]均降低(P<0.05);与糖尿病组比较,α-硫辛酸干预组各指标得到改善;与对照组比较,糖尿病组大鼠心肌细胞凋亡率[(11.28±0.33)%]增加(t=3.875,P<0.05),GRP78与CHOP蛋白表达比值升高;与糖尿病组比较,α-硫辛酸组心肌细胞凋亡率降低,GRP78与CHOP蛋白表达降低(P<0.01)。结论α-硫辛酸对糖尿病大鼠心肌有保护作用,其作用机制可能与内质网应激有关。     

芒果苷对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响

目的 探讨芒果苷对肌醇依赖酶1介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡影响.方法 健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,糖尿病组,芒果苷低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),灌胃12周,糖尿病组与芒果苷组大鼠给予链脲佐菌素45 mg/kg 建立糖尿病模型;测定大鼠血糖,心功能;用原位末端转移酶标记技术检测心肌细胞凋亡;免疫组织化学法检测肌醇依赖酶1(IRE1)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达.结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖[(25.52±2.82)mmol/L]明显升高(P <0.01),左心室收缩压、左室内压最大上升和下降速率均明显降低,左室舒张末压明显升高(P <0.01),心肌细胞凋亡率[(25.63±1.41)%]增加(P <0.01),心肌细胞IRE1、ASK1、JNK 蛋白表达明显增强(P <0.01);与糖尿病组比较,高剂量芒果苷组大鼠血糖[(12.04±1.86)mmol/L]降低,心肌细胞凋亡率[(13.22±1.71)%]下降(P <0.01),心功能明显改善,心肌细胞 IRE1、ASKl、JNK 蛋白表达均明显下调(P <0.01).结论 芒果苷可抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与下调血糖、内质网应激中IRE1介导的JNK信号通路表达有关.     

锰对多巴胺能神经细胞SN4741生长及细胞周期分布的影响

目的：研究锰（Manganese,Mn）对多巴胺能神经瘤细胞SN4741生长与细胞周期分布的影响，为进一步探讨锰损伤神经细胞的机制提供参考资料，方法：取对数生长期神经细胞株SN4741，使用含有200、400、600、800μmol/L MnCl2的培养液，分别作用1、2、4、6d后，用噻唑蓝（MTT）比色试验和平板集落形成实验检测细胞的存活和生长，筛选锰的细胞毒性剂量。流式细胞仪检测细胞周期分布。结果：MTT和平板克隆形成实验检测结果显示200－800μmol/L的Mn作用2、4、6d均对SN4741细胞株生长有显著的抑制作用，且呈剂量和时间效应关系。流式细胞仪检测结果表明，锰可将SN4741细胞生长周期阻滞在S期。结论：锰对神经瘤细胞SN4741增殖上有显著的抑制作用，将细胞阻滞在S期，结果为进一步探讨锰的神经细胞毒作用机制提供实验基础。     

Avicularin Attenuates Lead-Induced Impairment of Hepatic Glucose Metabolism by Inhibiting the ER Stress-Mediated Inflammatory Pathway

Lead (Pb), an environmental hazard, causes several human diseases. Avicularin (Avi), a main dietary flavonoid found in several plants and fruits, exhibits potential protective properties on organs. However, the molecular mechanisms of Avi’s protective effects against Pb-induced damage are not clear. In our study, the effects of Avi on Pb-induced hepatotoxicity were evaluated using ICR mice. We have revealed for the first time that treatment with Avi significantly reduced hepatic inflammation, endoplasmic reticulum stress (ERS) and glucose metabolism disorder induced by Pb. Avi decreased the serum biochemical indicators of glucose metabolism. Avi increased the activities of glycogenolysis rate-limiting enzyme hexokinase (HK), pyruvate kinase (PK), glucokinase (GK) and glycogen phosphorylase (PYG) and inhibited the activities of gluconeogenesis rate-limiting enzyme phosphoenolpyruvate carboxy kinase (PEPCK) and glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD). Avi decreased the protein expression levels of glucose-regulated protein 78 (GRP78), phosphorylated inositol requiring enzyme 1 (p-IRE1), phosphorylated RNA-dependent protein kinase-like ER kinase (p-PERK) and phosphorylated eukaryotic initiation factor 2α (p-eIF2α). The levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) were decreased in the liver as a result of Avi suppression Pb-induced inflammation. These results indicated that Avi attenuated Pb-induced impairment of hepatic glucose metabolism by the ERS and inflammation pathway.     

锰的神经毒性机制研究进展

锰对机体来说是一种非常重要的微量金属元素,而在职业环境中,某些接触锰作业的工人,还可能导致急性或慢性锰中毒,并诱发严重的、不可逆的精神和锥体外系运动功能障碍,出现帕金森综合征的临床表现。锰的神经毒性机制尚不明确,目前多从对多巴胺转运的影响,线粒体功能障碍,氧化应激,神经递质传输和炎症反应等角度进行探索。本文就锰神经毒性机制的研究进展作一综述。     

丙泊酚对类风湿性关节炎大鼠炎症反应及滑膜细胞凋亡影响

  目的  探讨丙泊酚对类风湿性关节炎（RA）大鼠炎症反应及滑膜细胞凋亡的影响。  方法  建立佐剂诱导关节炎（AIA）大鼠模型并用丙泊酚（2.5、5.0、10.0 mg/kg）处理,HE染色观察关节病变,ELISA检测血清中肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）和IL-6浓度。蛋白质印迹检测葡萄糖调节蛋白（GRP78）、生长停滞与DNA损害诱导蛋白（GADD34）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、核因子（NF-κB p65）及NF-κB抑制蛋白（IκBα）在大鼠滑膜组织中的表达。  结果  丙泊酚可减小AIA大鼠足趾体积,减轻关节组织炎性浸润及滑膜细胞增生,降低TNF-α、IL-1β 和IL-6在AIA大鼠血清中的浓度;抑制AIA大鼠关节炎滑膜组织中GRP78、GADD34、p-IκBα 和NF-κB p65表达,促进CHOP表达。  结论  丙泊酚可抑制类风湿性关节炎（RA）大鼠炎症反应,其机制可能与调控内质网应激有关。     

自噬紊乱在锰刺激诱导SN4741细胞损伤中的作用与机制研究

目的 通过利用氯化锰刺激SN4741细胞（小鼠多巴胺能细胞）,构建体外锰暴露模型,研究自噬紊乱在锰中毒中的作用,并初步探讨机制。方法 向SN4741细胞培养基中加入400 μmol/L的氯化锰溶液,检测细胞活力通过CCK-8 (Cell Counting Kit-8,CCK-8)试剂盒,分别检测锰作用0 h~48 h的细胞活力;凋亡蛋白Caspase-3和PARP,自噬相关蛋白Atg5和LC3的蛋白表达水平采用蛋白印迹法(western blot)检测;3-MA作为实验干预组抑制自噬紊乱,之后检测上述细胞自噬蛋白水平和损伤指标,采用方差分析进行比较。结果 锰刺激48h后损伤SN4721细胞活力(t=47.42,P=0.0013),凋亡标志蛋白Caspase-3剪切增加,下游分子PARP的剪切水平升高(t=11.96,P=0.019);Atg5和LC3-Ⅱ蛋白表达在锰暴露24h有所升高,48h升高更明显(t=18.72,P=0.012);3-MA干预后降低锰对SN4741细胞损伤(t=3.92,P=0.045),且3-MA干预致Atg5水平下降,Caspase-3蛋白和PARP等标志凋亡的蛋白水平降低(t=10.21,P=0.016)。结论 锰暴露可诱导多巴胺神经元自噬功能异常,继而诱导细胞凋亡,抑制自噬能减少锰暴露引起的细胞凋亡。     

大鼠脑缺血后内质网调节蛋白GRP78及胱冬酶12动态变化及其联系

内质网应激在大鼠脑缺血后发挥着重要作用。而内质网调节蛋白GRP8作为其最重要的标志物之一能够调节蛋白质的正确折叠,它随着缺血时间的延长也发生着动态变化,胱冬酶12则通过引起细胞凋亡的发生同样参与内质网应激。本研究主要对近些年来其二者在脑梗后内质网应激中发挥的作用及其相互关系的研究作一综述。