基质金属蛋白酶与皮肤光老化

紫外线(ultraviolet,UV)是导致皮肤老化最重要的外源性因素,由UV引起的皮肤老化称之为皮肤光老化.UV照射可诱导有活性的基质金属蛋白酶( matrix metalloproteinases,MMPs)过度表达,继而降解胶原蛋白等真皮细胞外基质成分,导致皮肤光老化.本文综述了MMPs在皮肤光老化中的作用及其相关机制.一、MMPs的生物学特性MMPs是一组含锌蛋白酶家族,由25名成员组成,根据其底物特异性以及其分泌后是可溶性蛋白还是细胞膜结合蛋白将其分为胶原酶类、明胶酶类、基质溶素和膜型MMPs.     

基质金属蛋白酶抑制剂抗光老化的研究进展

紫外线（UV）照射引起的皮肤老化称为皮肤光老化,UV照射可诱导有活性的基质金属蛋白酶（MMPs）过度表达,继而降解胶原蛋白等真皮细胞外基质成分,导致皮肤光老化。本文简述了MMPs在皮肤光老化中的作用,并详细阐述了MMPs抑制剂在抗光老化中的研究进展。     

杜仲提取液对紫外线照射下真皮成纤维细胞保护作用的研究

目的:研究紫外线(UV)照射对真皮成纤维细胞功能的影响,观察杜仲提取液对紫外线照射下细胞的保护作用。方法:体外培养人真皮成纤维细胞接收长波紫外线或中波紫外线照射,同时加入杜仲提取液,检测细胞存活率,基质金属蛋白酶(MMP)-1和3的mRNA表达,以及Ⅰ型、Ⅲ型前胶原蛋白表达水平。结果:与未照射组相比,20J/cm~2UVA1和40mJ/cm~2UVB照射组可显著抑制细胞存活率、增加MMP-1和MMP-3mRNA水平、抑制Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白表达水平(P0.01)。照射同时加入1mg/ml杜仲提取液可以显著减少UVA1或UVB照射对细胞引起的上述改变(P0.05)。结论:杜仲提取液对UV照射所致真皮成纤维细胞的增殖损伤、胶原合成和分解代谢紊乱有保护作用,因而可以应用于防治皮肤光老化。     

光老化皮肤中基质金属蛋白酶增高的信号转导机制及防治策略

紫外线(ultraviolet ,UV)是导致皮肤老化的最重要的外源性因素,由UV引起的皮肤老化称之为皮肤光老化[1,2 ] 。皮肤光老化最重要的变化主要是由于以细胞外基质为底物的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)增高所致的纤维结缔组织降解。MMPs包括胶原酶、明胶酶和基质溶解素等,是由MMP基因编码的一组金属依赖性蛋白酶家族[3 ,4] 。随着对UV引起的MMPs增高的信息转导通路了解的增多,不仅加深了人们对皮肤光老化的认识,同时也为其防治研究提供了新的思路。一、UV诱导MMPs表达的信号转导机制UV刺激可通过膜受体依赖和非膜受…     

雷帕霉素调控光老化成纤维细胞MMPs和COL-1表达

目的探讨雷帕霉素(RAPA)对光老化皮肤成纤维细胞(FBs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达和Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)合成的影响。方法采用cck-8法检测RAPA对FBs活性的影响,甄选最佳应用浓度,利用UVB体外反复照射构建成纤维细胞的老化模型,RAPA预处理细胞,造模结束24 h后,实时荧光定量检测MMPs的表达;造模结束48 h,蛋白质印迹法检测Ⅰ型胶原的表达。结果低剂量RAPA对FBs的细胞活性无影响,5μm/L的RAPA作为后续细胞处理的药物浓度为佳。UVB组的光老化FBs中,MMP-1、2、9的表达均显著升高;而RAPA预处理后能明显降低UVB引起的MMPs过度分泌;同时使Ⅰ型胶原的表达量增多。结论 RAPA可降低光老化FBs中MMPs的表达,增加Ⅰ型胶原的合成,维持光老化皮肤ECM成分的稳定,在一定程度上缓解细胞光老化程度。     

外源性bFGF对深Ⅱ度烫伤大鼠创面MMP-2、MMP-7和TIMP-2的影响

目的观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-7与金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissueinhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的变化以及创面外用bFGF对两者的影响,认识基质金属蛋白酶与抑制因子对创面愈合的作用.方法78只Wistar大鼠随机分为正常对照、单纯烫伤和bFGF治疗三组.利用大鼠30%深Ⅱ度烫伤模型,于伤后3h、6h、1d、3d、7d和14d采取创面皮肤标本,用免疫组织化学染色检测创面组织真皮内成纤维细胞MMP-2、MMP-7和TIMP-2的表达变化情况.结果烫伤大鼠创面中细胞外基质活动影响皮肤的胶原沉积.伤后1d MMP-2/MMP-7表达增多,随后略有下降,7d时再次达到高峰.伤后TIMP-2的表达与前者的表达一致.局部外用bFGF后,创伤初期(3h～6h)组织中MMP-2/MMP-7的表达无显著变化,1d～14d,MMP-2/MMP-7和TIMP-2阳性表达强于对照组.结论MMPs和TIMPs的表达变化是组织修复的重要步骤,bFGF加速创面愈合的过程与MMP-2/MMP-7和TIMP2的表达密切相关.     

TGF-β1对UVA照射人皮肤成纤维细胞MMP-1和MMP-3 mRNA表达的影响

目的：研究转化生长因子-β1（tansforming gowth fctot-beta1,TGF-β1）对长波紫外线（ultrayiolet A,UVA）照射人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和基质金属蛋白酶-3（matrix metalloprotein ase-3,MMP-3）mRNA表达的影响,探讨TGF-D,对皮肤成纤维细胞的光保护机制。方法：通过体外培养人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度TGF-β1（0．1、1、10ng／m1）预处理细胞后UVA15J／cm^2照射诱导细胞光老化,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测成纤维细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定MMP-1、MMP-3 mRNA表达。结果：UVAI5J／cm^2照射前给予不同剂量TGF-β1预处理,随TGF-β1剂量增加成纤维细胞增殖活性明显提高,MMP-1、MMP-3 mRNA表达随着TGF-β1剂量增加而降低。结论：TGF-β1可提高UVA照射体外培养成纤维细胞增殖活性,减少UVA照射体外培养的皮肤成纤维细胞MMP-1、MMP-3 mRNA表达,减少其对胶原的降解,对UVA照射皮肤成纤维细胞起保护作用。     

富血小板血浆(PRP)对大鼠光老化皮肤胶原蛋白、TGF-β及MMP-1表达的影响

目的:通过测定注射富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)后大鼠光老化皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,转化因子β(TGF-β),基质金属蛋白酶1(MMP-1)的表达量,观察PRP对大鼠光老化皮肤的改善作用。方法:通过紫外线照射大鼠背部皮肤建立皮肤光老化模型。将模型动物随机分为5组,A-PRP注射组注射激活的PRP(A-PRP);N-PRP注射组注射未激活的PRP(N-PRP);生理盐水注射组注射生理盐水;空白对照组仅照射建模;正常大鼠组仅剃除毛发。干预4周后,通过免疫组化法对大鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量进行半定量分析;通过Western bolt法对大鼠皮肤TGF-β、MMP-1表达量进行测定。结果:Ⅰ型胶原表达:A-PRP注射组较N-PRP注射组、生理盐水注射组、空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。Ⅲ型胶原表达:A-PRP注射组显著高于生理盐水注射组、空白对照组(P0.05),与N-PRP注射组比较,差异无统计学意义(P0.05)。TGF-β表达:A-PRP注射组显著高于N-PRP注射组、生理盐水注射组、空白对照组(P0.05);MMP-1表达:A-PRP注射组显著低于生理盐水注射组、空白对照组(P0.05),与N-PRP注射组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:注射PRP可以提高光老化大鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和TGF-β表达,降低MMP-1表达,其中A-PRP对Ⅰ型胶原和TGF-β表达的促进作用优于N-PRP。     

肝细胞生长因子对光老化成纤维细胞凋亡及周期的影响

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对紫外线诱导皮肤成纤维细胞周期及凋亡的影响。方法建立光老化模型,皮肤成纤维细胞(FBs)经HGF处理后行倒置显微镜观察、细胞计数并予以流式细胞周期检测;以HGF预处理皮肤FBs 2 h,中波紫外线(UVB)照射诱导体外FBs细胞发生细胞损伤,Tunel染色试剂盒检测细胞凋亡。结果光老化模型建立后,UVB+HGF组细胞存活较UVB组增多(P0.05);HGF减少光老化成纤维细胞P53的表达,改善光老化FBs细胞周期分布;HGF能够减少UVB导致的FBs凋亡(P0.05)。结论 HGF可调控光老化细胞周期分布及减少细胞凋亡,在光老化治疗中具有潜在应用前景。     

糖尿病肾病患者外周血单个核细胞中基质金属蛋白酶的表达

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖蛋白酶,它主要参与细胞外基质(ECM)的降解、转运、组织重塑[1].MMP-9是MMPs家族中最大的成员,主要降解Ⅳ型胶原,在一定的病理条件下,对细胞的迁移、侵袭、活化及动脉硬化的形成、血管重塑等均起重要作用[2].我们通过对糖尿病,肾病患者外周血单个核细胞(PBMC)MMP-9 Mrna表达的研究.探讨MMP-9在糖尿病肾病发生、发展过程中的可能作用.     

基质金属蛋白酶及其抑制因子在增生性瘢痕中的表达特征及意义

目的：研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制因子(TIMP-2)在增生性瘢痕和正常皮肤中的表达特征。方法：用免疫组化技术检测这三种蛋白酶在12例增生性瘢痕和6例正常皮肤中的表达变化规律。结果：在正常皮肤中,MMP-2、MMP-9和TIMP-2的阳性率分别为(2．13±2．36)%、(16．25±18．72)%、(25．38±12．47)%。在增生性瘢痕中,三种蛋白的阳性细胞率明显升高(P＜0．01),其中MMP-2和MMP-9主要定位于表皮细胞和成纤维细胞上,含有TIMP-2蛋白的阳性细胞也主要为表皮细胞和成纤维细胞。结论：MMP-2、MMP-9和TIMP-2可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及创伤后修复起重要作用。     

组织蛋白酶G在光老化皮肤成纤维细胞中的表达及意义

目的 探讨组织蛋白酶G（cathepsin G）在光老化皮肤中的表达变化及意义.方法 培养原代人皮肤成纤维细胞,8-甲氧补骨脂素＋长波紫外线（8-MOP＋UVA）法体外诱导培养细胞光老化.衰老相关-β半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色证明老化诱导成功.蛋白印迹技术及反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）对比检测光老化成纤维细胞及正常成纤维细胞组织蛋白酶G蛋白及基因表达.结果 Western印迹法结果 示光老化诱导组组织蛋白酶G表达上调为单UVA诱导组、单8-MOP孵育组及空白组的（1.70±0.028）倍.实时RT-PCR结果 示光老化细胞组织蛋白酶G mRNA表达上调为空白组的（1.42±0.09）倍（P〈0.01）.结论 组织蛋白酶G在光老化成纤维细胞中高表达,可能通过改变细胞外基质成分和激活基质金属蛋白酶参与皮肤光老化所致.     

紫外线致皮肤胶原纤维光损伤的研究进展

真皮中最主要的结构蛋白是胶原纤维,由成纤维细胞合成和分泌,占皮肤于重的70％-80％,成年人皮肤中主要是Ⅰ型和Ⅲ型胶原,其中Ⅰ型胶原约占80％,是真皮中最主要的胶原成分。长期紫外线辐射可使真皮中出现明显退行性变的胶原,胶原最后形成无定性物质导致皮肤的光老化。紫外线导致胶原纤维的减少通过两条途径：①胶原成分的降解增多;②胶原的合成减少。紫外线导致的胶原纤维减少是皮肤光老化的重要原因之一,下面就紫外线导致真皮胶原纤维光老化的机制综述如下。     

低剂量长波紫外线反复照射诱导培养成纤维细胞表达基质金属蛋白酶实验研究

目的：探讨长波紫外线引起皮肤光老化、皱纹形成的机制。方法：以7.2J/cm2长波紫外线单次或多次照射培养真皮成纤维细胞,光镜、电镜观察细胞的形态学变化,原位杂交和免疫组化的方法检测基质金属蛋白酶中的间质胶原酶（MMP-1）、间质溶解素-1（MMP-3）mRNA及其共同的组织抑制因子（TIMP-1）蛋白在各实验组成纤维细胞的表达并进行定量分析。结果：在长波紫外线累积剂量达57.6J/cm2后,培养真皮成纤维细胞开始出现具有细胞衰老特征性的形态改变,但仅经两次7.2J/cm2 UVA照射,培养成纤维细胞就出现MMP-1、MMP-3 mRNA的表达并随累积照射剂量增加逐渐增强,但各照射组的TIMP-1蛋白均仅在照射后48h内呈一过性轻度表达。结论：皮肤光老化皱纹形成可能与长波紫外线照射引起真皮成纤维细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达失衡密切相关。     

β1转化生长因子对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌相关的基质金属蛋白酶的影响

目的探讨β1转化生长因子(TGF-β1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的调节作用,及TGF-β1与瘢痕的关系。方法培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经TGF-β1处理,采用酶联免疫法(ELISA)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP-1、MMP-2和TIMP-1的水平。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1、MMP-2和TIMP-1的生成量显著高于正常皮肤(P<0.01);加TGF-β1处理后,瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1的分泌量显著降低(P<0.01),MMP-2的分泌量显著升高(P<0.01),而TIMP-1的分泌量无显著改变(P>0.05)。结论培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞显示MMP-1、MMP-2和TIMP-1增加,TGF-β1在生成调节过程中起重要作用。     

TSG-6对兔耳瘢痕形成过程中MMP-2、TIMP-2表达及瘢痕修复的影响

目的建立兔耳创面修复瘢痕模型,探讨在瘢痕形成过程中肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)表达和瘢痕修复的影响。方法参照Morris方法,建立兔耳创面模型,设计实验组,注射TSG-6;对照组注射等量的无菌生理盐水。检测各组瘢痕指数及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达情况来评价瘢痕增生情况。同时检测MMP-2及TIMP-2基因的表达情况。结果实验组的瘢痕指数及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量低于对照组,MMP-2的表达较多,对应的TIMP-2表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 TSG-6可以抑制瘢痕增生,可能是增多瘢痕组织中MMP-2表达来实现的。     

MMP-3在乳腺癌演变中的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)是基质降解代谢的主要酶类(MMP-3)在乳腺癌的发生、发展及侵袭转移过程中发挥着一定作用。笔者就MMP-3的生物活性及其与乳腺癌的发生、侵袭和转移中的作用作一综述。     

萝卜硫素的皮肤光保护作用研究进展

流行病学、临床和生物学研究提示,日光中的紫外线(UV)是一种完全致癌物,短期集中或长期间断紫外线辐射可引起皮肤损伤,尤其是日光中的中波紫外线(UVB)与各种皮肤病包括光老化、皮肤炎症和皮肤癌密切相关[1]。近年来,对     

基质金属蛋白酶9在多器官功能障碍综合征大鼠肾组织的表达

炎性介质的大量释放导致内皮细胞损伤是引起多器官功能障碍综合征(MODS)的基础.有关器官内皮细胞激活和损伤在MODS病理过程中的作用研究较多~([1]),而细胞外基质在MODS中的变化及与其的关系目前还未检索到相关报道.因此,我们选择了降解细胞外基质主要成分Ⅳ型胶原的基质金属蛋白酶9(MMP-9)作为观察指标,并与血清MMP-9比较,探讨细胞外基质的变化在MODS肾损伤中的作用.     

脂肪干细胞抑制UVB诱导的细胞外基质降解的机制研究

目的:细胞微环境在调控细胞定位、细胞行为和细胞分化等方面发挥重要作用。细胞外基质(Etracellular matrix,ECM)在塑造干细胞微环境中起着最关键的作用,与上皮干细胞接触,调节干细胞命运,其中整合素和胶原蛋白在干细胞的调节和维持中发挥重要作用。本研究中,笔者假设UVB照射通过改变ECM诱导皮肤光老化,并且应用脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)可以逆转光老化。方法:将C57BL/6J小鼠作为研究对象,分为对照组、UVB组和UVB+ADSCs组。采用HE和Masson染色鉴定各组的组织学差异,应用免疫荧光分析和RT-PCR技术检测三组间ECM组分表达的差异性。评估整合素α2(Integrinα2),增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),抗凋亡蛋白Bcl-2在各组的表达情况。结果:HE和Masson染色结果显示UVB照射明显增加表皮厚度,应用ADSCs后表皮厚度与对照组接近。UVB组整合素α2、胶原蛋白Ⅲ和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均低于对照组,而UVB+ADSCs组各因子表达高于UVB组,与对照组接近(P0.05)。基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP 2)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9,MMP 9)和PCNA的表达趋势与上述相反。结论:笔者发现UVB照射通过改变ECM而导致典型的光老化征象,并且UVB抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达和整合素α2的表达。Bcl-2和整合素α2有望成为抑制光老化的作用因子。