头孢菌素C酰化酶的分离

头孢菌素C酸化酶(CCA)可催化头孢菌素C侧链酰胺键的水解,生成β-内酰胺母核7-氨基头孢烷酸(7-ACA)和侧链α-氨基己二酸.利用CCA生产7-ACA只需一步反应过程.这种酶的工业应用将能取代目前使用的多步化学或酶促水解方法.     

酶定向进化的研究策略

定点突变是酶工程中研究酶的结构与功能的常规手段,并广泛用于改变酶的性能.酶的体外定向进化是改造生物催化剂的一种有效的新策略,主要是模拟自然进化进程,通过容错PCR等技术对编码酶的基因进行随机突变,再由DNA改组、交错延伸过程、随机引导重组、递增截短技术等进行突变基因的体外重组,最终经筛选获得所需的酶.本文综述了酶定向进化的研究与应用.     

药酶在头孢菌素C发酵上的应用

目的：使用药酶部分替代头C发酵中的有机氮源，提高发酵水平；方法：采用“均匀设计”法优化原料配比；结果：使用药酶后，效价提高10．4％，总亿提高了8．2％；结论：药酶能够提高头C发酵的水平。     

青霉素酰化酶研究进展

青霉素酰化酶除了在医药工业上用于大规模生产β－内酰胺类抗生素中间体和半合成β－内酰胺类抗生素之外,还有其它的一些潜在应用;对青霉素酰化酶的研究一直吸引着各国科研人员的兴趣,近年来,用一些经典的和现代的技术手段,对青霉素酰化酶产生菌进行改良,通过理化诱变,使酶活力提高;通过定点突和化学修饰,将酶活性中心的丝氨酸变成半胱氨酸或含硒原子的半胱氨酸,使酶的合成活力相对于水解活力大幅提高,通过基因工程技术提高酶的表达水平,促进分泌或改进生产菌的缺陷,出现了介孔分子筛,二甘醇二甲基酯丙烯酸酯接枝尼龙共聚物等新的;固定化材料及酶膜反应器,多室固定化酶反应器,有望用于工业化生产。ββ     

青霉素酰化酶电极

用海藻酸钠-氯化钙包埋法制备青霉素酰化酶电极,电极涂液中海藻酸钠浓度为1％,酶量大于15U/100mg较好。经聚乙烯亚胺处理的电极的抗磷酸盐性能良好,测试在pH 7.05缓冲液中进行,加样搅拌平衡后,取停止搅拌5min后的pH读数,△pH-青霉素G浓度的线性范围为0～1.88mg/ml。温度和pH对pH响应值均有影响。     

头孢菌素C的生产

本文报导头孢菌素 C 的生产(简称 cpc),特别详细的叙述了头孢霉菌多倍体产生头孢菌素 C 的过程。通过选育及发酵提高产量的研究,目前已知籍在有机硫化物的代谢及生物合成上受     

头孢菌素C的生产

头孢菌素 C 的重要性是作为半合成头孢类抗生素的原料。头孢菌素 C(CPC)是由头孢霉菌的一些种产生,除产生 CPC 外,同时还产生青霉素 N(PCN)、头孢菌素 P。CPC 与PCN 的物理性质很相似,致使 CPC 的提炼、纯化较困难,因此需要在培养基中选择适当营养物质及对菌种进行改良,以期降低副产物和提高 CPC 产量。     

头孢菌素C的生产

据近期美国专利报道,用顶头孢霉菌发酵产生头孢菌素C时,有时会产生高达15％作为杂质的脱乙酰头孢菌素C。由于脱乙酰头孢菌素C的理化性质与头孢菌素C相似,所以会给后者的提取造成困难,且在以后的裂解中无法获得纯度高的7-ACA。     

氨噻肟头孢菌素合成中新酰化工艺探讨

氨噻肟头孢菌素(Cefotaxime Sodium,HR-756) (1)是一种抗菌谱广、抗菌活性强、对酶稳定的第三代头孢菌素。氨噻肟侧链(2)与7-ACA缩合时,以往     

头孢菌素C的反应性萃取

除青霉素以外,头孢菌素衍生物也是典型和重要的β-内酰胺类抗生素。由顶头孢霉产生的头孢菌素C可用层析法或化学法从发酵液提取。前一种方法需要相当笨重和昂贵的设备。因此有必要发展一种简便的分离技术。已广泛应用于青霉素之类亲脂性抗生素提纯的基于水相与有机相之间分配的溶媒萃取法(下称物理性萃取)被认为是最有希望的替代方法之一。然而,由于头孢菌素是两性的,几乎不溶于有机溶媒,故物理性萃取无法应用于头孢菌素的提纯。为建立一种能萃取的提取方法,Andrisan等提出使发酵液     

头孢菌素C钠盐的制备

由头孢菌素C钠盐或钾盐经两步酶法直接裂解制备7-ACA，收率高，成本低，且污染少。但此法所用原料头C钠盐或钾盐极易溶于水，从水溶液中析晶很困难，且结晶剂不易寻找。本文即对头C钠盐的制备作初步的研究和介绍。采用醋酸-醋酸钠缓冲液将头孢菌素C从D-2004交换树脂上洗脱下来，得头孢菌素C钠盐溶液，再用纳滤浓缩至效价2万r／ml以上，以丙酮析晶，即得头孢菌素C钠盐。     

头孢菌素C的发酵研究

以顶头孢(Cephalosporium acremo-nium)C-82-123菌株研究了硫脲对头孢菌素C(CPC)发酵的影响,结果表明硫脲不是CPC生物合成的硫源,亦非其调节剂。当发酵液中硫脲的浓度为0.2％以上时,它明显抑制菌体的生长,硫脲可与CPC发生化学反应生     

产生酰化酶菌种的选育

青霉素酰化酶(penicillin acylase)是半合成抗菌素工业上的一种重要酶类,它可用于青霉素或重排酸(7-苯乙酰氨基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸)的裂解,以生产6-氨基青霉烷酸(6-APA)或7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA);也可用于缩合制取氨苄青霉素、羟氨苄青霉素及其他半合成青霉素或头孢菌素。但目前国内广泛使用的产生酰化酶的菌种,酶产量较低,因此我们开展菌种选育工作。以大肠杆菌B-EC-1及B-EC-2二株为出发菌株,经紫外线(UV)诱变二次累积处理,选育到1.236菌株,使酰化酶产量由原来的24.84单位/     

高通量筛选方法在酶定向进化中的应用

在过去的几十年中,酶作为经济、环保的生物催化剂已经越来越受到工业以及医药领域的重视,与此同时,高通量筛选方法(HTS)作为酶定向进化中的一项重要技术也得到长足的发展。近些年来,一系列高通量筛选方法的建立使得酶的筛选更加灵敏、高效、快捷,大量的能够适用于工业以及医药领域的工程酶也相继产生。综述了近期建立的一些高通量筛选方法,简要概述了各种筛选方法的基本原理以及存在的优点和不足,并对高通量筛选方法将来的发展做出了展望。     

头孢菌素Ⅳ的酶催生物合成

半合成头孢菌素因其耐青霉素酶,并具有广谱抗菌活性,疗效胜过青霉素。有关其酶催合成研究,虽有许多报道,但进展缓慢。鉴于酶催合成半合成抗生素在工业上潜在的重要性,以及缺乏有关发酵变量和酶特性的实验数据,作者利用结合于细胞上的柑桔黄单胞菌(Xanthomonas citri)的合成酶,对由7-氨基脱乙酰氧基头孢霉     

用去乙酰头孢菌素C半合成头孢菌素的一个新途径

1.3-杂环硫甲基一头孢菌素的合成最近有许多半合成头孢菌素已用于临床。它们的制备均以头孢菌素 C(CPC)作为合成的原料,在其7位上用其它乙酰基置换氨基巳二酰基;在3-次甲基位上的乙酰氧基或3’-位用亲核的试剂,如吡啶、杂环硫醇作用而成。如头孢菌素Ⅱ(Cephaloridine),唑啉头孢菌素(Cefazolin),羟基四唑头孢菌素(Cefamandole),羟胺唑头孢菌素(Ce-fatrizine),三氟唑头孢菌素(Cefazaflur),     

头孢菌素类产品的市场情况及头孢菌素C发酵工艺

简要的分析了头孢菌素类抗生素目前的市场发展状况，结果表明头抱菌素的研究开发速度减缓，开发广谱、高效、长效的新头孢菌素已成为当务之急。分别从发酵培养基的组成、发酵操作条件以及发酵过程控制三个层面分析了发酵工艺对头孢菌素C产量的影响，为发酵生产头孢菌素C提供了理论和现实意义。     

酶促转化头孢菌素C成为7—氨基头孢烯酸研究进展

以７－氨基头孢烯酸（７－ＡＣＡ）作为母核原料合成的许多重要的半合成头孢菌素类抗生素约占全球抗生素市场份额的２９％,因此７－ＡＣＡ的生产备受生物制药行业的关注。为克服目前工业生产主要采用的头孢菌素Ｃ化学脱酰化的缺陷,近年的发展多以利用Ｄ－氨基酸氧化和７β－（４－羧基丁酰胺基）－头孢烯酰脱酰酶两步转化头孢菌素Ｃ为７－ＡＣＡＡ,对该生物方法及所使用的酶的纯化、稳定性及固定化方法作了介绍。     

头孢菌素C生产工艺改进研究Ⅳ.溶媒法提取头孢菌素C的试验

头孢菌素 C(1)用氯甲酸异丁酯保护氨基,继以溶媒提取并使 N-异丁氧羰基头孢菌素 C 成双二环己胺盐(2)析出。对头孢菌素 C 发酵滤液或该发酵滤液经前处理及医工82号阴离子交换树脂交换后的洗脱液进行溶媒提取试验,收率分别为约50%及68%。2采用反相高效液相色谱法测定,用 YMG-C_(18)H_(37)作载体,甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH2.4)[45:55(v/v)]为流动相,紫外检测波长为254nm,整个操作仅需8 min 左右。2裂解制取7 ACA 收率约80%。