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1.
目的了解HBsAg无症状携带者乙型肝炎病毒(HBV)核心基因启动子双突变(nt1762 A→T,nt1764 G→A)发生情况及其与基因型、病毒量和HBeAg的关系。方法 HBsAg无症状携带者从隆安研究队列中选择,用套式聚合酶链反应(nested PCR)对研究对象血清HBV核心基因启动子、S基因扩增、序列分析及基因分型,用HBV引物和双标记的TaqMan探针扩增和定量病毒DNA。结果观察开始时核心基因启动子为野毒株的109例观察对象,3年后双突变平均年发生率为2.8%;观察开始时已发生nt1762或nt1764点突变的59例对象,3年后另一个位点也发生突变的平均年发生率为6.8%,两率差异有统计学意义(χ2=5.109 0,P<0.05)。nt1762 A→T突变组HBeAg阳性率(45.5%,10/22)与nt1764 G→A突变组HBeAg阳性率(10.8%,4/37)差异有统计学意义(χ2=9.149,P<0.05)。20例基因型B未发生双突变,重组基因型年双突变率为4.8%(2/14),基因型C年突变率为3.1%(7/75),各基因型间突变率差异无统计学意义(P>0.05)。5例双突变发生后HBeAg仍然阳性者病毒量有下降趋势,而另5例突变发生后HBeAg阴性者其病毒量有升有降。结论 HBV核心基因启动子双突变年发生率较高,这两个位点中的任何一个发生突变是双突变的过渡形式,双突变与基因型无关,nt1764 G→A突变与HBeAg阴性有关。 相似文献
2.
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896 G→A点突变对母乳喂养安全性的影响.方法 收集62例本院妇产科HBeAg阴性的HBV感染产妇血标本,同时收集这些孕妇产后48 h内初乳.应用PCR固相杂交法检测孕妇血清中HBV DNA前C区1896 G→A突变,荧光定量PeR(FQ-PCR)检测孕妇血清和初乳中HBV DNA含量.分析HBV前c区1896 D→A点突变及孕妇血清HBVDNA含量与初乳中HBV DNA含量的对应关系.结果 62例孕妇血标本共检测到38例HBV前C区1896 G→A点突变(61.3%);突变组初乳HBV DNA阳性率为28.9%(11/38),未突变组初乳HBVDNA阳性率为29.2%(7/24),两组间差异无统计学意义(X2=0.0003,P0.05).孕妇血中HBVDNA高含量组(≥1×105拷贝/ml)初乳HBV DNA阳性率为56.0%(14/25),低含量组(相似文献
3.
乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变对血清HBV DNA含量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的利用基因芯片技术检测乙型肝炎病毒(HBV)前C区/BCP区基因突变,探讨前C区/BCP区基因突变后血清HBV DNA水平的变化。方法应用基因芯片技术检测95例慢性乙肝的HBV前C区1896、1814及HBV C基因启动子(BCP)1762、1764四位点突变,同时用荧光定量PCR检测血清HBV DNA含量。结果95份血清标本中,有91份分别检测到了HBV前C区/BCP区基因突变,阳性率95.8%,其中G1896A突变33例(36.3%),A1762T G1764A联合突变64例(70.3%),G1896A A1762T G1764A联合突变22例(24.2%),未检测到A1814C突变毒株。G1896A A1762T G1764A联合突变后,血清HBV DNA水平较未变异组降低(P<0.05),其它各组则无显著变化。结论应用基因芯片法可同时检测HBV多个突变位点。乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变对血清HBV DNA含量有一定的影响。 相似文献
4.
目的 了解内江市东兴区乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)慢性感染者中的HBV基因型和基本核心启动子(basal core promoter,BCP)、前C(Precore,PC)区变异。方法 从慢性HBV感染者血清标本中提取病毒DNA,进行核苷酸测序,构建进化树确定基因型,分析BCP和前C区位点变异。结果 S基因序列进化树分析显示,64份标本为B基因型,7份为C基因型,1份为I基因型;获取的53份BCP和PC序列标本中,25份标本发生A1762T/G1764A或G1896A变异;7份C基因型标本中6份发生A1762T/G1764A变异;B基因型标本以G1896A变异为主,并与A1762T/G1764A联合变异,HBeAg阳性组和阴性组之间G1896A和A1762T/G1764A变异率有差异(P均<0.05)。其他包括HBeAg前体启动子变异、1846位点核苷酸缺失等。结论 内江市东兴区慢性HBV感染者以B基因型感染为主,1例为I基因型。B基因型HBV以G1896A变异最常见,并与A1762T/G1764A联合变异,C基因型HBV更容易发生A1762T/G1... 相似文献
5.
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896 G→A点突变对母婴垂直传播的影响。方法:收集60例本院妇产科HBeAg阴性/HBV DNA阳性的孕妇血标本,同时收集这些孕妇的60例新生儿脐带血。应用PCR固相杂交法检测孕妇血清中HBV DNA前C区1896 G→A突变,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV孕妇血清和新生儿脐带血中HBV DNA载量。分析HBV前C区1896 G→A点突变及孕妇血清HBV DNA载量对母婴垂直传播率的影响。结果:60例孕妇血标本共检测到38例HBV前C区1896 G→A点突变(63.3%);突变组母婴垂直传播发生率为44.7%(17/38),未突变组母婴垂直传播发生率为40.9%(9/22),二组比较无统计学差异(χ2=0.0831,P>0.05)。孕妇血中HBV DNA高载量组(≥1×105 copies/ml)母婴垂直传播发生率为72.0%(18/25),低载量组(<1×105 copies/ml)母婴垂直传播发生率为22.9%(8/35),二组相比有显著性差异(χ2=14.3426,P<0.01)。结论:HBV前C区1896 G→A点突变未对母婴HBV垂直传播率造成影响,孕妇血清中HBV DNA载量升高增加了母婴HBV垂直传播的危险性。 相似文献
6.
乙型肝炎肝硬化患者与乙型肝炎病毒携带者乙型肝炎病毒X基因序列比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究乙型肝炎肝硬化患者与乙型肝炎病毒(HBV)携带者HBV X基因序列的差异。方法对20例标本的PCR产物进行直接测序;并对3例乙型肝炎肝硬化患者和3例无症状HBV携带者HBV DNA的扩增片段进行克隆测序,并分析比较。结果肝硬化患者中X基因核心启动子双突变T1762/A1764、G1719T、T1727G/A、G1730C、T1753C等变异高于HBV携带者;前者X启动子区变异率明显高于后者;乙型肝炎肝硬化同一患者X区不同克隆之间的碱基序列同源性为91.3%-99.7%,而HBV携带者为96.0%-100.0%。结论乙型肝炎肝硬化患者,HBV DNA X区的CP启动子区以及X启动子区变异程度明显高于HBV携带者,同时乙型肝炎肝硬化患者体内存在变异程度更大的HBV准种群。 相似文献
7.
目的 检测宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)博尔纳病病毒(BDV)携带情况,分析BDV与标准病毒株之间的同源性.探讨BDV感染性疾病与不明原因病毒性脑炎之间的关系,同时也为部分病毒性脑炎的病因学诊断及其防治提供实验依据.方法 采用荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者及正常人PBMCs BDV p24基因片段,并对其中阳性扩增产物进行基因序列测定,然后采用BLAST软件以及DNAsist 5.0软件对测序结果进行分析.结果 病毒性脑炎组样本BDVp24基因片段FQ-nRT-PCR阳性率(10.17%)显著高于正常对照组(0%)(P<0.05).病毒性脑炎患者检出BDVp24基因片段的核苷酸序列与马BDV标准病毒株H3915序列同源性为97.67%,与H1766株比较在3个位点出现一致性突变(nt1659 T→C,nt1668 A→G,nt1674 T→C;突变率为3.49%);与strain V株比较在4个位点出现一致性突变(nt1648 C→T,nt1658 G→A,nt1667 A→G,nt1673 T→C;突变率为4.65%),但编码的氨基酸相同.证实扩增所得目的 基因片段确系BDV p24的相应片段.结论 宁夏地区不明原因病毒性脑炎患者中存在BDV感染,提示部分不明原因病毒性脑炎的发生可能与BDV感染有关.且该BDVp24扩增产物核苷酸序列与标准病毒株高度同源性,与马源strain H3915同源性最高. 相似文献
8.
目的探讨乙型肝炎病毒前C区G1896A突变、基本核心启动子区A1762T、G1764A双突变与基因型、拉米夫定疗效的相关性。方法采用基因测序法对接受拉米夫定治疗的81例慢性重型乙型肝炎患者的血清标本进行前C区、基本核心启动子区(BCP区)、基因型及逆转录酶区(P区)检测,并对前C区、BCP区的变异与基因型、逆转录酶区的变异进行相关性分析。结果 81例慢性重型乙型肝炎患者送检标本中,68份标本可检出前C区G1896A变异或BCP区A1762T/G1764A变异;单纯G1896A突变31例,单纯A1762T/G1764A突变24例,前C区联合BCP区变异13例;81例慢性重型乙型肝炎患者经拉米夫定治疗后,有45例发生变异,其中180M和204V变异株35例,204I变异株10例;前C区变异在野生型组、变异型组中的检出率分别为38.9%、66.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05);BCP区变异在野生型组、变异型组中的检出率分别为33.3%、55.6%,两者差异有统计学意义(P<0.05);在81例慢性重型乙型肝炎患者血清标本中,B基因型18例,C基因型63例;前C区变异在B、C基因型中的检出率分别为72.2%、33.3%,两者差异有统计学意义(P<0.05);BCP区变异在B、C基因型中的检出率分别为16.7%、54.0%,两者差异有统计学意义(P<0.05);G1896A突变在B基因型感染者中检出率明显高于C基因型感染者;A1762T/G1764A双突变在B基因型感染者中检出率明显低于C基因型感染者。结论发生G1896A突变和A1762T/G1764A突变的患者,在接受拉米夫定治疗后更易发生逆转录酶区的变异;G1896A突变易出现在B基因型感染者中,A1762T/G1764A突变易出现在C基因型感染者中。 相似文献
9.
《中国卫生检验杂志》2015,(15)
目的了解合肥地区慢性无症状乙肝病毒携带者(As C)体内HBV s基因的变异情况。方法自慢性肝炎患者血清中提取HBV基因组DNA,扩增其s基因片段并进行序列分析,用MEGA 3.1和Clustalx 1.8软件为所测基因进行分型,并通过比对s基因序列,分析s基因变异情况。结果 27例样品中,B型13例(48.1%),C型14例(51.9%),未发现混合型和其他基因型。有12例(44.4%)标本s基因发生突变,其中B型6例,C型6例;单位点突变有8例,多位点突变有4例,其中B型有2例在氨基酸133位点发生突变(Met→Leu)。结论 27例慢性无症状乙肝病毒携带者HBV的基因型为B型和C型,As C患者体内HBV病毒s基因存在突变现象,并且突变位点随机,突变形式有单点突变和多位点突变。 相似文献
10.
乙型肝炎病毒表面大蛋白检测的临床应用研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的探讨乙型肝炎病毒表面大蛋白(LHBs)用于临床乙型肝炎诊断的实验价值及与乙型肝炎病毒DNA定量的相关性。方法应用基因工程表达的乙型肝炎病毒表面大蛋白,采用ELISA技术共检测了510份HBsAg阳性血清标本中的LHBs,同时检测前S1抗原(PreS1Ag)及HBeAg,并应用荧光定量PCR技术平行检测HBVDNA。结果380份HBV DNA阳性血清标本中,361份(95.00%)LHBs检测阳性,PreS1Ag192份(50.50%)检测阳性;LHBs阳性率明显高于乙型肝炎前S1阳性率,两者差异有统计学意义(P〈0.01);239份HBeAg阴性血清标本中,HBV DNA129份(53.93%)阳性,LHBs132份(55.23%)阳性,PreS1Ag77份(32.22%)阳性,LHBs阳性率与HBV DNA阳性率差异无统计学意义(P〉0.05),均显著高于PreS1Ag;LHBs含量与HBV DNA拷贝数呈正相关性,相关系数r=0.946。结论LHBs是一个操作简便的可用于反映乙型肝炎病毒复制水平的敏感指标。 相似文献
11.
Triki H Ben Slimane S Ben Mami N Sakka T Ben Ammar A Dellagi K 《Epidemiology and infection》2000,125(1):169-174
Hepatitis B Virus (HBV) e antigen (HBeAg), HBV DNA and precore mutations affecting HBeAg expression during active replication were studied in 72 Tunisian hepatitis B surface antigen (HBsAg) positive individuals: 30 asymptomatic carriers of the virus, 37 with chronic hepatitis and 5 with acute hepatitis. HBV DNA was detected in 44 patients, but only 20% of them expressed HBeAg. Precore mutant strains, with mutations at position 1896 or at positions 1896 and 1899, were detected by PCR-hybridization in 86 and 36% of patients, respectively. Wild-type strains were detected in 54% of patients. Precore mutants were found in chronically and in acutely infected individuals, in patients with severe and asymptomatic infections, in HBeAg positive as well as HBeAg negative individuals.These results show the high frequency of HBV precore mutants in Tunisia. 相似文献
12.
Baha W Ennaji MM Lazar F Melloul M El Fahime E El Malki A Bennani A 《Infection, genetics and evolution》2012,12(6):1157-1162
The study of hepatitis B virus (HBV) genomic heterogeneity has become a major issue in investigations aimed at understanding the relationship between HBV mutants and the wide spectrum of clinical and pathological conditions associated with HBV infection. The objective of the current study was to find out the pattern of HBV genotypes circulating in Morocco and to investigate the precore (PC) and basal core promoter (BCP) mutants' status in Moroccan chronic hepatitis B patients. Viral genotypes were determined in 221 chronic carriers using INNO-LiPA HBV assay and hemi-nested PCR. Phylogenetic analysis was performed in 70 samples, and multiplex PCR method was used to confirm some genotyping results. PC and CP mutants were determined using Inno-Lipa. All isolates were successfully genotyped. The genotype distribution was D in 90.45% of cases, A (5.9%), E (1 case), and mixed genotypes (5 A/D and 2 D/F) in 3.17% patients. HBV carried in the HBV/D samples could be assigned to D7 (63.3%), D1 (32.7%) and 2% of strains to each D4 and D5, all HBV/A belonged to A2 subgenotype and HBV/E strain could not be sub-genotyped. In 70 studied strains, HBV mutants were detected in 88.6% of cases; PC mutants were detected in (40%) of patients and 21.5% present a mixture of wild type and G1896A mutation. BCP mutants were observed in 65.7% of cases, 22.9% were found to have the T1762/1764A double mutation, 18.6% had A1762/1764T mutation and 22.9% of patients showed the A1762T/G1764A double mutation with either A1762T/G1764T mutation. Co-infection by PC and BCP mutants was detected in 52.9% of cases. Movement from place to place most likely shapes the observed genotype distribution and consequent prevalence of genotypes other than A2 or D7 in this population. High circulation of PC and BCP mutants is common in chronic hepatitis B infection in Morocco. 相似文献
13.
应用突变特异PCR检测HBV前C区nt1896位点突变 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立检则HBV前C区突变的突变特异聚合酶链反应(msPCR)方法,探讨前C区突变与肝病临床分型、e系统状态及病毒复制的关系。方法根据HBV前C区nt1896G→A突变设计并合成引物,建立msPCR检测方法,通过测序和扩增产物电泳证实msPCR的特异性。结果229例急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝硬化患者nt1896突变株感染率分别为25.0%、5.3%、5.2%、27.8%和20.0%;野生株和突变株混合感染率分别是62.5%、32.9%、50.6%、38.9%和38.0%。221例慢性HBV感染者中,野生株、突变株和混合感染者血清HBeAg阳性率分别为71.3%、34.8%和51.1%;HBVDNA含量分别为7.1×108±3.3×106、7.2×107±1.3×106和2.1×109±2.4×106copies/ml;ALT异常率分别为46.3%、73.9%和54.4%,突变组显著高于野生组(P<0.05)。干扰素治疗后,混合感染者血清HBVDNA的阴转率显著高于野生株(P<0.05)。结论msPCR检测nt1896突变灵敏特异,nt1896突变与肝病严重性有密切关系。 相似文献
14.
目的 研究广西壮族自治区(广西)扶绥县肝癌高发区HBV基因型、基本核心启动子(BCP)/前C区突变与肝癌的关系。方法 采用病例对照方法收集53例肝癌患者和70例HBV健康携带者的血清,提取HBV DNA,用巢式PCR扩增 HBV S区、BCP/前C区,扩增产物纯化后测序,分析基因型、基因突变与肝癌发生的关系。结果 BCP区A1762T/G1764A及前C区T1858C在病例组中的突变率高于对照组,分别为94.3% vs. 75.7%(P=0.006)和50.9% vs. 31.4%(P=0.029);A1775G在对照组中的突变率高于病例组28.6% vs.13.2%(P=0.041)。多因素logistic回归分析显示,HBV A1762T/G1764A和T1858C突变是肝癌发生的危险因素,OR值分别为5.459(95%CI:1.397~21.332,P=0.015)和3.881(95%CI:1.462~10.305,P=0.006);A1775G突变是肝癌发生的保护因素,OR=0.192(95%CI:0.059~0.622,P=0.006)。结论 HBV C基因型是广西肝癌高发区的主要流行株,HBV BCP区A1762T/G1764A、A1775G、前C区T1858C 突变与HBV相关肝癌的发生有密切关系。 相似文献
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[目的]了解广西壮族自治区隆安县HBsAg携带者血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)情况。[方法]对广西隆安县30~55岁HBsAg携带者组成的研究队列采空腹静脉血,利用套式聚合酶链激反应(nPCR)检测血清HBV DNA,利用赖氏法测血清ALT,根据HBV DNA检测结果将研究对象分为两组,HBVDNA(+)组和HBVDNA(-)组。比较人群ALT异常率。[结果]HBsAg携带者HBV DNA阳性率为53.34%(1008/1855),ALT异常率为17.41%(323/1855),男性HBVDNA阳性率(56.69%,589/1039)、ALT异常率(22.14%,230/1039)均高于女性(51.35%、419/816,11.40%、93/816)(均P〈O.05),HBVDNA(+)组ALT异常率(23.21%)高于HBVDNA(-)组(10.51%)(Pd0.01);40~岁年龄组ALT异常率(19.18%)最高,各年龄组ALT异常率的差异无统计学(P〉0.05)。[结论]该地区HBsAg携带者高HBV复制率、肝功能受损是肝癌高发的危险因素之一。 相似文献
16.
目的探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性和阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)前C区、基本核心启动子(BCP)区变异特点以及与血清细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-10水平的关系。方法将120例HBV DNA阳性CHB患者(HBeAg阴性和阳性各60例)与60例健康体检者(对照组)纳入研究。荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测HBeAg阴性和阳性组患者HBV DNA水平,直接测序法检测两组前C区G1896A变异及BCP区A1762T和G1764A变异,双抗夹心酶联免疫吸附试验检测血清细胞因子IFN-γ/、IL-10的水平。结果 120例HBV DNA阳性CHB患者HBV前C区和BCP区变异总检出率为60.00%(72/120),其中HBeAg阴性组变异检出率为80.00%(48/60),HBeAg阳性组变异检出率为40.00%(24/60),两组比较,差异有显著性(x~2=20.00,P=0.000)。HBeAg阴性组G1896A变异(38.33%)和联合变异(G1896A、A1762T和G1764A同时变异,25.00%)的检出率明显高于HBeAg阳性组(16.67%、0.00%)(分别x~2=7.06,P=0.008;x~2=17.14,P=0.000)。变异组血清IFN-7水平为(102.33±27.20)pg/mL,明显高于无变异组(79.18±16.43)pg/mL及对照组(35.77±4.23)pg/mL(分别t=5.72,t=19.33,均P=0.000);变异组血清IL-10水平为(28.13±7.00)pg/mL,明显高于无变异组(13.91±5.42)pg/mL及对照组(13.68±2.27)pg/mL(分别t=12.50,t=15.65,均P=0.000)。结论 G1896A变异和联合变异更常见于HBeAg阴性CHB;G1896A和A1762T/G1764A变异与血清细胞因子IFN-γ和IL-10水平升高有关。 相似文献
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乙型肝炎病毒前C区1896点突变的检测与病毒复制水平关系的探讨 总被引:4,自引:6,他引:4
目的分析乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896位基因突变与HBV的感染和复制以及血清ALT水平之间的关系. 方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测144例不同e系统表达的乙型肝炎患者血清前S2抗原(Pres2Ag)及其抗体(Pres2Ab),应用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DVA,PCR固相杂交法测定前C区1896变异株前C区1896变异的存在状况,并对ALT结果进行对比分析. 结果前C区1896变异株在HBeAg与抗-HBe阳性标本中的突变检出率分别为3.33%和46.1%,两者差异有显著性(P<0.05),凡前C区1896阳性样本,一般HBeAg阴性,抗-HBe阳性,且HBV-DNA的值很高,与HBeAg( )DNA含量差异无显著性(P>0.05);HBV-DNA阳性标本Pres2Ag阳性率为81.8%;Pres2Ab为零;且ALT异常水平达(105±207) U/L. 结论HBV-DNA的病毒含量,前C区1896变异导致抗HBe阳性以及前S2蛋白的存在与HBV的感染和复制有密切关系;提示由前C区1896变异引起的抗-HBe阳性感染者体内病毒复制更容易引起ALT升高,证实HBV活性复制是肝细胞持续破坏的重要原因. 相似文献
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广西肝癌患者乙型肝炎病毒前C区基因的突变 总被引:21,自引:0,他引:21
目的 了解乙型肝炎病毒(HBV)前C区基因突变与HBeAg阴性的原发性肝癌患HBV感染的关系。方法 应用套式PCR方法对广西16例原发性肝癌患血清HBV NA前C区进行扩增,对阳性用Sanger DNA测序法分析。结果 16例肝癌患中有14例HBV DNA阳性,阳性率为87.5%(14/16)。其中1例HBeAg阳隆,1例虽然HBeAg为阴性,但其前C区序列正常;2例为HBV野毒株和突变株 相似文献
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目的调查贵州省乙型肝炎病毒(HBV)前C区A1896、基本核心启动子区(BCP) T1762/A1764变异分布。方法收集贵阳、遵义、凯里、都匀4地区不同民族无症状携带者(ASC)、慢性肝炎(CH)、肝炎肝硬化(LC)、肝细胞肝癌(HCC)患者血清482份,用测序及限制性片段长度多态性检测A1896、T1762/A1764变异,用S基因PCR-RFLP确定基因型。结果A1896、T1762/A1764变异检出率分别为23.03%和29.67%。汉族感染者A1896、T1762/A1764变异检出率为27.64%和36.04%,高于侗、苗、布依族感染者合并后的7.96%、8.85%(P<0.01)。A1896变异在B、C基因型中的分布为20.34%和27.13%(P>0.05),T1762/A1764变异为18.97%和46.28%(P<0.01)。A1896、T1762/A1764变异在HBeAg阴、阳性组间的分布差异有统计学意义(P值均<0.01)。从ASC到HCC组,A1896、T1762/A1764变异分布逐渐增高,LC、HCC组的检出率明显高于CH和ASC组(P值均<0.01)。A1896、T1762/A1764变异的分布:贵阳(分别为31.79%和41.06%)高于遵义(10.94%和14.06%)、都匀(8.64%和11.1I%)及凯里(2.86%和2.86%),但多因素logistic回归分析在控制了HBeAg、HBV基因型及临床类型影响后,在地区间分布差异无统计学意义。结论A1896、T1762/A1764变异在贵州省不同民族间分布有一定差异。C型感染者易发生T1762/A1764变异,两种变异均与疾病进展有关。 相似文献