Survivin和cyclinD1在原发性肝细胞癌中的表达及其相关性研究

为探讨survivin和cyclinD1在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及两者在肝癌发病机制中的作用和相关性。笔者利用免疫组织化学S P法检测50例原发性肝癌组织（HCC组）及20例正常肝组织（正常组）中survivin和cyclinD1蛋白的表达情况。 采用Spearman相关分析法分析两种蛋白表达的相关性。结果示，HCC组中survivin蛋白表达的阳性率为66.0%（33/50），显著高于正常组（均为阴性表达）（P<0.001）;其阳性表达与肝癌的肝内转移和癌灶的多发性有关（P=0.019，P=0.030）。 cyclinD1蛋白在HCC组的阳性率为44.0%（22/50），显著高于正常组（均为阴性表达）（P<0.001）;其阳性表达与肝癌的肝内转移和分化程度有关（P=0.035，P=0.036）。两种蛋白的的阳性表达呈正相关（r=0.466，P<0.001）。两者的过表达均与患者术后＜3年生存期有关（P=0.018，P=0.013）。提示survivin与cyclinD1在HCC的发生及发展过程中起着不同程度的作用; 两者的联合检测对判定原发性HCC的预后可提供一定的依据。     

多药耐药相关蛋白基因在原发性肝细胞癌组织中的表达及意义

目的　研究原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的表达及意义。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5例新鲜原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中MRPmRNA的表达 ,用免疫组织化学技术LSAB法检测 60例肝细胞癌组织中MRP蛋白的表达 ,并结合流式细胞仪对体外化疗药物敏感性的检测结果进行统计学分析。结果　原发性肝细胞癌组织中MRPmRNA与MRP蛋白表达阳性率分别为 44 .0 0 % (11/2 5 )和 45 .0 0 % (2 7/60 ) ,均以中、低表达为主 ,明显高于癌周肝组织中MRPmRNA和MRP蛋白的表达阳性率〔2 8.0 0 % (7/2 5 )、2 6.67% (16/60 )〕 ,P<0 .0 5 ;5例复发性肝癌的MRP蛋白表达阳性率和表达强度呈增高的趋势。在RT PCR检测的 2 5例患者中 ,该两项指标具有良好的一致性 (P<0 .0 5 )。肝细胞癌在体外对化疗药物 5 FU、DDP、ADM、MMC及CTX的敏感性分别为 (15 .80± 7.63 ) %、(18.45± 9.5 9) %、(17.95± 7.99) %、(16.60± 8.69) %和 (17.40± 10 .14 ) %。MRP蛋白表达阳性者对 5 FU、ADM的敏感性低于阴性者 (P<0 .0 5 )。结论　MRP基因在原发性肝细胞癌组织中的表达可能在肝癌内在性和获得性耐药中起重要作用 ,检测MRP基因表达有助于预测化疗反应和选择合理的化疗方案。     

Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其在肝癌发病机制中的作用和临床意义.方法 利用免疫组织化学S-P法检测50例原发性肝癌组织、20例正常肝组织中Survivin蛋白表达情况.结果 Survivin蛋白在肝癌中的阳性表达率为66.0%(33/50),显著高于正常肝组织组(均为阴性表达;P<0.001),阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的多发性有关(P=0.019,P=0.030);Survivin的过表达与病人术后<3年生存期相关(P=0.018).结论 Survivin在肝细胞癌的发生及发展过程中起着不同程度的作用,检测Survivin对判定原发性肝细胞癌预后可提供一定的依据.     

CD146与VEGF在人肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 该研究旨在观察人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中CD146与VEGF的表达及其关系,探讨它们在HCC中与血管生成的关系及其临床意义.方法 采用免疫组化法检测60例HCC癌组织及癌旁肝组织中CD146、VEGF的表达情况,用CD34标记免疫组化法检测微血管密度(microvessel density,MVD),分析它们的表达与临床病理指标的关系.结果 CD146、VEGF在癌组织中的阳性率分别为66.67%和63.33%,而在癌旁组织中的阳性率分别为30%和33.33%,癌组织与癌旁组织比较差异有显著性(P＜0.05).癌组织的MVD为54.92±8.55/200倍视野,癌旁组织的MVD为21.36±6.63/200倍视野,两者差异有显著性(P＜0.05).与癌旁组织相比,癌组织中CD146、VEGF表达及MVD明显增加.CD146在人肝癌组织中的表达与临床分期、门静脉癌栓及肝外转移明显有关,而与术后复发、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及肿瘤分化程度无明显关系.VEGF在人肝癌组织中的表达与术后复发、肝外转移、临床分期、门静脉癌栓、肿瘤直径相关,而与肿瘤个数、血清AFP水平及肿瘤分化程度无明显关系.在癌组织中MVD与CD146、VEGF的表达呈正相关,CD146与VEGF亦呈正相关.结论 肝癌组织中CD146及VEGF高表达,与肿瘤血管形成和转移密切相关,分析它们的表达有助于综合判断HCC的预后.     

肝细胞癌Tenascin蛋白和微血管密度检测及临床意义

目的:研究细胞外基质Tenascin(TN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,探讨TN对HCC肿瘤微血管生成、浸润、转移及预后的影响.方法:采用免疫组织化学方法检测63例HCC癌组织、癌旁组织及15例肝炎后肝硬化组织、10例正常肝组织中TN表达,同时检测HCC组织微血管密度(CD105-MVD),分析TN表达与HCC病理学特点及肿瘤微血管生成的关系.结果:HCC组织TN阳性率65.1%,癌旁组织69.8%,肝硬化组织20.0%,正常肝组织无阳性表达;HCC组织及癌旁组织TN表达阳性率及表达强度评分显著高于肝硬化组织及正常肝组织(χ2=27.67,P<0.01;F=12.82,P<0.01);HCC组织TN表达阳性率与癌旁组织比较差异无统计学意义(χ2=0.325,P>0.05);TN表达与HCC的组织学分级,病灶数量,有否包膜浸润、肿瘤转移及肿瘤微血管生成密切相关.结论:HCC组织TN的表达上调促进了肿瘤的新生血管形成,导致术后肿瘤的早期复发和转移;HCC组织TN检测可有效反映其恶性程度、浸润、转移及预后.     

含缬酪肽蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与其临床病理特点及复发的关系.方法 运用RT-PCR、荧光定量PCR检测HCC组织70例、正常无肝硬化肝组织70例中VCP mRNA的表达水平,应用免疫组织化学法检测HCC组织30例、正常无肝硬化肝组织25例中VCP的蛋白表达情况,并结合HCC患者的临床病理因素及复发情况进行分析.结果 HCC患者的组织标本中VCP mRNA表达量显著高于正常无肝硬化肝组织,差异有统计学意义(P<0.05);HCC组织中VCP的蛋白表达阳性率(76.7%)显著高于正常无肝硬化肝组织(25.0%),差异有统计学意义(P<0.05);HCC组织VCP的表达与门静脉癌栓、肿瘤大小和复发相关(P<0.05).结论 HCC组织中VCP的表达明显高于正常无肝硬化肝组织,其表达与肿瘤大小、门静脉癌栓及复发关系密切.     

肝癌组织中Livin蛋白的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨Livin蛋白在肝癌组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法检测78例肝癌及33例肝血管瘤旁正常肝组织中Livin蛋白的表达;光镜下计数阳性细胞数并根据不同临床特征进行统计学分析。结果:肝癌组织中Livin蛋白的表达明显高于正常肝组织（P＜0.001）;Livin蛋白的表达与患者的性别、年龄以及是否患有乙肝、丙肝、TNM临床分期均无明显关系，而与肝癌是否发生转移有明显关系;肝癌发生转移者Livin蛋白的表达率明显高于未转移者（P＜0.05）。结论:Livin蛋白的过度表达可能在肝癌的发生、发展中起重要作用，并与肝癌的转移密切相关。     

凋亡抑制因子Livin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的：研究凋亡抑制蛋白家族(IAP家族)新的凋亡抑制因子Livin在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其与肿瘤分级、分期、复发之间的关系。方法：采用免疫组织化学SP法,对54例BTCC和8例正常膀胱组织中Livin的表达情况进行检测,分析其在膀胱癌组织和非膀胱癌组织中的表达及其与肿瘤病理学分级、临床分期和患者复发情况的关系。结果：Livin在8例正常膀胱组织中均不表达,而在54例膀胱移行细胞癌组织中表达率为85．2%(P＜0．01)。Livin的表达和膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期、是否复发无明显相关(P＞0．05)。结论：细胞凋亡抑制因子Livin在BTCC组织中表达上调,提示Livin可能通过抑制细胞凋亡,对BTCC的发生发展起重要作用;Livin在膀胱癌中的高表达有望成为一种有效、敏感的瘤标,并为BTCC的基因治疗提供新的靶点。     

WWOX基因在肝细胞癌及手术切缘中的表达意义

目的 探讨WWOX基因在肝细胞癌(HCC)和切缘中的表达状况和术后复发及预后的关系及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测76例肝癌组织及其切缘组织、20例正常肝组织中WWOX基因蛋白产物表达水平,用TUNEL法检测76例肝细胞癌的细胞凋亡水平,结合临床病理指标和术后生存率进行分析.结果 WWOX基因蛋白产物在HCC中定位于细胞核,在癌旁组织中定位于细胞核与细胞浆.肝癌组织中WWOX基因蛋白表达指数为(35.2±20.1)%,低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05).并与肝癌的细胞凋亡率下降、PCNA增高、肿瘤较大、门脉分支浸润、低分化高恶性度以及术后复发等指标有关(P<0.05).肝癌切缘ww0X基因蛋白表达水平与术后复发率和生存率有关(P<0.05),而与1 cm以上切缘距离无关.结论 肝癌组织和手术切缘存在低WWOX表达和定位异常,并可能与影响肿瘤进展、预后的生物学行为有关.肝癌组织和手术切缘WWOX表达水平测定有望成为评估肝癌进展等生物学行为和预后的有用指标之一,并有助于确定较为安全的根治切除分子切缘.     

原发性肝癌组织中胸苷磷酸化酶的表达及其临床意义

目的 探讨胸苷磷酸化酶(TP)与原发性肝癌(HCC)术后预后的关系.方法 收集65例HCC病人围手术期一般临床资料和病理学资料,并进行随访.分析TP的免疫组织化学表达与微血管密度(MVD)计数的关系;对随访的54例病人作生存分析.结果 (1)肝癌组织TP阳性表达率明显高于正常肝组织(P<0.05).(2)肝癌组织TP阳性表达组、阴性表达组MVD计数分别为16.14±5.11、10.11±4.55,两者差异具有统计学意义(P<0.01).(3)TP的表达与肝癌大小、Edmondson分级、包膜是否完整、有无门静脉癌栓明显相关.(4)TP表达阳性HCC组1、2、3年复发率分别为40%、66.7%、79.2%;TP表达阴性HCC组则分别为27.4%、31.3%、45.7%.TP阳性HCC组2、3年复发率明显高于TP阴性组(P<0.01).(5)54例随访病人,TP阳性组总体生存率明显低于阴性组(P<0.01).结论 TP是HCC术后一个新的评估预后的指标.     

STAT1、STAT2、STAT4在原发性肝癌中的表达及意义

目的探讨STAT1、STAT2、STAT4在肝癌的癌组织、癌旁组织及正常肝组织表达及其表达与原发性肝癌的关系。方法应用SABC免疫组织化学染色法检测2002年3～11月中南大学湘雅二医院肝胆胰外科手术切除原发性肝癌(PHC)标本37例和胆囊炎病人手术切除的正常肝组织17例中的STAT1、STAT2、STAT4蛋白表达。结果肝癌癌组织中STAT1、STAT2、STAT4蛋白表达阳性率及其评分明显低于癌旁组织和正常肝组织，均有高度显著性差异(P＜0．01)。STAT1、STAT2、STAT4之间信号表达均无相关性(P＞0．05)。STAT1、STAT2、STAT4蛋白与分化和病理分型有关，与肝硬化、AFP、转移及肿瘤大小无显著差异。结论STAT1、STAT2、STAT4在肝癌癌组织表达显著降低，在癌旁组织和正常肝组织表达显著增高，STAT1、STAT2、STAT4在肝癌的发生、发展中有重要相关作用。     

p73蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的　探讨p73蛋白在肝细胞性肝癌中的表达及其临床病理意义。方法　采用免疫组 织化学SABC法检测p73蛋白在肝癌和癌旁组织中的表达水平,并分析其与肝癌临床病理特征的关 系。结果　38例肝癌组织中有22例p73蛋白呈阳性表达,阳性表达率为57.9%,而癌旁组织无1例 呈阳性表达,低分化、有转移的肝癌组织中p73蛋白水平明显高于高分化、无转移的肝癌组织。结论 p73蛋白在肝癌组织中表达上调,可能在肝癌的发生、发展过程中起着重要的作用。     

AFP-IgM复合物在肝癌中的表达与临床关系

目的 分析甲胎蛋白-IgM免疫复合物(AFP-IgM)在肝细胞癌(HCC)中的含量,探讨AFP-IgM对诊断肝癌的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法与电化学发光法,对103名正常人、74例肝癌、43例肝硬化和58例脂肪肝病人血清AFP-IgM与甲胎蛋白(AFP)含量检测,并分析其与临床病理特点之间的关系.结果 应用ROC曲线确定AFP-IgM和AFP的最佳切割值分别为300 Au/ml和10μg/L作为诊断学意义的临界值.在此切割值下,肝癌组AFP-IgM和AFP血清水平均高于脂肪肝组和健康体检组(P<0.05).对早期(Ⅰ与Ⅱ期)肝癌诊断时,AFP-IgM的ROC曲线下面积大于AFP(0.91 vs 0.82);当肿瘤直径≤3 cm时,AFP-IgM为(1090.4±571.8)Au/ml,而当直径>3 cm时,AFP-IgM为(604.9±749.9)Au/ml,两者比较P<0.05.且AFP-IgM在诊断小肝癌时ROC曲线下面积大于AFP(0.92 vs 0.78);AFP-IgM对性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤数量、包膜的相关性无统计学意义(P>0.05),而与肿块大小和分期密切相关.结论 AFP-IgM对早期(Ⅰ与Ⅱ期)肝癌和小肝癌(≤3 cm)诊断具有重要作用,且对判断肝癌的肿瘤大小与分期等具有一定的临床意义.     

P16基因蛋白在原发性肝癌及癌旁组织中的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６在肝癌及癌旁组织中的表达及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法对５０例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）及癌旁肝硬化组织（４４例）手术切除石蜡包埋标本进行Ｐ１６基因蛋白表达的测定,并结合临床病理指标进行分析。结果 ｐ１６基因在ＨＣＣ中表达的阳性率为４８％,癌旁９１％。     

凋亡抑制蛋白FLIP在肝癌组织中的表达和意义

目的检测凋亡抑制蛋白FLIP在人肝癌不同分化组织中的表达并揭示其在肝癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学技术，分析86例肝癌标本（采用经典的Edmondson四级分级法，Ⅰ级18例，Ⅱ级25例，Ⅲ级21例，Ⅳ级22例），肝癌Hepg2细胞系1株细胞爬片的10样本中FLIP蛋白的表达并进行统计学分析比较。结果凋亡抑制蛋白FLIP在86例肝癌标本中有72例阳性表达（83．72％），Ⅰ级13／18（72．22％），Ⅱ级20／25（80．00％），Ⅲ级18／21（85．71％），Ⅳ级21／22（95．45％）（P〈0．05）；在肝癌Hepg2细胞系细胞爬片10个样本中全部阳性表达（100％），（P〈0．01）。结论凋亡抑制蛋白FLIP在肝癌组织中呈阳性表达；不同分化的肝癌组织其表达阳性率不同，分化越差其阳性表达率越高；这可能为揭示肝脏恶性肿瘤的发生、发展提供新的理论依据，并为肝癌的有效治疗提供新的思路。     

Glut1和HIF-1α在原发性肝细胞癌中的表达和意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glut1）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在原发性肝细胞癌中的表达,以及在肝细胞癌发生发展过程中相互关系。方法应用免疫组织化学方法（SP法）,检测108例肝细胞癌及其癌旁组织、15例正常肝组织中Glutl,HIF-1α的表达。结果Glutl和HIF-1α在108例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为74.1%和78.7%,明显高于其在癌旁组织（χ^2=15.27,χ^2=8.727）和正常肝组织（χ^2=31.78,χ^2=27.19）中的表达率（P〈0.05）。Glutl的表达强度与HCC的分化程度（χ^2=27.80）,Edmondson分级（χ^2=6.260）,有无转移（χ^2=11.54）等显著相关（P〈0.05）。HIF-1α在原发性肝癌中的表达强度与HCC分化程度（χ^2=13.05）和肿瘤大小（χ^2=11.74）相关（P〈0.05）。统计学分析显示Glutl和HIF-1α在HCC中的表达呈正相关（χ^2=18.81）。结论Glutl和HIF-1α的异常高表达在原发性肝细胞癌的发生发展中起重要作用,可能促进肝细胞癌的增殖和侵袭转移。Glutl和HIF-1α的表达强度对肝癌的诊断具有临床应用价值。     

肝癌基质型血管生成拟态的表达及预后意义

目的 研究基质型血管生成拟态( vasculogenic mimicry,VM)在肝细胞癌中表达及其预后意义.方法 收集安徽省立医院2003年1月至2008年12月临床病理资料完整的151例肝细胞癌组织标本,采用层粘连蛋白、CD34和肝细胞免疫组织化学染色以及透射电镜检测肝细胞癌组织中基质型VM表达,分析基因表达与肝细胞癌临床病理指标及生存预后的关系.结果 151例肝细胞癌组织中基质型VM阳性31例(20.5％).组织中基质型VM阳性肝细胞癌患者与阴性患者相比,肿瘤较大(x2=4.132,P=0.042),血管侵犯率高(x2=5.825,P=0.016),Edmondson分级高(x2=5.256,P=0.022),pTNM分期晚(x2 =6.218,P=1.013).基质型VM阳性患者和基质型VM阴性患者1、3、5年总生存率分别为67.7％、34.6％、11.5％和86.7％、64.7％、40.3％(x2=14.852,P＜0.001);1、3、5年无瘤生存率分别为41.9％、19.4％、6.5％和63.3％、40.6％、19.6％(x2=10.065,P =0.002).对总生存率和无瘤生存率的单、多因素分析显示,多发肿瘤、血管侵犯和基质型VM表达是影响总生存率的独立危险因素;而血管侵犯和基质型VM表达是影响无瘤生存率的独立危险因素.结论 肝细胞癌中存在基质型VM,其表达与肿瘤大小、分级、分期、血管侵犯有关,是肝癌患者预后不良的独立危险因素.     

Cyclin D1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin D1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例HCC组织、20例正常肝组织中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果Cyclin D1蛋白在肝癌组织中的阳性率为44．0％,极显著高于正常肝组织（均为阴性表达）（P〈0．01）;阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P〈0．05,P〈0．05）。Cyclin D1的过表达均与病人术后〈3年生存期有关（P〈0．05）。结论Cyclin D1在HCC的发生、发展过程中起着不同程度的作用,检测Cyclin D1对判定HCC预后可提供一定的依据。