丝裂霉素诱导人膀胱癌细胞凋亡的研究

为进一步探讨丝裂霉素膀胱内灌注治疗膀胱肿瘤的机制,研究了丝裂霉素诱导人膀胱癌 Ｂ Ｉ Ｕ８７ 细胞凋亡的规律。形态学观察具有典型凋亡征象,胞浆浓缩,染色质凝集,核固缩、裂解及凋亡小体。凋亡指数与诱导时间呈正相关（ Ｐ＜ ０．０１）;流式细胞仪 Ｄ Ｎ Ａ 直方图上出现特征性的亚二倍体（亚 Ｇ１ ）峰;凋亡过程中伴 Ｂｃｌ２ 基因的下调,且与诱导时间呈负相关 （ Ｐ＜ ００１）。提示丝裂霉素诱导癌细胞凋亡是腔内化疗的重要机制,降低 Ｂｃｌ２ 的表达可提高膀胱癌腔内化疗的疗效。     

丝裂霉素诱导人膀胱癌细胞凋亡的研究

为进一步探讨丝裂霉素膀胱内灌注治疗膀胱肿瘤的机制,研究丝裂霉素诱导人膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞凋亡的规律,形态学观察具有典型凋亡征象,胞浆浓缩,染色质凝集,核固缩,裂解及凋亡小体。凋亡指数与诱导时间呈正相关（Ｐ〈０．０１）;流失细胞仪ＤＮＡ直方图上出现特征性的亚二倍体（亚Ｇ１）峰,凋亡过程中伴Ｂｃｌ－２基因的下调,且与诱导时间呈负相关（Ｐ〈０．０１）,提示丝裂霉素诱导癌细胞凋亡是腔内化疗的重要机制,降     

维甲酸诱导喉癌及鼻咽癌细胞株凋亡的研究

研究维甲酸诱导鼻咽唯株凋亡。方法：采用ＤＮＡ电泳、透射电镜及ＰＩ染色及流式细胞技术。结果：４μｍｏｌ／Ｌ的维甲酸作用于喉及鼻咽癌细胞株２２ｈ，成功地诱导出细胞凋亡，结论：维甲酸能诱导喉癌及鼻咽癌细胞株的凋亡，可以此作为进一步研究喉癌及鼻咽癌细胞株凋亡的模型。     

阿霉素诱导人膀胱癌多重抗药性细胞凋亡的研究

目的：研究阿霉素诱导的细胞凋亡，探讨人膀胱癌多重抗药性机制。方法：用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及电镜、ＤＮＡ凝胶电泳和原位ＤＮＡ末端转移酶标记法，分别对耐药细胞株ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ及敏感细胞株ＢＩＵ－８７细胞进行了阿霉素诱导的细胞凋亡研究。结果：ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞存活率明显高于ＢＩＵ－８７细胞，光镜及电镜观察到凋亡细胞形态学改变，凋亡细胞ＤＮＡ凝胶电泳出现ＤＮＡ断片，但并无典型的梯形改变，Ｂ     

9-顺式-维甲酸联合8-cl-cAMP对肺癌细胞凋亡的协同作用

目的探讨9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)联合8-cl-cAMP对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株(H460和H292)的生长抑制和诱导凋亡的协同作用。方法实验分为9-cis-RA 1、5、10、20μmol/L组;8-cl-cAMP 5、10、20、50μmol/L组;9-cis-RA(5、10μmol/L) 8-cl-cAMP(10μmol/L)联合组和阴性对照组。以台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,以Hoechst33258荧光染色法、DNA凝胶电泳法和流式细胞术等检测细胞凋亡。结果与阴性对照组比较,9-cis-RA明显抑制H460细胞生长,具有时间和浓度依赖性,并诱导凋亡(P<0.01),5μmol/L 9-cis-RA诱导48 h凋亡率最高;同样条件下,H292细胞对9-cis-RA不敏感。8-cl-cAMP抑制H460和H292生长,有浓度依赖性;与相同剂量单药组比较,联合用药组H460细胞和H292细胞的生长抑制率和凋亡率均显著提高(P<0.01)。结论人NSCLC细胞株H460和H292对9-cis-RA的敏感性不同,9-cis-RA明显抑制H460细胞生长,诱导凋亡,H292则表现耐药;9-cis-RA联合8-cl-cAMP对H460和H292细胞的生长抑制和诱导凋亡具有协同作用,并可部分逆转H292细胞对9-cis-RA的耐药性。     

醋酸棉酚诱导膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的　研究棉酚对膀胱癌T2 4 细胞的抑制作用和诱导凋亡作用 ,探讨其作用机制。方法　将不同浓度的醋酸棉酚作用于人T2 4 膀胱癌细胞 ,利用MTT法检测其有效作用浓度、瑞氏染色、流式细胞仪 ,观察T2 4 细胞的凋亡情况。结果　MTT法测得其IC50 值为 12 6.3 μmol·L-1,浓度为 5 0～ 3 0 0 μmol·L-1的棉酚具有诱导T2 4 细胞凋亡的作用 ,随着药物作用时间的延长凋亡率增加。结论　棉酚抗癌作用机制之一是诱导人T2 4 膀胱癌细胞凋亡     

维甲酸诱导颅咽管瘤原代细胞凋亡的实验研究

目的探究维甲酸对颅咽管瘤存化细胞凋亡诱导作用.方法获得临床颅咽管瘤手术切除新鲜组织,通过原代培养技术获得实验细胞,体外维甲酸处理后应用Annexin V,DAPI染色和DNA ladder检测细胞凋亡.结果维甲酸处理组比对照组（为处理组）明显体现出更多的细胞磷脂外翻Annexin V强染,表现为早期凋亡状态.同时实验组相比对照组DAPI强染,明亮,DNA ladder实验阳性,呈中晚期凋亡状态.结论 20μmol维甲酸处理原代颅咽管瘤细胞能有效诱导其进入早期凋亡,对颅咽管瘤细胞有杀伤作用.     

中华眼镜蛇毒膜毒素诱导人膀胱癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究中华眼镜蛇毒膜毒素12(MT-12诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用.方法 不同浓度的MT作用于体外培养的BIU-87和E-J细胞,分别在12、24和36h用HE染色、透射电镜观察细胞的形态变化,Annexin'V-FITC/PI双染流式细胞术定量榆测凋亡率.结果 倒置显微镜和透射电镜下观察到凋亡细胞的核固缩、染色体边集、核碎裂和凋亡小体等形态学变化.MT-12浓度分别为1、2和3μg/mL时,双染法流式细胞术均检测到2株细胞凋亡率,实验组凋亡率和对照组比较有统计学意义(P<0.05).MT-12剂量和作用时间相同时,BIU-87细胞的凋亡率明显高于E-J细胞(P<0.01.结论 MT-12能诱导体外培养的BIU-87和E-J细胞凋亡,2株细胞凋亡率存在差异,可能与肿瘤细胞的生物学行为、MT-12诱导2株细胞凋亡机制的不同有关.     

三氧化二砷诱导膀胱癌BIU-87细胞凋亡作用的研究

目的 探讨三氧化二坤（As2O3)诱导膀胱癌BIU－87细胞凋亡作用。方法 应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、自动酶标仪、细胞免疫组化法,分别对不同浓度加药组及对照组BIU－87细胞的形态学改变,细胞的存活及Bcl-2、Bax蛋白的表达进行观察和测定。结果 生长曲线显示,18．8μg/ml,37.6μg/ml和94．0μg/ml As2O3均能抑制膀胱癌BIU－87细胞的生长增殖。透射电镜观察,膀胱癌细胞表面的突起减少或脱失;部分细胞核染色质聚焦,边移;线粒体膜结构模糊不清。细胞免疫组化法测定Bcl-2、Bax蛋白的表达均有变化,与对照组细胞相比,18．8μg/ml,37.6μg/ml As2O3组Bcl-2和Bax蛋白表达率均升高。结论 三氧化二砷不仅抑制膀胱癌BIU－87细胞增殖,而且诱导细胞凋亡。诱导细胞凋亡与Bax蛋白的表达升高有关。     

羟基喜树碱诱导人T24膀胱癌细胞凋亡的研究

目的研究羟基喜树碱对膀胱癌细胞的作用,探讨其抑制膀胱癌的机制。方法将不同浓度的羟基喜树碱作用于人Ｔ２４膀胱癌细胞,利用流式细胞仪、透射电子显微镜、荧光染色技术及ＤＮＡ分析,对所作用的Ｔ２４细胞进行动态分析以及细胞形态变化的观察。结果０．００５ｍｇ／Ｌ的羟基喜树碱,主要是通过阻止Ｔ２４细胞由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,并不诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡;０．０１～０．１０ｍｇ／Ｌ时,凋亡的细胞数随着其浓度增加及作用时间的延长而增加。羟基喜树碱能够诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡。结论羟基喜树碱作用机制之一是诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡。     

43例膀胱移行细胞癌细胞凋亡指数的分析

目的 :探讨膀胱移行细胞癌 (BTCC)中的细胞凋亡指数与膀胱癌发生、发展的关系。方法 :用缺口末端标记法(TUNEL)检测 12例正常膀胱粘膜和 4 3例BTCC中的凋亡细胞指数。结果 :BTCC中的AI高于正常膀胱粘膜中的AI(P<0 0 1) ;AI随病理分级的增高而降低 ,各级之间差异有显著性 (F =4 1 14 2 ,P <0 0 1) ;AI在Tis-T1 期高于T2 ～T4期 (P<0 0 5) ;AI在无复发组高于复发组 (P <0 0 1)。结论 :凋亡指数随病理分级和临床分期升高而降低 ,细胞凋亡的减少可能是BTCC进展的原因之一     

膀胱癌中p53突变及Bcl-2、PCNA表达与细胞的增殖和凋亡

目的　探讨膀胱癌中p5 3突变和Bcl 2、增殖细胞核抗原 (PCNA)表达与细胞增殖、凋亡和临床病理学参数之间的关系。方法　SABC免疫组化检测 6 2例膀胱癌标本Bcl 2、p5 3和PCNA的表达。计算肿瘤细胞中PCNA阳性细胞百分比即增殖指数 (PI)。TUNEL法检测细胞凋亡 ,计算肿瘤细胞中凋亡细胞的百分比即凋亡指数 (AI)。结果　 6 2例膀胱癌中 ,5 0例 (80 6 % )发生 p5 3突变 ,其中G3 级的突变率为 91 3% ,较G1级 (72 7% )和G2 级(78 5 % )更多见 ,但差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;T2 期 p5 3突变率 (95 7% )较Ta 1期 (71 8% )高 (P <0 0 1)。14例 (2 2 5 % )发现有Bcl 2表达 ,Bcl 2表达阳性率在G3 级中明显高于G1和G2 级 (P <0 0 5 ) ,但与分期无相关性(P >0 0 5 )。Bcl 2表达与p5 3突变无关。PI为 17 3%～ 4 1 8% (平均为 2 2 4 % ) ,AI为 1 9%～ 3 5 % (平均为2 9% ) ,PI与肿瘤分级、分期相关 ,AI与肿瘤的分级明显相关。结论　p5 3突变与浸润性行为呈正相关。在膀胱癌中 p5 3和PCNA过表达可提示预后。随着肿瘤的进展 ,肿瘤细胞过度增殖可能伴有频繁的凋亡 ,但增殖指数的增加明显强于凋亡指数的增加。     

干扰素和小剂量阿糖胞苷联合作用诱导K562细胞凋亡

目的 研究干扰素（IFN）和小剂量阿糖胞苷（Ara-C）联合应用对K562细胞的诱导凋亡作用，并探讨其机制。方法 以IFN-α 2b和小剂量Ara-C单独和联合作用后，MTT法检测K562细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡水平，RT-PCR检测野生型p53基因的表达，免疫细胞化学法检测野生型P53蛋白的表达。结果 IFN-α 2b和小剂量Ara-C联合作用可以有效抑制K562细胞的增殖，联合作用后K562细胞的抑制率可达42．85％，与对照组及单用IFN-α 2b和单用Ara-C相比，差异均有显著性意义（均P〈0．05）。IFN-α 2b和小剂量Ara-C联合作用72h后，可以使K562细胞凋亡率提高到39．03％，与对照组及单用IFN-α 2b和单用Ara-C相比，差异均有显著性意义（均P〈0．05）。两药联合作用可以促进野生型p53基因mRNA和蛋白的表达上调。结论 联合使用IFN和小剂量Ara-C可以协同诱导K562白血病细胞的凋亡，促进野生型p53基因和蛋白表达上调可能是其机制之一。     

尼美舒利对食管鳞癌细胞的增生抑制和诱导凋亡作用

目的研究特异性环氧化酶-2抑制剂尼美舒利对食管鳞癌细胞的增生抑制和诱导凋亡作用。方法EC109细胞与不同浓度的尼美舒利共同孵育。1)用MTT方法研究细胞增生抑制作用;2)用荧光标记的流式细胞检测技术研究尼美舒利的诱导凋亡作用;3)检测细胞培养上清液中前列腺素E2质量浓度,观察尼美舒利对环氧化酶功能的影响。结果尼美舒利抑制食管鳞癌细胞增生,呈浓度及时间依赖性;尼美舒利可诱导食管鳞癌细胞凋亡,可抑制前列腺素E2的合成。结论尼美舒利抑制食管鳞癌细胞增生诱导凋亡作用,可能是通过抑制前列腺素E2的合成而实现的。环氧化酶-2抑制剂有可能在食管鳞癌的预防及治疗上发挥重要作用。     

吡柔比星联合干扰素抑制大鼠膀胱癌生长的机制

 目的探讨吡柔比星联合干扰素琢鄄2b 膀胱灌注对大鼠膀胱肿瘤生长的抑制作用和机制。方法80 只雌性Wistar大鼠随机分为对照组、吡柔比星组、干扰素组和联合用药组,每组20 只。制作N鄄甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型,于第8周分别以生理盐水、吡柔比星、重组干扰素琢鄄2b 和吡柔比星+重组干扰素琢鄄2b 连续膀胱灌注,每周1 次,共6 次。第8 和14 周进行病理观察,第14 周测量膀胱质量,免疫组织化学法检测微血管密度（PMVD）,流式细胞仪测凋亡指（PAI）。结果第8 周时,各组大鼠膀胱黏膜呈不典型增生和移行细胞癌玉级。第14 周时,可见菜花状、多发膀胱肿瘤并侵入肌层。吡柔比星组和联合用药组大膀胱质量小于对照组（P < 0.01）,联合用药组大鼠膀胱质量小于吡柔比星组（P < 0.05）,联合用药组MVD 小于干扰素组（P < 0.01）,联合用药组大鼠的AI 高于其他3 组（P < 0.01）,吡柔比星组和干扰素组的AI大于对照组（P 分别<0.01 和0.05）。结论吡柔比星联合干扰素琢鄄2b 膀胱灌注可抑制大鼠膀胱肿瘤生长,其机制与二者协同作用抑制肿瘤血管生长和诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

错配修复基因hMSH2表达与膀胱移行细胞癌预后关系的研究

目的：探讨错配修复基因hMSH2在膀胱移行细胞癌中的表达情况与肿瘤预后的关系。方法回顾性研究101例膀胱移行细胞癌患者的临床资料,采用免疫组织化学法检测错配修复基因hMSH2的表达情况,通过门诊复查、书信或电话联系方式对患者进行随访,随访12～72月,平均49月。数据分析采用SPSS 21．0统计软件,生存分析应用Kaplan-M eier法,生存率比较采用Log-rank检验,多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果31例（31/101,30．7％）浸润性膀胱移行细胞癌患者中,22例hMSH2为（＋）表达,9例（9/101,8．9％）完全（-）表达;70例（70/101,69．3％）浅表性膀胱移行细胞癌为（触或处）表达。随访结束时共56例复发,总复发率为55．45％。单因素分析发现,hMSH2低表达组平均无复发生存时间（57．20月）较高表达组（40．08月）长（P＜0．05）。而膀胱移行细胞癌的TNM分期、组织学分级、淋巴结转移与肿瘤复发亦密切相关（P＜0．05）;Cox比例风险模型多因素分析发现,仅 TNM 分期及 hMSH2表达情况进入COX回归模型。结论错配修复基因hMSH2表达可能是膀胱移行细胞癌独立预后指标,与肿瘤复发紧密相关,hMSH2低表达组与相同分期的高表达组比较,复发可能性小。     

粉防己碱抑制人膀胱移行细胞癌BIU-87细胞生长的研究

为观察粉防己碱对人膀胱癌细胞株BIU 87的抑制作用并探讨其作用机制,采用四氮唑蓝法检测粉防己碱不同浓度对BIU 87细胞生长的抑制率,用流式细胞仪检测不同浓度粉防己碱作用后细胞的凋亡率,结果显示粉防己碱可有效抑制BIU 87细胞的生长,具有浓度依赖性特点,浓度为5～25mg/L的粉防已碱具有诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用,且随着药物作用时间延长凋亡率逐渐增加,说明粉防己碱可有效抑制膀胱癌细胞生长,其作用机制与凋亡有关。     

干扰素-ε诱导K562细胞凋亡的研究

目的：研究应用不同浓度的干扰素（IFN-ε）对K562细胞中野生型p53mRNA和Survivin mRNA表达影响及诱导凋亡作用。方法：应用RT—PCR法检测野生型p53 mRNA和Survivin mRNA的表达。结果：不同浓度的IFN-ε均可抑制Survivin基因的表达，并存在剂量与时间依赖性；可促进野生型p53mRNA的表达上调，但无剂量与时间依赖性。结论：IFN-ε可诱导K562细胞发生凋亡，促进野生型p53 mRNA表达上调和抑制Survivin mRNA的表达可能是其机制之一。     

胸腺肽α1诱导膀胱癌细胞株BIU87凋亡的实验研究

目的研究胸腺肽α1诱导膀胱癌细胞株BIU87凋亡的作用及其机制。方法用50~400μg/ml胸腺肽α1作用BIU87细胞24~72 h后,MTT比色法检测细胞生长活性,单细胞凝胶电泳法和流式细胞仪分别检测BIU87细胞DNA损伤和凋亡作用。结果胸腺肽α1能显著抑制膀胱癌细胞株BIU87细胞的体外生长(P<0.01),呈时间与剂量依赖性;流式细胞仪检测显示不同浓度凋亡率分别为(4.69±0.60)%、(21.15±3.10)%、(33.15±2.40)%、(40.87±1.50)%、(48.47±1.02)%;单细胞凝胶电泳检测显示不同浓度DNA损伤比率分别为5%、20%、41%、62%、85%。结论胸腺肽α1通过抑制BIU87细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制,显著抑制膀胱癌细胞生长。