慢性乙型肝炎患者色氨酸和犬尿氨酸的检测及意义

目的探讨血浆中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)的定量检测在乙型肝炎(乙肝)中的临床意义。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定60例慢性乙肝患者(乙肝患者组)和41例正常人(正常对照组)血浆中色氨酸和犬尿氨酸含量,并对两组数据进行比较。结果正常对照组Trp含量为(76.99±10.88)μmol/L,Kyn含量为(2.16±0.32)μmol/L,Kyn/Trp为0.028±0.003;乙肝患者组Trp含量为(68.04±8.52)μmol/L,Kyn含量为(2.18±0.26)μmol/L,Kyn/Trp为0.032±0.004。乙肝患者组血浆Trp含量明显低于正常对照组(P<0.01),Kyn/Trp明显高于正常对照组(P<0.01),两组Kyn含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性乙肝患者色氨酸代谢发生异常,检测患者血浆中Trp和Kyn有重要的临床意义。     

构建LPS诱导的急性炎症小鼠模型用于IDO1抑制剂药效动力学评价

 目的 构建急性炎症小鼠模型用于吲哚胺2, 3-双加氧酶1（indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1）抑制剂的药效动力学评价。方法 采用尾静脉注射或腹腔注射给予小鼠脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,构建IDO1活性上调的急性炎症小鼠模型。模型小鼠灌胃给予IDO1抑制剂L-1-甲基色氨酸（L-1-methyl-tryptophan,L-1-MT）或TQ016,给药后不同时间点取血,HPLC检测小鼠血清中色氨酸（tryptophan,Trp）和犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）含量,计算Kyn/Trp比值。采用IDO1活性上调引起的Trp浓度降低、Kyn浓度升高及Kyn/Trp比值增大,来评价IDO1抑制剂L-1-MT和TQ016对急性炎症小鼠血清中上调的IDO1活性的抑制效果。结果 尾静脉注射0.66 mg/kg LPS或腹腔注射5 mg/kg LPS均显著上调小鼠血清中IDO1活性。100 mg/kg L-1-MT在灌胃给药4 h后显著抑制模型小鼠血清中上调的IDO1活性。100 mg/kg TQ016在灌胃给药1、6、12、24和30 h后均显著抑制模型小鼠血清中上调的IDO1活性。TQ016呈剂量依赖性抑制模型小鼠血清中上调的IDO1活性。结论 LPS诱导的急性炎症小鼠模型适用于IDO1抑制剂的药效动力学评价。IDO1抑制剂TQ016具有良好的IDO1活性抑制效果。     

IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用探讨

目的探讨IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用。方法选取2016年9月～2017年9月来我院就诊的30例免疫性血小板减少症患者(观察组)和同期来我院体检的30例健康者(对照组)为研究对象,观察组患者给予地塞米松进行治疗,采集治疗前后血液样本,比较分析血浆中Kyn、Trp、Kyn/Trp的水平,以及CD4~+、CD8~+T淋巴细胞中TTS、IDO的表达。结果治疗前,观察组Kyn、Trp以及Kyn/Trp水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后,有效组患者血浆中Trp水平降低,Kyn、Kyn/Trp水平升高,差异有统计学意义(P0.05);治疗前,观察组CD4~+、CD8~+T淋巴细胞中IDO水平显著高于对照组,TTS水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后,有效组患者CD4~+、CD8~+T淋巴细胞中IDO水平水平升高,TTS水平降低,差异有统计学意义(P0.05);治疗无效组患者治疗前后各项指标无显著差异(P0.05)。结论 IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径与免疫性血小板减少症患者的发病相关,也可通过IDO/TTS评价患者的临床疗效,具有指导意义。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者单核细胞趋化蛋白-1水平的变化

目的 观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的水平变化,探讨炎性反应和脂质过氧化在OSAHS患者发病中的作用.方法 选择OSAHS患者30例(研究组),健康对照者20例(对照组),检测并对比两组受试者血清MCP-1、MDA及NO的水平.结果 研究组患者与对照组比较,血清MCP-1[(2 054±248)μg/L和(450±295)μg/L]、MDA[(9.0±5.9) μmol/L和(2.5±0.9)μmol/L]及NO[(47±11)μmol/L和(144±23)μmol/L]水平差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 慢性炎症、脂质过氧化参与了OSAHS及其并发症的发病过程.     

ARDS患者呼出气冷凝液和血清中NO、ET-1和8-isoPG检测的临床意义

目的：研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者呼出气冷凝液(EBC)和血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和8-异前列腺素(8-isoPG)的浓度变化及其临床意义。方法选取2012年9月至2014年7月在南通大学第二附属医院重症监护病房(ICU)中行机械通气的ARDS 52例患者为观察组,收集患者入院第1天及治疗后第7天呼出气冷凝液及血清标本。健康对照组为30例健康体检者,收集其EBC及血清标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组受检者EBC和血清中的NO、ET-1和8-isoPG浓度。结果观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(7.33±2.21)μmol/L vs (2.37±0.79)μmol/L、(46.02±10.39)μmol/L vs (10.08±4.27)μmol/L、(55.87±13.78) pg/mL vs (21.86±9.24) pg/mL,P<0.05];血清中NO、ET-1和8-isoPG水平高于对照组[(122.82±64.88)μmol/L vs (22.42±6.56)μmol/L、(178.82±55.21)μmol/L vs (97.32±39.74)μmol/L、(241.94±43.98) pg/mL vs (122.09±36.62) pg/mL,P<0.05];治疗后观察组患者EBC中NO、ET-1和8-isoPG水平均较治疗前下降[(6.32±1.61)μmol/L vs (7.33±2.21)μmol/L、(32.49±10.55)μmol/L vs (46.02±10.39)μmol/L、(36.74±11.41) pg/mL vs (55.87±13.78) pg/mL,P<0.05];血清中ET-1和8-isoPG水平低于治疗前[(158.31±55.79)μmol/L vs (178.82±55.21)μmol/L、(170.20±53.37) pg/mL vs (241.94±43.98) pg/mL,P<0.05]。结论 EBC和血清中NO、ET-1和8-isoPG浓度变化可反映ARDS患者肺部炎症反应及肺损伤严重程度;EBC反映炎症反应较血清更灵敏。     

IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用

目的 探讨IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者的发病和治疗中的作用。 方法 选取2015年7月~2017年8月我院收治的36例免疫性血小板减少症患者和36例来我院体检的健康人为研究对象，分别为观察组和对照组，观察组给予地塞米松40 mg/d进行治疗，对照组不采取任何处理。通过液相-质谱分析仪检测血浆中犬尿氨酸（Kyn）和色氨酸（Trp）的浓度；通过流式细胞仪检测T淋巴细胞中IDO和TTS的表达。 结果 与对照组相比，治疗前免疫性血小板减少症患者血浆中Kyn、Trp、Kyn/Trp的表达量较高，IDO的表达量较低，而TTS的表达量则明显较高，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组经有效治疗后，患者血浆中Trp的浓度降低，而Kyn浓度及Kyn/Trp比值则明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；患者IDO表达量明显上升，而TTS的表达量则明显下降，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 地塞米松对免疫性血小板减少症患者疗效显著，主要通过IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径发挥作用，临床可以通过监测IDO、TTS的水平指导其治疗。     

氟伐他汀对尿毒症患者高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、尿白蛋白排泄率和血清肌酐的影响

目的 探讨氟伐他汀对尿毒症患者高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、尿白蛋白排泄率(UAER)和血清肌酐(Cr)的影响.方法 选择进行维持性血液透析的尿毒症患者100例,按随机原则分为2组,每组50例.对照组进行常规治疗;观察组在常规治疗基础上采用氟伐他汀治疗,2组均连续治疗6个月.治疗前后采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α水平,用电化学发光法测定hs-CRP水平,同时使用全自动生化分析仪检测UAER、血清Cr的变化.结果 与治疗前hs-CRP、TNF-α、Cr、UAER等指标(13.91±2.10)ng/L、(197.64±25.47)ng/L、(138.42±46.95)μg/min、(88.00±19.00)μmol/L比较,观察组治疗后炎症指标hs-CRP、TNF-α均明显下降(5.65±2.21)ng/L、(80.21±9.41)ng/L(均P<0.05);Cr、UAER等指标均明显下降(80.00±15.00)μmol/L、(67.83±21.52)μg/min(均P<0.05).对照组治疗前后hs-CRP、TNF-α、Cr变化不明显[(14.23±2.33)ng/L vs (13.22±1.10)ng/L]、[(198.68±26.65)ng/L vs (196.87±24.54)ng/L]、[(90.00±18.00)μmol/L vs (87.00±14.00)μmol/L].而UAER 指标明显低于治疗前[(85.55±39.86)μg/min vs (134.13±45.10)μg/min](P<0.05);观察组上述各项指标的改善程度优于对照组(均P<0.05).结论 氟伐他汀可明显抑制炎症因子hs-CRP、TNF-α,降低UAER、Cr.     

大肠癌围手术期血清IAP和sE-cad水平的动态观察

目的 探讨大肠癌患者围手术期血清免疫抑制酸性蛋白(IAP)和可溶性上皮型钙黏附蛋白(soluble epithelial cadherin,sE-cad)水平的变化及其临床意义.方法 分别用单向免疫扩散法和ELISA法测定60例大肠癌患者手术前后血清IAP和sE-cad水平的改变,并与健康对照组比较分析.结果 大肠癌组治疗前较对照组血清IAP和sE-cad均增高[(673.3±77.3)μg/mL vs (508.3±69.5)μg/mL,(88.3±11.7)μg/L vs(8.33±0.77)μg/L],与对照组比较差异有显著性(P<0.01);且与淋巴结转移和肿瘤临床TNM分期有明显相关性.行根治性手术组(33例)术后血清IAP和sE-cad均显著降低[(530.7±50.2)μg/mL vs(667.7±47.5)μg/mL,(6.96±0.34)μg/L vs (144.2±37.1)μg/L](P<0.01);而姑息性手术组(27例)血清IAP和sE-cad则无显著变化[(659.8±58.9)μg/mL vs (676.1±50.7)μg/mL;(153.2±20.5)μg/L vs (149.8±31.7)μg/L](P>0.05).大肠癌患者血清IAP和SE-cad的变化与肿瘤的浸润转移和病程有关.结论 动态检测大肠癌患者血清IAP和SE-cad的变化,有助于估计患者的治疗效果和预后.     

慢性肾脏病患者血清HMGA2蛋白、FGF-23水平与肾功能损伤程度的相关性研究

目的 分析慢性肾脏病(CKD)患者血清高迁移率族蛋白A2 (HMGA2)、成纤维细胞生长因子23(FGF-23)与肾功能损伤程度的关系。方法 选取2021年2月至2022年3月在西电集团医院诊治的108例CKD患者(CKD组)为研究对象，根据CKD分期分为A组42例(1～2期)、B组45例(3～4期)和C组21例(5期)，选取同期体检健康者108例作为对照组。比较各组受检者的血清HMGA2、FCF-23、尿素氮(BUN)水平，采用Pearson相关系数法分析血清HMGA2、FCF-23水平与肾功能的相关性。结果 CKD组和对照组受检者的HMGA2 [(3.59±1.42) ng/mL vs(0.96±0.43) ng/mL]、FCF-23 [(432.16±43.15) pg/mL vs (306.55±35.63) pg/mL]、BUN [(6.43±1.46)μmol/L vs (4.35±1.27)μmol/L]水平比较，CKD组明显高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05);A组、B组和C组患者的血清HMGA2 [(3.01±0.97) ng/mL vs (3.42±...     

精神分裂症患者血清犬尿喹啉酸和犬尿喹啉酸与色氨酸比值变化的临床意义

目的 初步探讨血清犬尿喹啉酸(KYNA)含量及犬尿喹啉酸/色氨酸(TRP) 比值(KA/T)在精神分裂症患者抗精神药物治疗中的意义.方法 测定并比较了健康对照组、初始发病未用药SCH患者(SCH I组)、坚持用药SCH患者(SCH II组)血清KYNA、TRP含量及KA/T值.结果 与健康对照组血清KYNA (23.30±8.31)μmol/L、TRP(47.59±10.43)μmol/L比较,SCH I组患者血清KYNA(29.47±12.01)μmol/L和TRP(54.50±9.56)μmol/L含量均升高; SCH II组血清KYNA含量及KA/T比值下降.结论 抗精神药物治疗可能使血清KYNA含量和KA/T比值降低.     

慢性乙型肝炎及乙型肝炎性肝硬化患者色氨酸代谢变化及其相关性分析

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎性肝硬化(HBC)患者色氨酸(Trp)代谢变化及相关性.方法 选取2015年10月至2016年1月在重庆医科大学附属第一医院住院的CHB 81例和HBC 40例患者为研究对象,40例健康者为对照.采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)对各组受试者血浆中Trp及代谢产物犬尿氨酸(Kyn)、5-羟色胺(5-HT)水平进行测定,实时荧光定量PCR检测HBV-DNA病毒复制数,分析3组间血清学指标差异,采用Pearson相关分析和Logistic回归分析筛选危险因素.结果 与对照组比较,CHB组、HBC组受试者血浆中Trp和5-HT水平明显降低(P<0.01);HBC组受试者血浆中Kyn/Trp明显高于其他两组(P<0.01).HBC组Kyn/Trp与A/G呈负相关(r=-0.686,P<0.01),CHB组Kyn/Trp与Log DNA呈正相关(r=0.784,P<0.01).Logistic回归分析显示Kyn/Trp为CHB和HBC的危险因素.结论 检测血浆中Trp及其代谢产物可作为辅助指标评估乙型肝炎进展情况.     

吲哚胺-2,3-双加氧酶在非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)在非小细胞肺癌中的表达及意义.方法 收集38例非小细胞肺癌组织和10例癌旁正常肺组织.用半定量免疫组织化学方法 检测肺组织中IDO蛋白阳性率,实时荧光定量PCR检测肺组织中IDO mRNA表达水平.结果肺癌组IDO蛋白阳性率和IDO mRNA表达水平均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05);而肺癌组按不同病理分型中,腺癌组和鳞癌组比较差异无统计学意义(P＞0.05).肺癌组按不同分化程度分为高、中、低3组,经统计学分析,3组中IDO阳性表达率和IDO mRNA表达水平差异均有统计学意义(均P＜0.05).肺癌组按有和无淋巴结转移分组比较,IDO蛋白阳性率和IDO mRNA表达水平差异也均有统计学意义(均P＜0.05).结论 IDO在非小细胞肺癌中呈高表达,与分化程度及有无淋巴结转移有关,但与肺癌病理分型无关.     

吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的色胺酮类抑制剂筛选及其体外抗肿瘤作用

 目的  评价色胺酮衍生物吲哚胺2,3-双加氧酶 (indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的抑制活性,并研究其作为 IDO 抑制剂的抗肿瘤作用。方法  采用基因工程手段表达、纯化重组人 IDO (rhIDO),建立 IDO 活性检测体系;以色胺酮衍生物作为对象,进行 IDO 抑制活性初筛,对抑制类型、半数抑制浓度以及抑制常数进行测定;构建高表达人 IDO 的 pcDNA3.1(+) hIDO 转染 HEK 293 细胞,评价色胺酮衍生物在细胞水平上的 IDO 抑制活性;采用 MTT 比色法考察色胺酮衍生物3对人非小细胞肺癌A549细胞的生长抑制作用。结果  6个被测色胺酮衍生物均具有IDO抑制活性,且细胞水平上的抑制效力高于酶活水平,抑制效力均优于目前通用的IDO抑制剂1 甲基色氨酸(1-methyl-tryptophan,1-MT)。色胺酮衍生物 3 作为最强的 IDO 抑制剂,其Ki值为 0.161 μmol/L。MTT 实验结果显示,色胺酮衍生物3 显著抑制 A549 细胞生长,IC50 为 8.77 μmol/L。结论  色胺酮衍生物是一类新型高效的 IDO 抑制剂,在体外对 A549 细胞具有较强的抗肿瘤活性。     

Activated changes of platelet ultra microstructure and plasma granule membrane protein 140 in patients with non-small cell lung cancer

Background Non-small cell lung cancer （NSCLC） is the leading cause of cancer mortality worldwide. Platelet activation may play an important role in pathologic progress in lung cancer. In this study, we aimed to clarify the influence of activated platelets on lung cancer generation and growth, and the relationship among these functional and ultrastructural chanqes of platelets and the severity of pathoeenetic condition in these Datients with NSCLC.
Methods One hundred and thirty-six cases of patients with pathologically confirmed NSCLC were included in this study. Fifty-four healthy people were enrolled as controls. The change of ultra microstructure and activity of blood platelets were observed under the transmission and scanning electron microscope. Simultaneous determination of plasma granule membrane protein 140 （GMP-140） was made.
Results Transmission electron microscopy showed remarkable changes of ultra microstructure of platelets in patients with NSCLC, including swelling, increase of α-granules, vesicles, and glycogenosome. Scanning electron microscopy showed many more surface processes and wrinkles on platelets in patients with NSCLC. The reference plasma levels of GMP-140 of healthy controls were （18.2±2.7） μg/L. The plasma levels of GMP-140 in patients with NSCLC were （47.8±12.3） μg/L, which were much higher than those of the controls. There was a medium positive correlation between plasma levels of GMP-140 and amount of α-granules （r=0.514, P 〈0.01） and a high positive correlation between plasma levels of GMP-140 and area of platelet （r=0.84, P 〈0.01） in patients with NSCLC. The Kaplan-Meier survival curve analysis showed significant shift to the left in patients with NSCLC whose a-granules per platelet were 19 or more compared to those 18 or less （Log rank statistic, X^2= 17.38, P〈0.01）.
Conclusions There are significant activated changes of ultra microstructure and increased activity of blood platelets in patients with NSCLC. These activated platelets may play an important role in the generation and growth of lung cancer. These changes can be used as a diagnostic index of severity, progression, and prognosis of NSCLC.     

人参单体皂甙Rh2对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞免疫活性的影响

目的:探讨人参单体皂甙Rh2(G-Rh2)对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)分泌细胞毒效应分子的影响.方法:采用ELISA法和酶法分别检测35例非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液及其AM培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和NO浓度,并分别用干扰素-α(IFN-α)、G-Rh2以及两药联合干预AM培养,检测其上清液中TNF-α和NO变化情况.结果:所有非小细胞肺癌患者其AM均可产生一定量的TNF-α和NO;非小细胞肺癌患者荷瘤侧肺NO和TNF-α活性在肺泡灌洗液及AM培养上清液中均明显低于非荷瘤侧肺.G-Rh2干预下AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度较对照组明显升高(P＜0.05);与TNF-α干预AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度比较差异无统计学意义(P＞0.05).G-Rh2和TNF-α联合干预时AM培养上清液中TNF-α和NO的浓度明显大于TNF-α或G-Rh2单独干预(P＜0.01).结论:G-Rh2能促进非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞分泌细胞毒效应分子,联合干扰素时其作用更显著,两者具有协同性.     

IFN-γ诱导胰腺癌细胞IDO表达及活性的变化

目的：观察胰腺癌细胞株Panc02在不同浓度γ干扰素（IFN-γ）作用下吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）表达及活性的变化。方法：分别用不同浓度的IFN-γ诱导刺激胰腺癌细胞株Panc02,检测各组Panc02中IDO表达水平的变化,高压液相测定培养液上清中犬尿氨酸的浓度来评价IDO的分子活性。结果：不同浓度IFN-γ诱导Panc02的IDO蛋白表达量分别为0.401±0.116、0.628±0.109、0.728±0.146、1.088±0.183,不同浓度组间差异有统计学意义（P〈0.05）;不同浓度IFN-γ刺激Panc02后细胞培养液上清中犬尿氨酸的浓度分别为5.609±1.123、6.279±0.717、9.152±2.920、11.866±1.596,不同浓度组间差异有统计学意义（P〈0.05）。而且Panc02中的IDO蛋白的相对表达量随着IFN-γ作用浓度的增大逐渐增高,同时活性增强。结论：胰腺癌细胞株Panc02本身表达IDO,在IFN-γ诱导下表达上调且活性增强,这可能是引起胰腺癌免疫逃逸的重要机制之一。     

吲哚胺2,3-双加氧化酶1及其抑制剂的研究

 吲哚胺2,3-双加氧化酶1( indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是肝脏以外催化色氨酸沿着犬尿氨酸途径(kynurenine pathway,KP)分解代谢的限速酶。IDO1过度活化而引起KP的神经毒性产物喹啉酸(quinolinic acid,QUIN)的蓄积,是导致神经紊乱和神经退行性疾病的重要原因。IDO1同时又是免疫耐受酶,在诱导母胎免疫耐受和肿瘤免疫逃逸中均发挥重要作用,被视为新的免疫检查点。IDO1与阿尔茨海默病、老年性白内障、癌症等多种疾病发病机制的相关性已被证实,因此IDO1抑制剂作为极具潜能的药物受到日益广泛的关注。本文就IDO1的生物活性及其抑制剂的研究作一综述。