板蓝根中化学部位及其不同组合的抗病毒活性的筛选

目的:研究从板蓝根中提取分离的3个化学部位及其不同组合的体外抗FM1(流感病毒亚甲型鼠肺适应株)和RSV(呼吸道合胞病毒)的活性,确定板蓝根抗病毒的有效部位。方法:采用大孔树脂吸附技术分离得到苯丙素、生物碱、有机酸3个化学部位,用MTT法检测这几个部位对FM1和RSV的抑制作用。以对病毒抑制率作为评价指标,比较各部位抗病毒作用的效果。结果:对FM1抑制率分别为:62.00%、62.10、43.50%、58.00%、38.64%、58.00%、76%。对RSV的抑制率分别为:26.31%、53.50、56.47%、67.54%、80.82%、81.61%、33.74%。结论:板蓝根的抗病毒作用可能是几个部位协同作用的结果。     

板蓝根提取物体外抗呼吸道合胞病毒机制研究

目的:研究板蓝根活性提取物体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:MTT法检测人喉癌上皮细胞(hep-2)中板蓝根活性提取物对RSV的抑制作用。荧光定量RT-PCR检测药物对RSV非结构蛋白NS1和L蛋白RNA合成的影响。结果:MTT结果显示药物治疗组和预防组在0.25~1 mg/m L浓度时均表现出抑制RSV的作用,其中0.5 mg/m L药物对RSV的抑制率分别是34.2%和52.2%,药物没有显示出直接杀伤和抑制RSV的效应。荧光定量RT-PCR检测表明药物作用1 h,RSV的NS1和L的RNA水平均显著低于病毒组(P0.05)。结论:RSV感染hep-2过程中,板蓝根活性提取物具有预防和早期抗病毒复制的效应,但未显示出直接杀伤RSV的功能。     

中药矮地茶不同提取方法提取物体外抗病毒研究

目的:为建立矮地茶抗病毒谱-效相关评价系统,对矮地茶不同提取方法提取物体外抗病毒活性进行筛选。方法:采用细胞体外抗病毒实验法,结合CPE法及CCK-8试剂盒,以TI值(治疗指数)为研究指标,以利巴韦林、阿昔洛韦为阳性对照药,研究矮地茶不同提取方法提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒(HSV-1)、柯萨奇病毒(COX-B5)、手足口病病毒(EV71)的抑制作用。结果:矮地茶对RSV、HSV-1、COX-B5均有直接杀灭作用,水提液对COX-B5的直接杀灭效果较好,TI值为16.282,最大抑制率分别为87%,较阳性对照药利巴韦林相差不大(TI值为17.482,最大抑制率为85%)。结论:矮地茶提取物具有体外抗RSV、HSV-1、COX-B5的活性。     

大青叶有效单体抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的 探讨中药大青叶单体1#,2#,3#,4#体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法 通过观察病毒引起的细胞病变效应(Cytopathogenic effect,CPE)和MTT[Methyl Thiazolyl Tetrazolium,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测药物抗RSV活性, 计算药物对病变的抑制率和半数抑制浓度(50% inhibiting concentration ,IC50),并从药物抗病毒吸附,药物对病毒的直接杀灭作用及抑制病毒在细胞内的生物合成3个方面初步探索大青叶单体抗RSV活性的作用机制.结果 大青叶单体1#,2#,3#,4#对RSV无直接灭活作用,也不能阻止RSV的吸附,而能抑制RSV在Hep-2细胞内的的生物合成,其半数抑制浓度(IC50)分别为32.57,26.37,31.60,29.61 μg/ml,治疗指数(TI) 分别为6.15,10.50,9.21,13.22,其抗病毒效果优于病毒唑(IC50=103.20 μg/ml, TI=5.21)和抗病毒口服液(IC50=105.21 μg/ml, TI=5.03) ,P<0.01.结论 大青叶单体1#,2#,3#,4#能安全高效地抑制RSV在Hep-2细胞中的增殖,抑制作用发生在病毒入侵细胞后.     

板蓝根粉体抗病毒活性的研究

目的:通过比较板蓝根不同粒径粉体(细粉与超微粉)及超微粉体的不同溶剂部位提取物的抗病毒作用,考察粒径对抗病毒作用的影响,并探讨其抗病毒作用的物质基础.方法:测定流感病毒对50％组织培养感染剂量,MTT法测定试验药物对细胞的半数中毒剂量,观察板蓝根普通粉体与超微粉体及超微粉体不同极性溶剂提取液的细胞毒性作用及对流感病毒FM1的抑制作用.结果:各组样品对流感病毒FM1均有不同程度的抑制作用,但超微粉抑制效果较细粉好,不同部位中,三氯甲烷部位抗病毒作用最强.结论:板蓝根超微粉抑制病毒复制的浓度明显小于细粉,为明确板蓝根粉体抗病毒的物质基础提供试验依据.     

板蓝根抗流感病毒多靶点研究思路综述

<正>板蓝根在临床上主要用于病毒或细菌感染性疾病的治疗,许多文献报道板蓝根对流感、乙型肝炎、单纯疱疹、病毒性心肌炎、出血热等疾病均有较好的治疗和预防作用[1]。有关板蓝根功效的研究发现其具有抗病毒、抗癌、抗细菌内毒素、抗炎、增强免疫力等多重药理属性,但其中以抗病毒最受关注[2~3]。为了进一步探索板蓝根抗流感病毒的物质基础和作用机制,笔者将板蓝根已证明具有抗流感病毒作用的化学成分及药理机制的研究情况作一综述。1板蓝根抗流感病毒化学成分和作用机理     

全蝎白术蛴螬混合发酵品体内外抗RSV病毒的作用研究

目的研究全蝎白术蛴螬混合发酵品(SAHHFP)体内外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的药理作用。方法将SAHHFP用不同极性的溶剂、不同的提取方式提取,分别得到不同的极性部位,用MTT法进行体外抗RSV病毒实验,通过比较抗病毒治疗指数TI来确定最佳提取方法;体内抗RSV病毒实验,用RSV病毒感染小鼠模型,通过计算胸腺指数、肺指数、酶联免疫试剂盒检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、一氧化氮(NO)三种细胞因子的含量等来观察体内抗病毒效果。结果体外抗病毒方面,SAHHFP 50%超声醇提液抗病毒效果最好;体内抗病毒方面,SAHHFP高中低三个剂量的肺指数抑制率以及三种细胞因子的含量均高于模型组。结论 SAHHFP 50%超声醇提液对RSV病毒在体外和体内都有较好的抑制作用,且和模型组相比,具有显著性差异。     

苦碟子抗呼吸道病毒的实验研究

目的：通过细胞内培养和小鼠体内试验观察苦碟子抗呼吸道病毒感染细胞的作用和活体内抗呼吸道病毒感染的效果。方法：体外试验采用病毒CPE法测定药物的半数抑制浓度IC50和最小有效浓度MIC及治疗指数TI，体内试验采用流感病毒致肺炎试验观察肺病变并计算病变率和病变抑制率。结果：苦碟子对呼吸道流感病毒H3N2、合胞病毒（RSV）和腺病毒（ADV-3）的治疗指数分别为10、32和16。在不同剂量组对3种病毒肺病变抑制率高于双黄连对照组（P〈0．05）。结论：苦碟子对呼吸道流感病毒H3N2、合胞病毒（RSV）和腺病毒（ADV-3）均有良好的抑制作用。     

抗戾饮抗甲1型流感病毒的实验研究

目的以狗肾细胞株（MDCK）及小鼠流感病毒肺炎模型为基础，观察抗戾饮体内、外抗流感病毒的作用。方法将甲1型流感病毒FM1株接种于MDCK细胞，观察抗戾饮对细胞的毒性及体外抗流感病毒的作用；以甲1型流感病毒FM1株滴鼻感染致小鼠肺炎，观察抗戾饮对小鼠肺指数和肺指数抑制率及死亡保护作用的影响。结果抗戾饮的最大无毒浓度为0．21mg／mL，其最大无毒浓度在MDCK细胞对甲1型流感病毒FM1株无明显抑制作用；抗戾饮组的肺指数和肺指数抑制率与模型对照组相比，均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）；抗戾饮组的死亡保护率和延长生命率与模型对照组相比，均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）。结论抗戾饮体外对甲1型流感病毒无明显抑制作用，但对甲1型流感病毒FM1株致小鼠肺炎具有良好的治疗效果。     

桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的:研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,将51.2 g·L-1桑叶液(70%乙醇提取物)倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应(CPE),通过MTT法测定半数中毒浓度(TC50)。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果:桑叶质量浓度在0.01~12.8 g·L-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L-1,IC501.015 g·L-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大(P<0.05)。结论:桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。     

Anticancer and antiviral activities of Youngia japonica (L.) DC (Asteraceae, Compositae)

Aqueous and ethanol extracts of Youngia japonica (also known as Oriental hawksbeard) were tested in vitro for anti-tumor activity against three cell lines, human promyelocytic leukaemia (HL-60), human myelogenous leukaemia (chronic K-562) and mouse Sarcoma 180 (S-180), and for antiviral activity against respiratory syncytial virus (RSV), influenza A virus (Flu A) and herpes simplex virus type 1 (HSV-1) by cytopathic effect (CPE) reduction assay. Hot water extract of Youngia japonica inhibited cell proliferation and growth of all cancer cell lines to various extent. K-562 cells were the most sensitive to the extract whereas S-180 cells were the least. It did not show any significant cytotoxic effects on normal mammalian Vero cells up to the concentration of 450 microg/mL. The ethanol extract of whole plant of Youngia japonica exhibited antiviral activity against RSV cultured in HEp-2 cells, but did not have any activity against Flu A and HSV-1. Two partially purified fractions (Fr.10 and Fr.11) from the 95% ethanol extract exhibited significant anti-RSV with 50% inhibitory concentration (IC50) in the range of 3.0-6.0 microg/mL. The ratio of the viral titer reduction in the absence (viral control) and presence of the maximal non-cytotoxic concentration (MNCC) of the Fr.10 and Fr.11 was both estimated to be 1 x 10(4) (RF, viral titer reduction factors), indicating that their anti-RSV activity was high enough to justify for further analysis. Our preliminary analysis showed that the antiviral ingredients were likely to contain phenolic compounds including tannins by chemical tests.     

黄虎解热袋泡剂的抗病毒作用研究

目的探讨黄虎解热袋泡剂对小儿急性上呼吸道感染常见病毒(呼吸道合胞病毒、流感病毒)的对抗效果。方法进行狗肾细胞(MDCK)上抗流感病毒[甲1型流感病毒(FM1)]试验,体外进行呼吸道合胞病毒(RSV)抑制实验。结果黄虎解热袋泡剂在无毒浓度6.25 mg/ml下能完全抑制FM1;对RSV体外抑制作用的最低浓度为2 mg/ml。结论黄虎解热袋泡剂对RSV、FM1具有明显抑制作用,提示可能是其有效治疗小儿急性上呼吸道感染的重要作用机制之一。     

清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的研究清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法通过细胞培养,采用观察细胞病变(CPE)和活细胞染色计数法(MTT),观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中抑制RSV的作用。结果清热抗感冲剂及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用,其半数中毒浓度(TC50)分别为4760μg/mL、1/4.35稀释度;半数有效浓度(IC50)为178μg/mL、1/54稀释度;治疗指数分别为26.7、12.3。结论清热抗感冲剂及其含药血清具有抑制RSV在Hep-2细胞内复制的作用。     

黄芩苷体内抗流感病毒作用

目的：研究黄芩苷体内抗流感病毒(influenza virus,IV)作用。方法：采用体内实验方法,对小鼠先预防给药(2 d)后感染流感病毒(A/FM/1/47)或先感染流感病毒(1 d)后治疗给药的方法观察黄芩苷的抗流感病毒作用。结果：黄芩苷可明显延长流感病毒感染小鼠的存活时间(P<0.01)；对小鼠肺内的流感病毒有一定的清除作用,能降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力；减轻小鼠肺内的炎性病变。结论：黄芩苷具有明显的抗流感病毒作用。     

Antiviral effect of cimicifugin from Cimicifuga foetida against human respiratory syncytial virus

Human respiratory syncytial virus (RSV) causes serious infection of the lower respiratory tract in children and an effective antiviral therapy against the viral pathogen remains unavailable. We previously demonstrated that the oriental medicinal plant, Cimicifuga foetida L. (C. foetida), possessed inhibitory activity against RSV. Since cimicifugin is a major constituent of C. foetida, we sought to examine in this study its anti-RSV effect on both the human upper (HEp-2) and lower (A549) respiratory tract cell lines. Results revealed that cimicifugin dose-dependently inhibited RSV-induced plaque formation in both HEp-2 and A549 cells (p < 0.0001), with a superior effect in the latter cell type (p < 0.0001). The antiviral activity of cimicifugin was time-dependent (p < 0.0001) and was most effective when cells were treated with the compound before viral inoculation. Additional experiments demonstrated that cimicifugin could inhibit viral attachment (p < 0.0001) and viral internalization (p < 0.0001). Furthermore, the drug could potentiate heparin's effect against attachment of RSV, particularly in A549 cells. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) analysis of antiviral cytokines induction revealed that cimicifugin could also stimulate epithelial cells to secrete IFN-β to counteract viral infection. Taken together, these results indicate that cimicifugin is an efficient antiviral agent against RSV infection. We suggest that cimicifugin might be useful for the management of RSV pathogenesis.     

蟾酥总蟾蜍甾烯对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及组织中代谢物的初步分析

目的:评价蟾酥总蟾蜍甾烯(total bufadienolides from toad venom,TBFs)对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用,同步对体内组织中的代谢物进行初步分析.方法:采用HPLC和LC-MS对制备的受试药TBFs的化学组成进行表征;采用灌胃和腹腔注射2种方式给予H22荷瘤小鼠高、中、低3个剂量的受试药,给药后第13天处死,剥取瘤组织,称重,计算抑瘤率;同时取心、肝、脾、肺、肾各脏器组织,采用HPLC和LC-MS对其中的药物进行初步分析.结果:在对照品对照,在线紫外吸收光谱和质谱数据的基础上,明确了受试药TBFs的化学组成,以日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、酯蟾毒精、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基为主.与空白对照组比,灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠的体重无影响,低(5 mg· kg-1),中(10 mg·kg-1),高剂量组(20 mg·kg-1)的抑瘤率分别为14.76％,16.38％,10.32％;腹腔注射给予TBFs,与空白对照组比,中、高剂量组在给药第5天时体重增加较慢,第13天时恢复正常;低(1.5mg· kg-1),中(3 mg·kg-1),高剂量组(6 mg·kg-1)的抑瘤率分别为17.30％,19.80％,40.95％,呈一定的剂量依赖性.小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器组织HPLC分析表明,肝组织中存在蟾蜍甾烯类成分,LC-DAD-MS初步推测其中的11个化合物.结论:灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有一定的抑制趋势,但作用不明显;腹腔注射则展示了显著性抑瘤作用,同时给药初期也表现了一定的毒性反应;肝组织中推测的蟾蜍甾烯类化合物为进一步研究其体内代谢途径奠定基础.     

Isolation, structure, and synthesis of combretastatins A-1 and B-1, potent new inhibitors of microtubule assembly, derived from Combretum caffrum

The principal antineoplastic constituent of the South African tree Combretum caffrum has been isolated and designated combretastatin A-1. The structure of this new cis-stilbene was unequivocally established by X-ray crystal structure determination and total synthesis. A Wittig reaction sequence in THF comprised the synthetic key step (92.5% yield) and provided a very favorable 9:1 ratio of the cis:trans [1c:2c, geometrical isomers]. Selective hydrogenation of combretastatin A-1 afforded combretastatin B-1, a companion cell growth inhibitory constituent of C. caffrum. Combretastatin A-1 provided 26-29% life extension at 2.75-11 mg/kg dose levels with ED50 0.99 microgram/ml against the murine P-388 lymphocytic leukemia in vivo and in vitro systems. Both combretastatin A-1 and combretastatin B-1 are potent inhibitors of microtubule assembly in vitro and among the most potent inhibitors of the binding of colchicine to tubulin yet described. The structural simplicity and ready synthesis of combretastatin A-1 and combretastatin B-1 suggest that these new biosynthetic products will become useful in a variety of biological endeavors.     

肺炎宁颗粒剂制备工艺优化及抗菌试验研究

以黄酮化合物为指标，采用正交试验设计法筛选提取 工艺后制成肺炎宁颗粒剂，管碟法进行了药物体外抗菌试验，并以抗病毒胶囊为对照药物，考究了对小鼠致死性肺炎球菌感染的保护作用。结果显示，肺炎宁颗粒剂在治疗剂量和低剂量对肺炎球菌感染死亡的保护率分别提高６０％和３０％，优于对照药物。     

Biological screening of Italian medicinal plants for antibacterial activity

Some 68 plant extracts from 65 species belonging to 25 families were investigated for antibacterial activity against eight gram-positive and gram-negative bacteria. Of the 68 extracts, 64 (94.1%) exhibited inhibitory effects against one or more microorganisms. Furthermore, among the active extracts, 12 from 11 species exhibited a broad spectrum of activity. Discussion on the probable chemical components responsible for this activity is included.