铅的体外胚胎毒性

目的探讨铅在胚胎发育中的毒性及对胚胎组织GSH和MDA含量的影响.方法采用全胚胎培养技术,将孕8.5天的昆明种小鼠脱臼处死,分离胚胎,置不同浓度铅 (0, 30, 60, 90 mg/L)的大鼠即刻离心血清(immediately centrifugal serum, ICS)中旋转培养48 h,观察铅对体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响.应用分光光度法测量胚胎组织谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量.结果铅在30 mg/L能抑制胚胎生长发育和形态分化,诱发卵黄囊生长和血管分化不良以及神经管不闭合,胚胎发育异常率增高;60和90 mg/L除具有上述特点外,还可见后脑水肿.各染毒组胚胎组织GSH含量均低于对照组(P＜0.05),MDA含量高于对照组(P＜0.05).结论体外实验条件下,铅对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性.     

乌头类中药的胚胎毒性及致畸性

目的：研究乌头类中药盐附子、生川乌、生草乌的胚胎毒性及致畸性。方法：选用SD大鼠，实验分为5组：盐附子1．14g生药/kg，3．43g生药/kg；10．30g生药/kg，生川乌13．0g生药/kg；生草乌8．3g生药/kg，另设阴性对照（蒸馏水）组和阳性对照（维生素A）组，试验组和阴性对照组大鼠于妊娠第7至16天，阳性对照组大鼠于妊娠第9至12天灌胃给药。结果：盐附子10．30g生药/kg剂量组和生川乌13．0g生药/kg剂量组、生草乌8．3g生药/kg剂量组对大鼠都出现了轻微母体毒性（孕鼠体重增加缓慢和摄食量减少）；与阴性对照组比较，生草乌8.3g生药/kg剂量组出现胎鼠身长减小，胸骨骨化数减少（P〈0．05）；其余无异常。结论：在本实验条件下，乌头类中药盐附子、生川乌、生草乌对大鼠均无致畸作用；生草乌8．3g生药/kg有一定的胚胎毒性。     

槲皮素拮抗大气细颗粒物PM2.5对大鼠胚胎毒性的体外研究

目的：探讨槲皮素对大气细颗粒物（fine particulate matter，PM2.5）发育毒性的拮抗作用及可能机制。方法：于2015年12月至2016年3月以大气采样器将北京市某地区采暖期PM2.5收集在石英滤膜上，超声震动后将洗脱液过滤，冷冻干燥后得到PM2.5样品。采用体外全胚胎培养模型，将胎龄9.5 d的SD大鼠胚胎以50 mg/L PM2.5染毒，然后用不同剂量（0.1、0.5、1.0、5.0 μmol/L）的槲皮素干预，培养48 h后对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。染毒结束后，剥离卵黄囊，制备胚胎单细胞悬液，通过流式细胞仪检测细胞线粒体内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成情况。结果：PM2.5染毒后，大鼠体外胚胎的卵黄囊直径、头长、颅臀长和体节数明显减少，各组织器官形态学评分明显降低，细胞线粒体内ROS水平显著升高。槲皮素干预后，对PM2.5致胚胎生长发育阻滞有明显改善作用，可使胚胎卵黄囊直径、颅臀长、头长增大，体节数增多，卵黄囊血管分化情况得到改善，并对PM2.5所致的尿囊、体屈、心脏、后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉、腮弓、上颌突、前肢芽及后肢芽分化抑制均有不同程度的改善，细胞内线粒体ROS含量也显著降低。1.0 μmol/L槲皮素干预效果最佳，其他3个剂量组的槲皮素干预也有一定的保护作用，但效果均不及1.0 μmol/L剂量组。结论：适量补充槲皮素对PM2.5致胚胎发育毒性有拮抗作用，清除线粒体内ROS可能是其机制之一。     

应用小鼠胚胎体外培养技术研究氟的胚胎发育毒性

目的　探讨无机氟的发育毒性及机理。方法　妊娠 8.5d大鼠胚胎于体外旋转培养系统中给予不同剂量的氟化钠 ,培养 48h后 ,测定卵黄囊直径 ,胚胎体长和头长 ,用Maele Fabry形态学评分系统进行器官形态评分 ,评价胚胎器官分化发育情况。结果　随着氟剂量的增加 ,反映胚胎生长发育和器官分化的各项指标呈现出下降趋势 ,有一定的剂量效应关系。其中 ,卵黄囊及血管网发育分化对氟较敏感 ,剂量为 5 .0mg·L- 1 时与对照比较已有显著性差异。大于或等于 1 0 .0mg·L- 1 时对多数指标影响显著 ,Maele Fabry形态学总评分与对照相比呈现显著差异。胚胎畸形发生率在剂量为 1 5 .0mg·L- 1 明显升高 ,主要表现为神经管闭合不全和体翻转不全。结论　无机氟有潜在的致畸性和发育毒性     

硝酸铅对大鼠胚胎中脑神经细胞发育毒性的研究

目的：研究硝酸铅对胚胎中脑神经细胞分化和增殖的毒性作用。方法：利用大鼠胚胎中脑神经细胞进行原代微团培养，观察不同浓度(0．01、0．1、1．0、10．0、100．0mg／L)的硝酸铅对细胞分化、增殖的影响，并利用图象分析细胞形态变化及MTT测定细胞活性。结果：结果显示硝酸铅可抑制中脑神经细胞的增殖和分化，导致细胞形态的改变，表现为细胞集落数目、细胞表面突起和集落间的神经纤维束减少。并显示剂量一效应关系，其半数生长抑制浓度(ICV50)为23mg／L，而半数分化抑制浓度(ICD50)为3mg／L。结论：ICV50与ICD50比值为7．7，判断为硝酸铅可能具有体外细胞毒性及致畸作用，抑制细胞的分化和增殖可能是硝酸铅致发育危害的重要作用机理     

孕大鼠在胚泡着床前给予醋氨酚对器官形成期胚胎发育的影响

研究孕大鼠胚泡着床前药物损伤对胚胎器官形成期发育的影响，探索药源性胚泡异常与胎仔发育的关系。方法：母鼠孕第3天给予醋氨酚0．25～1．00g／kg．孕第4天处死母鼠．计数胚泡细胞数，胚泡微核数及微核率；孕第12．5天处死母鼠，评价胚胎组织器官形态分化程度及胚胎生长发育状况。结果：醋氨酚（0．25～1．00g／kg）抑制着床前胚泡发育,对胚泡细胞产生遗传毒作用，并呈明显剂量依赖关系。与对照组相比，孕第12．5天（器官形成期）胚胎生长发育状况无明显差异，胚胎组织器官形态分化无显著改变。醋氨酚0．5g，1．0g／kg对胚胎发育具毒性，导致胚胎发育迟缓、胚胎畸形、胚胎死亡数显著增加。结论：胚胎发育毒性与着床前胚泡遗传物质损伤相关。     

As_2O_3对体外培养胚胎致畸作用时效关系研究

本实验采用ＷＥＣ技术（ｗｈｏｌｅｅｍｂｒｙｏｃｕｌｔｕｒｅ，全胚胎培养）探讨了Ａｓ２Ｏ３不同时间对大鼠胚胎的致畸作用，染毒剂量为３．０μｇ／ｍｌ。结果表明：作用６ｈ、１６ｈ对胚胎的生长发育和器官形态分化无明显影响；作用２６ｈ，反映胚胎生长发育和器官形态分化各指标伍均明显降低（Ｐ＜０．０５），４１．７％的胚胎出现畸形；作用４８ｈ，改变更加明显，畸胎率达１００％；畸形主要表现为前肢芽小或无、前后神经管未闭、无耳泡等。电镜观察可见ＶＹＳ（脏层卵黄囊）上皮细胞顶端微绒毛变短、排列不规则和数量减少、线粒体肿胀、溶酶体数量减少等改变，提示ＶＹＳ超级结构的改变可能与砷的致畸机制有关。     

人参皂苷拮抗醋酸铅对大鼠胚胎发育毒性的研究

目的：探讨人参皂苷对醋酸铅胚胎发育毒性的拮抗作用。方法：应用全胚胎体外培养技术建立胚胎致畸模型,并进行胚胎发育毒性的拮抗实验。结果：铅对大鼠胚胎有较强的发育毒性作用,并呈剂量—效应关系,人参皂苷可拮抗醋酸铅胚胎发育毒性,使胚胎正常生长。结论：人参皂苷对铅所致胚胎畸形有较好的拮抗作用,并可均衡地促进胚胎的分化和发育。     

野胡萝卜籽挥发油碳氢部位对SD大鼠体内和体外的潜在致畸胎作用

用体外原代胚胎细胞培养和体内传统致畸胎试验研究了野胡萝卜籽挥发油碳氢部位的潜在致畸胎作用。体内试验检查了77只孕鼠和703只胎鼠。挥发油体外试验浓度为50、100和150μg/ml,体内试验为625.0,312.5和156.3mg/kg,分别用生理盐水和维生素A作为阴性和阳性对照。结果表明,在体外挥发油对大鼠胚胎中脑和肢芽细胞的分化无抑制作用:体内亦无母体毒性、胚胎毒性,对胎鼠亦无致畸胎作用,也不影响其生长发育。两种试验均提示挥发油对SD大鼠无致畸胎作用,且两种方法的结果是一致的。     

氯化两面针碱对斑马鱼胚胎心脏影响的初步研究

目的观察不同浓度的氯化两面针碱对斑马鱼心脏的影响。方法用发育正常的受精后48 h（48 hpf）的斑马鱼胚胎作为实验模型,用浓度为5.00 mg/L、3.15 mg/L、2.00 mg/L、1.58 mg/L、1.12 mg/L的氯化两面针碱处理上述胚胎,分别于受精后60 h和72 h时观察胚胎心脏的形态及心率的变化。结果各给药组在受精后60 h和72 h时均出现胚胎心脏中毒现象。5.00 mg/L、3.15 mg/L实验组中,胚胎主要表现为心脏跳动停止、心脏区域出血,2.00 mg/L、1.58 mg/L、1.12 mg/L实验组的胚胎则主要表现为心脏发育畸形。心率随着浓度的升高而明显下降,随着暴露时间的延长,心率下降不明显。结论氯化两面针碱对斑马鱼胚胎有心脏毒性。     

植入后全胚胎培养的培养基pH值改变对大鼠胚胎生长发育的影响

目的　探讨植入后全胚胎培养培养基最适pH值。方法　分离 9.5天龄Wistar大鼠胚胎 ,分别在实验组 (即不同pH :5 .5 ,6 .0 ,6 .5 ,7.0 ,7.5 ,8.0 ,8.5 ,9.0 )和对照组 (pH为 8.2 )的培养基 (1 0 0 %大鼠即刻离心血清 )中体外旋转培养4 8小时 ,观察pH值的改变对胚胎生长发育的影响。结果　与对照组比较 ,当培养基pH为 6 .5、6 .0和 9.0时培养胚胎的生长发育明显受到影响 (P <0 .0 5 ) ,胚胎畸形率和死亡率增高 (P <0 .0 5 )。当培养基pH为 5 .5时 ,培养胚胎死亡率达1 0 0 %。结论　全胚胎培养培养基pH条件改变 (过低或过高 )能够影响培养胚胎的生长发育。植入后全胚胎培养培养基最适pH值为 7.5～ 8.2。     

不同浓度表皮生长因子对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的:研究不同浓度表皮生长因子(ep iderm al growth factor,EGF)对ICR小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响。方法:在mKSOM培养液中添加不同浓度(0.1,1.0,10和100 ng/m l)的EGF对小鼠2-细胞胚胎进行体外培养72 h、96 h,观察囊胚发育率、孵化率和胚胎细胞数的变化。结果:实验组加入四种不同浓度EGF胚胎培养72 h后,其囊胚率分别为93.8%、92.4%、91.8%、91.2%;96 h后其孵出率分别为61.1%、61.8%、63.0%、60.1%,均显著高于对照组(79.9%、43.1%,P<0.05),囊胚细胞数分别为73.1±13.4、73.8±7.0、74.3±12.2、77.6±8.2,与对照组(72.1±6.9)比较,差异无显著性(P>0.05);四个实验组间差异亦无显著性(P>0.05)。结论:EGF浓度在0.1,1.0,10和100 ng/m l范围内可提高体外培养鼠胚的囊胚率与孵出率;胚囊细胞数无变化;不同浓度EGF对早期鼠胚未见有毒性作用。     

Effects of hyperglycaemia on the development of embryos in vitro

通过应用全胚胎体外培养方法研究了高血糖对胚胎生长发育的影响，发现单纯高血糖即可导致胚胎死亡、胚胎畸形和胚胎生长发育迟缓。结果提示在妊娠过程中尤其是在妊娠早期将血糖控制在正常范围内是降低糖尿病孕妇胚胎死亡、畸形和发育迟缓的关键。     

Morphological staging on presomite rat embryos

目的：研究Ｗｉｓｔａｒ大鼠孕第９天胚胎发育的分期。方法：用在解剖显微镜下观察大鼠胚胎于分节前形态学的发育特点去分期。结果：可分５期，第１期，羊膜完全形成但未见神经沟。第２期，前面观可见正中线上的神经沟，侧面观未见神经褶。第３期，神经褶清晰，未见前肠。第４期，未见体节。第５期，体节出现。结论：此种分期方法简便、实用、准确。     

应用小鼠体外全胚胎培养方法研究多氯联苯同系物PCB153对胚胎发育的影响

目的探讨多氯联苯同系物PCB153对胚胎生长发育的影响及其作用机制.方法于体外将孕8.5d小鼠胚胎置入不同浓度PCB153,应用植入后全胚胎培养技术研究PCB153对胚胎生长发育的影响;透射电镜观察PCB153对卵黄囊的损害.结果PCB153对胚胎发育具有明显影响且呈剂量-效应关系.0.10ng/ml组除卵黄囊循环稍差外,其余指标与对照组一致或差异不显著(P＞0.05);1.00ng/ml组明显影响卵黄囊循环、头长、颅臀长、体节数、中脑、后脑、翻转、鳃弓和上下颌突等指标,与对照组比较P＜0.05;10.00ng/ml组,各指标进一步降低(P＜0.01),胚胎致畸率升高并出现死亡;电镜发现,PCB153处理的各实验组卵黄囊超微结构遭到不同程度破坏.结论PCB153使胚胎发育迟缓、具有发育毒性和致畸性,作用的敏感部位主要是卵黄囊、头长、颅臀长、中脑和鳃弓;卵黄囊的超微结构损害与PCB153致胚胎发育异常有关.     

Vascular and morphogenetic abnormalities associated with exposure of cigarette smoke condensate during chicken and murine embryogenesis

Objective Embryonic movements （EM） and angiogenesis pathways are evolutionarily conserved mechanisms which are essential for proper embryonic development. Deviations in these processes by exposure to cigarette smoke condensate （CSC） may cause vascular and morphogenetic disorders. Methods Using chicken and mouse embryos, we have demonstrated the in vivo effects of CSC on EM, vascular development, and organogenesis. Results Examination of the CSC exposed chicken embryos revealed a significant reduction in EM, stunted growth, deviated pattern of blood vessels, hemorrhages, and localized necrosis. Likewise, mouse embryos that were exposed to CSC at E8.5 and E9.5 died between E11.5 and E12.5, respectively. These mouse embryos showed defects in morphogenesis and remodeling of the embryonic vasculature, while littermate controls showed normal development. Conclusion Cigarette smoking during pregnancy is fatal for growing embryos. CSC may induce the remodeling of embryonic vasculature, leading to various pathologies.     

益母草碱对阿霉素致斑马鱼心脏毒性保护作用的初步研究

目的观察不同浓度的盐酸益母草碱对阿霉素所致斑马鱼胚胎心脏毒性的保护作用。方法应用发育正常受精后48h的斑马鱼胚胎作为实验模型,用盐酸益母草碱＋阿霉素（浓度为0＋30mg／L,30mg／L＋30mg／L,60mg／L＋30mg／L,120mg／L＋30mg/L）处理上述胚胎,分别于受精后60h、72h和96h时观察胚胎心脏的形态及心率的变化。结果各给药组以及对照组在给药后均出现心率减慢、心脏区域出血的胚胎心脏中毒现象。但益母草碱联合用药组的心脏毒性作用较小,且随着盐酸益母草碱浓度的升高,阿霉素的心脏毒性作用明显减小。结论阿霉素对斑马鱼胚胎具有心脏毒性作用．而盐酸益母草碱对阿霉素所致心脏毒性具有保护作用。     

以人血清为培养基的大鼠全胚胎培养方法研究

目的;该方法可否作为一种检测药物胚胎发育毒性效应的手段,方法：取孕９．５天（头褶中期）的大鼠胚胎,分别在大鼠血清培养基和人血清培养基（９０％的人血清,１０％的大鼠血清,并补充葡萄糖到３ｍｇ／ｍｌ血清）中培养４８ｈ,并用Ｋｌｕｇ等人的评分系统对胚胎生长参数和形态进行评分,结果：９．５天的大鼠胚胎在人血甭培养基中培养４８ｈ,全部胚胎均发育正常,与在大鼠血清培养基中培养４８ｈ的胚胎生长发育情况相近,除胚     

轻度维生素A缺乏对大鼠胚胎生长的影响

目的 观察轻度维生素A缺乏（MVAD）对大鼠胚胎生长的影响.方法 24只10周龄雌性Wistar大鼠,随机分为两组：MVAD组和维生素A充足组（Control）.于孕前3周开始分别饲以含维生素A（VA）400IU/kg和6 500IU/kg的饲料喂养至处死.孕鼠分别于妊娠11、14、17、20孕天（days post coitum,dpc）（各3只）剖腹取出胚胎鼠,称重后处死并称取头（脑）重,用高效液相色谱法（HPLC）测定其肝脏和脑组织中VA含量.结果 （1）MVAD组胚胎鼠肝脏和脑中VA水平从17dpc开始均明显低于正常组（P＜0.05）.（2）MVAD组孕晚期（17、20dpc）胚胎鼠体重明显低于正常组（P＜0.01）;MVAD组20dpc胚胎的头重低于正常组（P＜0.01）,脑重无明显降低.结论 孕鼠MVAD可导致孕晚期胚胎鼠生长障碍.