麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的MDCK细胞活性与超微结构的影响

目的 研究麻杏石甘汤对A型流感病毒感染的MDCK细胞活性与超微结构的影响.方法 (1)运用细胞培养技术和MTT法检测麻杏石甘汤预防给药和治疗给药方式下的流感病毒感染的MDCK细胞活性;(2)用透射电子显微镜观察最大无毒限毒的麻杏石甘汤治疗给药方式下的流感病毒感染的MDCK细胞的超微结构.结果 治疗给药方式中,麻杏石甘汤在浓度为31.25 mg/mL时,MDCK细胞活性的0D值显著高于病毒对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),TI为2.78;预防给药方式中,麻杏石甘汤在浓度为15.63、31.25 mg/mL时,MDCK细胞OD值高于病毒对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01),T1为1.71;与病毒对照组比较,麻杏石甘汤治疗给药方式下的MDCK细胞超微结构较完整.结论 麻杏石甘汤在预防给药和治疗给药方式中均能发挥抗流感病毒作用;并能通过抑制病毒增殖的方式而保护流感病毒感染的MDCK细胞活性与超微结构.     

麻杏石甘汤体外抗A型流感病毒作用靶点的研究

目的研究麻杏石甘汤体外抗A型流感病毒的作用靶点。方法运用细胞培养技术、血凝试验和MTT法检测麻杏石甘汤在4种给药方式中对流感病毒血凝滴度和流感病毒感染的MDCK细胞活性的影响。结果在直接灭活病毒作用中,麻杏石甘汤在3.19￣31.25 mg/mL浓度范围内的血凝滴度低于病毒对照组,在15.63￣31.25mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组;在干预病毒吸附作用中,麻杏石甘汤在1.95￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度低于病毒对照组,在7.81￣31.25 mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组;在保护宿主细胞作用中,麻杏石甘汤在3.19￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度低于病毒对照组,在7.81￣31.25 mg/mL时病毒血凝滴度低于利巴韦林组,差异均有统计学意义(P<0.01￣0.05)。在这3种给药方式中,麻杏石甘汤对流感病毒感染的MDCK细胞的治疗指数高于利巴韦林。在抑制病毒增殖的作用中,麻杏石甘汤在7.81￣31.25 mg/mL浓度范围内病毒血凝滴度显著低于病毒对照组,差异有统计学意义(P<0.01￣0.05)。与利巴韦林组比较,检测的麻杏石甘汤5个浓度点的作用不明显,在给药方式中,麻杏石甘汤对MDCK细胞的治疗指数也低于利巴韦林组。结论麻杏石甘汤通过直接杀伤病毒、干预病毒吸附、抑制病毒增殖、保护宿主细胞而发挥抗流感病毒作用,该方直接杀伤病毒、干预病毒吸附和保护宿主细胞的作用优于利巴韦林片,抑制病毒增殖的作用不及利巴韦林片。     

鱼腥草抗流感病毒诱导细胞凋亡的研究

目的 :探讨鱼腥草抑制甲3型流感病毒 (H3N2 )诱导细胞凋亡的作用。方法 :瑞氏染色法光镜下观察狗肾传代细胞 (Madin -Darbycaninekidney ,MDCK)细胞形态学变化并计算凋亡率 ;琼脂糖凝胶电泳比较在有无鱼腥草作用下的甲3型流感病毒作用后的细胞DNA条带差异。结果 :光镜观察表明病毒感染组MDCK细胞出现细胞凋亡所特有的形态学变化 ,且该组细胞凋亡的百分率显著高于其它组 (P <0 .0 1) ;被感染的MDCK细胞DNA琼脂糖电泳呈特征性“梯状条带”[1] ,而鱼腥草作用后的细胞则没有出现。结论 :鱼腥草具有抑制H3N2 诱导细胞凋亡的作用。     

甲型流感病毒H3N2诱导狗肾传代细胞凋亡的研究

目的探讨甲型流感病毒对体外培养的狗肾传代细胞系(MDCK)的凋亡诱导作用.方法用不同血凝单位的甲型流感病毒感染MDCK细胞,经HE染色、琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞术等方法检测凋亡情况.结果甲型流感病毒感染MDCK后,在细胞形态上呈现凋亡特有变化;电泳出现典型梯状条带;Annexin-V染色流式细胞仪检测出在一定范围内,细胞凋亡率与病毒的浓度呈正相关.结论甲型流感病毒能够诱导体外培养的MD-CK细胞凋亡,且在一定范围内,细胞凋亡率与病毒的浓度呈正相关.     

褪黑素对离体培养的小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响

目的:研究褪黑素对体外培养的小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响. 方法:小鼠胸腺细胞体外培养前预先加入不同浓度褪黑素,培养4 h后,应用流式细胞术检测其凋亡小体百分率和细胞周期各时相细胞百分率的变化. 结果:小鼠胸腺细胞培养后其凋亡小体百分率明显升高,为培养前的6.9倍(P<0.001);G0/G1和S期细胞百分率与培养前相比未见明显变化,G2+M期细胞百分率呈增高趋势.预先加入2.0 mmol*L-1 褪黑素可使凋亡小体百分率明显降低(P<0.01),G2+M期细胞百分率明显增高(P<0.05). 结论:褪黑素可以减轻体外培养的小鼠胸腺细胞凋亡,并可诱导细胞发生G2阻滞.     

麻杏石甘汤对流感小鼠肺部炎症与超微结构的影响

目的 观察麻杏石甘汤对流感病毒感染小鼠肺部炎症与超微结构的影响.方法 采用鼻腔接种法建立流感病毒小鼠肺部感染模型.实验设正常对照组、模型对照组、利巴韦林组和麻杏石甘汤组,经灌胃给药或给生理盐水7d后,处理动物,常规方法检测肺重量指数;光学显微镜技术观察肺病理变化;透射电子显微镜技术观察肺组织超微结构.结果 ①与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺指数明显升高(P＜0.05),麻杏石甘汤组小鼠肺指数降低,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);②与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺脏出现明显的病理变化,肺泡、细支气管等正常组织结构消失,肺泡内有大量炎症细胞浸润,麻杏石甘汤组小鼠肺组织病理变化显著改善,偶可见少量炎症细胞浸润;③与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺组织超微结构受到破坏,核膜与质膜模糊不清,细胞浆内细胞器减少,出现空泡样病变,发现病毒颗粒,麻杏石甘汤组小鼠肺组织的细胞超微结构较完整,核膜与质膜清晰可见,细胞器比模型对照组丰富,细胞浆内空泡样病变程度明显低于模型对照组.结论 麻杏石甘汤对A型流感病毒感染所致的肺部炎症与超微结构有改善作用.     

雌激素受体拮抗剂ICI182780(Faslodex)对17β-雌二醇作用下子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182780(Faslodex)对17β-雌二醇(E2)作用下ER阳性的Ishikawa细胞和ER低表达的HEC-1A子宫内膜癌细胞系细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨ICI182780治疗子宫内膜癌的可行性.方法:应用四甲基亚唑蓝(MTT)法、流式细胞技术观察ICI182780对E2作用下的子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响.结果:随着E2浓度的增加和作用时间的延长,子宫内膜癌细胞在570 nm处的光密度值增大,Ishikawa细胞G0～G1期的比例减少,S期的比例增多,HEC-1A细胞各期的比例变化不显著.随着ICI182780的浓度增加,ICI182780可以使E2作用下Ishikawa细胞的光密度值逐渐下降至基础状态水平,并且使其发生细胞凋亡,表现为早期凋亡细胞增多,使细胞G0～G1期的比例升高,S期的比例下降;HEC-1A细胞的上述变化不显著.结论:ICI182780可以抑制E2对Ishikawa细胞的促增殖作用,促使其发生凋亡,同时也使细胞周期停滞在G1期;ICI182780对HEC-1A细胞的增殖、凋亡和细胞周期无明显影响.ICI182780有可能用于ER阳性子宫内膜癌的治疗.     

甲型H1N1流感病毒致宿主细胞脱氧核糖核酸氧化损伤的研究

目的:通过检测DNA损伤标志物8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxo-dG)在甲型H1N1型流感病毒感染MDCK细胞中的表达,初步探讨甲型H1N1型流感病毒诱导细胞凋亡的脱氧核糖核酸(DNA)损伤机制.方法:MDCK细胞培养后.甲型H1N1流感病毒感染继续培养0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h,细胞爬片免疫组织化学方法检测各时间点DNA损伤标志物8-oxo-dG的表达.结果:甲型H1N1流感病毒感染后各时间点实验组MDCK细胞8-oxo-dC的表达均显著高于相应的正常对照组(P<0.05),病毒感染各组间两两比较发现各组间差异显著.结论:甲型H1N1流感病毒感染能造成宿主细胞DNA氧化损伤.     

苯乙酸钠对肺癌A549细胞生长的影响

目的:研究抗肿瘤药物苯乙酸钠(NaPA)对体外培养的人肺腺癌细胞株A549抑制率、细胞周期和凋亡的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪等方法,观察不同浓度NaPA对人肺腺癌A549细胞株生长、细胞周期和凋亡的影响。结果:NaPA对A549有明显的生长抑制作用,且呈剂量时间依赖性,最大抑制率可达79%。NaPA可阻滞A549细胞的细胞周期,使G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡,凋亡率最高可达30.5%。结论:苯乙酸钠抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过NaPA使细胞周期抑制于G1/G0期和诱导细胞凋亡而实现。     

雷公藤内酯醇对皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖与凋亡的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对体外培养的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖与凋亡的影响.方法:以体外培养的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,MTT比色法测定TP对A431细胞株增殖活性的影响,光镜观察细胞形态学的改变,流式细胞仪检测TP作用于A431细胞株后细胞周期的分布及凋亡率的变化.结果:随着TP剂量的增加及作用时间的延长,TP对A431细胞株增殖活性的抑制作用增强,TP不但能够引起细胞形态的改变(漂浮细胞及核固缩现象增多),而且能够诱导A431细胞株凋亡,改变细胞周期的分布,与对照组相比G0/G1期细胞比例增多(P<0.05),S期细胞比例减少(P<0.05).结论:TP通过诱导A431细胞凋亡并抑制其增殖发挥抗肿瘤作用.