可溶性MHCⅡ类分子四聚体的制备及其应用

可溶性MHCⅡ类分子四聚体可被用于计数、分离CD4+T细胞以及分析其生物学性状,而且MHCⅡ类分子四聚体在制备、标记和应用方面显示出与MHCⅠ类分子四聚体明显不同的特点,是探索自身免疫性疾病的发病机理和筛选T细胞肽表位(tetramerguidedepitopemapping,TGEM)时必不可少的工具。     

用竞争结合法检测HLAⅠ类分子抗原呈递能力

目的：建立弱酸处理后荧光素标记肽竞争结合法分析MHCⅠ类分子抗原呈递能力的方法，并评估其实用性。方法：pH2．7～3．1的柠檬酸缓冲液对B淋巴母细胞进行短时处理后，即用IMDM培养液中和pH，然后加入β2微球蛋白、荧光素标记的9肽及竞争肽共同孵育，FACs检测细胞表面的平均荧光强度，以达到50％抑制所需的竞争肽浓度作为衡量竞争肽与MHC分子结合能力的指标。结果：通过不同pH的柠檬酸缓冲液处理、处理后不同时间加β2微球蛋白和，或荧光素标记肽、加入不同稀释度的竞争肽等角度，对方法进行评估，结果显示本方法操作简便、结果可靠、非特异性吸附小。结论：在排除其它MHCⅠ类分子的干扰后，本方法适合在国情条件下广泛开展MHCⅠ类分子抗原呈递能力及T细胞肽表位筛选等研究。     

可溶性MHCⅡ类分子四聚体的制备及其应用

可溶性MHCⅡ类分子四聚体可被用于计数、分离CD4 T细胞以及分析其生物学性状，而且MHCⅡ类分子四聚体在制备、标记和应用方面显示出与MHCⅠ类分子四聚体明显不同的特点，是探索自身免疫性疾病的发病机理和筛选T细胞肽表位(tetramer guided epitope mapping，TGEM)时必不可少的工具。     

MHCⅠ类分子在内质网中的组装研究进展

MHCI类分子在内质网中组装形成肽 MHC复合体。抗原肽主要来自于胞内蛋白 ,在蛋白酶体作用下形成的 8～ 10个氨基酸小肽。内质网中的多个伴侣分子与I类分子相互作用形成肽组装复合体。这些伴侣分子对于Ⅰ类分子的有效组装以及配体的选择均有重要作用。     

基于氨基酸结构信息的MHCⅠ类抗原表位的定量构效关系建模

目的主要组织相容复合物(MHC)在细胞免疫中具有重要作用,MHC与表位亲和力的大小直接影响T细胞免疫响应的强弱,因此准确预测MHC-表位的结合亲和力可以提高表位的筛选效率并且降低实验成本。方法筛选89种天然氨基酸的理化性质用于15个MHCⅠ类分子亚型表位的结构表征,然后使用逐步线性回归(STR)方法优选对亲和力具有重要贡献结构参数建立预测模型,最终用多元线形回归法(MLR)方法建立了15个MHC亚型的QSAR模型。结果建立的QSAR模型具有稳定性高、预测能力强等优点,能确定表位中各氨基酸及其相应理化性质队对亲和力的贡献,并可很好解释MHC与表位的相互作用机理。结论 STR-MLR建模方法具有计算简便、易于解释、性能优异、物化意义明确等优势。     

恒河猴(Macaca mulatta)主要组织相容性复合体及其与SIV/SAIDS疾病进程关系的研究进展

主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物染色体上一组紧密连锁的基因群，人MHC位于6p21．3上，恒河猴MHC定位在6q24上。MHC可分为三大基因群，分别称为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因。MHC编码的糖蛋白称MHC分子，典型的MHCI类分子几乎表达于所有类型的细胞，主要与内源性抗原肽结合并递呈给CD8^＋杀伤性T细胞，导致靶细胞死亡；MHCⅡ类分子主要表达于免疫系统细胞，能够结合外源抗原肽并呈递给CD4^＋辅助性T细胞。它们在针对病原生物的免疫应答中发挥着重要的作用。     

恒定链辅助肿瘤免疫逃逸的研究进展

<正>恒定链(Invariant chain,Ii)属于Ⅱ型跨膜糖蛋白,在MHCⅡ类分子与抗原肽复合物的装配过程中发挥重要作用。在内质网中,Ii在calnexin辅助下形成三聚体,然后与MHCⅡ类分子的α和β链形成九聚体,占据Ⅱ类分子的抗原肽结合槽,阻止内源性抗原肽的结合,与MHCⅡ类分子聚合后将其靶向定位到内体中。此外,Ii还能与MHCⅠ类分子结合,辅助MHCⅠ类分子进行抗原的交叉呈递[1]。早在     

特异性HPV16E7 CTL表位肽-MHC I复合物单抗的制备及鉴定

目的制备抗HPV16E7CTL表位（49-57）-MHC Ⅰ类分子复合物的特异性单克隆抗体，并对其敏感性、特异性及亲和力进行鉴定，为今后研究HPV16感染后机体对病毒蛋白的免疫呈递途径研究奠定基础。方法制备高纯度的HPV16E7 CTL表位（49．57）肽RAHYNIVTF，将其与TAP缺陷的RMA-S细胞孵育后免疫BALB／c小鼠，常规收集小鼠脾细胞与SP2／0细胞融合，筛选杂交瘤细胞株的阳性克隆，并对其进行一系列鉴定。结果筛选出的杂交瘤细胞株能稳定分泌抗HPV16E7（49．57）-MHC Ⅰ类分子复合物的单抗，不仅能与装载有RAHYNIVTF的TAP缺陷的RMA-S细胞结合，也能与具有内源性抗原处理能力的RMA细胞结合，但不能与装载有类似变异肽（进行氨基置换后的RAHYNIVTF）或乙肝病毒对照肽的RMA-S或RMA细胞反应，具有良好的敏感性、特异性及亲和力。结论本实验制备表位肽．MHC Ⅰ类复合物单抗的方法，对今后研究包括HPV16感染在内的病毒感染免疫有很大的临床应用价值。     

MUC1黏蛋白模拟表位的筛选和鉴定

目的从噬菌体表面展示的随机12肽库中筛选出MUC1抗原的模拟表位。方法通过生物淘洗,获得阳性噬菌体克隆,通过基因测序,推导氨基酸序列,同MUC1核心序列比较,选出2个模拟表位,进行抗原表位预测和竞争抑制实验。结果筛选到的两个模拟表位与MUC1单克隆抗体的亲和力均较强,能特异性抑制MUC1的抗原抗体结合,且包含有与某些MHCⅠ类分子较好结合的位点。结论从噬菌体12肽库中筛选出两个MUC1的模拟表位可以作为靶向MUC1肿瘤疫苗的候选肽。     

057 抗原处理相关转运体结构与功能的研究进展

内源性抗原通过MHCⅠ类分子提呈给细胞毒性T细胞(CTL)是机体细胞免疫识别的重要阶段.抗原处理相关转运体(transporter associated with antigen processing,TAP)负责抗原肽从胞浆到内质网的转运,在MHCⅠ类分子的抗原处理及提呈过程中发挥重要作用.TAP结构和功能障碍将导致细胞表面MHC Ⅰ类分子表达缺陷,这成为肿瘤细胞、病毒感染细胞逃逸免疫监视的重要机制.