骨髓增生异常综合征的免疫表型特征分析

 【摘要】　目的　评价免疫表型在骨髓增生异常综合征（MDS）诊断中的价值。方法　采用流式细胞术对27例MDS患者的骨髓细胞进行免疫表型检测。结果　随着MDS疾病的进展,CD+34细胞比例逐渐升高,分别为：难治性贫血／环形铁粒幼细胞性难治性贫血（RA／RAS）7.43 %,难治性贫血伴原始细胞增多（RAEB）36.81 %,难治性贫血伴原始细胞增多转化型（RAEB-T）56.45 %,3组差异有统计学意义（F＝51.197,P＝0.000）,且各组间差异均有统计学意义（P＜0.05）;髓系抗原CD33、CD13、HLA-DR表达逐渐增高,CD14、CD15抗原表达随着疾病的进展逐渐降低,3组间差异有统计学意义（P＜0.05）;B淋巴细胞表面抗原CD19、CD10的表达随着疾病进展而降低;T淋巴细胞表面抗原CD7表达随着疾病进展而增高,分别为RA／RAS 2.63 %、RAEB 10.79 % 和RAEB-T 11.00 %,3组间差异有统计学意义（F＝10.439,P＝0.001）,其中RA／RAS组与RAEB组、RAEB-T组之间差异有统计学意义（P＝0.000,P＝0.001）。结论　检测MDS患者骨髓细胞的免疫表型有助于MDS的诊断、分型和判断预后,从而为治疗提供依据。     

维吾尔族和汉族骨髓增生异常综合征患者细胞形态学及免疫表型的对比分析

 【摘要】　目的　探讨新疆地区维吾尔族和汉族骨髓增生异常综合征（MDS）患者的细胞形态学和免疫表型特征。方法　对已确诊的67例MDS患者骨髓涂片进行系统观察分型,记录各系病态造血细胞,并进行流式细胞术（FCM）免疫表型检测。结果　67例MDS患者骨髓细胞的粒、红、巨核三系有不同程度的病态造血,依次为粒系[52例（77.6 %）]、巨核系[44例（65.7 %）]、红系[36例（53.7 %）],维吾尔族和汉族患者骨髓三系中出现病态造血表现的比例相近,两组差异无统计学意义（χ2值分别为1.02、0.30、0.02,均P＞0.05）。67例骨髓细胞病态造血改变类型的发生率依次为单圆核巨核细胞 [36例（53.7 %）]、假Pelger核异常粒细胞 [36例（53.7 %）]、红系巨幼样变[33例（49.3 %）]、粒细胞颗粒减少或缺失[27例（40.3 %）]等,维吾尔族和汉族患者发生率相似。67例MDS患者FCM免疫表型检测结果显示,随着MDS的难治性贫血／难治性贫血伴环形铁粒幼细胞向难治性贫血伴原始细胞过多（RAEB）／转化中的RAEB的进展变化,较成熟的CD15表达率逐渐降低,而较早期的CD34、CD117表达率逐渐升高（χ2值分别为6.23、12.06,8.95、7.37,8.95、8.08,均P＜0.05）,维吾尔族和汉族患者差异无统计学意义（χ2值分别为0.715、0.024、0.146,均P＞0.05）;同时维吾尔族患者CD56表达增高,汉族MDS患者HLA-DR增高,两组比较差异有统计学意义（χ2值分别为3.91、3.90,均P＜0.05）。结论　维吾尔族和汉族MDS患者骨髓细胞形态学病态造血改变相同,多数MDS有两系以上的病态造血。维吾尔族和汉族MDS患者免疫表型抗原表达部分不同,免疫表型的检测对MDS的诊断、分型及预后具有重要意义。     

儿童急性髓系白血病免疫表型特点分析

目的:分析儿童急性髓系白血病(AML)免疫表型特征,探讨其临床意义.方法:采用四色流式细胞术CD45/SSC双参数散点图设门方法,对127例儿童AML患者幼稚细胞进行免疫表型检测,对抗原表达情况进行分析.结果:在127例儿童急性髓系白血病患者中,髓系特异性抗原CD33、CD13和CD117的表达最常见,分别达95.3%、90.6%、90.6%.造血干/祖细胞抗原CD34、HLA-DR、CD38阳性率分别达53.5%、71.6%和97.6%.有65.4%的病例伴有淋系抗原的表达,其中以CD56的表达最常见占38.6%,其次为CD7占21.3%.有淋系抗原表达(LymAg+)患者早期抗原CD34和HLA-DR抗原表达阳性率明显高于无淋系抗原表达(LymAg-)患者(P<0.05).结论:免疫分型对儿童AML的诊断和不同亚型鉴别具有重要意义.     

世界卫生组织标准在骨髓增生异常综合征诊断分型中的应用

 【摘要】　目的　依据世界卫生组织（WHO）标准对249例骨髓增生异常综合征（MDS）进行诊断分型。方法　根据WHO（2008）标准对249例MDS行细胞形态学、细胞遗传学、免疫表型分析及骨髓病理活组织检查诊断。结果　所有MDS病例外周血成熟红细胞均见有巨大形与椭圆形改变;幼红、幼粒细胞、Pelger样核异常细胞与无颗粒中性粒细胞检出率随分型进展而增高;骨髓发育异常细胞特点及比例随MDS亚型进展而更明显、更高; 经动态随访观察, MDS随分型进展其转急性白血病（AL）率增高（P＜0.05）;148例患者行免疫表型分析,随分型进展髓系特异性抗原（CD33）表达逐渐增加;138例患者行染色体检查,其中异常核型表达53例（38.7 %）,主要见于20q-和+8,复杂异常核型16例（28 %）,其中5q- 2例;180例患者同时行骨髓活组织检查,19例具有形态异常,符合MDS诊断,42例伴有骨髓纤维化。结论　依据WHO标准多指标联合检测MDS有助于更准确的分型及诊断,进行长期追踪随访有助于判断预后。     

骨髓增生异常综合征骨髓细胞淋巴系免疫标志及其增殖特性临床意义探讨

目的：探讨骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞淋巴系免疫标志及其增殖特性的变化和意义。方法：用流式细胞仪(FCM)分析了45例MDS患者和10例良性血液病患者(对照组)骨髓细胞淋巴系免疫标志及其增殖特性。结果：MDS组T细胞标志CD2、CD7。早期B细胞标志CD9。干／祖细胞标志HLA-DR阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05)；RA和RAEB组分别与对照组比较，T系标志CD2、CD7，阳性表达率明显高于对照组(P＜0.05)，HLA-DR明显高于对照组(P＜0.01)，B系标志CD9、CD10、CD19，与对照组无差异(P＞0.05)。随病情进展CD2+表达率明显下降，HLA-DR~+表达率明显升高。在S+G2／M期申CD2+细胞所占比例RAEB较RA明显降低(P＜0.05)，CD7+细胞所占比例RAEB较RA明显升高。结论：MDS骨髓细胞T淋巴系免疫标志和增殖特性异常，表明T淋巴细胞增殖分化受阻，提示细胞免疫功能失调在MDS发病和病情进展中可能起作用。     

新疆地区450例急性白血病的免疫分型研究

 目的　研究新疆地区急性白血病（AL）患者免疫表型分布特点。方法　采用间接免疫荧光法对450例AL患者进行免疫表型分析。结果　106例急性淋巴细胞白血病（ALL）,334例急性髓系白血病（AML）,10例为FAB不能分类的急性白血病（UAL）;ALL中髓系抗原的表达15 %,AML中淋系抗原的表达25 %,表达最频繁的是CD7;研究了295例AL患者MPO mRNA基因表达,81例ALL中有1例表达MPO基因;所有髓系均不同程度地表达MPO基因,9例UAL有6例表达MPO基因;ALL免疫分型特点在汉族和维吾尔族（简称维族）中差异无统计学意义（P＞0.05）,在AML中,汉族髓系抗原的表达率依次为CD33＞CD13＞CD15,维族髓系抗原的表达率依次为CD15＞CD33＞CD14。结论　免疫表型的检测对AL更精确地诊断和分型有重要意义。联合分析AL形态学、细胞化学、免疫学及MPO mRNA表达等特点,对于AL的诊断和指导治疗均有重要意义。     

35例急性白血病免疫表型特征

 目的 分析急性白血病（AL）免疫表型诊断意义并对急性白血病各亚型CD抗原表达进行比较。方法 对35例AL患者进行形态学检查,并用流式细胞仪检测白血病细胞免疫表型。结果 35例AL患者中,形态学分型：急性髓细胞白血病（AML）M1 2例,M2 4例,M3 6例,M4 7例,M5 8例,不能分型AL 1例,急性混合细胞白血病1例,急性淋巴细胞白血病（ALL）L1 4例,L2 2例。免疫表型检查结果在AML各亚型中CD13、CD33、MPO均阳性,CD+34 18例,CD+14 5例。其中2例伴有CD+19,6例ALL患者中,CD19、CyCD79a均阳性,CD+10 4例,CD+20 2例,1例不能分型AL表达CD10、CD19、CD34、CyCD79a诊断为B-ALL,1例混合细胞白血病有淋系和髓系表达,故诊断为混合细胞白血病。结论 白血病免疫表型检测能使AL的诊断率提高,因此对形态无法鉴别的AL,应进一步进行免疫表型检测。     

成年人急性白血病63例免疫分型特点及临床意义

 目的：探讨成人急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点及临床意义。方法：采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术对63例成人急性白血病患者进行免疫表型分析。结果：28例急性髓系白血病(AML)主要阳性表达为：CD33 (89.3%)、CD13（75%）、CD34 (60.7%)。42.9%（12/28）的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7(39.3%)。B细胞系急性淋巴细胞白血病(ALL)22例(62.9%),主要阳性表达为：CD19(100.00%),CD10(77.3%) ,CD22(81.8%);T细胞系ALL13例(37.1%),主要表达CD7(92.3%), CD5(84.6%)。28.6%（10/35）的ALL表达髓系相关抗原,主要是CD13(17.1%) ,CD33(11.4%)。结论：流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型有重要的指导意义。     

儿童与成人急性B淋巴细胞白血病免疫表型的差异分析

目的:对儿童和成人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型存在的差异进行分析,探讨不同年龄段B-ALL分型特征和临床意义。方法:以260例儿童和127例成人B-ALL患者为研究对象,使用流式细胞术对患者初发时骨髓标本进行免疫表型检测,分析抗原表达情况。结果:在全部B-ALL患者中B系抗原阳性率高的抗原有CD19,CD22,CD79a,分别达到了100%,99.73%,99.19%;而成熟B系抗原CD20和cIgM阳性率为31.27%和21.29%,阳性率较低。 CD10的阳性率为94.88%,在成人组和儿童组中存在明显差异,儿童组明显高于成人组(P＜0.05)。造血干/祖细胞抗原CD34、HLA-DR、CD38、cTdT阳性率分别为76.82％、98.38％、98.92％和92.72%,其中儿童患者CD34明显低于成人患者(P＜0.05)。髓系相关抗原CD33、CD13和CD15的表达最常见,分别达20.49％、20.49％、7.01％,其中CD33和CD15在儿童组中阳性率明显低于成人组(P＜0.05)。结论:免疫分型对儿童与成人B-ALL的诊断和微小残留病检测方案选择具有重要意义。     

急性粒-单核细胞白血病的免疫表型及细胞遗传学特征

背景与目的:白血病中某些抗原的表达与细胞遗传学的改变密切相关。本研究旨在探讨急性粒-单核细胞白血病(acutemyelomonocyticleukemia,M4)的免疫表型特征,并分析其与细胞遗传学的关系,为其诊断及治疗提供依据。方法:采用一组系列相关单克隆抗体和三色流式细胞术对81例M4患者进行免疫表型分析,并分析有核型资料的73例患者的核型异常;同时应用双色间期荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)技术对有染色体标本的35例患者进行inv(16)检测,并分析inv(16)阳性患者的免疫表型特征。结果:81例M4患者中48例(59.3%)表达干细胞标志CD34;髓系标志以CD33(84.0%)表达最高,其次为CD13(81.5%)和CD14(24.7%);分别有23例(28.4%)和10例(12.3%)患者表达T系和B系相关抗原。11例M4Eo患者中CD13均阳性,10例CD33阳性,7例CD34阳性,5例CD2阳性。FISH检测发现14例患者inv(16)阳性,其中CD13阳性13例,CD33阳性11例,CD34阳性8例,CD14阳性5例,CD7阳性3例,CD2阳性3例。73例M4患者中,异常染色体检出率为41.1%(30/73),共检出11种主要异常核型。CD2和CD34在染色体异常患者中表达明显增高,而CD14表达减低。CD2在M4Eo中表达增高,但其表达与inv(16)无显著性相关。结论:急性粒-单核细胞白血病以髓系抗原表达为主,CD2和CD34在染色体异常患者中表达明显增高;CD2在M4Eo中表达增高。Inv(16)在M4中占40%,各抗原表达与inv(16)无显著相关性。     

家族聚集性骨髓增生异常综合征/急性髓系白血病家系报道一例并文献复习

目的 探讨家族聚集性骨髓增生异常综合征/急性髓系白血病(MDS/AML)的诊断、临床特点、基因突变及治疗转归.方法 分析1例家族聚集性MDS/AML家系中兄弟患者的骨髓细胞形态学、免疫分型、细胞遗传学、基因突变,对其疗效和转归进行观察,并复习相关文献.结果 先证者在确诊MDS-原始细胞过多难治性贫血Ⅰ型(RAEBⅠ)4个月后进展为AML,其兄在确诊MDS-难治性血细胞减少伴多系病态造血3个月后进展为MDS-RAEBⅡ,生存期分别为5个月和8个月.结论 家族聚集性MDS/AML临床罕见,其诊断需要结合家族史、细胞遗传学、分子生物学等进行综合判断,预后差.     

Flow cytometry evaluation of erythroid and myeloid dysplasia in patients with myelodysplastic syndrome.

The purpose of this study was to develop a flow cytometric approach to the evaluation of marrow dysplasia in myelodysplastic syndromes (MDS). We first studied a cohort of 103 MDS patients as well as 46 pathological and healthy controls. Flow cytometry data were expressed as percentage of positive cells. Analysis of erythroid cells showed higher proportions of immature cells (P < 0.001) and decreased levels of CD71 expression on nucleated red cells (P = 0.02) in MDS. Analysis of myeloid cells showed lower proportions of CD10+ and higher proportions of CD56+ granulocytes (P < 0.001), and increased ratios of immature to mature cells (P = 0.007). Since no single immunophenotype could accurately differentiate MDS from other conditions, we used discriminant analysis for generating erythroid and myeloid classification functions using combinations of immunophenotypic parameters. These functions were prospectively validated in a testing cohort of 69 MDS patients and 46 pathological controls. A diagnosis of MDS was obtained in 60/69 cases (87%). No false-positive results were noticed among controls. Significant correlations between values of these functions and both degree of morphological dysplasia and the International Prognostic Scoring System were found. These findings indicate that flow cytometry evaluation of marrow dysplasia is feasible and may be useful in the work-up of individual MDS patients.     

71例急性白血病免疫表型特征分析及意义

目的:分析急性白血病(AL)免疫表型特点及其临床意义。方法:采用单克隆抗体直接免疫荧光标记法的流式细胞术,对71例AL进行免疫表型检测。结果:71例AL患者以系列专一型表达为主,同时亦存在抗原交叉表达、不表达特异性抗原及混合型等情况。AL患者CD34和HLA蛳DR表达分别占56.3 %和61.9 %,M3患者均不表达HLA蛳DR。My+ALL患者完全缓解(CR)率(60.0 %)低于My - ALL患者CR率(80.6 %),两组相比有显著性差异(P<0.05)。CD+34 ALL与CD蛳34 ALL患者缓解率基本相同;CD+34 AML患者CR率(58.3 %)明显低于CD蛳34 AML患者CR率(88.9 %),两组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:白血病免疫表型检测结合FAB分型可以提高诊断的准确率,部分免疫表型特征对判断预后有一定的意义。     

CD45设门多参数流式细胞术在急性白血病免疫表型分析中的应用

目的：分析急性白血病的抗原表达及其临床意义。方法：采用一组系列相关单抗直接免疫荧光标记CD45设门的多参数流式细胞术,检测35例急性白血病患者的免疫表型。结果：11例ALL中B－ALL8例,T－ALL3例,其中出现髓系抗原表达4例,占36．4％,CD34表达10例,占90．1％;24例AML中伴淋系抗原表达7例,占29．17％,CD34表达16例,占70．8％,DR的表达与CD34一致,5例M3患者均无CD34和HLA DR表达。伴髓系统原表达的ALL CR率低于髓系抗原阴性表达者（1／3及5／6）,但统计学上差异无显著性（P＞0．05）;伴淋系抗原表达的AML患者CR率明显低于淋系抗原阴性表达者（0／5及10／10）,两组间差异具有显著性（P＜0．01）。结论：CD45设门的多参数流式细胞术是分析白血病免疫表型的最好方法,白血病抗原的错义表达是预后不良的因素之一。     

Over-Expression of Cancerous Inhibitor of PP2A (CIP2A) in Bone Marrow Cells from Patients with a Group of High-Risk Myelodysplastic Syndromes

Cancerous inhibitor of PP2A (protein phosphatase 2A) (CIP2A) is an inhibitor of PP2A, a phosphatase and tumor suppressor that regulates cell proliferation, differentiation, and survival. The aim of this study was to investigate whether CIP2A plays a role in the progression of myelodysplastic syndromes (MDS). Immunohistochemical analysis revealed that a fraction patients having refractory anemia with excess blasts (RAEB)-1 (4 out of 12) and RAEB-2 (10 out of 14) exhibited significant expression of CIP2A in bone marrow hematopoietic cells, while all patients with refractory cytopenia with unilineage or multilineage dysplasia (RCUD/RCMD) (0 out of 18) and the control group (0 out of 17) were negative. CIP2A was mainly expressed by the MPO-positive myeloid series of cells and partly by the CD34-positive cells in association with the expression of phosphorylated c-MYC (p-c-MYC) protein and the cell cycle-related proteins Ki-67, MCM2, and geminin. The percentage of p-c-MYC-positive cells in the bone marrow of CIP2A-positive MDS cases was significantly higher than that in CIP2A-negative MDS cases (P?<?0.01). The expression levels of mRNA for CIP2A and PP2A exhibited positive correlation in MDS/control bone marrow. These results suggest that up-regulated expression of CIP2A might play a role in the proliferation of blasts in the MDS bone marrow and in disease progression in at least some cases.     

小儿急性白血病免疫表型和骨髓细胞DNA含量及其相互关系的分析

目的　了解小儿急性白血病（ＡＬ）的免疫表型、异倍体、细胞周期分布状况及其之间的关系。方法　应用流式细胞仪检测了４２ 例初诊为ＡＬ患儿的免疫表型及骨髓单个核细胞（ＭＮＣ）的ＤＮＡ含量。结果　４例ＡＬ患者同时表达了Ｂ系和髓系的抗原，预后差。ＡＬ患儿骨髓细胞周期的Ｓ期细胞百分率明显低于正常对照。而且，ＡＬＬ组中，亚二倍体患者的Ｓ期细胞百分率均值与超二倍体患者、二倍体患者比较存在显著差异性，ＡＮＬＬ组中，ＣＤ３３ ／ＣＤ１３ ＜ １ 患者的Ｓ期细胞百分率均值与ＣＤ３３ ／ＣＤ１３ ＞ １ 患者比较亦存在显著差异。结论　ＡＬ患儿的免疫表型、倍体关系、细胞周期及其之间的关系，与临床预后密切相关。     

免疫表型及FCSS在骨髓增生异常综合征中的应用

目的：探讨骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）患者免疫表型特点及预后,以及流式细胞术积分系统（flow cytometric scoring system,FCSS）在MDS中的应用.方法：回顾性分析2006年至2012年根据FAB及WHO标准诊断为MDS的1 12例患者.采用多参数流式细胞术（multiparameter flow cytometry,MFC）研究其免疫表型改变,分别对幼稚细胞群、成熟粒细胞群、单核细胞群及有核红细胞进行分析,并对这些患者进行随访及生存期分析.结果：幼稚细胞群异常表达CD7占20.54％,成熟粒细胞群CD13/CD16结构关系异常占57.14％,单核细胞群CD56异常表达占21.43％,根据FCSS进行分组,各分组之间中位总生存期（mOS）存在显著差异,并且随着FCSS积分的增加,生存期显著缩短.结论：免疫表型异常对MDS的诊断及预后评估有重要意义,FCSS标准作为一种量化的流式细胞术积分系统,可以对MDS的诊断及预后评估起重要作用.