原癌基因c-jun、c-fos 在小鼠胚泡着床前后的表达

为了解胚泡着床前后ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ表达的动态变化。采用逆转录聚合酶链反应方法检测小鼠子宫内膜原癌基因ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ的表达。结果表明：（１）小鼠正常内膜有一定的ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ基因的表达；（２）胚泡着床前（孕３天）的内膜ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ基因的表达明显高于正常内膜（Ｐ＜０．００１）；（３）着床后，孕５与孕７天内膜ｃ ｆｏｓ、ｃ ｊｕｎ基因的表达低于着床前，至孕７天已低于正常水平（Ｐ＜０．００１）。提示原癌基因ｃ ｊｕｎ、ｃ ｆｏｓ与小鼠胚泡着床有关。     

转化人胚肌腱细胞的体外培养及生物学特性研究

目的 研究经ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒转化的人胚肌腱细胞的生物学特性,探讨细胞生长特性与体外培养条件改变的关系,方法 取人胚肌腱细胞和经ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒转化的人胚肌腱细胞,进行体外培养,对细胞进行形态学,超微结构及一般特征的观察。在不同培养条件下进行生长曲线绘制,平板克隆实验和软琼脂培养以及免疫组织化学法胶原染色,结果 在正常培养条件下,人胚肌腱细胞和转经人胚肌腱细胞的生长性状几乎无差异,且冻存复苏并不     

单细胞微阵列比较基因组杂交技术在胚胎植入前遗传学筛查中的应用

目的 建立利用单细胞微阵列比较基因组杂交(array CGH,aCGH)技术进行胚胎植入前遗传学筛查(PGS)技术平台,并应用aCGH技术进行PGS获得持续妊娠. 方法 采集废弃胚胎来源卵裂球10个,核型正常男性(46,XY)淋巴细胞3个,通过单细胞全基因组扩增后,利用aCGH技术进行染色体非整倍体分析;在此基础上,将aCGH技术应用于临床一例反复流产患者. 结果 3个淋巴细胞及9个废胚来源卵裂球的全基因组扩增成功,1个废胚来源卵裂球扩增失败,扩增成功的样本通过aCGH检测后均获得明确的诊断,3个淋巴细胞分析结果与已知核型一致;临床病例5个胚胎活检的单卵裂球均得到明确诊断,移植1枚正常整倍体胚胎后获得临床持续妊娠. 结论 在胚胎植入前遗传学筛查中,单细胞aCGH技术能全面地评估胚胎染色体组情况,可应用于临床PGS.     

ptsA58H质粒转化人胚腱细胞的生物学特性研究

目的 研究经ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒转染的转化人胚腱细胞的生物学特性及致瘤性。方法 体外培养转化人胚腱细胞，对细胞进行形态学、超微结构及一般特征的观察。绘制细胞生长曲线，平板克隆实验检测克隆形成率，软琼脂培养，植入鼠体内观察有无致瘤性，Ｂｒｄｕ标记细胞，检测细胞植入体内的转归及细胞的分泌功能。结果 转化人胚腱细胞能４长期传代，增殖能力强，在软琼脂中不生长，接种裸鼠不致瘤。且在裸鼠体内细胞存活，增殖能力旺     

成人型多囊肾病的基因诊断

应用人１６号染色体上α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ（Ｄ１６ｓ８５）为探针，对三个成人型多囊肾病（ＡＰＫＤ）家系进行限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）连锁分析，结果三个家系均对α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ提供信息，并对家系３中一成员成功地进行了症状前诊断，确定该成员（１０岁）携带致病基因的风险为５％。说明α－珠蛋白基因３’ＨＶＲ探针可用于中国人群中ＡＰＫＤ的症状前诊断和产前诊断，同时证明此法是目前成人型多囊肾病症状前诊断和产前诊断最有效的手段。     

ptsA58H质粒体外转染人胚肌腱细胞生长特性的研究

目的 探讨电穿孔法将ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒体外转染人胚肌腱细胞（ＨＥＴＣ）的条件，转化人胚肌腱细胞（ＴＨＥＴＣ）体外培养的生长特性。方法 体外分离培养ＨＥＴＣ，电穿孔法导入ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒，并经潮霉素Ｂ筛选，获得阳性克隆，扩增后建立ＴＨＥＴＣ系。体外传代培养，冻存，复苏ＴＨＥＴＣ，并分别绘制ＨＥＴＣ和ＴＨＥＴＣ在不同培养条件的生长曲线。结果 通过潮霉素Ｂ０￣１０００ｍｇ／Ｌ终冻度梯度的培养，选择２０     

常染色体显性遗传型多囊肾病常用的基因诊断技术

随着现代分子生物学研究的不断深人,基因诊断技术为常染色体显性遗传型多囊肾病（ａｕｔｏｓｏｍａｌ ｄｏｍｉｎａｎｔｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ　 ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ, ＡＤＰＫＤ）的防治研究带来了生机,尤以致病基因的检测定位和疾病的早期诊断（包括症状前和产前诊断）最引人瞩目。 基因连锁分析是最早运用于该领域的分析诊断方法。连锁分析（ｌｉｎｋａｇｅａｎａｌｙｓｉｓ）是研究与某一性状连锁的遗传标记在家系中的遗传分离方式,包括连锁平衡分析和连锁不平衡分析法。后者常发生在某一标记基因与致病突变基因连锁紧密的…     

不同胚龄人神经干细胞的分离和培养

目的 探索不同胚龄人神经干细胞分离和培养的适宜条件。方法 在多种培养条件下，采用无血清培养和单细胞克隆技术，从7周和13周人胚脑中分离和培养神经干细胞，应用免疫荧光染色予以鉴定。结果 从两个不同胚龄的人胚脑中分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，未包被组7周的人胚脑除高密度县浮培养法生长不良，其它密度及培养法均有克隆球形成；13周的人胚脑仅中等密度悬浮培养法及高密度贴壁培养法有克隆球形成；包被组各种密度培养均生长不良。结论 人胚脑中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞，随着胚龄增大，培养难度逐渐加大，高密度贴壁培养法适宜各胚龄神经干细胞的分离培养。     

肠系膜静脉血栓形成诊治进展

肠系膜静脉血栓形成诊治进展李基业肠系膜静脉血栓形成（ＭｅｓｅｎｔｅｒｉｃＶｅｎｏｕｓＴｈｒｏｍｂｏｓｉｓＭＶＴ）是一种临床罕见的腹部血管闭塞性疾病。本病的临床症状及体征尚无特异性表现，故很难在术前或死前明确诊断，更难做到早期诊断和治疗。由于上述原因，...     

胆道介入的诊断与治疗

胆道介入的诊断与治疗陈清圣自１９７４年Ｏｋｕｄａ使用细针经皮肝穿胆道造影（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｈｅｐａｔｉｃｃｈｏｌａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ，ＰＴＣ）以来，ＰＴＣ一直是临床胆道外科手术前有用的诊断方法。然而，随着新一代侵入性或少侵入性影像...     

WO-1对成骨细胞的生物学效应研究

目的 了解WO-1在体外环境中对人成骨细胞增殖、分化的影响，为骨组织工程学研究提供更多的方法。方法 采用培养人胚成骨细胞，以生长曲线和。HTdR法分析WO-1与成骨细胞生物学效应的量效关系，在最佳作用浓度下，以接种细胞克隆形成率，流式细胞技术分析细胞周期，透射电镜观察细胞形态学，了解WO-1对细胞活性和细胞增殖的影响；以ALP活性检测，^3H-Proline掺入实验，放射免疫法测骨钙素合成及I型胶原和骨钙素mRNA的表达等，从蛋白质和mRNA两个水平观察WO-1对细胞功能的影响。结果 WO—1在高浓度时对人胚成骨细胞增殖有抑制作用，低浓度时对人胚成骨细胞增殖有促进作用，最佳作用浓度8μg／ml，在0．25～8μg／ml浓度范围内存在量效关系。在8μg／ml WO-1作用下，实验组人胚成骨细胞接种克隆形成率增加，克隆体积增大；群体倍增时间明显缩短，电镜下见细胞器较对照组发达；而ALP活性、I型胶原合成、骨钙素合成等，在蛋白质及mRNA两个水平均有增加，且与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 低浓度WO-1，可促进体外培养的人胚成骨细胞活性及增殖，加强细胞合成I型胶原、骨钙素等基质的功能，可用作成骨细胞增殖及分化的促进剂。     

临床病理讨论（五）

临床病理讨论（五）病历摘要患者男，４７岁，工人。因四胚无力、颈痛进行性加重３个月，于１９８９年５月６日入院。人院前３个月始左髋痛，渐加重，甚至疼痛难忍。曾于某医院诊断为“腹股沟淋巴结炎”抗生素治疗。一周后出现四肢无力，双下肢步行困难。颈椎Ｘ线检查，报...     

肾移植后血清白细胞介素2、可溶性白细胞介素2受体和白细胞介素6的监测

动态监测６０例肾移植患者术后２个月内血清白细胞介素２（ＩＬ－２）、可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）和白细胞介素６（ＩＬ－６）的变化。结果发现发生急性排斥反应时，上述细胞因子的升高较临床诊断提早数天，并且显著高于环孢素Ａ肾中毒组；对甲泼尼龙敏感的排斥反应，抗排斥治疗数天后上述因子下降到排斥前水平。提示肾移植术后动态监测患者血清ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－６有助于急性排斥反应的早期诊断、鉴别诊断、及时治疗和甲泼尼龙抗排斥的疗效评价。     

应用ras基因突变检测诊断胰腺癌

为提高胰腺癌的早期诊断率，作者采用多聚酶链反应－限制性酶切片段长度多态性技术，对６８例怀疑胰腺及其邻近器官有占位性病变的患者行细针穿刺活检，标本进行ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测，应用于胰腺癌的临床诊断。结果显示：４４例胰腺癌中４２例有ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变，阳性率达９５．４％，而２４例慢性胰腺炎、壶腹癌、胰岛素瘤等均无ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变。本研究结果提示胰腺ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子突变检测是诊断和鉴别诊断胰腺癌的有效方法。     

股骨头骨折漏诊一例

××，女，２０岁，于１９９１年１月１７日急诊入院。患者２小时前骑单车赶路上班时，突然被一辆人货车从右侧面撞倒，左膝跪地，单车压在左大腿及臀部上，当时左髋关节呈屈曲、外展、外旋位俯于地面上，不能站立。检查：左下肢呈外旋缩短畸形，大粗隆向后上移位４ｃｍ，达Ｎｅｌａｔｏｎ线之上，臀部隆起可触及半球状硬块，被动活动髋关节时引起剧痛及肌肉痉挛，左膝肿胀，胫骨上段骨擦音（＋），髋、膝关节活动受限。Ｘ线片示：左股骨头位于髋臼外上方，股骨头内未见明显密度增高影，胚骨平台粉碎性骨折，胚骨嵴撕脱分离。诊断：①左髋关…     

人胚植入的生物化学

人胚植入的生物化学ＰａｕｌＢｉｓｃｈｏｆ植入和胎盘形成赖于一基本生物学过程：滋养层入侵。滋养层入侵对我们生命的延续至关重要。滋养层的入侵将导致子宫内膜螺旋动脉性状的改变（降低肌肉弹性强度），这样就确保了快速生长的胚胎－胎盘体有充足的血液供应（Ｂｌａｎ...     

GnRH及其受体与前列腺癌

促性腺激素释放激素（Ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ　ｈｏｒｍｏｎｅ，ＧｎＲＨ）亦称为黄体激素释放素（Ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ　ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ，ＬＨＢＨ），是一种含十个氨基酸的肽类激素，于１９７１年由美国人Ｓｃｈａｌｌｙ和 Ｇｕｉｌｌｅｍｉｎ首先从猪的下丘脑分离并提纯［１］。其最重要的生理功能是作为生殖系统的一种关键性神经调节物质，由下丘脑神经内分泌细胞合成，经下丘脑．垂体一门脉循环进入垂体前叶，在垂体前叶内，ＧｎＲＨ作用于促性腺激素分泌细胞，刺激ＬＨ和…     

直肠癌K－ras基因突变检测及临床意义

我们采取聚合酶链式反应技术（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅｅｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性分析法（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｙｓｍｓａｎａｌｙｓｉｓ，ＲＦＬＰｓ）对３６例直肠癌患者的癌组织、肉眼观察“正常”的癌旁远端２ｃｍ肠组织和降结肠切端正常粘膜组织，进行Ｋ－ｒａｓ基因１２位密码子（ｃｏｄｏｎ）点突变的基因检测，证明基因突变是癌变发生的早期行为，为临床早期诊断和确定合理的手术治疗方案提供依据。     

人胃癌鸡胚移植模型的建立及其肿瘤生物学研究

目的 建立人胃癌鸡胚移植模型，为胃癌研究提供一种简便实用的手段。方法 将人胃癌细胞系SGC-7901细胞接种到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上，动态观察移植瘤的形态学及肿瘤生物学特性，分析影响移植瘤成活的因素，并对瘤组织行组织学检查。结果 成功建立了人胃癌鸡胚移植模型，移植瘤组织学结构与人胃癌相似；接种癌细胞数量影响接种成瘤率，癌细胞数量越大，成瘤率越高；移植瘤可诱发大量血管生成并向肿瘤呈放射状集中。结论 将SGC-7901细胞接种到鸡胚上建立鸡胚移植胃癌是可行的，本模型可动态观察胃癌生长，模拟其在体内生长情况，为胃癌研究提供一种简便实用的手段。     

特发性肢端溶骨症1例报告

特发性肢端溶骨症１例报告吕玉江，嵇建中特发性肢端溶骨症（ＩｄｉｏｐａｔｈｉｃＡｃｒｏｏｓｔｅｏｌｙｓｉｓ）罕见，我们遇到１例，报告如下：患者，女，２９岁，农民。因右拇指破溃３个月，红肿１个月于１９８６年７月２日入院。３个月前无诱因右拇指未端起一黄豆大...