冬虫夏草中核苷类成分的毛细管区带电泳定量分析研究

目的:建立冬虫夏草中核苷类成分(腺苷、鸟苷、尿苷和次黄嘌呤核苷)的毛细管电泳定量分析方法,研究青海产天然冬虫夏草和人工发酵虫草菌粉的核苷类成分差异。方法:采用0.025mol·L^-1硼砂缓冲液,pH9.5,工作电压为20kV,毛细管温度25℃,波长检测260nm,对4种核苷定量分析。结果:用毛细管区带电泳法定量分析冬虫夏草及人工发酵虫草菌粉中的腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷,平均加样回收率分别为98.9%,95.1%,97.8%和98.8%,RSD分别为0.4%,1.7%,1.3%和5.0%。在天然冬虫夏草中未检测到腺苷,而在人工发酵虫草菌粉中未检测到次黄嘌呤。结论:本研究方法可满意地用于腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷的定量分析。青海产地道药材冬虫夏草核苷类成分组成与人工发酵虫草菌粉有明显差异。     

冬虫夏草不同部位核苷类成分比较分析

目的：建立一种同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素5种核苷类成分含量的高效液相色谱法。方法：ZORBAX SB-Aq（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长260 nm,柱温30℃,流速0.8 mL·min-1。结果：对6批冬虫夏草样本子座、虫体和全草的核苷类成分进行了分析,结果发现冬虫夏草子座核苷类成分含量高于虫体和全草。结论：该方法重复性好,准确性高,可用于冬草夏草中核苷类成分的含量测定。     

冬虫夏草水提取过程中腺苷转化途径研究

目的:通过比较分析不同条件下冬虫夏草中7个核苷类成分的含量变化,探究冬虫夏草药材在水提过程中腺苷的转化途径。方法:首先建立冬虫夏草中7个核苷类成分(三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、单磷酸腺苷、腺苷、肌苷、次黄嘌呤和腺嘌呤)的高效液相定量分析方法,并用所建立的分析方法比较不同提取方法和水提取添加对照品前后各相关成分的含量。结果:发现不同提取方法对冬虫夏草腺苷含量具有显著影响,冬虫夏草在室温水提取条件下腺苷酸(三磷酸腺苷、二磷酸腺苷和单磷酸腺苷)可以转化为腺苷,腺苷可以转化为肌苷。结论:研究结果说明了冬虫夏草在水提过程中的腺苷转化途径,为冬虫夏草腺苷类成分的质量控制提升提供数据支持。     

冬虫夏草发酵菌丝体中主要核苷及核酸碱基的HPLC测定

采用HPLC法测定四种人工培养冬虫夏草发酵菌丝体产品中六个核苷及碱基成分。着重对其中的腺苷成分作了提取溶剂比较及回收率试验等。采用水为提取溶剂,提取效率较50%乙醇为高;水中加入0.1％叠氮钠,既能防腐,又对样液中核苷成分起稳定作用。超声波室温下提取,加样回收率为99.8%。     

毛细管电泳法测定青海不同产地冬虫夏草核苷类的含量

 目的通过毛细管电泳的方法,寻找青海省不同产地之间冬虫夏草的核苷类含量变化。方法采用Beckman P/ ACE^TMMDQ高效毛细管电泳仪,熔融石英毛细管57cm×75μm,有效长度50cm,自动压力(500 kPa)进样5s,检测波长254 nm,分离电压20 kV,温度25℃,运行缓冲液为0.2 mol/·L^-1硼酸(用5 mol·L^-1氢氧化钠溶液调pH 8.5)。进样前,毛细管分别以1mol·L^-1氢氧化钠溶液和运行缓冲液冲洗5 min。结果该方法快速简便,青海省不同产地间冬虫夏草核苷类成分含量有一定的差异。结论本方法能有效鉴别天然冬虫夏草中的核苷类成分,而冬虫夏草化学成分与生态因子的相关性还需要进一步研究。     

高效液相色谱定量分析比较4种虫草药材的核苷类成分

为比较4种常见虫草类药材(冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体和蝉花)中核苷类成分的差异,该研究以0.5%磷酸溶液提取样本,色谱柱为Zorbax SB-Aq(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.8 m L·min-1,检测波长260 nm,柱温30℃,对4类药材产品进行分析。已知核苷以外标一点法进行计算,未知成分以腺苷为对照进行计算,并对测定结果进行聚类分析,同时利用指纹图谱相似度软件对不同样本进行了比较。结果显示,冬虫夏草、蛹虫草、虫草菌丝体、蝉花4种药材中的核苷类成分差异较大,聚类分析和指纹图谱分析均可有效区分冬虫夏草和其他3种虫草药材。该研究建立的核苷测定方法准确可靠,可用于虫草类产品的品质评价。     

虫草保健品中13种核苷类成分的UHPLC-ESI-MS/MS定量分析及评价

目的:对香港和大陆市场上销售的8种常见虫草保健品进行核苷类成分的定量分析及评价。方法:采用冰浴超声提取法与UHPLC-ESI-MS/MS分析法,快速检测虫草保健品中的13种核苷类成分。结果:虫草保健品中被测核苷类成分的含量明显高于天然冬虫夏草药材。这些保健品绝大部分组成为冬虫夏草菌丝体粉,而并非是由天然冬虫夏草经直接粉碎加工而成。结论:通过对13种核苷类成分的含量测定,比较市场上以虫草药材或虫草菌丝体为原料制备的保健品质量,可以反映部分已经上市销售的虫草类保健品在核苷类成分种类及含量之间的差异性。     

人工虫草与冬虫夏草成分的比较研究

目的比较人工北虫草、发酵虫草菌粉和冬虫夏草中,核苷及碱基类成分、甘露醇及麦角甾醇的含量,为开发利用虫草的药用价值提供理论依据。方法采用RP-HPLC法测定虫草中核苷及碱基类成分,采用HPLC-ELSD法分析虫草中甘露醇的含量,采用RP-HPLC法分析虫草中麦角甾醇的含量。结果 11批冬虫夏草中核苷及碱基类成分(尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷和虫草素)的平均含量分别为0.008 0、0.738 8、0.251 1、0.200 6、0.003 7、0.229 4、0.005 0 mg/g。10批人工北虫草中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.012 3、0.110 0、0.081 2、0.648 0、0.001 6、0.071 5、0.699 9 mg/g,12批发酵虫草菌粉中核苷及碱基类成分的平均含量分别为0.017 0、1.057 1、0.127 9、0.944 8、0.009 7、1.232 8、0.029 0 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中甘露醇的平均含量分别为88.66、44.23、17.40 mg/g;冬虫夏草、人工北虫草、发酵虫草菌粉中麦角甾醇的平均含量分别为1.723 8、5.123 3、5.321 9 mg/g。结论人工北虫草、发酵虫草菌粉含有与冬虫夏草相似的主要活性成分,但人工虫草与冬虫夏草中各种活性成分的含量存在差异。     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

冬虫夏草中核苷类化学成分的含量测定研究进展

通过检索、阅读文献,分析与归纳文献内容,综述近年来冬虫夏草中核苷类物质的的含量测定研究进展。包括HPLC法、毛细管电泳法、薄层色谱扫描法,以上含量测定方法各有特点,均可用于冬虫夏草中核苷类物质的含量测定。     

冬虫夏草及人工菌丝体的核苷类成分的HPLC研究

冬虫夏草 Cordycepssinensis( Berk) Sacc.为麦角科虫草属的药用真菌 ,为冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科虫草蝙蝠蛾 H epialus armoricanusOberthus等幼虫尸体的复合体 ,具有广泛的药理作用。核苷类成分为虫草有效成分之一 ,具有扩张心脏和外周血管的药效作用 ,其中尤以腺苷的作用为显著 [1～ 3 ]。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版对冬虫夏草中腺苷规定 ,不得少于 0 .0 1 0 %。目前核苷类分析方法有 HPLC法[4～ 6] 、薄层色谱法[7,8] 、高效毛细管电泳法[9～ 11] 等。高效液相色谱法主要针对单个指标进行评估 ,如以腺苷为指标作含…     

基于特征图谱及多指标成分含量的冬虫夏草野生与人工繁育品比较研究

采用高效液相色谱法建立冬虫夏草野生及人工繁育品的特征图谱,并同时测定4种主要核苷的含量。以尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷等4种成分为对照品,采用Waters XSelect HSS T3 C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,0%B;5~15 min,0~10%B,15~30 min,10%~20%B;30~33 min,20%~50%B;33~35 min,50%~0%B;35~40 min,0%B),流速0.6 mL·min~(-1),检测波长为260 nm,柱温30℃,进样量5μL,建立冬虫夏草野生品和人工繁育品的特征图谱,并同时测定4种主要核苷的含量。冬虫夏草人工繁育品和野生品之间特征图谱和4种主要核苷含量均无显著性差异,该研究能够为冬虫夏草人工繁育品的进一步开发利用提供科学依据。     

人工蛹虫草核苷类成分的超声提取工艺优化研究

目的:探讨超声提取法在人工蛹虫草核苷类物质提取中应用的可行性。方法:利用正交设计法对人工蛹虫草核苷化合物的超声提取工艺进行了优化,用高效液相色谱法测定了主要活性成分虫草素的含量。结果:人工蛹虫草核苷类成分的最佳超声提取条件为:1.0 g干燥样品中加入20 m l,室温下超声30 m in,该过程重复提取两次,合并提取液。测得虫草素的含量为0.0197%。结论:该方法具有提取时间短、成本低、不破坏活性成分等优点,具有很好的应用前景。     

商品冬虫夏草的品质评价

冬虫夏草是一种珍贵的滋补类中药物,近年来其需求量不断增大,而市场供求关系的不平衡导致了冬虫夏草药材品质的混乱。本文就收集到的各主产区冬虫夏草的性状及品质评价进行介绍,以期为该药物的有效应用提供参考。     

UPLC-Q-TOF-MS结合代谢组学分析冬虫夏草不同部位的差异性

目的:利用高分辨质谱结合代谢组学方法研究冬虫夏草不同部位化学成分差异及其与品质间的关联。方法:建立虫草类中药材化学成分数据库,采用UPLC-Q-TOF-MS对虫草子座、头及虫体3个部位及全虫样品进行数据采集,将结果导入Peak View软件,结合软件的Formula Finder,Mass Calculators,Fragment Matching功能及二级碎片裂解规律进行定性分析;将定性结果建立已知成分筛查表,并逐个提取分段样品离子强度,代入SIMCA-P软件中,进行可视化处理,构建PCA及PLS-DA数学模型。结果:冬虫夏草醇提样品中共找到了六类23个化合物,从子座、头及虫体中鉴定出11个差异性化合物,以脂肪酸及其衍生物居多,其中8个化合物为首次在冬虫夏草中发现;运用SIMCA-P11.5软件构建PCA及PLS-DA数学模型,分析结果显示子座所含成分与头及虫体有明显差异,按照对分类起作用强弱,依次为氨基酸、脂肪酸、维生素、生物碱、核苷及糖苷类。结论:该方法的建立为冬虫夏草药效学物质基础阐明及冬虫夏草品质形成机制提供了科学参考,并为冬虫夏草药材的快速鉴定、质量控制与深入地开发利用奠定了基础。     

泰山虫草菌丝体与天然冬虫夏草化学成分初步分析

目的:与天然冬虫夏草做对比,对泰山虫草菌丝体的多糖、水溶性蛋白、核苷类成分及无机元素进行了分析。方法:采用硫酸-苯酚法、Folin-酚试剂法、双波长薄层扫描法、原子吸收分光光度法、凯氏定氮法及荧光光谱法测定了上述各成分的含量。结果:泰山虫草菌丝体中多糖的含量为3.14%,低于冬虫夏草中多糖含量(5.89%);水溶性蛋白的含量二者相当,分别为0.795%和0.783%;泰山虫草菌丝体中核苷类成分腺苷、尿苷、次黄嘌呤核苷和次黄嘌呤含量分别为0.230%、0.908%、0.515%和0.097%,明显高于冬虫夏草中核苷类成分的含量,分别是冬虫夏草的8.21、3.75、11.7、5.7倍;钙、铁、锌、硒和锰微量元素的含量分别为100、53.6、12.2、0.12和1.50μg/g,其它无机元素氮、磷、镍的含量高于冬虫夏草样品,铝、汞等有害元素含量接近或低于冬虫夏草样品。结论:泰山虫草菌丝体中富含多糖、蛋白质、核苷类成分及微量元素等营养物质,尤其泰山虫草菌丝体中主要有效成分核苷类成分明显高于冬虫夏草,是很有开发利用价值的食品或药物新资源。     

人工蛹虫草中核苷类化学成分的研究

目的：研究人工蛹虫草Cordyceps militaris中核苷类化学成分。方法：建立人工蛹虫草中核苷类化合物的提取方法并用色谱水法分离各个核苷类化合物。结果：分离鉴定了4个化合物，分别是尿嘧啶核苷（1）、腺嘌呤核苷（2）、鸟嘌呤核苷（3）和酪氨酸（4）。结论：从核苷类物质分析来看，该人工蛹虫草菌丝体中核苷类物质含量丰富，主要为化合物1、2、3，三者总和约占菌丝体干重的1．3％。     

HPLC法测定北冬虫夏草和常见食用菌中腺苷和虫草素

目的 建立一种HPLC法快速测定北冬虫夏草和几种常见食用菌中腺苷和虫草素的方法.方法Welch Material XB-C18色谱柱(250mm×4.6mn,5μm),以水-甲醇(85∶15)为流动相,体积流量1.0mL/min,检测波长258 nm,柱温40℃.结果腺苷在0.023 2～0.464 0μg、虫草素在0.030 0～0.600 0μg与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为98.97％、99.15％,RSD分别为1.41％、1.01％.结论腺苷普遍存在于各种食用菌子实体中,而虫草素是虫草属真菌子实体中的特有活性成分.本法简便快速,为全面评估北冬虫夏草中核苷类成分的质量,推进人工培育北冬虫夏草替代野生冬虫夏草提供检测方法.     

鹿鞭商品药材中核苷类成分分析

目的:比较不同品种与商品地的鹿鞭药材中5种核苷类成分的含量,同时探讨5种核苷类成分含量对总核苷含量的影响程度.方法:采用HPLC法分别测定9个鹿鞭商品中腺苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量;应用逐步回归分析方法,得到5种核苷类成分含量对总核苷含量影响程度的最优方程.结果:不同样品的5种核苷类成分及总核苷含量均有一定差异,其中以黄嘌呤含量对总核苷含量影响最为显著.结论:黄嘌呤含量为标示鹿鞭药材中总核苷含量的最佳指标,可用于该药材中总核苷类成分含量的测定指标.     

冬虫夏草化学成分研究进展

冬虫夏草是我国的名贵中药材,是冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫的子座及幼虫尸体的复合体.含有氨基酸、核苷、多糖、甾醇及甘露醇等多种活性成分,另外还含有脂肪酸、挥发油以及无机元素等多种成分.对近年来国内外关于冬虫夏草化学成分的研究进行综述.