中药HPLC指纹图谱相似性研究的探讨

目的探讨中药HPLC指纹图谱相似性评价中药质量的几个相关问题。方法建立中药HPLC指纹图谱相似性方法 ,包括色谱条件建立 ,系统适用性试验 ,稳定性考察 ,精密度试验 ,特征峰提取 ,对照样品的选择 ,共有模式的建立 ,及欧氏距离、相关系数、夹角余弦、指数相似系数、相似性比为测度的相似度。结果欧氏距离为测度的相似度侧重于特征变量值上大小差异的样品间亲疏程度相似性的定量信息描述 ,而其余 4种测度的相似度 ,在样品鉴别真伪上有优势 ,它们是反映特征变量变化模式上的样品间亲疏程度相似性的描述。这些相似度的计算均可在Excel软件上实施。结论中药HPLC指纹图谱相似性可以用来评价中药质量     

色谱指纹图谱全定性相似度和全定量相似度质控体系研究

目的对中药色谱指纹图谱的全定性相似度和全定量相似度质控体系进行研究。方法用银杏叶提取物的HPLC指纹图谱实验结果为例,分别从化学成分分布相似性和含量相似性2个方面评价不同批次银杏叶提取物与对照指纹图谱的相似程度。提出用SF和S′F构成全定性相似度法来准确地解决色谱指纹图谱的定性评价问题;用W%与R%,C%与P%,Q%与M%,以及QF%与MF%分别构成第一、第二、第三、第四级全定量相似度。评价时,全定性相似度均〉0.9为必要条件,上述4种全定量相似度可选择任意1组,制剂控制在90%-110%,原料控制在85%-120%,组内相差不得超过10%为合格。结果当全定性相似度和全定量相似度合格时,一方面可保证削减大指纹峰影响,等权对待小指纹峰贡献;另一方面,从突出大指纹峰对体系的作用出发进行评价,这样能同时兼顾检测所有指纹峰对体系的定性定量的贡献作用。结论全定性相似度和全定量相似度的密切结合构成色谱指纹图谱新的质控体系,是利用色谱指纹图谱宏观控制中药质量的最佳方法。     

色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度的比较研究

以药材栀子为例，对中药色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度的宏观评价方法进行比较研究。用栀子对照药材和不同产地的栀子药材的HPLC指纹图谱实验结果，分别从化学成分分布相似性和含量相似性两个方面评价各产地药材与对照指纹图谱的相似性。以对照药材供试液不同进样量时获得的数据比较定性和定量相似度差异。提出了指纹图谱比率定性相似度s_F′，投影含量相似度C%、定量相似度P%和平均质量百分数M%等一系列概念。结果显示，表征化学成分分布相似性的定性相似度不能揭示含量性质，只有在定性相似度合格基础上，定量相似度合格的药材才能满足生产和实际需要。可见，定性相似度和定量相似度的密切结合是用指纹图谱宏观控制药材质量的最佳方法。     

中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统

目的介绍"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"的组成框架和核心内容。方法该软件能给出①指纹峰特征技术参数;②色谱指纹图谱潜信息特征判据参数即以色谱指纹图谱指数F和色谱指纹图谱信息量指数I及色谱指纹图分离量指数RF等综合性指标为核心挖掘色谱指纹图谱的潜信息特征;③色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数;④色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数,能计算以上4类参数用于中药信息质量控制研究。结果给出①指纹峰特征技术参数15个;②色谱指纹图谱潜信息特征判据参数42个;③色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数32个,其中定性相似度15个,定量相似度17个,使用时仅需32个参数的1到4个即可;④色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数25个,用以上4类参数可构建详实的中药数字化指纹图谱,能清晰准确地反映和控制中药质量。结论"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"是进行中药数字化指纹图谱研究的重要有效工具,其114个指标基本构成了数字中药质控的核心,是中药现代信息质量控制的一种最佳技术和合理选择。     

蒺藜药材HPLC指纹图谱研究

目的采用高效液相法建立蒺藜药材的指纹图谱,以控制其质量。方法用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-ELSD法测定蒺藜的指纹图谱,并根据向量夹角法计算相似度,进行比较分析。结果初步建立了蒺藜药材的指纹图谱。结论HPLC指纹图谱法重现性好,可作为控制蒺藜药材内在质量的标准。     

全定性全定量相似度法评价甜瓜蒂的毛细管电泳指纹图谱

目的建立甜瓜蒂的毛细管电泳指纹图谱(CEFP),考察全定性全定量相似度法评价甜瓜蒂CEFP的可行性和特征。方法采用毛细管区带电泳法,以50 mmol.L-1硼砂(含5%乙腈)为背景电解质,运行电压12 kV,紫外检测波长228 nm,以10个不同产地药材的电泳图谱建立了甜瓜蒂的对照CEFP。用全定性相似度SF和S′F、全定量相似度C%和P%分别评价甜瓜蒂CEFP。分别考察在大峰缺失和小峰缺失2种情况下,4个相似度指标变化特征。结果以葫芦素B为参照物峰,确定11个共有峰,建立了甜瓜蒂CEFP,并用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"计算2组全定性相似度。结果,SF能反映化学成分分布比例的相似度,受大峰影响严重,无法灵敏反映小峰的丢失;S′F对所有指纹峰等权,反映小峰缺失灵敏,两者构成全定性相似度。C%能反映样品总体含量,受大峰影响严重;P%对所有峰积分值等权,能较好反映小峰变动,两者构成全定量相似度。2组全相似度非常好地解决了中药色谱指图谱的评技术问题,毫无疑问其构成了中药色谱指纹图谱评价的技术核心。结论由SF和S′F、C%和P%构成的全定性全定量相似度法,能同时监测大峰和小峰的变动与缺失,能准确地解决色谱指纹图谱的宏观定性和定量评价的核心技术问题,所建立的CEFP可用于甜瓜蒂质量控制。     

外加参照物不应参加中药指纹图谱相似度计算

目的考察外加参照物对中药指纹图谱相似度计算的影响。方法将10批待测样品(其中参照物为外加内标物)的数据导入中药指纹图谱相似度评价系统(similarity estimate system)软件,通过溶剂峰剪切、尾部剪切、参比峰设定、相对保留时间与相对峰面积计算等预处理,应用夹角余弦法分别计算有参照物色谱峰参与计算的相似度与参照物色谱峰不参与计算的相似度。结果有参照物参与计算的图谱及共有模式的相似度均在0.9以下,当去掉外加参照物的影响后,其相似度均在0.9以上,表明外加参照物的色谱峰对中药指纹图谱相似度计算有较明显的影响。结论外加参照物不应参加中药指纹图谱相似度计算。     

用HPLC指纹图谱对佩兰的信息质量控制研究

目的建立佩兰HPLC数字化指纹图谱，采用双定性双定量相似度等46个参数作为评价的信息参数，对佩兰进行信息质量控制。方法采用RP-HPLC色谱法，以CenturySIL C18 AQ（20cm×4．6mm，5μm）色谱柱，1％醋酸水-1％醋酸乙腈为流动相进行低压梯度洗脱，检测波长为265nm，柱温：（30±0．15）℃，进样量：5μL，测定不同产地佩兰药材的HPLC指纹图谱。以10批佩兰的HPLC指纹图谱按平均值法计算生成对照指纹图谱（RFP），以此RFP为标准计算10批佩兰的双定性双定量相似度的均值，据此进行宏观定性定量质量评价；并以色谱指纹图谱指数F等42个信息参数进行超信息特征评价。结果以香豆素峰为参照物峰，确立了27个共有峰，建立了佩兰HPLC数字化指纹图谱，用双定性双定量相似度的均值评价了10批样品的化学成分数量和分布比例相似性较好，但含量差异很大。结论在选取的14个产地的佩兰药材中4批与其他相比化学成分分布比例差异较大，不建议使用，推荐使用定性定量相似度均很高的S2广东清平、S4江苏东台市等产地的佩兰药材。本研究对使用佩兰药材生产制剂具有宏观质控意义，证明了中药色谱指纹图谱技术结合多变量参数控制中药质量的信息质量控制方法具可行性及实用性。     

柴胡舒肝丸高效液相色谱数字化指纹图谱研究

目的建立柴胡舒肝丸（Chaihushugan Pills,CHSGPs）HPLC数字化指纹图谱。方法采用RP-HPLC法,以色谱指纹图谱分离量指数RF为目标函数优化选择指纹图谱条件,以宏定性相似度Sm和宏定量相似度Pm评价CHSGPs质量。用＂中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0＂软件计算CHSGP-HPLC指纹图谱的50个参数并进行超信息特征数字化评价,同时计算统一化指纹图谱技术的定点指数和定信号指数并进行评价。结果以黄芩苷峰为参照物峰,确定57个共有指纹峰,建立了CHSGP-HPLC数字化指纹图谱。通过聚类分析确定用其中13批生成对照指纹图谱（RFP）,以此RFP为标准,用系统指纹定量法鉴别评价20批柴胡舒肝丸的质量。鉴别出10批质量合格,7批化学成分数量和分布比例不合格,其余3批含量明显偏低。结论数字化指纹图谱可揭示中药质量控制的多维有效信息,结合系统指纹定量法可有效控制CHSGPs质量。     

建立中药"对照指纹图谱"的可行性探讨

建立中药“对照指纹图谱”为标准中指纹图谱相似性比较及相似度限值的确定提供参考。以SPSS统计分析软件对人参、黄芩的HPLC色谱数据所代表的指纹图谱相似度及影响相似度的因素进行研究。中药指纹图谱相似度的影响因素由样品所含的主要化学成分所引起，相关系数法比夹角余弦法对指纹图谱中小色谱峰变化的反应明显。提出了在中药质量标准中使用“对照指纹图谱”作为中药指纹图谱相似度比较的参照系。     

中药吴茱萸中生物碱类成分的HPLC指纹图谱

目的研究中药吴茱萸中生物碱类成分的HPLC特征指纹图谱。方法应用HPLC法分析吴茱萸药材生物碱类成分色谱图。色谱柱:Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水系(水-四氢呋喃-乙酸,体积比48∶1∶0.1);洗脱方式:线性梯度洗脱;柱温:35℃;流速:1 mL.min-1;检测波长:240 nm;进样量:20μL。理论板数按吴茱萸次碱计算不低于3 000。结果10批不同来源的吴茱萸药材所含生物碱类成分均得到很好的分离,获得14个共有特征峰。结论HPLC指纹图谱法能较好地识别吴茱萸药材,为吴茱萸的质量控制提供了方法学依据。     

基于功效和物质基础的吴茱萸毒性研究思考

目的为进行基于功效和物质基础的吴茱萸系统毒性研究提供文献依据和研究思路。方法对吴茱萸历代文献古籍及近十年国内外相关文献进行整理、分析和归纳,提出符合中医药特点的中药毒性研究思路。结果历代文献古籍中记载吴茱萸的多种功效在现代药理研究中已经得到证实,但对吴茱萸"有小毒"这一记载在中药现代药理学与毒理学研究中均相对缺乏,对其毒性成分、毒性表现也未见详细描述。应进行吴茱萸产生功效和毒性的物质基础、"物质基础-功效-毒性"的相关性、毒性作用靶点、物质基础体内过程、吴茱萸"量-效-毒"之间的关系如何等规范、系列研究,同时还要在中医辨证和辨病的基础上,去合理科学地认知毒性和功效,以期为临床安全、使用吴茱萸提供科学实验依据。结论有毒中药吴茱萸的毒性研究应该放到功效和证候的背景下进行研究,而且要注重毒性物质基础的体内过程、作用途径和作用靶点,并注重基于功效和病证的"量-效-毒"关系研究。     

高效液相色谱串联质谱分析吴茱萸水煎液的化学成分

目的建立吴茱萸中化学成分的液质联用分析方法,研究吴茱萸的化学成分。方法水煎煮提取吴茱萸,运用LC—MS“联用技术得到各化合物的总离子流图和多级质谱图,从而对各色谱峰进行鉴定。结果从吴茱萸提取物中鉴定出14个化合物。结论HPLC—MS。法可用于吴茱萸中3类成分的结构分析,为建立准确的质量评价方法提供了参考。     

石虎化学成分研究

目的　研究药用植物石虎(Evodiarutaecarpa (Juss.)Benth .var.officinalis (Dode)Huang)的化学成分。方法利用各种色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果　从石虎中分得多个化合物,本文主要报道石虎柠檬素A(R and S ,1)、大黄酚(chrysophanol,2 )、大黄素(emodin ,3)、大黄素甲醚(physcion ,4)和已知柠檬素(limonin ,5 )等化合物。结论　石虎柠檬素A(R and S)为新化合物,结构鉴定为21(R and S)-羟基-23-羰基-20-烯-柠檬素[21(R and S)-OH-23-oxo-20-en-limonin],化合物2 - 4等蒽醌类化合物为从吴茱萸属中首次获得     

吴茱萸不同炮制方法对抗炎镇痛作用的影响研究

目的观察吴茱萸不同炮制品的抗炎镇痛作用。方法采用小鼠热板法和扭体法,观察吴茱萸不同炮制品的镇痛作用;采用耳肿法观察吴茱萸不同炮制品的抗炎作用。结果吴茱萸不同炮制品能明显提高热板和扭体试验小鼠的痛阈值,其中以砂烫盐炙组作用较强;对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用,其中以砂烫组作用较强。结论吴茱萸不同炮制品均有显著的抗炎、镇痛作用,其中以砂烫组和砂烫盐炙组作用较强。     

吴茱萸次碱的研究进展

吴茱萸次碱是中药吴茱萸中的主要有效成分,本文介绍了近十余年来国内外对吴茱萸次碱的研究进展,包括合成、对药物代谢酶的影响、代谢机制和药理作用等。     

提取方式对吴茱萸“质量-毒性”综合评价模式的影响

目的 对不同提取方式提取的吴茱萸中生物碱含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨不同提取方式对吴茱萸“含量-毒性”综合评价模式的影响.方法 用HPLC法测定吴茱萸水提组分、醇提组分中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,并进行方法学考察;经典急性毒性实验法,进行吴茱萸不同提取物急性毒性比较研究.结果 吴茱萸水提物、醇提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的百分含量分别为0.028％和0.027％、0.046％和0.075％,水提物组和醇提组无法作出LD50,MTD试验结果按含生药量计算分别为80.0g· kg-1·d-1和70.6g·kg-1·d-1.结论 吴茱萸经不同方式提取后吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量和毒性各不相同且各样品均出现死亡,其最大耐受量显示吴茱萸经不同方式的提取均具有毒性,其提取物对小鼠急性毒性强度为:醇提物组＞水提物组;提取物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量依次为:醇提物组＞水提物组.说明提取方式对吴茱萸“质量-毒性”综合评价模式有一定的影响,其毒性大小可能与主要化学成分含量存在一定相关性.因此通过“质量-毒性”综合评价模式确定有毒中药的提取方式,更全面、客观、合理.     

黄连、吴茱萸不同配比对大鼠热耐受能力的影响研究

目的 观察黄连与吴茱萸不同配伍比例（黄连-吴茱萸分别为6：1、2：1、1：1、1：6）在热环境下对大鼠肛温、生存时间和死亡率的影响,确定其对增强大鼠热耐受能力的差异.方法 将SD大鼠随机分为6组,空白对照组（A组）给生理盐水,阳性对照组（B组）给藿香正气水,实验组（C、D、E、F组）分别给黄连、吴茱萸药对各配伍比例提取物.6组同时放入温度为41℃,相对湿度为70%的人工热室中受热至死.热暴露前测各鼠肛温1次,热暴露1 h后再测1次肛温,并记录各鼠死亡时间.结果 B组和C、D、E、F组均能不同程度降低大鼠肛温、死亡率,延长存活时间,其中以D组效果最为显著.结论 黄连-吴茱萸2：1能显著增强大鼠热环境的耐受能力,抗中暑作用最为明显.     

Quality evaluation of Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth by high performance liquid chromatography with photodiode-array detection

A simple, sensitive and accurate HPLC-DAD method was developed for simultaneous determination of wuchuyuamide-I, quercetin, limonin, evodiamine and rutaecarpine in Evodia rutaecarpa that has been widely used as one of the traditional Chinese medicines (TCMs). Chromatographic separations were performed on a reverse-phase C(18) column with the gradient elution of acetonitrile-water and the simultaneous detection at five wavelengths. Good linear behaviors over the investigated concentration ranges were observed with the values of r higher than 0.999 for all the analytes. The recoveries measured at three levels varied from 98.77 to 102.36%. The validated method was successfully applied for the simultaneous determination of the five chemical constituents in 36 batches of samples collected from different regions or time that were investigated and authenticated as E. rutaecarpa (Juss.) Benth. Hierarchical clustering analysis (HCA) and principal components analysis (PCA) were performed to differentiate and classify the samples based on the contents of the five characteristic constituents. The total contents of evodiamine and rutaecarpine in different samples were calculated and the blending method proposed was demonstrated to be very useful in saving resources and in guiding rational herb use.