苄基四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞快激活延迟整流钾电流的作用

目的研究苄基四氢巴马汀(BTHP)对心室肌细胞快激活(I_kr)延迟整流钾电流的作用。方法 用全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞钾离子通道电流。结果BTHP在1～100 μmol·L^-1以浓度依赖性方式阻滞I_kr,其IC₅₀为13.5 μmol·L^-1(95%可信范围:11.2～15.8 μmol·L^-1)。30 μmol·L^-1 BTHP可使I_kr及I_kr,tail分别降低(31±4)%和(36±5)% (N=6,P<0.01)。与多数III类抗心律失常药物不同,BTHP可频率依赖性地抑制I_kr。该药主要改变I_kr的失活过程,可使I_kr的失活时间常数(τ)从(238±16) ms降至(196±14) ms,而对I_kr的激活动力学影响不大。结论BTHP对I_kr有明显的抑制作用,且其阻滞作用呈现频率依赖性特征。     

III类抗心律失常药RP58866对豚鼠及犬内向整流及瞬时外向钾电流的作用

目的:研究III类抗心律失常药RP58866 对I_K1 ,瞬时外向钾电流(Ito) 的作用。方法:用豚鼠和犬离体心肌细胞及全细胞电压钳技术。结果:在- 100 m V 时,RP58866 以浓度依赖方式明显减少了豚鼠心室肌细胞I_K1,其IC₅₀为(3-4±0-8) μmol·L^-1。在犬心室肌细胞,RP58866 可明显抑制Ito( 在100 μmol·L^-1 时减少87% ±2-1% ),其IC₅₀为(2-3±0-5) μmol·L^-1 。结论:RP58866 对心肌细胞的IK1 和Ito 均有抑制作用,而不是一种特殊的IK1抑制剂。     

4-氨基吡啶对豚鼠心室肌钙和钠电流的影响

目的研究4-氨基吡啶(4-AP)对心肌细胞L型钙通道和钠通道的影响。方法用全细胞膜片钳技术考察4-AP对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和钠电流的作用。结果4-AP0.1,0.5,1.0mmol·L^-1浓度依赖性地抑制L型钙电流(I_Ca,L)和钠电流(I_Na),抑制率分别为(11.6±1.7)%,(37.5±8.3)%和(54.5±6.9)%以及(22.1±14.3)%,(39.4±8.8)%和(62.3±6.8)%。0.5mmol·L^-14-AP使I_Ca,L和I_NaI-V曲线均上移。结论4-AP可浓度依赖性地阻滞豚鼠心室肌细胞L型钙通道和钠通道。     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

M受体阻断剂对粉防己碱心肌负性肌力作用的调节及其离子机理

研究M受体阻断剂对粉防己碱(Tet)负性肌力作用的影响并探讨其机理. 记录Tet对豚鼠离体左心房收缩力,兔心房肌细胞动作电位及豚鼠单个心室肌细胞Ca²⁺,K^＋通道电流的作用及M受体阻断剂的影响.M受体阻断剂阿托品(0.03 μmol·L^-1)及M₂受体亚型阻断剂AF-DX 116(1.0 μmol·L^-1)能使Tet负性肌力作用的量效曲线平行右移, EC₅₀(μmol·L^-1)由28.9±0.9分别增至125±21和127±13;Tet(1-100 μmol·L^-1)浓度依赖性缩短兔心房肌细胞动作电位时程APD₂₀,APD₅₀, 此作用被阿托品(0.03 μmol·L^-1)部分拮抗,而Tet延长APD₉₀的作用不受阿托品的影响.阿托品(1 μmol·L^-1)部分拮抗Tet(30 μmol·L^-1)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的阻滞作用,而不影响其抑制内向整流钾电流(I_K1)的作用. 1 μmol·L^-1乙酰胆碱则能逆转Tet对I_K1的抑制. M受体阻断剂对Tet阻滞钙通道作用的影响可能是其拮抗Tet负性肌力作用的主要离子机理.     

三七皂苷Fc对SD大鼠心室肌细胞钠离子通道电流的影响

目的 探究三七皂苷Fc (notoginsenoside Fc，N-Fc)对SD大鼠心室肌细胞钠离子通道电流的影响。方法 使用Langendorff恒温恒压灌流装置通过酶解法急性分离SD大鼠心室肌细胞，采用标准全细胞膜片钳技术观察并记录不同浓度的N-Fc对大鼠心室肌细胞钠通道电流(I_Na)及其动力学特征的影响。结果 5µmol·L^–1的N-Fc对I_Na无明显影响，随着药物浓度的增加，10，20，50µmol·L^–1的N-Fc可使钠峰值电流由给药前的(–87.49±3.40) pA/pF依次下降为(–62.91±2.37)，(–49.30±1.27)，(–34.68±3.21) pA/pF (P<0.01)；I_Na的I-V曲线上移，但形态轨迹、激活电位及峰电位基本不变；I_Na的激活曲线向去极化方向迁移，半数激活电压由给药前的(–52.37 ±1.32) mV变为(–42.74 ±0.37)，(–38.92 ±2.77)，(–33.78 ±0.96) mV (P<0.05)；失活曲线显著左移，半数失活电压(V_1/2-in)由(–55.95±4.88) mV依次变为(–64.29 ±1.77)，(–69.57±3.47)，(–73.32±3.79) mV (P<0.05)；此外，N-Fc能够显著延长I_Na失活后恢复时间，时间常数τ值(给药前，10，20，50µmol·L^–1N-Fc处理后)分别为(12.50±1.17)，(21.36±2.23)，(25.35±1.25)，(34.35±1.24) ms (P<0.05)。结论 N-Fc能浓度依赖性地抑制SD大鼠心室肌细胞的I_Na，并能显著影响其激活、失活及失活后恢复的动力学特征。     

AMP579与腺苷对大鼠和豚鼠心室肌钾离子或钠离子通道作用的比较

目的研究AMP579和腺苷对钾离子与钠离子通道的影响及其作用机制，比较它们对负性变力及抗心律失常作用的离子机制。方法采用膜片钳全细胞记录模式记录大鼠和豚鼠心室肌细胞离子通道电流。结果腺苷对大鼠心室肌瞬时外向钾电流(I_{to)的激动作用强于AMP579，腺苷和AMP579的EC50值分别为2.33与8.32 μmol·L^-1 (P<0.05)；两者激动Ito的作用均可被腺苷A1受体阻滞剂PD116948阻断，表明其作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。腺苷对豚鼠心室肌延迟整流钾电流(IK)的抑制作用强于AMP579，腺苷和AMP579的IC50值分别为1.21与2.31 μmol·L^-1 (P<0.05)；AMP579对内向整流钾电流(IK1)的抑制作用强于腺苷，AMP579和腺苷的IC50值分别为4.15与20.7 μmol·L^-1 (P<0.01)。AMP579和腺苷对大鼠心室肌钠电流(INa)的抑制作用相似，其IC50值分别为9.46与6.23 μmol·L^-1。结论腺苷对大鼠心室肌Ito的激动作用强于AMP579，两者对Ito的作用机制均是通过腺苷A1受体介导的。AMP579对IK1的抑制作用强于腺苷，而腺苷对IK的抑制作用强于AMP579，两者对INa的抑制作用相似，这些离子机制与两者发挥负性变力与抗心律失常作用有关系。}     

阿米洛利对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用

目的研究阿米洛利（amiloride）对豚鼠心肌细胞钾电流及钙电流的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞钾通道及钙通道电流。结果阿米洛利在10~100 μmol·L^-1抑制L型及T型钙电流,不改变钙电流I-V曲线的形状，仅抑制这两型电流的幅度。当累积浓度达100 μmol·L^-1时，阿米洛利轻微抑制快激活延迟整流钾电流(I_Kr)，对慢激活延迟整流钾电流(I_Ks)无影响。阿米洛利在1~100 μmol·L^-1浓度依赖性地抑制内向整流钾电流(I_K1)。结论阿米洛利抑制电压依赖性的钾、钙电流，为其抗心律失常作用提供了离子基础。     

环维黄杨星D对分离大鼠心室肌细胞内Ca2+和L型钙电流的影响

目的研究环维黄杨星D（CD）对大鼠心室肌细胞内Ca²⁺动员和L型钙电流(I_{Ca-L/sub>)的影响。方法采用全细胞膜片钳和激光扫描共聚焦显微术研究CD对心肌细胞ICa-L/sub>以及氯化钾、咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺动员的影响。结果CD浓度依赖性抑制ICa-L/sub>。指令电压为10 mV时，1和10 μmol·L^-1 CD分别使ICa-L/sub>电流密度从（-9.9±1.8）pA/pF降至（-6.4±1.4）pA/pF和（-4.2±0.6）pA/pF。共聚焦实验显示1和10 μmol·L^-1 CD不影响静息心肌细胞［Ca²⁺］i?/sub>，对氯化钾诱发［Ca²⁺］i?/sub>升高水平无明显抑制作用；咖啡因引起的细胞内Ca²⁺动员可被CD进一步增强。结论CD浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞ICa-L/sub>，并有促进咖啡因诱发心肌细胞内Ca²⁺释放的作用。}     

苄基四氢巴马汀细胞内用药对豚鼠乳头状肌动作电位和心室肌细胞延迟整流钾电流的作用

目的　研究将苄基四氢巴马汀(BTHP)导入细胞内对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流的影响。方法　利用外加电压脉冲将药物导入乳头状肌细胞内，并用标准微电极方法测定动作电位；利用浓度差扩散方式使药物进入单个心室肌细胞内，采用全细胞膜片钳技术记录延迟整流钾电流（I_K）。结果　100 μmol.L^-1 BTHP使APD₂₀和APD₉₀分别延长13.5%和20.5%。30 μmol.L^-1 BTHP使I_K和I_K,tail分别从（14.1±2.2) pA.pF^-1和(4.0±0.6) pA.pF^-1降至(9.4±1.3) pA.pF^-1和(2.1±1.0) pA.pF^-1，下降率分别为33.2%和35.3%。 该药使I_K和I_K,tail的I-V曲线幅度降低，对曲线形状影响不明显。结论　BTHP入细胞内后可阻滞延迟整流钾电流和延长动作电位时程。     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_to, 研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (I_to) 的影响. 结果显示,5.0 μmol·L^-1 BTHP可以降低I_to, 使I_to幅值从（13.8±2.2）pA·pF^-1降至（5.1±1.4）pA·pF^-1（P＜0.01）. 在1～100 μmol·L^-1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性,IC₅₀为3.6 μmol·L^-1,该药不改变I_to 电流-电压曲线的形状,而使电流幅值减少. 5.0 μmol·L^-1 BTHP使稳态激活曲线右移,半激活电压（V_1/2）从（－6.8±0.2）mV移至（－1.5±0.1）mV,但曲线斜率基本不变. BTHP对失活曲线影响不大,5.0 μmol·L^-1 BTHP使通道失活后恢复时间常数从（75±19）ms延长为 （119±21）ms（P＜0.01）. 结果说明,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_to.     

盐酸非洛普对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的抑制作用

目的　已知盐酸非洛普〔1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 ,DDPH〕对心肌钙电流和钠电流具有抑制作用 ,为全面了解其抗心律失常作用的离子机理 ,研究其对延迟整流钾电流的影响。方法　全细胞膜片钳技术记录豚鼠心室肌细胞快激活的延迟整流钾电流的尾电流(IKr tail)和慢激活的延迟整流钾电流 (IKs)及其尾电流 (IKs tail)。结果　DDPH(1～ 10 0 μmol·L- 1)浓度依赖性地抑制IKr tail,其IC50 为 7.0 (95 %可信限为4 .2 3～ 9.76 ) μmol·L- 1;DDPH 10 μmol·L- 1对IKr tail具有电压依赖性抑制作用。DDPH 10 ,30和 10 0 μmol·L- 1可浓度依赖性地抑制IKs及其IKs tail,使IKs从给药前的 (9.1± 0 .7)pA·pF- 1分别降至 (7.7± 1.7) ,(7.5± 1.8)和 (5 .6± 1.8)pA·pF- 1(P <0 .0 1) ;使IKs tail从给药前的 (1.4± 0 .2 )pA·pF- 1分别降至(1.1± 0 .2 ) ,(0 .9± 0 .2 )和 (0 .6± 0 .2 )pA·pF- 1(P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;DDPH 30 μmol·L- 1对IKs tail具有电压依赖性抑制作用。结论　DDPH对豚鼠心室肌细胞延迟整钾电流具有抑制作用。     

慢性孵育β-淀粉样肽(25-35)对培养大鼠海马神经元外向钾电流的影响

目的　研究慢性孵育β-淀粉样肽_(25-35) (β-AP_25-35)对海马神经元上瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的影响。方法　在培养的大鼠海马神经元上用膜片钳全细胞记录钾通道电流。结果　β-AP_25-35 3μmol·L^-1 孵育细胞24h ,I_K 电流幅度增加(44.3±5.4)% ,电流密度由(30.4±6.4)pA·PF^-1 增加至(43.8±4.7)pA·PF^-1 ;β-AP_25-3510μmol·L^-1 孵育12h ,I_K 电流幅度增加(69.8±4.1) % ,电流密度增加至(51.6±7.9)pA·PF^-1,呈浓度依赖性;β-AP_25-35引起的I_K 增加对TEA 5mmol·L^-1 敏感;β-AP_25-35上调I_K 的作用主要发生在β-AP_25-355用药后48h内。β-AP_25-35对I_A无显著性影响。结论　β-AP_25-35选择性地增加海马神经元上I_K,这一作用可能与β-AP的神经毒性有关     

关附甲素对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的抑制作用

用全细胞膜片钳制技术研究关附甲素对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的作用。结果表明,关附甲素100μmol·L^-1对延迟整流钾电流有明显的抑制作用。去极化2200和3850ms时,I_k分别由293±90和290±90pA减小至227±59和231±66pA,这种抑制作用与去极化持续时间无关。关附甲素对内向整流钾电流无影响。提示关附甲素延长心肌复极化时间似与抑制延迟整流钾电流的作用有关。     

17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的抑制作用

目的观察17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响及其与雌激素受体(estrogen receptor,ER)的关系。方法酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;膜片钳全细胞模式观察17β-雌二醇对单个心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响,并通过加入雌激素受体阻断剂tamoxifen(TAM)研究该作用与雌激素受体的关系。结果 17β-雌二醇(10-9～10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1分别减少至(-2.4±0.3)pA.pF-1、(-1.9±0.3)pA.pF-1和(-1.1±0.3)pA.pF-1(与对照组比较,均为P<0.01,n=5)。TAM(10-7 mol.L-1)预处理后,17β-雌二醇(10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1减少到(-1.0±0.2)pA.pF-1(与对照组比较,P<0.01,n=5),与未应用TAM(10-7 mol.L-1)预处理时比较,ICa-L峰电流密度值无变化(P>0.05,n=5)。结论 17β-雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L的作用呈浓度依赖性,雌激素受体阻断剂TAM不能阻断17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞ICa-L的抑制作用,提示17β-雌二醇对ICa-L的抑制作用可能与ER作用无关。     

苄基四氢巴马汀对心室肌动作电位和延迟整流钾电流的频率依赖性作用

目的　研究BTHP对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流影响的频率依赖性。方法　用标准微电极方法在不同基础周长 (BCL)时测定动作电位 ;采用全细胞膜片钳技术测定延迟整流钾电流 (IK:IKr、IKs)。结果　 10 0 μmol·L-1BTHP在BCL为 :2 0 0 0、2 5 0ms时 ,使APD2 0 分别延长 11 35 %和 2 5 5 5 % ;使APD90 分别延长15 97%和 32 5 6 %。 30 μmol·L-1BTHP在刺激频率为 :0 2 5和 2 0Hz时分别使Ikr,tial从 (0 94± 0 .44 ) pA·pF-1和(0 92± 0 31) pA·pF-1降至 (0 6 0± 0 32 ) pA·pF-1和 (0 43± 0 18)pA·pF-1。在刺激频率为 :0 1和 2 0Hz时分别使Iks,tial从 (4 2 2± 0 5 6 ) pA·pF-1和 (5 14± 0 2 8)降至 (2 5 8±0 41)pA·pF-1和 (2 6 2± 0 37)pA·pF-1。结论　BTHP可频率依赖性地阻滞IKr、IKs,其延长动作电位也呈频率依赖性     

三磷酸肌醇信号途径参与血小板激活因子诱导豚鼠心室肌细胞钙浓度增高

目的观察血小板激活因子(PAF)是否影响心室肌细胞钙离子浓度([Ca~(2+)]i)以及通过哪条信号转导通路起作用。方法采用酶法分离豚鼠心室肌细胞,用PAF刺激细胞;用Fluo-3/AM和共聚焦显微镜观察细胞[Ca~(2+)]i;用2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)和雷诺定(ryanodine)分别阻断IP3和雷诺定信号通路。全细胞膜片钳技术观察心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)。结果无论在有钙还是无钙台氏液,PAF(1pmol·L-1~10nmol·L-1)都能增加心肌细胞[Ca~(2+)]i,其作用能够被2-APB2μmo·lL-1阻断,而不能被雷诺定200μmol·L-1阻断。PAF1nmol·L-1对ICa-L没有明显影响,对照组和实验组电流密度分别为-(11.0±1.9)和-(10.5±1.3)pA·pF-1。结论PAF能增加豚鼠心室肌细胞[Ca~(2+)]i,IP3信号通路可能参与了这一过程。