脑室注射N-甲基-D-门冬氨酸对小鼠学习记忆的影响

采用一次性被动回避性条件反射方法,给小鼠icv N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)10,1和0.1 ng。结果表明:对正常小鼠,在跳台法中NMDA 10 ng能明显增强记忆巩固过程,在避暗法中NMDA 1 ng能显著增强记忆再现过程;在两种方法中,NMDA 1 ng均能显著改善乙醇及亚硝酸钠所致记忆障碍;而NMDA对记忆获得过程无影响。进一步研究表明,NMDA改善记忆的作用可被其受体特异性拮抗剂AP5所拮抗。结合以前报道和电生理研究结果提示,谷氨酸受体NMDA亚型在记忆过程中起着重要的作用,脑室给药作用的环节主要是影响记忆巩固和再现过程。     

丁基苯酞对氯化钾及 N-甲基-D-门冬氨酸诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的保护作用

用原代培养大鼠皮质神经细胞的方法,观察l-丁基苯酞(l-NBP)和d-丁基苯酞(d-NBP)对KCl及N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的保护作用。结果表明:l-NBP和d-NBP能剂量依赖性地抑制NMDA诱导的大鼠皮质神经细胞内乳酸脱氢酶的释放,降低细胞死亡率,改善受损细胞的形态;此外l-NBP和d-NBP还能明显减轻KCl诱导的神经细胞损伤。提示:l-NBP和d-NBP对KCl及NMDA诱导的大鼠皮质神经细胞损伤有明显保护作用。     

不同发育期大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基的表达及其抗缺血缺氧能力

目的 观察不同发育时期海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体3A亚基(NR3A)的表达及其抗缺血缺氧能力与其NR3A表达量的关系。方法 取鼠龄1, 5, 10, 15, 20, 30和90 d大鼠海马,采用Western印迹法检测海马神经元NR3A表达;制备鼠龄10, 15, 20和30 d大鼠海马切片,免疫组化法检测NR3A表达。取鼠龄10, 15, 20和30 d海马脑片,体外制备氧糖剥夺损伤模型(OGD),采用PI染料标记和荧光方法检测观察神经元坏死情况。结果 Western印迹和免疫组化结果显示,大鼠海马NR3A亚基的表达以10 d鼠龄时最高,此后逐渐下降,直至成年都一直维持较低的水平。对海马脑片进行OGD处理后,鼠龄10 d的海马脑片受损细胞数明显少于其他组,5 d,20 d组PI阳性细胞数多于10 d,鼠龄30 d的海马脑片损伤细胞数最多。结论 鼠出生后海马神经元NR3A亚基表达呈现先高后低的状态,成年鼠NR3A亚基的表达量维持在较低水平。NR3A亚基的高表达有利于神经元对抗OGD造成的损伤。     

栝楼桂枝颗粒对神经元兴奋性毒性损伤后钙信号通路的影响

目的 研究栝楼桂枝颗粒对N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）诱导神经元兴奋性毒性损伤后钙信号通路的影响,并探讨其可能的机制。方法 建立NMDA诱导神经元兴奋性毒性损伤模型,栝楼桂枝颗粒干预后,采用MTT、LDH法检测神经元活性,免疫荧光染色法检测神经元特异性指标MAP-2蛋白的表达。Real-time PCR法检测神经元中CaMKⅡ、CREB mRNA的表达,Western blot法检测p-CREB、p-CaMKⅡ、CaMKⅡ、CREB及CaM蛋白的表达。结果 与NMDA组比较,栝楼桂枝颗粒（200,300 μg·mL^-1）组可显著提高细胞活力,降低LDH浓度（P<0.05或P<0.01）,明显升高CREB、CaMKⅡ mRNA水平（P<0.05或P<0.01）,明显升高MAP-2、p-CREB、p-CaMKⅡ及CREB水平（P<0.01）,而显著降低CaM水平（P<0.01）。结论 栝楼桂枝颗粒对NMDA诱导的神经元兴奋性毒性损伤具有保护作用,此作用可能与促进CREB、CaMKⅡ的磷酸化,抑制CaM的表达有关。     

新生大鼠海马分区培养神经元对N-甲基-D-天冬氨酸反应的差异

目的 探讨海马不同区域神经元对N-甲基-D天冬氨酸(NMDA)的反应.方法 取新生大鼠CA区和DG区脑组织细胞培养9d.利用活细胞工作站,用四甲基罗丹明乙酯观察NMDA对来自不同区域神经元线粒体膜电位的影响.同时采用全细胞模式的膜片钳记录技术检测来自海马不同区域的神经元NMDA诱导电流.结果 与DG区的神经元比较,NMDA更易引起CA区神经元线粒体膜电位的下降,同时NMDA诱导电流强度明显增强.结论 DG、CA区来源的海马神经元对NMDA反应具有明显差异.     

甘松新酮对缺糖缺氧损伤原代培养神经元的保护作用

观察甘松新酮对缺糖缺氧损伤原代培养神经元的保护作用。采用孕14天小鼠胚胎皮层制备原代培养神经元;MTT法确定甘松新酮对原代培养神经细胞的安全剂量,并观察其对缺糖缺氧神经元的保护作用;采用Western blotting法观察药物对缺糖缺氧损伤神经元以及正常培养神经元蛋白激酶A(PKA)和细胞外信号调节激酶(ERK)通路关键蛋白表达的影响。结果显示,甘松新酮(50和100μmol·L-1)能够增加缺糖缺氧损伤神经元的存活率(P<0.01,与OGD组比较);同时,能增加缺糖缺氧神经元PKA、小分子G蛋白Ras的相关蛋白1(Rap1)、丝裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEK1)及磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的表达,且此作用呈剂量依赖趋势。对正常培养神经元研究结果显示,甘松新酮(50、100和200μmol·L-1)也能增加其PKA、Rap1、MEK1及p-ERK1/2的表达(P<0.01)。以上结果表明,甘松新酮对缺糖缺氧损伤的原代培养神经元有明确保护作用,该作用可能与药物激活PKA和ERK通路有关。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体激活在脑缺血中的神经保护及神经毒性作用研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)介导的神经元兴奋毒性损伤与脑缺血发生密切相关,但生理水平的NMDAR却具有神经保护、抵抗损伤的功能,并且在突触可塑性及突触传递方面发挥重要作用。这种功能的双面性正是使用NMDAR拮抗剂治疗脑缺血、卒中等疾病临床效果欠佳的原因之一。深入了解NMDAR及其介导的促神经元存活或死亡信号通路在缺血性脑损伤中的作用,在不影响促神经元存活以及突触可塑性通路前提下,选择性地阻断NMDAR介导的神经元死亡信号通路,是临床治疗缺血/缺氧性脑损伤、脑卒中等疾病的发展方向。本文就NMDAR激活介导的信号通路在缺血性脑损伤中的作用作一综述。     

猪苓多糖通过JAK2-STAT3通路抑制N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基诱导的GES-1细胞上皮间充质转化

目的 研究猪苓多糖抑制胃黏膜上皮细胞（GES-1）间充质转化的作用和机制。方法 应用N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基（MNNG,40 μmol·L^-1）诱导GES-1细胞间充质转化模型,造模同时给予猪苓多糖（1.25、2.50、5.00、10.00 mg·mL^-1）处理24、48 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力;造模同时给予猪苓多糖（5.00 mg·mL^-1）处理48 h后,实时定量PCR（qRT-PCR）法检测猪苓多糖对N-cadherin、Snail、Twist、Fibronection及Vmention mRNA表达的影响;Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetin、Vimentin、STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2蛋白表达。裸鼠分别sc经MNNG 40 μmol·L^-1处理48 h后的GES-1细胞（5×10⁷·mL^-1 ,0.2 mL）、胃癌细胞SGC7901（5×10⁷·mL^-1 ,0.2 mL ,阳性对照）,1个月后观察各组成瘤及体质量情况,注射局部进行HE染色后行组织病理学观察,验证GES-1细胞经MNNG处理后是否达到肿瘤阶段。结果 与模型组比较,随猪苓多糖浓度的增加,GES-1细胞增殖能力逐渐上升,到达5 mg·mL^-1时增殖能力最高,差异显著（P<0.01、0.001）;猪苓多糖组N-cadherin、Snail、Twist、Fironetion及Vimentin的mRNA表达均显著下降（P<0.05、0.01、0.001）;猪苓多糖组E-cadherin蛋白表达显著上升（P<0.05）,N-cadherin、Snail、Twist、Fibronetion、Vimentin及通路蛋白STAT3、p-STAT3、JAK2、p-JAK2表达显著下降（P<0.05、0.01、0.001）。对照组和MNNG处理的GES-1组未见瘤体形成,阳性对照SGC7901组注射后1周左右局部出现瘤体,1个月瘤体长至6 cm左右;MNNG处理的GES-1组裸鼠精神较差,体质量明显减轻,SGC7901组裸鼠状态差,体质量大幅减轻;对照组和MNNG组病理染色显示为正常的皮肤组织,阳性对照组显示为肿瘤组织。结论 猪苓多糖可能通过抑制JAK2-STAT3通路干预MNNG诱导的GES-1细胞上皮间充质化。     

D-聚甘酯对原代培养胎大鼠皮层神经元细胞外液NO的影响

体外培养胎大鼠皮层神经元,利用低糖低氧环境造成脑缺血模型,观察了Ｄ－城酯对低糖低氧所致ＮＯ释放的影响。结果表明Ｄ－聚甘酯５,２５,５０ｍｇ．Ｌ＾－１涌抑制低糖氧所导致的ＮＯ释放的增多。提示：Ｄ－聚甘酯可能以非ＮＯ途径发挥其脑血保护作用。     

雷公藤氯内酯醇对帕金森病大鼠多巴胺神经元的保护作用

目的探讨雷公藤氯内酯醇(T₄)对帕金森病(PD)大鼠多巴胺(DA)神经元的保护作用。方法采用线刀损毁大鼠内侧前脑束(MFB)制备部分损伤性PD模型,应用旋转行为测试行为学改变,HPLC-ECD检测纹状体DA含量,酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化检测DA神经元的存活率,双抗夹心ELISA法检测损毁侧脑组织中细胞因子含量。结果T₄在较低剂量下(1 μg·kg^-1)能够改善安非他明(AMPH)诱发的PD大鼠异常旋转行为,其损伤侧纹状体DA含量和黑质致密部DA神经元存活率均比对照组增加,并能抑制脑内TNF-α和IL-2的异常升高。结论免疫抑制剂T₄对PD大鼠具有肯定的神经保护作用,其作用的发挥与T₄抵抗细胞因子在脑内过度升高而产生的毒性作用有关。     

人参皂甙Rb1和Rg1对原代培养大鼠海马神经细胞的保护作用

用大鼠海马神经细胞原代培养的实验模型,观察了人参皂甙Rb1和Rg1对原代培养的大鼠海马神经细胞生长的影响。结果发现Rb1和Rg1可明显延长培养神经细胞的存活时间、降低神经细胞的死亡率,并对抗谷氨酸介导的神经毒性作用。实验证明其机制在于选择性抑制大剂量谷氨酸引起的钙离子浓度异常升高。     

人参皂苷Rg1抗黑质神经元凋亡的可能机制

目的研究人参皂苷Rg1抗1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的小鼠黑质神经元凋亡的作用及其机制。方法MPTP制备的帕金森病(Parkinson′s disease,PD)小鼠模型,经人参皂苷Rg1预处理后,用尼氏(Nissl)染色和TH组化染色观察黑质神经元的损害情况,借助TUNEL染色了解黑质神经元的凋亡情况,并用免疫组织化学方法检测黑质神经元caspase-3的活化以及iNOS和nNOS的表达情况。结果人参皂苷Rg1预处理能减少PD鼠模型黑质致密带Nissl阳性神经元和TH阳性神经元的脱失现象,降低黑质神经元TUNEL染色的阳性率。结论人参皂苷Rg1预处理对MPTP诱导的小鼠黑质神经元凋亡有明显的保护作用。     

慢性孵育β-淀粉样肽(25-35)对培养大鼠海马神经元外向钾电流的影响

目的　研究慢性孵育β-淀粉样肽_(25-35) (β-AP_25-35)对海马神经元上瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的影响。方法　在培养的大鼠海马神经元上用膜片钳全细胞记录钾通道电流。结果　β-AP_25-35 3μmol·L^-1 孵育细胞24h ,I_K 电流幅度增加(44.3±5.4)% ,电流密度由(30.4±6.4)pA·PF^-1 增加至(43.8±4.7)pA·PF^-1 ;β-AP_25-3510μmol·L^-1 孵育12h ,I_K 电流幅度增加(69.8±4.1) % ,电流密度增加至(51.6±7.9)pA·PF^-1,呈浓度依赖性;β-AP_25-35引起的I_K 增加对TEA 5mmol·L^-1 敏感;β-AP_25-35上调I_K 的作用主要发生在β-AP_25-355用药后48h内。β-AP_25-35对I_A无显著性影响。结论　β-AP_25-35选择性地增加海马神经元上I_K,这一作用可能与β-AP的神经毒性有关     

兴奋毒性对海马脑片Ca2+/CaM PK Ⅱ活性的影响

用离体孵育的大鼠海马脑片模型,研究兴奋毒性与Ca²⁺/CaMPKII活性的关系。结果表明,外源性谷氨酸或NMDA均可抑制Ca²⁺/CaMPKII的活性,此活性的抑制可被MK801完全拮抗,而DNQX却无明显拮抗作用;无胞外Ca²⁺时,谷氨酸导致的酶活性抑制程度不如有胞外Ca²⁺时显著;无胞外Mg²⁺时,谷氨酸导致的酶活性抑制程度比有胞外Mg²⁺时显著。结果提示兴奋毒性对Ca²⁺/CaMPKII活性的抑制与NMDA受体介导的兴奋毒性有关。     

THE EFFECT OF APOMORPHINE AND CLONIDINE ON LOCOMOTOR ACTIVITY IN MICE AFTER LONG TERM TREATMENT WITH HALOPERIDOL

1. Mice were given haloperidol (approximately 3 mg.kg^?1 day^?1) or vehicle for 21 days and then withdrawn from the drug. All tests were performed 4 days after withdrawal. 2. Haloperidol treated mice (premedicated with reserpine plus a-methyl-p-tyrosine) displayed an increased locomotor response to apomorphine and to apomorphine plus clonidine, but neither haloperidol- or vehicle-treated animals revealed any stimulant response to clonidine. 3. In mice which had not been pretreated with reserpine plus a-methyl-p-tyrosine, clonidine produced a significant stimulation of locomotor activity in animals withdrawn from haloperidol but not in those withdrawn from the vehicle. Phen-oxybenzamine blocked the locomotor stimulant difference between these two groups, but did not completely antagonize the stimulant effect of clonidine in mice withdrawn from haloperidol. Pimozide was largely effective in blocking the clonidine-induced stimulation. Co-administration of phenoxybenzamine and pimozide was completely effective in blocking the stimulant effect of clonidine in mice withdrawn from haloperidol. 4. The evidence for a change in catecholamine receptor sensitivity was supported by the increased stimulant effect of dexamphetamine in the haloperidol-treated, compared to the vehicle-treated animals. 5. The data suggest that there is a change in the functional responsiveness of both adrenergic and dopaminergic receptors after withdrawal from long term haloperidol treatment.     

铜叶绿酸钠对急,慢性肝损伤保护作用的实验研究

以SGPT和SGOT活性升高作为肝损伤指标,证明由蚕沙制得的铜叶绿酸钠(Cu-Chl-Na)对硫代乙酰胺、醋氨酚和四氯化碳所致急性肝损伤均有较好的保护作用。建立了CCl_4皮下注射所致大鼠慢性肝损伤的实验模型,并报道了Cu-Chl-Na对慢性肝损伤的治疗作用。     

没食子酸丙酯对大鼠肝线粒体肿胀和脂质过氧化物形成的作用

The extract of Radix Paeonia rubra, a common traditional Chinese drug was shown to inhibit platelet aggragation and oxidative phosphorylation while increasing fluidity of rat liver mitochondria. This paper reports the effects of propyl gallic acid, one component isolated from Radix Paeonia, on rat liver mitochondrial swelling and malondialdehyde (MDA) formation.Experiments on the formation MD and swelling of rat liver mitochondria induced by Fe²⁺ (5 μM)and vit C (0.1 mM) with or without the drug was carried out in vitro. In order to study the protectiye effects of drug against the damage of the mitochondria. The results show-that propyl gallic acid inhibited the swelling of mitochondrta andMDA formation. Fe²⁺ and vit C were also shown to reduce ANS fluorescence in mitochondrial suspension. It is inferred that the cross reaction of MDA with biological macromolecules and the decrease of surface potential of mitochondrial membrane are factors that induced damage to the function of mitochondria. This compound was shown to be unable to inhibit MDA damage to the mitochondria. However, the anti-oxidative and antiswelling action of the drug on mitochondria may be associated with the Pharmacological effects of Radix Paeonia rubra.     

阿魏酸钠对大鼠肝线粒体氧化性损伤的保护作用

观察到阿魏酸钠有明显抑制硫酸亚铁和维生素C系统诱导的脂质过氧化反应和线粒体膨胀作用,且呈量效关系,并缓解丙二醛(脂质过氧化产物之一)对线粒体氧化磷酸化过程的解偶联反应。线粒体膜蛋白电泳图谱呈现阿魏酸钠有抑制丙二醛与膜蛋白交联作用。上述结果提示阿魏酸钠可缓解自由基损伤反应,有益机体能量合成代谢。