视网膜母细胞瘤Y79细胞裸鼠玻璃体腔移植瘤模型的建立

目的建立视网膜母细胞瘤裸鼠玻璃体腔移植瘤模型并观察其生长状态,为开展肿瘤体内实验做好前期工作。方法培养视网膜母细胞瘤Y79细胞,调整细胞浓度为（4.5-5.5）×107/ml,注射至裸鼠玻璃体腔内（5μl/只）,观察肿瘤的生长状态。结果注射早期玻璃体腔内浑浊明显,而后依次出现肿瘤团块;角膜混浊;眼内结构破坏;眼球突出于眼外。摘除的肿瘤组织HE染色结果显示瘤细胞大小不等,胞浆少,核大,核分裂相常见。结论利用Y79细胞系可以建立良好的视网膜母细胞瘤玻璃体腔移植瘤模型,为人们探索视网膜母细胞瘤的发展规律以及治疗方法提供了有用的工具。     

RNAi沉默ROCK-1基因抑制人视网膜母细胞瘤细胞株Y79的增殖、侵袭和转移

目的探讨利用RNA干扰技术(RNAi)沉默人视网膜母细胞瘤Y79细胞株ROCK-1基因对细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法实验设空白对照组、阴性脂质体组、实验组。转染后48 h,采用半定量RT-PCR检测ROCK-1、MMP9和CXCR4 mRNA的相对表达变化,采用Western blot检测ROCK-1、MMP9和CXCR4蛋白的表达变化。采用MTT法在转染后24 h、48 h、72 h分别检测细胞的生长情况。采用Transwell小室检测转染后细胞的侵袭和迁移能力。结果与空白对照组和阴性对照组相比,转染组细胞ROCK-1、MMP9和CXCR4 mRNA和蛋白表达水平明显下调;细胞生长活力显著下降、凋亡比率显著增加;基因沉默显著抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移能力,差异均具有统计学意义。结论应用ROCK-1-siRNA转染人视网膜母细胞瘤Y79细胞株,可有效抑制细胞的增殖、侵袭和迁移。小干扰RNA治疗有望成为人视网膜母细胞瘤靶向治疗的新手段。     

视网膜母细胞瘤的护理体会

视网膜母细胞瘤的护理体会６４６０００泸州医学院附属医院鲁晓霞，梁克丽，程文惠视网膜母细胞瘤是以视网膜内颗粒层，细胞层和外颗粒层为起源的胚胎性恶性肿瘤，是常染色体显性遗传病，大多数见于３岁以下儿童，年龄越小．预后愈差。我科从１９９３年１月～１９９５年７...     

姜黄素诱导视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50凋亡的研究

目的探究姜黄素对视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50凋亡的影响及其机制。方法 SO-Rb50细胞株经传代培养后随机分为4组:对照组(未经任何处理)、姜黄素低浓度组(10 mg/L)、中浓度组(20 mg/L)、高浓度组(40mg/L)。采用MTT法分析各组SO-Rb50细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blotting)分析各组细胞中线粒体凋亡信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,姜黄素不同浓度组SO-Rb50细胞增殖抑制率、Caspase8 mRNA表达水平、Bax、cleaved caspase-9及cleaved caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P 0. 05),中浓度组与高浓度组显著高于低浓度组(P 0. 05),而中浓度组与高浓度组比较差异无统计学意义(P 0. 05);中浓度组SO-Rb50细胞凋亡率显著高于对照组(P 0. 05);与对照组相比,姜黄素不同浓度组SO-Rb50细胞中COX2 mRNA表达水平及Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P 0. 05),中浓度组与高浓度组显著低于低浓度组(P 0. 05),中浓度组与高浓度组比较差异无统计学意义(P 0. 05); Hoechst染色显示姜黄素中浓度组SO-Rb50细胞核蓝色荧光明显增强并出现凋亡小体。结论不同剂量的姜黄素通过激活线粒体凋亡信号通路发挥促进SO-Rb50细胞凋亡的过程,但中浓度与高浓度姜黄素作用无显著差异。     

RNA干扰Survivin基因在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中的作用

目的利用RNAi技术沉默人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞Survivin基因。方法应用RNAi技术,以pGCsi/U6质粒为载体构建Survivin-siRNA重组质粒,体外转染SH-SY5Y细胞,通过RT-PCR检测Survivin基因的表达。结果重组质粒转染SH-SY5Y细胞后其生长明显受抑制;Survivin基因的表达明显低于对照组(P0.01),达到了抑制效果。结论 RNAi可明显降低人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中Survivin基因的表达,从而抑制细胞生长,促进凋亡。     

视网膜母细胞瘤误诊报告

【病例】男性，６岁。左眼发现白瞳１０余日，于１９９７年６月１５入院。无外伤史。查体：右眼正常。左眼视力光感，眼位正常，无突眼；球结膜轻度充血，瞳孔下方有白色反光；眼前节无炎症；玻璃体混浊，少量积血；眼底于颞下方可见网膜呈灰黄色隆起，其上有血管爬行，视...     

视网膜母细胞瘤中FasL表达的研究——一种新的肿瘤免疫逃逸机制

目的：探讨ＦａｓＬ 在视网膜母细胞的表达及意义。方法：本研究用免疫组织化学ＳＰ 方法检测了４５ 例视网膜母细胞瘤及１２ 例正常视网膜组织中ＦａｓＬ 蛋白的表达。结果：ＦａｓＬ 在视网膜母细胞瘤及正常视网膜组织中的表达分别为３－０２１±０－８４７ ,３－５８３ ±０－６６９ ,差异无显著性（ Ｐ＝ ０ ．０２３） ,均呈高表达。结论：ＦａｓＬ 在视网膜母细胞瘤及正常视网膜中均呈现高表达,是贯穿视网膜母细胞瘤发生及发展过程中的一个重要事件,与肿瘤细胞的免疫逃逸机制有关,在肿瘤的发展中起重要作用。     

川芎嗪抑制人视网膜母细胞瘤SO-RB50生长机制的研究

目的:研究川芎嗪对人视网膜母细胞瘤(RB)SO-RB50细胞增殖的影响,并探讨其作用与趋化因子CXCR4表达水平之间的关系。方法:体外培养人SO-RB50细胞,经川芎嗪处理不同时间后,应用MTT法检测SO-RB50细胞的增殖抑制;采用荧光定量逆转录PCR和蛋白免疫印迹法分别从基因和蛋白质水平检测川芎嗪对SO-RB50细胞趋化因子受体CXCR4表达的影响,进而应用流式细胞仪检测SO-RB50细胞的细胞周期分布。结果:MTT结果显示川芎嗪对人SO-RB50细胞增殖有明显的抑制作用,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);细胞周期结果显示川芎嗪处理后的SO-RB50细胞G0/G1期增多,S期细胞减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);通过荧光定量逆转录PCR及蛋白免疫印迹实验证明,川芎嗪能下调人SO-RB50细胞CXCR4的表达水平。结论:川芎嗪对人SO-RB50细胞的增殖有明显抑制作用,且能下调SO-RB50细胞中与肿瘤发生及生长密切相关的CXCR4表达水平。     

视网膜母细胞瘤患儿的护理

目的 探讨视网膜母细胞瘤患儿的护理方法.方法 术前进行健康教育和心理护理,术后密切观察术眼情况,预防并发症,同时做好用药护理,保证有效治疗及检查,出院时正确指导保养义眼片及护理义眼,提供遗传咨询.结果 经过及时正确的治疗和护理,加强遗传咨询,患儿均未发生并发症,康复情况良好,生活质量提高.结论 加强健康教育和心理护理,提高患儿及家属的依从性,密切观察病情,精心护理,加强出院指导,是促进患儿康复,减少并发症,提高生活质量的重要保证.     

视网膜母细胞瘤中survivin的表达

目的 探讨survivin在视网膜母细胞瘤中的表达情况.方法 对20例视网膜母细胞瘤组织和8例正常视网膜组织采用免疫组织化学方法分析,采用Mann-Whitney U法分析组间差异.结果 视网膜母细胞瘤组中有14例suvivin表达阳性,正常组无1例阳性,两组间存在统计学差异(P＜0.01).结论 视网膜母细胞瘤组织中snrvivin表达上调,可能与肿瘤的发生和发展相关.     

抑制Smac基因表达对胰腺癌裸鼠移植瘤生长影响的研究

[目的]探讨Smac基因对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.[方法]于裸鼠腋下接种200 μL 107/mL的PANC-1细胞悬液,建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将其分为三组：注射PBS液（A组）、转染空载体（B组）、转染Smac基因（C组）,比较三组移植瘤的大小、移植瘤细胞的凋亡率,移植瘤中Smac蛋白表达和微血管密度（MVD）.[结果]与A、B组比较,C组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小;移植瘤细胞的凋亡指数和Smac蛋白的表达率均明显增高,其差异均有统计学意义（P〈0.05）.[结论]脂质体转染Smac基因能抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导胰腺癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

磺化异麦芽寡聚糖对人肝癌细胞株HCCLM3移植瘤生长的影响

目的：探讨磺化异麦芽寡聚糖（isomalto oligosaccharide sulfate, IMOS）对人肝癌细胞株HCCLM3移植瘤生长的影响。方法：用剂量递增腹腔给药的方法,监测IMOS对裸鼠体质量、肝肾功能及重要脏器组织病理学的影响。用活体荧光显微镜,每周动态评价0、30、60、90mg／（kg·d）IMOS治疗组裸鼠中HCCLM3肝癌移植瘤的生长情况。结果：在≤90mg／（kg·d）剂量下,IMOS对裸鼠无明显毒性,且能显著抑制肝癌生长。结论：IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,值得进一步研究。     

LMWH对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响

【目的】探讨低分子肝素（LMWH）对裸鼠胃癌原位模型生长、转移及趋化因子SDF-1表达的影响。【方法】应用原位移植方法建立裸鼠胃癌原位模型,术后7d将裸鼠随机分为3组：对照组（生理盐水）、化疗组（5-氟尿嘧啶）、LMWH组（低分子肝素钙）,分别每周注药2次,共5周,第6周处死动物,观察裸鼠胃癌原住模型肿瘤转移及生长情况。采用RT—PCR技术检测胃肿瘤组织SDF-1mRNA表达水平。【结果】化疗组、LMWH组肿瘤体积较对照组明显缩小,差异有统计学意义（P〈0．05）;LMWH组胃癌原位模型肿瘤转移率（20％）低于对照组（70％）,差异有统计学意义（P〈0．05）,而与化疗组之间差异无统计学意义（P〉o．05）;LMWH组SDF-1mRNA表达均较对照组和化疗组低,差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】LM—wH可抑制裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及远处转移,其部分机制可能与降低肿瘤sDF_1的表达有关。     

新鲜及冻存的人脐血移植于裸鼠的实验研究

目的　探讨人新鲜脐血及冻存脐血移植于裸鼠的规律及差别。方法　采用Balb/Cnu +裸鼠致死量放射线照射后输入人新鲜或冻存脐血单个核细胞 ,观察小鼠存活率、存活时间 ,检测移植成活证据及干细胞在小鼠体内的迁移 ,定居情况。结果　新鲜脐血组及冻存脐血组小鼠存活率及存活时间均显著高于对照组 ,前两组则无显著差异 ;PCR法及流式细胞术检测小鼠体内人特异性基因及细胞均证实了人冻存脐血已在小鼠骨髓内定居并植入成活 ,持续至少 130d ;但冻存脐血干细胞的迁移情况与新鲜脐血有所差异。结论　脐血中富含造血干细胞 ,能使免疫缺陷小鼠获得造血和免疫重建 ;冻存可长期保存干细胞活性 ,但可能影响干细胞表面定居相关粘附分子 ,从而影响其迁移行为。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为0.9%氯化钠液(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml.只-1(NS组)或As2O310mg·kg-1(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积。结果:NS组瘤重0.992±0.401g、体积(1.50±0.57)mm3,As2O3组瘤重(0.526±0.269)g、体积(0.83±0.39)mm3,瘤重和体积明显下降(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长。     

卡培他滨联合干扰素-α抑制裸鼠肝癌生长的实验研究

目的:研究卡培他滨联合干扰素-α抑制肝癌生长的作用及其机制。方法:人肝癌高转移裸鼠模型LCI—D20 30只,随机分为对照组、卡培他滨组、干扰素组和联合用药组。用药3周后,观察肝内原位瘤体积的变化,利用ELISA方法检测肿瘤组织内的胸苷磷酸化酶(TP)表达水平。结果:对照组、卡培他滨组、干扰素组和联合用药组肿瘤体积分别为1033±146mm~3、455±236mm~3、248±114mm~3和46±29mm~3。与对照组肿瘤体积相比,给药组肿瘤体积明显缩小,联合用药组尤为突出,差异极显著(P<0.01)。析因设计方差分析表明联合应用卡培他滨与干扰素具有协同作用。应用干扰素组(包括干扰素组与联合用药组)与未用干扰素组(包括对照组与卡培他滨组),肿瘤组织中TP酶表达水平分别为30.52±10.73ng/mg蛋白质20.10±3.67ng/mg蛋白质,两组差异极显著(P<0.01)。结论:干扰素-α可上调肝癌组织中TP酶表达,与卡培他滨联合应用具有协同抑制LCI—D20肝癌生长的作用。     

外源性表达 VEGF165b 对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长影响的研究

目的：建立人膀胱癌 T24细胞裸鼠移植瘤模型,探讨外源性表达 VEGF165b 对其生长的影响及其机制。方法分别移植未转染和转染 VEGF165b 表达载体的人膀胱癌 T24细胞到裸鼠膀胱内,28 d 使处死动物,称量肿瘤重量,测定肿瘤体积。Western blot 法检测肿瘤 VEGF165b、p-VEGFR2、AKT、p-AKT 蛋白表达。结果转染 pcD-NA-VEGF165b 组肿瘤重量和体积与未转染组和转染 pcDNA3．0组相比明显降低（P ＜0．05）,而未转染组和转染pcDNA3．0组比较无统计学差异（P ＞0．05）。Western blot 结果显示,转染 pcDNA-VEGF165b 组与未转染组和转染pcDNA3．0组比较,VEGF165b 表达增高,p-VEGFR2、p-AKT 表达降低,而未转染组和转染 pcDNA3．0组间无明显差异。结论外源性表达 VEGF165b 可通过抑制 VEGFR2信号通路传导而明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长。     

表皮及周围结缔组织对人头皮毛囊在裸鼠背部生长的影响

目的：通过观察游离人头皮毛囊在裸鼠背部插入移植后的生长情况,探讨游离毛囊所带表皮成分以及周围结缔组织成分对其生长存活的影响。方法：将单根毛发的毛囊单位随机分为3组：A组为完整的毛囊单位,B组去除表皮成分,C组贴近毛囊去除周围结缔组织。将3组毛发植入裸鼠背部,在第2周时测量其生长长度及计算存活率,所得数据进行统计分析。毛发植入后共观察9周,并于9周后取毛囊做HE染色,观察其结构。结果：植入2周后,各组毛囊毛干的生长长度无显著差异（P〉0.05）。各组间毛发的存活率无显著差异（P〉0.05）。自移植后第2周起,裸鼠背部植入的毛发逐渐脱落。在第9周时,各组均见部分毛发已脱落毛囊处有重新长出的纤细柔软的黑色毛发。HE染色可见到人头皮毛囊在裸鼠背部存活,各层次结构清晰可见。结论：游离人头皮毛囊能在裸鼠背部生长,有无表皮成分及有无较完整的周围结缔组织对毛囊的生长无明显影响。有部分毛囊可再次进入毛发生长周期,形成纤细的毛发。     

安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植肿瘤生长及生物钟基因表达的影响

[目的]探讨安罗替尼对人肝癌细胞裸鼠移植后肿瘤生长情况及相应生物钟基因表达的影响.[方法]选取实验无胸腺裸鼠共36只,取人肝癌HepG2细胞,移植于小鼠左侧腋皮下,建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型.接种完成1周后,随机分为安罗替尼处理组和对照组,每组18只.安罗替尼组给予安罗替尼50 mg/(kg·d)灌胃,空白对照组给予二...