活血消瘤方对子宫肌瘤模型大鼠的抑瘤作用及雌激素受体、孕激素受体表达的影响

摘要：目的:探讨活血消瘤方对子宫肌瘤模型大鼠的抑瘤作用及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达的影响。方法:建立子宫肌瘤模型大鼠,将成功造模的64只大鼠随机分为模型组、米非司酮组(1.04 mg·kg-1)、活血消瘤方低(12.5 g·kg-1)、高(25 g·kg-1)剂量组,另设正常大鼠作为对照组,每组16只;米非司酮组、活血消瘤方低、高剂量组大鼠予以相应药物干预,对照组、模型组给予等体积的生理盐水灌胃。8周后,测定血清性激素[雌二醇（E2）、孕酮（P）、促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）]水平;获取子宫标本,测定子宫系数、子宫横径、平滑肌厚度指标;苏木素-伊红（HE）染色进行子宫组织病理观察;测定子宫平滑肌组织ER、PR及血管内皮生长因子（VEGF）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1） mRNA与蛋白水平。结果:对照组大鼠子宫平滑肌结构正常;模型组大鼠子宫平滑肌出现结缔组织增生、增厚、可见明显炎症细胞浸润;米非司酮、活血消瘤方干预后,情况明显好转。与对照组比较,模型组大鼠血清E2、P、FSH、LH水平、子宫系数、子宫横径、平滑肌厚度、子宫平滑肌组织ER、PR、VEGF、IGF-1 mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）;与模型组比较,米非司酮组、活血消瘤方低、高剂量组大鼠血清E2、P、FSH、LH水平、子宫系数、子宫横径、平滑肌厚度、子宫平滑肌组织ER、PR、VEGF、IGF-1 mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）;与米非司酮组比较,活血消瘤方低、高剂量组大鼠血清E2、P、FSH、LH水平、子宫系数、子宫横径、平滑肌厚度、子宫平滑肌组织ER、PR、VEGF、IGF-1 mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）;与活血消瘤方低剂量组比较,活血消瘤方高剂量组大鼠血清E2、P、FSH、LH水平、子宫系数、子宫横径、平滑肌厚度、子宫平滑肌组织ER、PR、VEGF、IGF-1 mRNA和蛋白水平降低（P<0.05）。结论:活血消瘤方对子宫肌瘤具有明显抑瘤作用,能明显改善大鼠相关激素水平;其机制可能与活血消瘤方降低子宫平滑肌组织ER、PR、VEGF、IGF-1的表达进而抑制子宫肌瘤生长有关。     

荔枝核提取物抑制乳腺增生模型大鼠乳腺组织ER和PR表达及促进乳腺细胞凋亡作用研究

目的:研究荔枝核提取物抑制乳腺增生(HMG)模型大鼠乳腺组织雌二醇受体(ER)和孕酮受体(PR)表达及促进乳腺细胞凋亡的作用。方法:肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg·kg-1连续25d后,改肌肉注射黄体酮4mg·kg-1连续5d,复制大鼠HMG模型。取健康、未孕雌性SD大鼠60只,均分为6组,即正常(蒸馏水)、模型(蒸馏水)、乳结平(3.3g·kg-1)及荔枝核提取物高、中、低剂量(44、22、11g·kg-1)组,ig给药,每天1次,连续给药30d。通过免疫组化方法观察大鼠乳腺组织中ER和PR的表达情况,流式细胞仪检测乳腺组织细胞凋亡情况,并计算子宫指数。结果:高、中剂量荔枝核提取物能显著抑制HMG模型大鼠乳腺中ER和PR表达(P<0.01或P<0.05),显著促进乳腺细胞凋亡(P<0.01或P<0.05)。HMG大鼠乳头红肿及增生明显,子宫指数显著增加(P<0.01),而各给药组能不同程度地逆转上述病理性改变(P<0.05或0.01)。结论:荔枝核提取物能抑制HMG模型大鼠乳腺组织ER和PR表达,并促进乳腺细胞凋亡,改善HMG及子宫的病理变化,从而有效地对抗雌激素性大鼠HMG。     

姜黄素对大鼠子宫内膜异位症激素及受体的影响

目的:探讨姜黄素(crucumin)治疗大鼠子宫内膜异位症的治疗机制。方法:采用雌性SD清洁级大鼠建立模型子宫内膜异位症模型,分为空白对照组、模型组、孕三烯酮组、姜黄素组。给药3周后,酶联免疫反应法(ELISA)测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)的含量,SP法检测异位子宫内膜组织雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、孕激素受体(PR)的表达。结果:孕三烯酮组、姜黄素组血清E2、P含量和异位组织ERα、ERβ、PR的表达与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),孕三烯酮组、姜黄素组组间无明显差异(P>0.05)。结论:姜黄素能降低血清E2、大鼠子宫内膜异位组织ERα、ERβ表达,提高血清P含量与异位组织PR的表达,抑制模型大鼠异位内膜的生长,实现治疗目的。     

香虎清妇炎颗粒对子宫肌瘤模型大鼠影响的实验研究

目的 研究香虎清妇炎颗粒(XHQFYKL)对子宫肌瘤的治疗作用,探讨其部分作用机理,为其临床应用提供实验依据.方法 给大鼠肌注雌激素及孕激素造成子宫肌瘤模型,观察XHQFYKL对大鼠子宫肌瘤的病理增生、肌瘤组织中孕激素受体(PR)和雌激素受体(ER)表达的影响,从而探讨XHQFYKL治疗子宫肌瘤的作用机制.结果 XHQFYKL有调节卵巢激素的作用,并可抑制子宫平滑肌的增生,能显著减少肌瘤组织中ER、PR的含量.结论 XHQFYKL可通过调节卵巢激素治疗子宫肌瘤.     

沙利度胺联合孕三烯酮对大鼠子宫内膜异位症血管生成的影响

目的探讨沙利度胺、孕三烯酮及两者联合用药对大鼠子宫内膜异位组织中血管生成的影响。方法24只子宫内膜异位症模型SD大鼠,随机分为模型对照、沙利度胺(20mg·kg-1·d-1)、孕三烯酮(0.5mg·kg-1·d-1)及联合用药(沙利度胺20mg·kg-1·d-1和孕三烯酮0.5mg·kg-1·d-1)4组,每组6只。药物溶于生理盐水中腹腔注射给药,模型对照组每日腹腔注射生理盐水2mL。给药4wk后处死,免疫组织化学SP法测定血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在异位内膜的表达,并通过Ⅷ因子标记异位子宫内膜血管,检测异位内膜组织中微血管密度(MVD)。结果沙利度胺组、孕三烯酮组及联合用药组异位内膜MVD、VEGF和TNF-α的表达均显著低于模型对照组(P<0.01),其中联合用药组MVD和VEGF比沙利度胺组和孕三烯酮组降低得更为显著(P<0.05),联合用药组TNF-α与孕三烯酮组无显著差异(P>0.05)。结论沙利度胺和孕三烯酮可抑制大鼠异位内膜的MVD、VEGF和TNF-α的表达,从而抑制子宫内膜异位症血管生成,当两者联合用药时,作用更强。     

小柴胡汤对子宫内膜异位症大鼠异位内膜形态结构的影响

目的:探讨小柴胡汤治疗大鼠子宫内膜异位症对其异位内膜形态结构的影响。方法:采用实验性大鼠子宫内膜异位症动物模型,分 5组,小柴胡汤组分别给小柴胡汤 5, 10, 15g·kg-1·d-1,达那唑组给达那唑0. 1g·kg-1,对照组给蒸馏水 20mL·kg-1,均ig,qd。从大体、光镜、电镜等形态学水平,观察小柴胡汤对子宫内膜异位症大鼠异位内膜形态结构的影响。结果:给予小柴胡汤 5, 10, 15g·kg-1·d-1 4wk后,子宫内膜异位症大鼠均可见异位内膜体积缩小、萎缩;在光镜和电镜下观察到子宫内膜异位症大鼠异位内膜生长明显受抑制。结论:小柴胡汤对实验性大鼠子宫内膜异位症具有治疗作用。     

妇科再造丸对子宫肌瘤模型大鼠的保护作用研究

目的:研究妇科再造丸(FKW)对子宫肌瘤模型大鼠的保护作用。方法:实验分为6组,即正常对照、模型、桂枝茯苓胶囊(0.3g·kg-1)与FKW高、中、低剂量(1.12、0.56、0.28g·kg-1)组。雌二醇(E2)、孕激素(P)负荷法复制大鼠子宫平滑肌瘤样增生模型,观察子宫组织病理改变,检测子宫组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达与血清中E2、P水平。结果:与正常对照组比较,模型大鼠较正常大鼠子宫明显增大,血清中E2、P水平显著升高,子宫组织中ER、PR的表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,FKW高、中、低剂量组血清中E2、P水平显著降低,FKW高剂量组平滑肌细胞ER、PR的表达显著减弱(P<0.05或P<0.01)。结论:FKW有抗大鼠子宫平滑肌瘤样增生的作用,其机制可能与调节血中E2、P水平,抑制子宫平滑肌细胞ER、PR的表达有关。     

子宫腺肌病组织中ER、PR和EGFR的表达及其临床意义

目的探讨雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体在子宫腺肌病组织中的表达情况以及ER、PR、EGFR与AM发病的关系。方法采用免疫组化SP法检测40例子宫腺肌病患者异位内膜、在位内膜及40例正常子宫内膜组织中ER、PR、EGFR的表达。结果腺肌病组异位内膜、在位内膜组织中ER、PR表达水平显著低于正常子宫内膜,异位内膜组织中ER、PR表达无周期性变化,而在位内膜和正常子宫内膜组织中ER、PR表达均符合增生期高于分泌期的变化规律。腺肌病组异位内膜、在位内膜组织中EGFR的表达水平显著高于正常子宫内膜,并且在位内膜组织中EGFR的表达水平显著高于异位内膜。结论子宫腺肌病患者异位内膜组织中ER、PR的表达水平低,可能是其对抗激素药物治疗反应差的原因。子宫腺肌病患者异位内膜、在位内膜组织中EGFR表达水平增强,提示EGFR在子宫腺肌病的发生发展中起着重要作用,可能为靶向生物治疗提供一个新的靶点。     

那法瑞林对正位和异位子宫内膜雌激素受体含量的影响

本实验旨在研究那法瑞林(Naf)对兔正位和异位子宫内膜组织内雌激素受体(ER)含量的影响. 以手术方法制备兔异位内膜模型后, 将兔分为对照组,Naf 1, 3, 10 μg·kg^-1·d^-1, sc 治疗组以及手术切除双侧卵巢(OVx) 组. 6周后发现, 经Naf和OVx治疗的兔, 其子宫的重量及其内膜组织内的ER数量明显减少. 但对异位子宫内膜组织内ER的免疫组织化学分析结果表明, Naf长期应用并未引起异位内膜ER数量的明显改变. 结果提示Naf对兔子宫的抑制作用可能通过ER介导, 而其对异位子宫内膜的抑制作用则可能与ER无关.     

子宫内膜异位症血管生成相关分子分型的研究

目的:探讨子宫内膜异位症相关基因型的变化以及血管内皮生长因子(VEGF)和病程相关蛋白(PR蛋白)的表达情况,为子宫内膜异位症血管生成相关的分子分型提供有意义的线索。方法:用PCR、Northern blot及免疫组化技术检测30例卵巢内膜样囊肿患者的30份异位子宫内膜(异位内膜组)、30份在位子宫内膜(在位内膜组)以及25例非子宫内膜异位症患者的25份子宫内膜(对照组)中的VEGF和PR基因及蛋白的表达水平。结果:异位内膜组与在位内膜组的VEGF mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05),而在位内膜组与异位内膜组的VEGF mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);异位内膜组织中PRmRNA的表达显著低于在位内膜组和对照组(P<0.01),在位内膜组织中PR mRNA的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。内膜异位组异位内膜中的PR阳性率显著低于在位内膜组和对照组(P<0.05),而在位内膜中的PR阳性率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);异位内膜与在位内膜的VEGR阳性率显著高于对照组(P<0.01),而异位内膜与在位内膜的VEGF阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子宫内膜异位症患者中VEGF mRNA的高表达和PR mRNA的低表达可能参与了子宫内膜异位症的发生发展过程。     

子宫内膜癌中ER、PR、MK、VEGF的表达及与病理特征的关系

目的探讨子宫内膜癌中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、中期因子（MK）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量PCR检测50例子宫内膜腺癌（研究组）和30例正常子宫内膜组织（对照组）中ER、PR、MK、VEGFmRNA的表达水平,结合患者的临床病理资料进行分析。结果 （1）子宫内膜癌组织中ER和PRmRNA表达量,较对照组低（P〈0.05）。MK和VEGFmRNA表达量明显高于对照组（P〈0.05）。（2）在子宫内膜癌组织中检测指标的表达水平与临床病理分期、组织学分级和肌层浸润深度有关系,随临床病理分期、组织学分级的升高和肌层浸润的加深,ER、PR的表达水平下降,而MK和VEGF表达水平明显升高,均有统计学意义（P〈0.05）。结论 ER、PR、MK和VEGF的检测有助于评估子宫内膜癌的生物学行为和预后,并指导该疾病的内分泌治疗。     

人参皂苷Rh2抑制实验性大鼠子宫异位内膜增殖及其作用机制探讨

目的探讨人参皂苷Rh2对实验性SD大鼠子宫内膜异位症模型的抑制作用及其机制。方法外科手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症模型,在第2次开腹后按模型异位内膜大小随机分成5组,分别是模型对照组(0.5%羧甲基纤维素钠,0.5%CMC-Na),孕三烯酮组(1.5 mg.kg-1)和Rh2低、中、高剂量组(5、10、40 mg.kg-1);连续灌胃给药21 d后,在末次给药24 h内麻醉解剖大鼠、采血及保存异位内膜组织。HE染色观察异位内膜病理组织学改变;Elisa测定血清中雌激素(Estrogen,E2)、孕激素(Progesterone,P)和抗子宫内膜抗体(Endometrial antibody,EMAb)水平;Western blot检测异位内膜组织中Bcl-2、Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达情况。结果 Rh2(40 mg.kg-1)异位内膜组织明显萎缩,腺体数目明显减少,腺腔萎缩,腔内积液体积减少;Rh2(5、10、40 mg.kg-1)降低E2、P和EMAb的水平;Rh2(5、10、40 mg.kg-1)异位内膜组织中Bax/Bcl-2、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达明显升高。结论 Rh2(40 mg.kg-1)可明显抑制实验性SD大鼠异位内膜生长,其作用机制可能与降低E2、P和EMAb水平、上调Bax/Bcl-2蛋白表达、激活细胞凋亡的内源性途径启动因子Caspase-9蛋白、激活执行因子Caspase-3蛋白表达有关。     

围绝经期和绝经后子宫内膜息肉局部雌孕激素受体的表达及意义

目的研究雌激素受体（estrogenreceptor,ER）、孕激素受体（progesteronereceptor,PR）在围绝经期、绝经后子宫内膜息肉及正常子宫内膜中的表达,探讨其在子宫内膜息肉发病中的意义。方法采用免疫组化sP法检测3组中ER、PR的表达;利用逆转录聚合酶连反应（RT—PCR）检测3组组织中ER、PR的转录水平。结果无论免疫组化还是RT—PCR结果均显示围绝经期及绝经后子宫内膜息肉组织中ER高于对照组（P〈0．05）,RT—PCR结果显示绝经后子宫内膜息肉组织中PR表达高于围绝经期息肉及正常对照组（P〈0．05）。结论围绝经期子宫内膜息肉发生可能与局部激素受体水平变化有关,其中雌激素受体起关键作用,提示绝经后子宫内膜息肉患者发病与局部雌孕激素受体水平升高均有关。     

子宫内膜癌ER、PR的表达及其临床意义

目的检测子宫内膜癌组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）阳性表达率并探讨其临床意义。方法应用免疫组化技术对47例子宫内膜癌组织进行ER、PR检测,结合临床及病理指标进行分析。结果ER、PR在47例子宫内膜癌的阳性表达率分别为57.4%和61.7%,ER、PR的双阳性、双阴性分别为48.9%和29.8%。ER、PR在子宫内膜癌的阳性表达率与组织学分级密切相关,随组织学分级的增高,其阳性表达率逐渐降低,有统计学意义（P〈0.05）。ER、PR的表达与肌层浸润、子宫外病灶有关,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论ER、PR均反应了子宫内膜癌的生物学行为,是一个可以综合反映病程、病情和病变性质的客观指标,其测定对估计患者预后,指导临床选择激素治疗具有重要意义。     

Quantitative analysis of expression level of estrogen and progesterone receptors and VEGF genes in human endometrial stromal cells after treatment with nicotine

Cigarette smoke is a complex mixture of toxic chemicals, including nicotine, carbon monoxide, and several recognized carcinogens and mutagens. Nicotine has a direct disturbing influence on steroid hormones (estrogen and progesterone), which are essential components of the female reproductive system, but the effect of nicotine on the hormone receptors is not yet clear. The aim of this study was to elucidate the effect of nicotine on the expression of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), and vascular endothelial growth factor (VEGF) in endometrial stromal cells. Expression levels of PR, ER, and VEGF in human endometrial stromal primary cells treated with nicotine (0, 10^?11, 10^?8, and 10^?6?μM) for 24?h were measured by quantitative real-time PCR. MTT assay demonstrated that nicotine decreased cell viability in a dose-dependent manner. Real-time PCR data showed that despite decrease in ER expression in the nicotine-treated groups compared with the control, nicotine exerted an increased inhibitory effect on PR expression compared to that on ER expression. VEGF mRNA expression in nicotine-treated endometrial stromal cells was increased. The results from this study provide novel evidence for inhibitory effects of nicotine on steroid hormones receptor expression in human primary endometrial cells. Also, our data suggest that nicotine might have angiogenesis effects on these cells.     

雌激素受体、孕激素受体与凋亡基因蛋白在子宫腺肌症中的表达

目的探讨雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及凋亡基因蛋白（bcl-2）在子宫腺肌症中正位及异位内膜的表达及意义。方法采用免疫组化PV-9000二步法检测20例正常子宫内膜,58例子宫腺肌症正位及异位内膜ER、PR和bcl-2的表达情况。结果子宫腺肌症病例中,正位和异位内膜组织中ER、PR、Bcl-2都有阳性表达,异位腺体上皮阳性率高于间质细胞（P〈0．05）,异位内膜Bcl-2阳性表达率高于正位内膜（P〈0．05）;且增生期阳性表达率高于分泌期,差异有显著性（P〈0．05）。子宫腺肌症病例正位和异位内膜中ER、PR阳性表达率差异无显著性（P〉0．05）,在异位内膜中ER、PR、bcl-2的表达具有相关性（P〈0．01）。结论子宫腺肌症正位和异位子宫内膜中均有ER、PR和bcl-2的阳性表达,提示可能与子宫腺肌症的发生发展有关。     

绝经后子宫内膜息肉患者外周血中雌孕激素水平及息肉组织中雌孕激素受体的表达

目的研究绝经后子宫内膜息肉患者外周血中雌孕激素水平及息肉组织中雌孕激素受体(ER、PR)的表达。方法采用ELISA法检测绝经后正常子宫内膜(对照组,n=19)和子宫内膜息肉患者(病例组,n=22)外周血中雌孕激素水平,免疫组化SP法检测绝经后正常子宫内膜和子宫内膜息肉中雌孕激素受体表达水平。结果绝经后子宫内膜息肉患者病变局部雌孕激素受体水平均较萎缩的子宫内膜组要高(P<0.05),而外周血雌孕激素水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论局部雌孕激素受体水平不平衡可能是绝经后女性子宫内膜息肉发病的病理生理基础。