ELISA法HBsAg的“即刻性”室内质控

室内质量控制是保证实验室工作质量的有效手段,但由于ELISA试剂的有效期短、批号更换频繁,短时间内难以测得S（标准差）值所需批次,因此,完全沿用生化定量试验的质控模式,是不现实的。而“即刻性”室内质校在实验的第3天就可观察结果是否失控,及时的控制实验质量。作者于1998年4月起对HBsAg进行“即刻性”室内质控,现将结果报告如下。1材料和方法1．1“即刻性”室内质控的方法[1]1．2对HBsAg某厂家试剂7个批号（980220、980504、980603、980710、980901、980917、98101）进行检测,所有批号均通过“批检”。1．3质控血清：由卫…     

ELISA法检测抗-HIV的即刻法室内质控

ELISA实验的质控一般采用化学定量实验的质控模式。由于ELISA试剂盒有效期短,批号更换频繁,短时问内难以测得确定S值所需批次;而且该实验的变异较大,批内测定不能代表批间测定,实际操作较困难。我科为保证检测结果的可靠性,采用“即刻法”对ELISA检测进行室内质控,并绘制即刻法室内质控表。通过实践证明效果良好,现以ELISA检测抗-HIV为例报告如下。     

抗-HIV临界值质控血清的制备和"即刻法"室内质控

以自制的外部质控定值血清作为质控物，对ELISA法检测抗-HIV进行“即刻法”室内质控，此法简便、经济，取得了良好效果现报告如下。     

ELISA实验“即刻法”室内质控的局限性

<正>Levey-Jennings质控图法需连续测定20次才能进行质控,对于一些工作量小的酶免实验室难度较大,"即刻法"室内质控只需3个数据就可对第3次数据进行质控,有效解决了数据积累不够的难题,弥补了Levey-Jennings质控图法的不足之处,但在ELISA实验长期的使用过程中,笔者发现"即刻法"室内质控也有其局限性,现以3组数据为例,将"即刻法"室内质控的局限性叙述如下。     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的室内质控研究

目的研究HBV-DNA荧光定量PCR检测室内质控管理体系。方法自制HBV-DNA阳性质控血清,连续测量20次,计算均值、标准差和变异系数,从第3次开始利用即刻法进行质控,20次以后利用质控图法进行质控。结果自制阳性质控血清均一性和准确度均达到实验要求,用即刻法检测3～20次质控结果均小于N2S数值,在控制范围内,用质控图法检测HBV-DNA室内质控对数值的均值为5.54,标准差为0.22,CV为3.9%,稳定性好,有临床应用价值,质控图利用EXCEL表格标示出警告限和失控限,有利于动态监控质控结果。结论联合即刻法和质控图法对于应用荧光定量PCR的方法进行HBV-DNA检测的室内控制切实可行。     

即刻法用于酶联免疫吸附试验室内质控的探讨

目的探讨即刻法在酶联免疫吸附试验（ELISA）室内质量控制（IQC）中的局限性,建立一种适用于日常质控更加准确有效的操作方法。方法采用即刻法和控制变异系数（CV）的方法同时统计初始阶段的质控数据,并用Excel 2000对质控数据自动统计、分析并绘制出即时累积的L-J质控图,将此操作方法用于日常质控进行评价。结果即刻法中前3次的质控数据直接影响随后的结果,如前3个质控数据的CV〈5%,随后统计的结果会出现假失控,前3个质控数据的CV〉10%,随后的结果会出现假在控。同时结合即时累积的L-J质控图可以直观质控结果和质控图曲线。结论采用即刻法进行室内质控时,应用控制变异系数的方法可减少假失控和假在控的结果,同时结合即时累积的L-J质控图能更准确有效的进行评价,效果明显优于单用即刻法。     

抗-HCV ELISA试剂评估结果分析

目的 用酶联免疫吸附试验（ELISA）的双抗原夹心法和间接法检测抗-HCV,并对不同检测方法的试剂进行评估.方法 用1种双抗原夹心法和4种间接法检测抗-HCV血清盘和不同浓度的室内质控品,严格按试剂说明书在Xantus全自动加样仪和FAME全自动酶免分析仪中进行检测.结果 经用不同的ELISA法检测抗-HCV后,血清盘中阴性参考品符合率均为20/20,阳性参考品符合率均为20/20.双抗原夹心法灵敏度高,0.05NCU/mL的室内质控品能完全检测出来,间接法最低检出为0.5 NCU/mL,间接法的10个单试剂阳性标本用双抗原夹心法和RIBA确认法检测全部为阴性.结论 双抗原夹心法的抗-HCV ELISA试剂灵敏度和特异性均优于间接法.     

ABO血型实验的室内质控方法探讨

目的探讨ABO血型实验的室内质控方法。方法用抗-A、抗-B标准血清验证A、B、O试剂红细胞,用A、B、O试剂红细胞验证抗-A、抗-B标准血清。质控结果正常后,进行献血者血型鉴定实验,并观察实验凝聚效果。结果2009年1～10月,室内质控共发现3次血型试剂异常情况,经更换合格试剂后正常。本站22051份无偿献血者血液标本的ABO血型检测结果均正常,未发生错报血型结果的情况。结论血型实验的室内质控,可以进一步提高血型实验的准确性;血站检验科在每天工作开始时,应进行血型实验的室内质控,以进一步提高输血安全水平。     

电化学发光法检测感染项目的室内质控规则的探讨

目的：发光法定量检测感染标志物是近几年来一种新检测手段,因为其检测方法的特殊性及试剂的局限性一直未有一种很确定的质控规则来有效管理质控数据。本文通过实际操作中使用各种质控方法的心得,来探讨电化学发光法检测感染项目的质控规则。方法：将本实验室几种感染项目在2010年3月至5月份的质控数据绘制成双区定性质控图和Levey—Jennings质控图法,进行分析比较。结果：用Levey-Jennings质控图法可以及时发现系统误差及随机误差可以发现试剂、仪器、操作者存在的问题,效率较高,容易出现假失控;仅用双区法又会使质控数据太散漫而无法判断是哪种误差的存在;结论：将两者结合起来,优于用单一的质控规则。     

血液检测的“即刻性”室内质控

室内质量控制是保证实验室工作质量的一项重要措施 ,它能够很好地控制本室检测结果的精密度和准确度。绘制质控图一般需连续测定结果 2 0次以上 ,而“即刻性”质控在实验结果的第 3天就可计算出实验结果是否失控 ,并能很好地保证实验质量。笔者现将 1999年度开展无偿献血后进行的ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＣＶ、抗 ＨＩＶ的部分“即刻性”室内质控结果报告如下。1　材料和方法1.1“即刻性”室内质控方法　见文献[1] 。Ｓ为质控血清测定值 ,ｃｏ为ｃｕｔｏｆｆ值 ,ｓ/ｃｏ为判断值指数 ,其≥ 1.0样本判为阳性 ,<1.0样本判为阴性。1.2试剂　对ＨＢ…     

浅谈基层实验室HBsAg检测的室内质控法

质量控制图是实验室最主要的室内质控工具,为了建立简便、高效、准确的HBsAg酶联免疫吸附法检测的室内质控,我室结合质控图（简称L-J图）和＂即刻法＂（Crubbs法）质控的优点,建立了HBsAg的即刻法-质控图法的质控方法。通过室内质控监控实验操作的一致性以及判断结果的有效性,同时了解各批次试剂盒之间的误差（批间误差）,很大程度上提高了HBsAg酶联免疫吸附法检测的灵敏度与准确度,具有较好的可操作性,创建了一套更适合于基层实验室的室内质控方案。     

酶联免疫吸附试验检测HIV抗体的质量控制方法探讨

目的寻找一种适用于HIV抗体酶联免疫吸附实验室内质量控制(IQC)的方法。方法采用Levey-Jennings质控图法、即刻法和控制变异系数(CV)的方法(改良即刻法)同时统计规范操作前和规范后的两批各30个质控数据,制作质控图。结果规范前检测采用即刻法和Levey-Jennings质控图法考核显示在控,改良即刻法显示失控;规范后检测3种方法考核均为在控。结论采用即刻法考核,前3次结果对后续质控结果影响较大,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果会出现假在控。Levey-Jennings质控图法如果不对CV值进行考核,前3个质控数据的CV值较大时,随后的结果也会出现假在控。采用改良即刻法统计,只要设定好一个实验室或一个地区的允许CV值,就没有假失控和假在控的结果,因此改良即刻法较为适用于HIV抗体ELISA检测的室内质量控制。ELISA检测手工操作步骤较多,操作细节都对实验结果有很大影响,因此需要规范实验操作,并严格按照要求执行。     

血站抗-HIV试剂室内确认品的建立

目的 建立血站抗-HIV试剂室内确认品(以下简称确认品),用于常规试剂质量控制,保证血液检测质量.方法 应用ELISA及Westblot方法对北京市血液中心1997-2004年检出的抗-HIV阳性样品进行HIV-Ab检测,双孑L复试.并用Westblot进行确认.根据检测结果,依据血清盘设置的基本要求,建立抗-HIV试剂确认品,并用于常规试剂质量控制检测工作.结果 得到40份确认品.其中阴性标本20份,阳性标本19份,弱阳性标本1份.结论 选择建立的抗-HIV试剂确认品用于常规HIV-Ab EIA试剂的质控抽检.     

智能化酶联免疫工作站在酶联免疫室内质量控制中的应用

目的探讨智能化酶联免疫工作站在酶联免疫室内质量控制中的应用,是否可使酶联免疫室内质量控制得到提高。方法回顾性分析我院免疫室酶联免疫定性检测项目时每个检测板都带有弱阳性室内质量控制品,用即刻法质量控制图和L-J质量控制图计算此弱阳性质量控制品的S/COV值与标准差(s)和变异系数(CV)值的关系。每次酶联免疫检测时手工操作与TECAN酶联免疫工作站同时进行。通过2种方法质量控制图的弱阳性质量控制品的S/COV值与s和CV值的关系的比较,观察使用智能化酶联免疫工作站是否可使酶联免疫室内质量控制得到提高。结果手工操作与TECAN酶联免疫工作站同时进行,严格执行操作规程,对每日所得S/COV值与s和CV值的关系进行比较:手工操作法8个月中产生640个S/COV值,其中>3 s的点有10个,TECAN酶联免疫工作站8个月中产生640个S/COV值,其中>3 s的点有8个,经SPSS 13.0软件分析,2种方法比较差异无统计学意义(P>0.05)。8个月的手工法CV均值为16.89%,全自动法CV均值为15.78%。二者相差不大,全自动法的CV值没达到10%¹5%之间。但TECAN酶联免疫工作站全自动法可减少人为产生的加样错误。结论智能化酶联免疫工作站可减少人为误差,但对酶联免疫室内质量控制的提高无显著意义。     

男性不育患者精子质量和血清抗精子抗体分析

目的分析男性不育患者精子质量（密度、活率及活力）及其血清抗精子抗体的影响。方法采用ELISA法检测患者血清中抗精子抗体,用伟力彩色精子质量检测系统动态观察精子的密度、活率及活力。结果男性不育患者精子密度、活率、a级精子及a＋b级精子均明显低于正常生育组（57.66±11.88）×10^6/ml,（71.24±10.45）%,（39.47±8.24）%,（66.22±10.38）%v（s12.28±9.09）×10^6/ml,（34.46±10.02）%,（7.46±6.48）%,（21.03±11.21）%,P〈0.01。不育男性AsAb阳性组上述各指标也低于AsAb阴性组（P〈0.01）。结论男性不育患者精子密度、活率及活力均下降,同时血清抗精子抗体（AsAb）也可影响这些指标。     

甲胎蛋白定量测定试剂盒的临床应用

目的:通过新试剂(酶联免疫法)与已上市的试剂1(酶联免疫法)和试剂2(化学发光法)定量测定甲胎蛋白的比较,重点评价新试剂(酶联免疫法)测定甲胎蛋白的临床应用价值.方法:将发光法测定的AFP高、中、低值300份血清分别用上述三种方法进行检测,进行回归分析及相关分析.将低、中、高值质控品分别用上述三种方法每天测定一次,连续...     

小儿肺炎血清可溶性白细胞介素2受体水平的测定及其临床意义

采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）的方法，对６２名小儿肺炎血清ｓＩＬ－２Ｒ水平进行测定。实验表明：肺炎患儿血清ｓＩＬ－２Ｒ的含量（１）实验组与对照组比较有显著差异。（２）病情严重不同组有明显差别。（３）各种不同病原体组无显著性差异。综上所述，肺炎患儿免疫功能受抑制原因之一可能与血清ｓＩＬ－２Ｒ升高有关。血清中ｓＩＬ－２Ｒ测定对诊断肺炎的病情，疗效和转归有一定的指导意义。     

固相生物素－亲和素ELISA检测HIV抗体方法的建立与应用

采用生物素化ＨＩＶ合成肽抗原与预吸附在ＥＩＡ反应板上的亲和素结合，建立检测ＨＩＶ抗体的固相生物素－亲和素ＥＬＩＳＡ方法。经ＨＩＶ（１＋２）抗体参考血清Ｐａｎｅｌ检定，其灵敏度（１３／１３）１００％，特异性（２８／２８）１００％，批内变异系数＜７％，批间变异系数＜１０％。１０５６８例确认血清标本验证，阳性检出率１００％，阴性总符合率９９．８％，假阳性率０．２％。与常规间接ＥＬＩＳＡ法比较，本法操作简便，试验所需时间短，灵敏度、特异性和稳定性提高明显