采用PCR—RFLP技术分析石蜡包埋胃癌组织ras和P53基因点突变

采用多聚酶链延伸反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ—ＲＦＬＰ）法对福尔马林固定、石蜡包埋胃癌组织ｒａｓ和Ｐ５３基因．点突变进行分析，结果表明．Ｃ－Ｈａ—ｒａｓ第１２位密码子突变率为１３．６％（１２／８８），第６１位密码子为３．８％（３／８０）；Ｃ－Ｋｉ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为７．２％（５／６９），第１３位密码子未发现有点突变者；Ｎ—ｒａｓ第１２位密码子突变率为１．４％（１／６８）。Ｐ５３基因第２４８位密码子声、突变率为７．４％（５／８８），第２４９位密码子未见有点突变者。以上提示采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ技术可对多数从石蜡包埋胃组织提取的ＤＮＡ进行ｒａｓ和Ｐ５３基因。点突变分析。     

采用PCR—RFLP技术分析石蜡包埋胃癌组织ras和p53基因点突变

采用多聚酶链延伸反应一限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ—ＲＦＬＰ）法对福尔马林固定、石蜡包埋胃癌组织ｒａｓ和ｐ５３基因点突变进行分析，结果表明，Ｃ—Ｈａ—ｒａｓ第１２位密码子突变率为１３．６％（１２／８８），第６１位密码子为３．８％（３／８０）；Ｃ—Ｋｉ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为７．２％（５／６９），第１３位密码子未发现有点突变者；Ｎ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为１．４％（１／６８）。ｐ５３基因第２４８位密码子点突变率为７．４％（５／６８），第２４９位密码子未见有点突变者。以上提示采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ技术可对多数从石蜡包埋胃癌组织提取的ＤＮＡ进行ｒａｓ和ｐ５３基因点突变分析。     

胃癌组织中P53基因缺失、重排和点突变的研究

本文用Southern杂交方法分析了30例胃癌组织中P53基因的缺失和重排,发现9例(30％)有缺失或重排;用PCR-RFLP方法分析了胃癌组织中P53基因第248、249位密码子的点突变,42例中2例(4.8％)有248位密码子的点突变。     

膀胱癌P53,ras基因表达的研究

膀胱癌ｐ５３、ｒａｓ基因表达的研究吴长利，赵玉干，马腾骧天津市医科大学第二医院（天津市３００２１１）近年来实验研究表明，单一癌基因的活化与突变不能诱发肿瘤的发生与进展［１］。因此，肿瘤的发生与发展可能是多阶段、多基因协同作用的共同结果［２］。本文试图...     

人原发性肝癌P53基因缺失和突变

在多种人体肿瘤组织中P53基因有缺失,P53基因作为一个抗癌基因,能在体外抑制肿瘤细胞的生长。肿瘤组织中P53基因缺失或发生突变,丧失了抗癌基因的活性,某些突变体还具有协同转化活性。本文分析了12例肝癌及其相应癌旁正常组织P53基因的存在状态,发现3例(25％)P53基因有缺失,3例P53基因有突变。这一结果提示P53基因为人肝癌抗癌基因,它的缺失或突变与肝癌的发生或演进有关。     

P53基因与胃癌相关性研究

目的 探讨抑癌基因P53的缺失与胃癌发生的关系。方法 利用PCR技术对22例胃癌术后标本进行检测,观察P53基因突变和缺失情况。结果 提示胃癌组织中存在P53基因缺失,且P53基因部分缺失和胃癌病人的性别、年龄及胃癌分化程度有关或很密切。结论 胃癌的发生与P53基因缺失密切相关。     

BPDE诱发人胎气管上皮细胞ras基因点突变的研究

ＢＰＤＥ诱发人胎气管上皮细胞ｒａｓ基因点突变的研究陈家 ，詹德进，吴中亮，杜应秀，吴孟起（广州医学院化学致癌研究所广州５１０１８２美国纽约医学院）苯并（ａ）芘的代谢活化终致癌物ａｎｔｉ─ＢＰＤＥ作用于体外培养的人胎气管上皮细胞，并用聚合酶链反应（ＰＣ?..     

肺癌及肺鳞癌癌前病变中K—ras基因点突变的研究

应用ＰＣＲ技术及限制性片段长度多态性分析方法，研究了４１例非小细胞肺癌和１４例肺鳞癌癌前病变中的Ｋ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变，结果在非小细胞肺癌中检出１０例Ｋ－ｒａｓ基因点突变，突变率为２４．４％，而在１４例肺鳞癌癌前变中未检出一例，这提示Ｋ－ｒａｓ基因点突变虽然不发生在肺鳞癌癌前病变阶段，但仍与非小细胞肺癌的发生有密切关系。     

原发性肝癌组织癌基因ras和抑癌基因P~（53）点突变研究

应用多聚酶链延伸反应──限制性片段长度多态性分析法（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）对４３例福尔马林液固定、石蜡包埋肝癌组织癌基因ｒａｓ和抑癌基因Ｐ（５３）点突变进行分析。结果表明，ｒａｓ基因总突变率为４１．９％（１９／４３），其中Ｎ－ｒａｓ第１２位密码子突变率为３７．２％（１６／４３），Ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２位密码子突变率为６．９％（３／４３），Ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１３位、Ｃ－Ｈａ－ｒａｓ第１２和６１位密码子未发现有突变者。Ｐ~（５３）基因第２４９密码子突变率为２０．９％（９／４３），第２４８密码子未发现有突变者。结果提示Ｎ－ｒａｓ第１２密码子和Ｐ（５３）第２４９密码子突变与肝癌的发生和发展有关。     

喉癌p53基因点突变的研究

目的：研究喉癌p53基因第6、7外显子的点突变情况。方法：采用聚合酶链反应－限制性片断长度分析（PCR－RFLP）法。结果：喉癌p53基因第6外显子第205密码子突变率为13．5％,突变情况与喉癌组织分化类型和程度无关;第7外显子248位点突变率为0。结论：p53基因205位点是喉癌的突变热点,而其248位点则不是喉癌的突变热点。     

肺癌组织抑癌基因P53异常分析

Ｐ５３基因５－８外显子ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序列分析及石蜡包埋组织Ｐ５３鼠抗人单克隆抗体（Ｄｏ－１）免疫组化分析发现：５７例原发性肺癌中３７例有Ｐ５３蛋白积累。ＤＮＡ／ＰＣＲ产物直接测序发现：９／１２例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），８／１５非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）Ｐ５３基因突变，错义突变为１２／１７，Ｇ→Ｔ突变为６／１７。免疫组化发现：１１／１９例ＳＣＬＣ，１９／３７例ＮＳＣＬＣ Ｐ５３蛋白染色阳性。４／     

胃癌P53基因突变和蛋白表达的研究

为了解中国人胃癌Ｐ５３基因突变情况，应用银染聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对Ｐ５３基因第５、６、７、８外显子进行检测。对来自癌组织ＤＮＡ和癌旁正常组织ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现３７例胃癌中，１１例胃癌样品电泳带迁移异常，依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，研究结果表明：胃癌Ｐ５３基因５－８外显子的突变率为３０％。微波处理ＡＢＣ法检测突变型Ｐ５３蛋白表     

喉癌p53基因点突变的研究

目的 :研究喉癌p53基因第 6、7外显子的点突变情况。方法 :采用聚合酶链反应 -限制性片断长度分析 (PCR RFLP)法。结果 :喉癌p53基因第 6外显子第 2 0 5密码子突变率为 13.5% ,突变情况与喉癌组织分化类型和程度无关 ;第 7外显子 2 4 8位点突变率为 0。结论 :p53基因 2 0 5位点是喉癌的突变热点 ,而其 2 4 8位点则不是喉癌的突变热点。     

P53、ras基因在肺腺癌组织中的表达及意义

目的　了解P5 3基因及ras基因在肺腺癌中的表达特点及与预后的关系。方法　采用免疫组化法对 5 3例肺腺癌组织中P5 3及ras蛋白进行检测 ,分组随访。结果　肺腺癌组织中P5 3、ras蛋白阳性表达率分别为 5 4.72 %、6 6 .38% ,淋巴结转移组阳性表达率 (78.13 %、84.38% )高于无淋巴结癌转移组 ;低分化者阳性表达率 (81.82 %、86 .36 % )高于高分化组 ;阴性组 1年存活率高于阳性组。结论　P5 3、ras表达和肺腺癌生物学行为有关 ,可作为判断预后的参考指标。     

PCR—SSCP法检测非小细胞肺癌p53基因的突变

目的 分析原发性非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中ｐ５３基因５～８外显子点突变发生及意义。方法 动用聚合酶链反应－单链构象多态性分析方法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析法）进行检测。结果 发现８例肺良性疾病均无点突变发生,４０例ＮＳＣＬＣ中１９例（４７．５％）有点突变发生,点突变发与性别,年龄,组织学类型和组织发级无明显相关性（Ｐ〉０．０５）,但与临床分期和淋巴结累及状态明显相关（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）。Ｘ     

胃癌及癌前病变中c－Ha－ras癌基因点突变的研究

采用高敏感和特异的ＰＣＲ技术及寡核苷酸探针检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子的Ｇ→Ｔ突变，６６例胃粘膜组织中（包括胃癌、不典型增生、肠化生，浅表性胃炎及正常胃粘膜），点突变７例，胃癌占６例，达２８．５７％（６／２１），不典型增生１例，占５．５６％（１／１８）．初步提示ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变有可能发生于胃癌变的早期。应用ＰＣＲ结合斑点杂交技术检测ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因有可能与胃癌病理和临床研究相结合，提供早期诊断胃癌的分子生物学指标。