葛根素对缺血/再灌注损伤兔肺组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3变化的影响

目的探讨天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）在兔肺缺血／再灌注损伤（LIRI）中的变化及葛根素的保护作用机制。方法健康日本大耳白兔30只，随机分为对照组、缺血／再灌注（I／R）组及葛根素组，每组10只。复制单侧LIRI模型。对比观察各组血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、一氧化氮（NO）含量、肺湿／干重（W／D）比值及肺泡损伤指数（IQA）；用原位末端缺刻标记法（TUNEL）测定肺组织细胞凋亡指数（AI）；用免疫组化及原位杂交技术分别检测肺组织caspase-3蛋白和mRNA表达。结果与对照组比较，I／R组血清SOD活性和N0含量降低，MDA含量、W／D比值、IQA、AI值及caspase-3表达均上调（P均〈0．01）。与I／R组比较，葛根素组SOD、NO显著升高，MDA、W／D比值、IQA、AI值及caspase-3表达明显下降（P均〈0．01）。相关分析显示：AI值与SOD、NO呈明显负相关，与MDA、caspase-3 mRNA及caspase-3蛋白呈明显正相关（P均〈0．01）；caspase-3 mRNA与SOD、NO呈明显负相关，与MDA含量呈明显正相关（P均〈0．01）。结论葛根素可通过提高体内NO水平、降低氧自由基水平、减轻脂质过氧化反应，下调caspase-3的mRNA和蛋白表达，从而抑制肺再灌注后肺组织细胞的异常凋亡，减轻LIRI。     

左旋精氨酸对兔肺缺血/再灌注损伤时细胞凋亡的影响

目的观察左旋精氨酸对免肺缺血／再灌注损伤中细胞凋亡的影响。方法复制单侧免肺缺血／再灌注损伤模型．随机分为三组：对照组（C组）、缺血／再灌注组（I／R组）和左旋精氨酸组（L—Arg组），每组10只。再灌注180min时取肺组织，观察超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）浓度、一氧化氮（NO）含量、肺湿干比（W／D）、肺泡损伤数定量评价指标（IQA）及肺组织细胞凋亡指数（At）。结果I／R组与C组比较，SOD活性、NO含量明显降低（P〈0．01），MDA、W／D、IQA、AI明显升高（P〈0．01），L—Arg组与I／R组相比较，SOD活性、NO含量均明显升高（P〈0．01），MDA、W／D、IQA、AI不同程度降低（P〈0．05）。结论左旋精氨酸可通过提高体内NO水平、降低氧自由基水平、减轻脂质过氧化反应，抑制肺组织细胞凋亡，从而减轻肺损伤。     

缺血预处理对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响

目的：研究缺血预处理（IP）对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响。方法：建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD大鼠随机分为3组，每组6只。对照组（Con)持续平衡灌注通气60min，无缺血；缺血再灌注组（IR）缺血45min，再灌注30min；缺血预处理组（IP）先给予连续2次的5min缺血、5min再灌注的预处理，再行缺血45min和再灌注30min。测定缺血前和再灌注末灌注液中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和白细胞数量，测定再灌注末肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、黄嘌呤氧化酶（XOD）活性和湿／干比（W／D）。结果：IR组再灌末MDA含量、MPO活性、XOD活性和W／D较Con组明显升高（P＜0．01），而SOD活性则显著下降（P＜0．01）。IP能明显减少再灌后MDA、MPO、XOD和W／D的增加，提高SOD的活性（P＜0．01）。结论：IP能明显抑制离体大鼠肺缺血再灌注导致的氧化损伤。     

缺血预处理加用川芎嗪抑制肠缺血-再灌注性心肺细胞凋亡

目的：研究缺血预处理加川芎嗪对肠缺血-再灌注大鼠心、肺细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法：健康SD大鼠,随机分为假手术对照组（Ⅰ组）、肠缺血-再灌注组（Ⅱ组）、川芎嗪治疗组（Ⅲ组）、缺血预处理组（Ⅳ组）和川芎嗪＋缺血预处理组（Ⅴ组）5组.用免疫组化法检测心、肺组织Bcl-2和Bax蛋白表达,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（TUNEL）检测心、肺细胞凋亡,并测定心、肺组织超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性及丙二醛（MDA）含量.结果：Ⅴ组心、肺组织细胞凋亡指数明显低于除Ⅰ组外的其他各组,Bcl-2蛋白表达明显增多,肺组织Bax蛋白表达明显减少,心肌细胞Bax蛋白表达明显比Ⅱ组降低,同时Ⅴ组心、肺组织SOD活性增高,MPO活性和MDA含量降低.结论：缺血预处理与川芎嗪联合应用对抑制肠缺血-再灌注所致的心、肺细胞凋亡具有显著的协同作用.     

齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的：观察齐墩果酸（OA）预处理对肝脏缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响,探讨齐墩果酸预处理对肝脏保护作用的机制。方法雄性 SD 大鼠40只,随机分为假手术组（SH 组）、缺血再灌注组（IR 组）、0．5％羧甲基纤维素钠组（CM 组）和齐墩果酸预处理组（齐墩果酸组）,齐墩果酸组以100 mg/kg 的齐墩果酸混悬液,SH 和 IR 组以相同容积的水,CM 组以相同容积的0．5％CMC-Na 分别每日灌胃1次,连续7 d。第8天建立70％肝脏缺血再灌注模型,肝脏缺血60 min 后行再灌注3 h。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和LDH 水平;检测肝组织内丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平变化;通过 HE 染色观察肝组织形态,利用 Tunel 染色检测肝组织凋亡状态;Western blot 检测肝脏组织 caspase3和 p53蛋白表达水平。结果与 IR 组相比齐墩果酸组血清肝酶水平及肝组织中 MDA 水平显著降低,而 SOD 和 GSH 活性则显著升高;与 IR组相比齐墩果酸组肝组织病理形态学损伤明显减轻;缺血再灌注后可见明显的肝实质细胞凋亡现象,齐墩果酸组凋亡细胞较 IR 组显著下降,且 caspase3和 p53蛋白表达亦减少。结论齐墩果酸预处理可减轻肝脏缺血再灌注损伤,可能与抑制 caspase3和 p53蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关。     

参附注射液对缺血再灌注心肌损伤的保护作用

目的：探讨参附注射液对缺血／再灌注（I／R）损伤心肌的保护作用及其机制。方法：32只雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（n=8）、缺血／再灌注组（n=8）、参附注射液30mg／L组（n=8）和100mg／L组（n=8）。采用Langendorff离体心脏灌流模型，制备心肌缺血再灌注损伤模型，在心脏缺血前和再灌注后，给予参附注射液，观察离体大鼠心脏血流动力学指标和心肌组织中的高能磷酸化舍物ATP含量、MDA含量及SOD活性等的变化。结果：参附注射液100mg／L明显改善缺血／再灌注后心脏血流动力学指标。缺血／再灌注组大鼠心肌ATP含量和SOD活性明显降低，MDA含量明显升高。与缺血／再灌注组比较，参附注射液30mg／L组和100mg／L组心肌MDA值减少（P〈O．05），SOD值升高（P〈0．05）；参附注射液100mg／L组ATP含量增加（P〈0．05）。结论：参附注射液能通过提高心肌组织ATP含量和SOD活性，减少MDA含量，改善缺血／再灌注后心脏血流动力学紊乱，减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

薯蓣皂甙对大鼠急性缺血再灌注损伤心肌的作用

目的：探讨薯蓣皂甙（Dioscin）对大鼠急性缺血再灌注损伤心肌的保护作用以及可能的机制。方法：30只Wistar大鼠随机分为数量相等的3组：假手术对照组、缺血再灌注损伤（MIRI）模型组和薯蓣皂甙预处理组。通过结扎冠状动脉左前降支，建立急性缺血再灌注模型，测定再灌注时的血流动力学变化、超氧化物岐化酶（SOD）的活性以及丙二醛（MDA）和肌钙蛋白-Ⅰ（cTn-Ⅰ）的含量。结果：同假手术对照组相比，缺血再灌注损伤组的血流动力学指标明显恶化，SOD活性降低和MDA浓度显著增加（P〈0．01），薯蓣皂甙预处理组则显著改善了缺血再灌注损伤后血流动力学的变化，增加SOD的活性并降低MDA的浓度（P〈0.01）。结论：薯蓣皂甙对缺血再灌注心肌具有良好的保护作用，其部分机制可能与提高SOD活性、减少MDA生成从而减轻氧自由基损伤有关。     

老年大鼠心肌再灌注时ICAM-1表达变化规律及艾司洛尔的影响

目的：探讨细胞间粘附分子－1（ICAM－1）表达与老年大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）的关系，并观察艾司洛尔（ES）对IRI的影响。方法：大鼠116只，分设缺血再灌注（IR）组，IR＋ES组和假手术对照组，并分设缺血1h，再灌注3、6、12、24h时相点，取缺血心肌用原位杂交和免疫组织化学方法检测ICAM－1 mRNA及其蛋白质表达水平，用酶法测定中性粒细胞（PMNs)浸润数，硫代巴比妥酸比色法测定心肌组织丙二醛（MDA），用黄嘌呤过氧化物酶法测定过氧化物歧化酶（SOD）活性，TTC染色法测定梗死范围。结果：心肌IR时，ICAM－1表达、MDA含量、PMNs浸润数均明显增高，SOD活性明显降低；ICAM－1蛋白表达水平、PMNs浸润与心肌梗死范围呈显著正相关，但ICAM－1 mRNA、MDA、SOD与梗死范围无明显相关性。IR＋ES组上述指标于再灌注时虽也明显增高，但比IR组明显减轻。结论：心肌IR时，ICAM－1参与介导了PMNs对组织细胞的粘附、浸润和IRI的发生、发展；ES可通过抑制ICAM－1的表达而产生心肌保护作用。     

大鼠心肌再灌注不同时相Fas表达和半胱胺酸蛋白酶-3活性变化规律

目的：探讨大鼠心肌缺血再灌注(ischemia reperfusion，IR)不同时相Fas表达、心肌细胞凋亡指数、天冬氨酸特异的半胱胺酸蛋白酶3(caspase-3)活性变化规律，探讨对其进行干预的可能性。方法：实验选用Wistar大鼠116只，随机设立IR组、治疗组和对照组并分设缺血30min后再灌注1，3，6，12及24h 5个时相点。治疗组于再灌注开始时尾静脉注射caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO。分别检测Fas表达、心肌细胞凋亡指数、caspase-3活性和心肌梗死范围。结果：Fas表达、心肌细胞凋亡指数与caspase-3活性随心肌再灌注不同时相而变化，Fas表达于再灌注6h最高(1．72&;#177;0．16)，心肌细胞凋亡指数与caspase-3活性[(34．83&;#177;9．35)％，(22．34&;#177;4．50)nkatl于再灌注12h最高，其后基本维持在平台状态；心肌梗死范围随IR时间逐渐增加，至24h仍未见下降趋势。治疗组上述指标虽也明显增高，除Fas表达外均比IR组明显减小(t=2．990～9．596，P&;lt;0．05～0.01)。结论：Fas表达增高激活caspase-3导致心肌细胞凋亡是心肌缺血再灌注损伤形成的机制之一，Ac-DEVD-CHO减轻再灌注损伤的机制可能是其抑制心肌细胞凋亡。     

参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景：肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因，参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用。目的：建立大鼠肠缺血再灌注模型，观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响。设计：随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2002-12／2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成。选取健康清洁级SD大鼠24只，随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组，8只／组。方法：各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1mg／kg腹腔注射麻醉，肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1h然后再灌注2h．空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉。参附注射液组于阻断前30min静注参附注射液0．02mL／g，空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水。制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测。主要观察指标：①各组大鼠细胞凋亡指数的比较。②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达。③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较。结果：实验选用24只大鼠，全部进人结果分析。①各组大鼠细胞凋亡指数的比较：参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组．但比空白对照组高【（7．75&;#177;1．89）％，（28．25＋8．50）％，（4．25＋2．63）％．P均〈0．01]。（（2）各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达：参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组，但高于空白对照组[（0.2116&;#177;0．0875），（0．3547＋0．0778）．（0．1941&;#177;0.0574），P〈0．01，P〉0．051；Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高（P〈0．05），参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低（P〈0．01）。（2）各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较：肠缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[（189．7＋56．3），（38．6＋10．4），（47．5&;#177;18．7）mg／L，P均〈0．011，参附注射液组和空白对照组基本相似（P〉0．05）。结论：参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡，从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

抗氧化应激参与参附注射液预处理诱导的肾脏保护作用

目的 探讨抗氧化应激是否参与参附注射液预处理诱导的肾脏保护作用.方法 健康成年雄性SD大鼠21只随机分为假手术对照组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和参附注射液组(SF组);SF组给予参附注射液10 mL/kg腹腔注射,每日1次,连续给药7 d.麻醉下行右肾切除后,用无损伤动脉夹钳夹左侧肾蒂60 min,再...     

参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因,参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用.目的建立大鼠肠缺血再灌注模型,观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响.设计随机对照实验.单位武汉大学人民医院麻醉科.材料实验于2002-12/2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成.选取健康清洁级SD大鼠24只,随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组,8只/组.方法各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1 mg/kg腹腔注射麻醉,肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1 h然后再灌注2 h,空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉.参附注射液组于阻断前30 min静注参附注射液0.02 mL/g,空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水.制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测.主要观察指标①各组大鼠细胞凋亡指数的比较.②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达.③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较.结果实验选用24只大鼠,全部进入结果分析.①各组大鼠细胞凋亡指数的比较参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组,但比空白对照组高[(7.75±1.89)%,(28.25±8.50)%,(4.25±2.63)%,P均＜0.01].②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组,但高于空白对照组[(0.211 6±0.087 5),(0.354 7±0.077 8),(0.194 1±0.057 4),P＜0.01,P＞0.05];Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高(P＜0.05),参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低(P＜0.01).③各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较砀缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[(189.7±56.3),(38.6±10.4),(47.5±18.7)mg/L,P均＜0.01],参附注射液组和空白对照组基本相似(P＞0.05).结论参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡,从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤.     

纳洛酮对肺再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响

目的 研究纳洛酮对大鼠肺缺血-再灌注(ischemia/reperfusion injury,I/R)损伤中细胞凋亡及血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响.方法 实验于南京医科大学附属南京第一医院动物实验中心进行,雄性SD大鼠42只,随机(随机数字法)均分为对照组(Sh组)、缺血-再灌注组(IR组)、纳洛酮组(Na组).I/R组钳夹肺门远心端,阻断肺门(以肺无舒缩为阻断标准),建立在体肺I/R损伤模型.Na组在该基础上予纳洛酮1 mg·kg-1腹腔注射,各组分别于3,6 h点取标本,用Annex-in-V-PI双染法检测肺组织凋亡细胞并计算凋亡率,测算肺湿于比(W/D),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HO-1的mRNA表达,电镜观察肺超微结构改变.采用Stata 9.0统计软件行统计学分析.结果 IR组与Sh组相比,3,6 h点肺组织凋亡率明显增加,W/D显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);IR组3,6 h点,HO-1的mRNA表达与肺组织凋亡率、W/D呈显著负相关(P<0.01).与IR组相比,Na组3,6 h点肺组织凋亡率明显减少,W/D显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01).肺组织HO-1表达显著增加(P<0.01),肺组织超微结构损害明显减轻.结论 在肺1/R损伤早期,纳洛酮可以诱导HO-1的mRNA表达大量表达从而抑制细胞凋亡的发生,起到保护作用.     

甲泼尼龙和纳洛酮对大鼠肺缺血/再灌注损伤的保护作用研究

目的 研究甲泼尼龙、纳洛酮在大鼠肺缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用,并探讨其可能机制.方法 雄性SD大鼠70只,随机均分为假手术组(sham组)、I/R组、甲泼尼龙组(MP组)、纳洛酮组(Na组)、甲泼尼龙联合纳洛酮组(MP+Na组).术后3 h和6 h取标本,用钙结合蛋白Ⅴ-碘化丙啶(AnnexinⅤ-PI)双染法、流式细胞仪检测肺组织凋亡细胞并计算凋亡率;用免疫组化及图像分析法观察肺脏核转录因子-κB抑制因子-α(IκB-α)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达;计算肺湿/干重(W/D)比值;苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察肺组织病理学变化,电镜下观察肺脏超微结构的改变.结果 ①6 h MP组较I/R组肺脏IκB-α的表达有所增加,差异有统计学意义(P＜0.01);3 h和6 h Na组较I/R组肺组织caspase-3表达明显减少,差异有统计学意义(P均＜0.05);MP组和Na组3 h和6 h的细胞凋亡率较I/R组均有所减少(P均＜0.01),肺组织的病理形态及超微结构损害均有所减轻.②MP+Na组较MP组、Na组、I/R组肺组织凋亡率、caspase-3表达均有不同程度的减少(P＜0.05或P＜0.01),肺脏IκB-α的表达较6 h Na组显著增多(P＜0.05),肺组织的病理形态及超微结构损害明显减轻,6 h较3 h减轻更明显.结论 甲泼尼龙、纳洛酮分别通过抗炎、减少caspase-3的激活两个不同途径抑制凋亡的发生,早期联合应用有协同效应,更能有效抑制肺组织I/R损伤凋亡的发生,对肺组织有明显的保护作用.     

肢体缺血-再灌注后大鼠心肌中的氧化应激及HO-1 mRNA表达

目的 探讨肢体缺血-再灌注损伤后心肌的氧化损伤机制及HO-1的保护作用,为研究肢体缺血-再灌注损伤所致的心肌损伤的预防提供实验依据.方法 应用止血带构造SD大鼠双后肢IR模型,实验动物随机(随机数字法)分为正常对照组和缺血4 h再灌注2 h,4 h,6 h,8 h,16 h,24 h共7组,分别取心肌和血液标本检测MDA,SOD,MPO,心肌形态学及心肌组织中HO-1 mRNA的表达.方差分析方法进行统计学处理.结果 (1)血浆及心肌IR各组MDA均较对照组明显升高(P<0.05),且于IR 4 h达高峰.血浆及心肌IR各组SOD均较对照组明显降低(P<0.05),且血清SOD于IR4 h达最低值,心肌SOD于IR 8 h达最低值.血浆及心肌IR各组MPO均较对照组明显升高(P<0.05),且血清MPO于IR 4 h达高峰,心肌MPO于IR 6 h达高峰.(2)在肢体缺血4 h再灌注4-6 h组,心肌形态学损伤最重.(3)与对照组比较,IR2 h组HO-1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),其余各组HO-1 mRNA表达均显著上调(P<0.05)且于IR 16 h达高峰.结论 心肌局部组织的自由基和中性粒细胞聚集活化是LIR心肌损伤的机制且能上调HO-1 mRNA的表达,HO-I在心肌组织的高表达能减轻心肌组织的损伤.     

灯盏花素对大鼠岛状皮瓣血液流变学和氧化应激的影响

目的观察灯盏花素对大鼠岛状皮瓣丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T—AOC）和血液流变学的影／响,探讨灯盏花素对皮瓣缺血再灌注损伤后的保护机制。方法健康清洁雄性SD大鼠108只,平均分为假手术组（SO组）、缺血再灌注组（IR组）和灯盏花素干预组（BR组）。建立大鼠腹部岛状皮瓣缺血再灌注损伤模型。术前30min分别一次性给予生理盐水（SO组、IR组）和灯盏花素注射液（BR组）腹腔注射。术后检测各组大鼠血液中MDA含量、SOD活性、T—AOC活性及血液流变学指标,并观察皮瓣成活率。结果IR组、BR组再灌注后4、8及24h3个时点MDA含量均高于SO组,SOD、T—AOC活力和血液流变学状态低于s0组（P〈0．05）;并且BR组在这3个时点的各项指标优于IR组（P〈0．05）。皮瓣成活率缺血再灌注组〈灯盏花素组〈假手术组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论灯盏花素能通过改善微循环和提高机体航氧化的能力,减轻皮瓣缺血再灌注损伤,促进皮瓣成活。     

肺缺血再灌注损伤模型大鼠肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化

背景:肺缺血再灌注损伤过程中肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化及其可能的作用机制有待观察。目的:观察大鼠肺缺血再灌注损伤中肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化,并分析细胞凋亡在肺缺血再灌注损伤中作用及可能机制。设计:随机对照动物实验。单位:南京医科大学附属南京第一医院急诊中心。材料:实验于2006-04/2006-09在南京医科大学附属南京第一医院动物实验室及南京市放射免疫检测中心完成。选用28只雄性健康清洁级SD大鼠,体质量250￣350g,鼠龄49￣76d,由南京医科大学实验动物中心提供。随机数字表法将大鼠分为实验组及对照组,每组14只。方法:①实验干预:实验组大鼠参照Eppinger等的方法进行建立肺缺血再灌注模型,大鼠给予阻断肺门45min(观察肺无舒缩为阻断标准),再开放3,6h(再灌注以肺恢复舒缩为标准)后取材,每次取7只,对照组仪行开胸术,于相同时间点同样方法分离肺组织。②实验评估:采用Annexin-V-PI双染法通过流式细胞仪检测肺组织凋亡细胞,计算凋亡率;采用免疫组织化学法及图像分析法观察肺脏天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达;计算2组大鼠左肺湿干质量比;计算肺泡损伤数比值进行肺组织损伤定量评价;光镜下苏木精-伊红染色观察肺脏的病理形态学变化。主要观察指标:①肺组织细胞凋亡率及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达。②肺湿干质量比及肺组织损伤定量评价结果。③肺组织病理形态学变化。结果:纳入大鼠28只均进入结果分析,无脱落。①实验组肺缺血再灌注3,6h肺组织细胞凋亡率较对照组有明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),实验组缺血再灌注6h凋亡率较3h有所降低(P<0.05)。②实验组大鼠肺组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达3h达到最高,6h稍有下降,较对照组各时间点表达增加(P<0.01)。③实验组肺缺血再灌注3,6h肺泡损伤数比值及肺脏湿干质量比值较对照组均明显增加(P<0.01),实验组缺血再灌注6h两比值较3h有所增加(P<0.05)。④实验组肺泡结构破坏、塌陷、消失,肺泡间隔有大量的炎性细胞浸润,肺缺血再灌注6h较3h更严重。对照组无明显改变。结论:肺缺血再灌注早期可能通过天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的改变,激活细胞的凋亡途径,诱导肺组织细胞凋亡的发生,从而导致肺损伤的发生。     

无创伤双后肢缺血后处理对移植胰腺缺血再灌注损伤的远隔保护

背景：缺血预处理及缺血后处理是近年来提出减轻缺血再灌注损伤有效方法。目的：探讨无创伤双后肢缺血后处理对移植胰腺缺血再灌注损伤的影响及机制。方法：18只糖尿病SD大鼠数字表法随机分为3组,对照组仅行开腹术;缺血再灌注组仅行胰腺移植;缺血后处理组,移植前行非创伤性双后肢缺血后处理。结果与结论：缺血再灌注组血糖和胰腺组织中丙二醛水平均高于缺血后处理组（P〈0.01）、而超氧化物歧化酶活性低于缺血后处理组（P〈0.01）;与缺血后处理组比较,缺血再灌注组胰腺组织凋亡指数明显增高（P〈0.01）。结果提示,无创伤双后肢缺血后处理对大鼠移植胰的缺血再灌注损伤具有保护作用,机制可能与可通过减少超氧化物歧化酶失活,从而清除氧自由基以及减少胰腺细胞凋亡等有关。