Spinal Cord Injury Causes More Damage to Fracture Healing of Later Phase than Ovariectomy in Young Mice

The purpose of this study was to compare the effects of spinal cord injury (SCI) and ovariectomy (OVX) on femoral fracture healing of later phase in young mice. Sixty young female C57 mice were randomized into three groups: SCI, OVX, and age-matched intact control. The femoral fracture was generated at 3 weeks after SCI or OVX. At 1 month after fracture, the femoral fracture area was evaluated through the healing status using radiograph; bone mineral density using dual X-ray absorptometry; callus formation and mineralization and neovascularization in callus using micro-computed tomography; biomechanical analysis using testing machine; and histology analysis by staining with hematoxylin-eosin stain. SCI mice showed lower bone mineral density in the femoral callus as compared with OVX mice. Callus geometric microstructural parameters of the femora in SCI mice were significantly lower than OVX mice. SCI induced significant changes of biomechanical parameters in the femoral fracture healing area. The callus formation and callus neovascularization in SCI mice were significantly lower than in OVX mice. SCI induces more deterioration of fracture healing in the femoral diaphysis than OVX.     

骨髓间充质干细胞在去卵巢大鼠骨质疏松发病机理中潜在的作用

为探讨去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs）成纤维细胞集落生成单位（CFU—Fs）、细胞周期、成骨分化能力和成脂分化能力的变化，选用3月龄和6月龄健康雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术，建立骨质疏松动物模型，动物实验分为4组：（1）3月龄正常组（control-3）；（2）3月龄卵巢切除组（OVX-3）；（3）6月龄正常组（control-6）；（4）6月龄卵巢切除组（0VX-6）。采用密度梯度离心方法分别获取各组MSCs，体外培养，选用第3～4代MSCs用于实验。倒置相差显微镜观察CFU—Fs；流式细胞技术检测细胞周期、细胞增殖指数（proliferation index，PI）和细胞凋亡指数（apoptotic index，AD）。加入成骨诱导剂，采用碱性磷酸酶活性蛋白检测法（IFCC推荐法）检测MSCs碱性磷酸酶（alkalinephos phatase，ALP）分泌量；采用同位素标记方法检测骨钙索（Osteocalcin，OCN）分泌量；茜素红染色观察钙结节形成。加入成脂诱导剂，油红O染色观察MSCs内脂滴形成；RT-PCR方法检测MSCs脂蛋白脂酶（1ipoprotein lipase，LPL）mRNA的表达。结果表明：与相应对照组比较，OVX-3组和OVX-6组CFU—Fs、PI值明显降低（P〈0．05），AI值明显增加（P〈0．05）；OVX-6组CFU，Fs、PI值的降低和AI值的增加都明显大于OVX-3组（P〈0．05）。成骨诱导表明：与相应对照组比较，OVX-3组和OVX-6组ALP、BGP分泌量以及钙结节形成的数量均明显降低（P〈0．05），OVX-6组的降低最为明显。成脂诱导表明：与相应对照组比较，OVX-3组和OVX-6组，LPLmRNA的表达量明显增加（P〈0．05），OVX-6组LPL mRNA的表达量的增加明显高于其他各组（P〈0．05）。结论：去卵巢骨质疏松大鼠MSCs增殖能力明显下降，向成骨细胞分化能力下降，向脂肪细胞分化能力增强，其中60VX组MSCs的变化最明显。提示：去卵巢骨质疏松大鼠MSCs向成骨细胞分化能力的降低和向脂肪细胞分化能力的增强，可能与绝经后骨质疏松症的发生相关。     

老年人骨质疏松运动预防策略研究进展

随着我国老龄化程度的加剧,骨质疏松的发病率正在急剧上升。运动疗法作为骨质疏松的三大治疗和预防手段之一,以其可靠、方便、安全、廉价等特点正在受到越来越多的重视和推广。同时,运动疗法还具有增强老年人肌肉力量、提高平衡能力、改善生活质量等特点,因此正在成为预防骨质疏松的最主要方法。从有氧运动、抗阻运动和振动运动等3个方面系统综述目前运动疗法中普遍使用的方法、效果及其特点,并进行对比和分析;同时本文对运动预防策略中使用的强度与频率进行讨论与总结;最后指出骨质疏松运动预防目前存在的亟需解决的问题,有助于读者进一步深入开展研究。     

雷公藤延长小鼠同种皮肤移植物存活时间

在对同种器官移植排斥反应的予防和治疗中,尽管采用了组织配型,移植前输血及抗淋巴细胞球蛋白等较为有效的方法,仍需使用肾上腺皮质激素、硫唑嘌呤等免疫抑制剂。由于这些药物的毒副作用十分严重,故寻找有效、低毒的排斥反应抑制药物依然是移植免疫学的重要课题之一。李乐真等报告了雷公藤提取物防治大鼠佐剂性关节炎,临床用于原发性肾小球疾患以及系统性红斑狼疮等自身免疫性疾患的治疗取得了令人满意的疗效。这些提示     

微囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验研究

观察微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的疗效。选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(Histopaque-1077)纯化胰岛细胞,将微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植于糖尿病小鼠腹腔。分离的胰岛细胞对刺激反应良好,微囊化和未囊化胰岛细胞移植后均可纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,但未囊化胰岛细胞移植组只能维持血糖正常2~3d,而微囊化胰岛细胞移植组可持续降低血糖30d以上。微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠具有良好的效果,微囊具有较好的免疫隔离作用。     

补肾活血药对去势雌鼠血清IL-6和激素水平的影响

目的：探讨补肾活血中药对实验性骨质疏松的影响及其机理,为临床中医药治疗骨质疏松提供理论依据。方法：选用SD雌性大鼠90只,随机分为6组：正常对照组,模型组,尼尔雌醇组,中药大、中、小剂量组。采用切除卵巢诱导的骨质疏松模型,用灌胃法给服补紧活血药骨康口服液,并以尼尔雌醇及生理盐水作对照。各组动物均在用药后90天处死,采用放射免疫分析法观察各组动物血清雌二醇（E2）、白细胞介素－6（IL－6）、降钙素（CT）、骨钙素（BGP）水平的变化,同时对子宫分别称湿重和进行组织形态学观察。结果：模型组与正常对照组大鼠比较,IL－6含量显著升高（P＜0．001）,而E2（P＜0．001）、CT（P＜0．05）、BGP（P＜0．05）含量明显降低,子宫重量减轻（P＜0．01）。中药大、中、小剂量组的IL－6含量均比模型组显著降低（P＜0．05－0．001）,并能显著升高E2（P＜0．01－0．001）、CT（P＜0．05－0．001）、BGP（P＜0．01－0．001）水平,使子宫重量增加（P＜0．05）。组织形态学观察可见补肾活血中药能改善病理状态下大鼠子宫的形态结构。结论：补肾活血中药对实验性骨质疏松有较好的防治作用。     

Effects of continuous and cyclic nasal calcitonin administration in ovariectomized women

The aim of the present study was to assess the effects of continuous and cyclic salmon calcitonin (sCT) administration in the prevention of the rapid bone loss that follows ovariectomy in humans. Patients who had undergone bilateral ovariectomy 10–30 days previously received either calcium supplementation alone (500 mg/day, n = 12) or such supplementation together with nasal sCT (200 IU/day) according to a continuous (n = 20) or a cyclic (3 months on, 1 month off) regimen (n = 16) for 2 years. In the calciumonly-treated subjects urinary hydroxyproline excretion, serum alkaline phosphatase and plasma bone Gla protein levels showed a substantial increase (P < 0.01) 6 months after surgery, while radial bone density was found to have decreased significantly (P < 0.01). The patterns of biochemical markers in the sCT-treated groups indicated that nasal sCT can positively uncouple the two bone remodelling processes without inducing any significant change in radial bone density over a 2-year period. No differences were observed between the two sCT-treated groups. These results demonstrate that the rapid bone loss that follows ovariectomy can be prevented by either cyclic or continuous nasal sCT administration. Thus, cyclic nasal sCT represents an attractive alternative for the prevention of osteoporosis in postmenopausal women with contraindications to oestrogen replacement therapy.     

静息B细胞免疫诱导小鼠心肌移植物存活时间的延长

本文用小鼠耳后心肌移植作为模型观察静息B细胞在诱导延长移植物存活的作用。用C5 7BL/ 6新生小鼠的心脏移植给Balb/c成年雌性小鼠的耳后 ,受鼠在移植前 1周事先尾静脉注射C5 7BL/ 6静息B细胞 ,同时观察了用静息B细胞免疫后的Balb/c小鼠脾细胞对C5 7BL/ 6小鼠脾细胞的CTL活性。结果显示单独使用静息B细胞免疫组受鼠的同种移植物平均存活时间为 (16± 1 34 )d [空白对照组为 (10± 1 0 5 )d],单独注射阿霉素组心肌平均存活时间为 (14 6± 1 74)d ,静息B细胞预处理同时配合使用阿霉素组 ,心肌平均存活时间延长至 (2 7 8± 3 96 )d (P <0 0 0 1)。而活化B细胞组的小鼠排斥反应强烈 ,在移植后 8d之内全部排斥。静息B细胞免疫鼠对同种细胞的杀伤率 ,明显低于用活化B细胞免疫的对照组。     

雌激素通过调节细胞因子治疗骨质疏松症的机理

绝经后骨质疏松（ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）是由于手术或自然绝经后雌激素低落引起的骨质疏松。在绝经后最初５～１０年内雌激素的缺乏而引起骨吸收增加导致骨量丢失增多是主要的病理因素，其特征是全身的骨量减少及骨组织微结构改变致骨...     

卵巢切除对大鼠骨组织结构改变的影响

目的：探讨卵巢切除对大鼠骨组织形态学改变的影响。方法：将１８只３月龄雌性大鼠随机分为卵巢切除组及假手术组（对照组）。术后３周处死两组大鼠，获取股骨远端１／３处骨，分别进行石蜡包埋，塑料包埋切片及扫描电镜观察。结果：卵巢切除可引起大鼠骨小梁变细、中断，骨小梁表面钙盐沉积减少。结论：卵巢切除可使大鼠骨吸收增加，影响骨的稳定性，增加骨折发生的危险性。     

骨化醇治疗脊髓损伤后骨质疏松的髂骨形态计量学参数研究

目的 通过髂骨形态计量学参数变化的检测,探讨骨化醇对脊髓损伤后骨质疏松的治疗效果及机理.方法 选择脊髓损伤截瘫患者45例,随机分为2组,1组15例为服用药物实验组;2组30例为未服用药物对照组.取髂骨标本,测伤后、伤后1月、伤后6月不同时期髂骨形态计量学参数变化.结果 实验组髂骨骨结构参数中骨小梁密度(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、结点末端比(NTR)在服用药物后1月均轻微高于对照组(P＜0.05),而骨小梁间距(Tb.Sp)则轻微低于对照组(P＜0.05),服药后6月均明显高于对照组(P＜0.05),而骨小梁间距(Tb.Sp)则明显低于对照组(P＜0.05).实验组髂骨骨转换参数中平均类骨质宽度(Os.Th)、类骨质体积(OV/BV)、平均骨壁厚度(W.Th)均较对照组高,用药1月后指数稍高,用药6月后指数显著增高.其中,两组间相比较平均骨壁厚度(W.Th)差异显著(P＜0.05);骨吸收表面(ES/BS)低于对照组.结论 骨化醇能够降低骨的吸收,,抑制高转换率,阻止骨吸收与骨形成的严重失衡,有效治疗脊髓损伤引起骨质疏松.     

Establishing a rapid animal model of osteoporosis with ovariectomy plus low calcium diet in rats

The objective of this study was to rapidly develop osteoporotic model animals by combining ovariectomy with a low calcium diet in rats. Thirty, eight-week-old, female, Sprague-Dawley rats were either sham-operated (Sham) or ovariectomized (Ovx) and divided into three groups: Sham, Ovx, and Ovx + low calcium diet. Rats in the Sham and Ovx groups were fed a standard diet containing 1.1% w/w calcium while rats in the Ovx + low calcium diet group were fed a diet containing 0.1% w/w calcium. Serum osteocalcin and bone mineral density (BMD) of the lumbar vertebrae were measured 4 and 8 weeks after surgery. The rats were euthanized 12 weeks after surgery, and the BMD of the right femur and histomorphometry of the femoral neck were assessed at that time. The Ovx + low-calcium diet group had a significantly lower mean BMD of the lumbar vertebra and higher mean serum osteocalcin concentration than the Sham and Ovx groups. Twelve weeks after surgery, rats in the Ovx + low calcium diet group had a significantly lower BMD, smaller Tb.Th and Tb.N, and larger Tb.Sp of the right femoral neck than did rats in the Sham and Ovx groups. These data indicate that a low calcium diet can significantly accelerate bone loss in ovariectomized rats. Combining ovariectomy and a low calcium diet can save considerable time in the creation of osteoporotic model animals.     

同种特异T细胞疫苗诱导移植物存活期延长的研究——Ⅱ.抗独特型T细胞免疫反应

同种特异T细胞疫苗(TCV)免疫诱导出同种免疫反应低下,同种移植物存活时间显著延长,推测其作用机制可能是同种特异TCV免疫诱导机体抗同种特异TCV(独特型)T细胞的上调.实验证实了“抗TCV-T细胞”的存在.以同种特异TCV免疫动物可诱导出对TCV特异的细胞增殖反应.TCV免疫小鼠淋巴细胞能特异杀伤TCV细胞.将TCV免疫小鼠脾细胞作为调节细胞,观察到它能显著地抑制同种MLR,表明它是一“抑制性T细胞”.这些结果提示,同种特异TCV免疫可诱导机体免疫网络中独特型-抗独特型的上调,产生了同种反应T细胞的独特型T细胞,从而保护同种移植物免受同种反应性T细胞的攻击使同种移植物存活时间显著延长.     

Beneficial effect of pristimerin against the development of osteoporosis in ovariectomy-induced osteoporosis rats by the RANKL/TRAF6/NF-κB pathway

IntroductionOsteoporosis is a major cause of bone fracture in post-menopausal women. We evaluated the effects of pristimerin treatment on ovariectomy-induced osteoporosis, and its possible molecular mechanism.Material and methodsRats were ovariectomised and biochemical markers of bone formation were determined from serum samples. The microarchitectures of bone tissues were analyzed via micro-CT scans and Western blotting assays. The cytotoxic effects of pristimerin, the differentiation of osteoclasts, and bone reabsorption were evaluated in vitro using RAW 264.7 cells.ResultsTreatment with pristimerin attenuated changes in markers of bone formation and reabsorption such as creatine kinase (CK), alkaline phosphatase (ALP), tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), collagen type I fragments (CTX), bone Gla-protein (BGP), and osteocalcin (OC) in the serum of ovariectomised rats. It also appeared to restore the microarchitecture of bone tissue. The expression levels of TNF receptor-associated factor 6 (TRAF-6), nuclear factor κ light chain enhancer of activated B cells (NF-κB p65), and receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL) protein were significantly lower, while those of Akt and PI3K were significantly higher, in the bone tissues of the pristimerin-treated group than in negative controls. Pristimerin had no cytotoxic effect on RAW 264.7 cells and reduced the differentiation of osteoclasts, bone reabsorption, and translocation of p65 in RANKL-stimulated RAW 264.7 cells in vitro.ConclusionsPristimerin reduces the effects of osteoporosis by restoring the altered RANKL/TRAF-6/NF-κB pathway in ovariectomised rats.     

Micro CT定量研究去卵巢山羊胫骨平台松质骨微结构特点

背景：骨质疏松时胫骨平台松质骨微结构发生显著变化,Micro CT是一种能够全面、立体、无创测量骨微结构、评估骨质量及预测骨强度的新兴技术,近年来在骨质疏松研究领域得到日益广泛的应用。 目的：应用Micro CT技术定量研究去卵巢山羊胫骨平台松质骨的微结构特点。 方法：将12只2.5岁健康雌性山羊随机分为去卵巢组和假手术组,去卵巢组行卵巢切除,假手术组切除等量腹腔脂肪组织,每组各6只。两组实验动物分别在术后2,4年处死,分离并截取左侧胫骨平台,行Micro CT扫描,分别测量胫骨平台骨骺松质骨和干骺端松质骨微结构参数。 结果与结论：术后2和4年,与假手术组相比,去卵巢组胫骨平台骨骺和干骺松质骨微观结构参数-骨体积分数、骨小梁数量和骨小梁厚度均降低(P < 0.05),骨小梁分离度均升高(P < 0.05),基本呈时间依赖性变化。仅在术后4年,去卵巢组骨骺松质骨微观结构参数骨小梁厚度与假手术组相比差异无显著性意义(P > 0.05),其骨小梁分离度、骨小梁厚度与去卵巢组术后2年相比差异无显著性意义(P > 0.05)。无论术后2或4年,与假手术组相比,去卵巢组干骺端松质骨微结构参数的改变均比骨骺松质骨明显。结果证实,山羊胫骨平台骨骺松质骨微结构参数与干骺端松质骨具有一定的差异;骨质疏松时山羊胫骨平台松质骨微结构改变呈现出区域性特点,干骺端松质骨较骨骺松质骨微结构退变更为显著。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

测定白细胞介素2以监视肾移植排异的初步研究

本文测定了28例肾移植患者术前术后PBL和白细胞介素2(IL-2)的产生,并与正常人作了比较。在85人次测定中有7次排异反应。术前PBL与正常值无明显差异,IL-2产生略有降低;术后稳定期PBL和IL-2产生都明显下降;排异期急速上升,甚至高于正常水平。一些典型病例的动态观测也表明,术后无排异时IL-2产生逐渐恢复;排异时急速增加。本文引入IL-2×PBL的概念,即每毫升血液的PBL产生IL-2的能力代替IL-2,由于同时考虑了PBL的改变,所以监测排异反应的阳性率和准确率均优于IL-2指标。     

同种特异T细胞疫苗诱导移植物存活期延长的研究——Ⅰ.同种特异T细胞疫苗诱导的细胞免疫水平低下

在体外实验中观察了同种特异T细胞疫苗（TCV）免疫鼠T淋巴细胞对同种抗原和有丝分裂原（ConA）的反应能力。B6同种抗原特异TCV免疫的BALB/c小鼠对B6同种抗原的反应（MLR）能力明显变抑制,对无关第三者同种抗原AKR的反应能力也显著下降,表明存在抗原非特异性的抑制作用。在BALB/c同种抗原特异TCV免疫的B6小鼠中,获得一致的结果。在观察两组TCV免疫动物T细胞对Cond诱导的淋巴细胞增殖实验中,与正常小鼠 T细胞反应性比较,TCV免疫动物 T细胞的增殖能力显著下降,表现为抗原非特异作用。此与MLR中ConA-T细胞免疫动物的结果相一致。在CML实验里,同种抗原特异TCV免疫小鼠的脾细胞体外诱导同种CTL活性明显受到抑制,CTL 活性十分低下。体外实验结果表明:同种特异TCV免疫小鼠可诱发同种抗原反应和对ConA诱发的增殖反应能力显著低下,表现为抗原非特异性作用。     

低强度脉冲电磁场对大鼠骨质疏松的影响

目的：观察低强度脉冲电磁场（pulsed electromagnetic fields，PEMFs）对去卵巢诱导骨质疏松症的大鼠生化指标和骨应力的影响。方法：雌性SD大鼠30只，随机等分为3组（n=10），分别为假手术组（Sham）、骨质疏松模型组（Model）、脉冲电磁场照射组（PEMFs）。经适应4wk后，在25mg·Kg^-1戊巴比妥钠腹腔麻醉下，Model组和PEMFs组摘除双侧卵巢．Sham组找到但不切除卵巢。各实验组均在相同环境下饲养，模型制备4wk后开始治疗，由GZY型低强度低频率脉冲电磁场发生仪产生低频脉冲磁场，根据实验要求，我们使用亥姆霍兹线圈形成均匀磁场，PEMFs组经照射刺激治疗，频率14．3Hz，场强2Gs．日照8h。Model组和Sham组正常饲养。治疗8wk后，对各组大鼠血清、尿液中ALP和Ca以及骨应力进行检测。结果：（1）ALP、Ca检测结果：与Model组相比，PEMFs组ALP值、Ca值差异均有统计学意义（P〈0．05）。其中，血清中ALP值，Model组为（275．16±228，57），PEMFs组为（179．30±87．68）；Ca值，Model组为（2，66±0，13），PEMFs组为（2．52±0．05）。（2）骨应力检测结果：Model组为（923．60±34．15Pa），PEMFs组为（1152．85±118，20Pa），组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：研究发现，PEMFs对于促进骨重建、提高Ca吸收和骨应力恢复具有积极作用。     

微囊化异种坐骨神经组织移植对脊髓损伤大鼠T淋巴细胞亚群的影响及行为学观察

目的观察移植微囊化兔坐骨神经组织对脊髓损伤大鼠外周血中T淋巴细胞亚群的影响及后肢运动功能恢复情况。方法88只成年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为微囊组、细胞悬液组和正常对照组。于术后第1、3、7、14、28d,运用流式细胞仪检测大鼠外周血中T淋巴细胞亚群变化及通过BBB评分法进行后肢运动功能评价。结果细胞悬液组大鼠外周血中CD4+T细胞数于术后第3、7、14和28d较正常对照组有升高,于术后第7、14和28d较微囊组有明显升高;该组大鼠外周血中CD8+T细胞数于术后第7、14和28d较正常对照组和微囊组有升高。而术后微囊组各时相CD4+T细胞数与CD8+T细胞数较正常对照组均无明显变化。术后第14及28d时,微囊组大鼠后肢BBB评分高于细胞悬液组。结论微囊化异种坐骨神经组织移植可以有效地阻止大鼠CD4+T细胞和CD8+T细胞的激活和增值,并能促进后肢运动功能恢复。     

单光子吸收法测定糖皮质激素对大鼠骨骼影响的骨密度

采用16只3月龄♂SD大鼠，体重345～347g，随机分为对照组和激素组，后喂醋酸泼尼松4．5m/kg，每周2次。3个月后，对两组动物的股骨进行骨密度测定。结果表明：与对照组比较，激素组大鼠股骨近段和中段的骨矿含量有减少的趋势；股骨三段的骨宽度有所增加；股骨近段、中段和远段骨密度分别减少了11.8％(P<0．05)，12．5％(P<0．5)和10．5％(P<0．05)。由此初步认为，单光子吸收法除了能测定人的骨密度外，也可用于对大鼠骨质疏松的研究。