支气管肺泡灌洗及灌洗液的细胞计数分类技术规范

支气管肺泡灌洗及灌洗液的细胞计数分类技术规范支气管肺泡灌洗（ＢＡＬ）检查是一项比较新的肺部疾病检查方法，主要应用于以下几方面：①肺部感染，特别是免疫受损、免疫缺陷肺部感染的病原学诊断；②肺癌和其他恶性肿瘤，特别是周围型肺癌肿瘤细胞诊断；③肺间质性疾病...     

哮喘支气管肺泡灌洗液的研究

本文综述近年对哮喘病人支气管肺泡灌洗液的研究情况;包括细胞学和炎性介质成份和量的变化及其临床意义。     

支气管肺泡灌洗液细胞DNA含量分析在周围型肺癌中的诊断价值

目的探讨支气管肺泡灌洗液细胞DNA含量分析对周围型肺癌的诊断价值。方法采用全自动细胞DNA定量分析系统,对31例周围型肺癌及20例肺良性病变患者的支气管肺泡灌洗液细胞作DNA含量分析,并与纤维支气管镜活检和刷检比较。结果灌洗液细胞DNA含量分析诊断周围型肺癌的敏感性为67．7％,特异性为95．0％,显著高于活检（29．0％）和刷检（32．3％）的阳性率（P均〈0.01）。结论支气管肺泡灌洗液细胞DNA含量分析是诊断周围型肺癌有效的辅助方法。     

支气管冲洗和肺泡灌洗液细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值

目的探讨支气管冲洗和肺泡灌洗液细胞ＤＮＡ含量分析对肺癌的诊断价值。方法用流式细胞仪（ＦＣＭ）对４３例肺癌及２５例肺良性病变患者的支气管冲洗和肺泡灌洗液细胞作ＤＮＡ含量分析，并与纤维支气管镜活检和刷检比较。结果以非整倍体阳性为标准，诊断肺癌的敏感性为８１％，特异性为９２％；中心型肺癌非整倍体阳性率为８３％，与活检（９０％）和刷检（６９％）差异无显著性；周围型肺癌非整倍体阳性率为７９％，显著高于活检（２９％）和刷检（２９％）阳性率（Ｐ均＜０．０２５）；两型肺癌中均有一些病例活检和刷检阴性而非整倍体为阳性。结论提示支气管冲洗和肺泡灌洗液细胞ＦＣＭＤＮＡ含量分析是诊断肺癌（尤其是周围型肺癌）有效的辅助方法。     

肺癌患者支气管肺泡灌洗液中K-ras基因突变的检测及其临床意义

Ｋ ｒａｓ基因是与肺癌密切相关的原癌基因之一 ,目前国内外对它的研究主要局限于术后石蜡标本的回顾性研究。我们从肺癌患者支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中检测Ｋ ｒａｓ基因点突变的情况 ,为肺癌的早期诊断及预后评价提供依据。材料与方法　 1 材料 :我们检测了 10 0份标本 ,其中 40份为组织标本 ,包括纤支镜活检组织及术后蜡块 (表 1) ;6 0份为灌洗液标本 ,来自我院 1998～ 2 0 0 0年住院及门诊接受支气管肺泡灌洗术 (ＢＡＬ)的患者 ,男 37例 ,女 2 3例 ,平均年龄(5 6± 12 )岁。 6 0例患者中肺癌 44例 ,均为周围型肺癌 ,其中40例最终经…     

支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范(草案)

支气管肺泡灌洗 (ＢＡＬ)能直接获取肺内炎症免疫效应细胞 ,是探讨肺局部免疫病理过程的一种比较安全和有用的检查方法。对某些肺疾病 ,特别是弥漫性间质性肺疾病 (如特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病伴肺纤维化和Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ组织细胞增生症等 )、肺部肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等 ,ＢＡＬ已成为辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。近 2 0年间支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)检测无论从检测范围和检测项目上都有了长足的进展。由于ＢＡＬＦ检测受诸多因素的影响 ,如ＢＡＬ操作时混血…     

支气管肺泡灌洗液淋巴细胞端粒酶活性检测对肺癌诊断意义

目的通过检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的淋巴细胞的端粒酶活性（TA）,探讨其对BALF端粒酶活性检测的影响,评价TA在肺癌中的诊断意义。方法将52例患者按最终临床诊断结果分为恶性（27例）、良性（25例）两组,用密度梯度离心法分离BALF标本获得淋巴细胞;应用TRAP—ELISA法检测淋巴细胞和同组对照标本的端粒酶活性,结果以OD值表示,计算该方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确性等,结果用t检验和X^2检验。结果端粒酶活性检测（TA）：25例良性肺病组中只有1例TA检测阳性（1／24）,OD值为0．091±0．027,分离的18例淋巴细胞无1例阳性,OD值为0．064±0．013;27例肺癌中有24例阳性,OD值为0．630±0．350,分离的淋巴细胞有1例阳性,OD值为0．084±0．013,分离的肿瘤细胞全部阳性;TA检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确性分别为88．9％、95．8％、96％、88．5％、92．2％,经统计分析：恶性和良性两组问TA差异有显著性（P〈0．01）,淋巴细胞的TA对总体对照无明显影响（P〉0．01）。结论BALF中淋巴细胞的端粒酶活性对TA检测结果无明显影响,TA检测可以作为肺癌的诊断方法。     

支气管肺泡灌洗液细胞分析在间质性肺疾病中的临床价值

胸部高分辨率CT已经成为间质性肺疾病重要的诊断手段,支气管肺泡灌洗作为胸部影像的补充,其在间质性肺疾病的诊断中仍然具有一定的价值.除了某些少见的间质性肺疾病,单独应用支气管肺泡灌洗液细胞学分析不足以诊断间质性肺疾病的特异类型,但是结合临床和影像表现,支气管肺泡灌洗液分析可以支持某种特异性的诊断,使患者一定程度上避免外科肺活检.     

肺癌组织端粒酶活性测定的临床意义

目的：探讨端粒酶活性与肺癌的关系。方法：采用以聚合酶链反应（PCR）为基础的端粒重复序列扩增法（TRAP），结合聚丙酰胺凝胶电泳银染法检测经纤支气管镜取出的35例肺癌患者肺癌组织和相应健侧肺支气管粘膜及35例支气管－肺良性疾病患者支气管粘膜的端粒酶活性。结果：（1）肺癌组肺癌组织活检标本端粒酶阳性33例（94％），毛刷标本阳性32例（91％），其相应健侧肺活检标本阳性2例（5．7％），毛刷标本阳性4例（11％）；（2）支气管－肺良性疾病患者活检阳性0例（0％），毛刷阳性2例（5．7％）；（3）肺癌组织端粒酶活性与肺癌组织学类型和临床分期无明显关系（P＞0．05）。结论：端粒酶活性与肺癌密切相关，可作为检测肺组织癌的一种辅助手段。     

支气管活检标本的端粒酶活性检测对肺癌的诊断价值

目的：探讨肺癌组织端粒酶活性检测对肺癌的诊断价值。方法采用端粒酶重复序列扩增法检测纤维支气管镜活组织检查的肺癌病变组织（７０例）、肺癌对侧支气管组织（７０例）及非癌性肺疾病支气管组织（２０例）的端粒酶活性,并和病理学及细胞学检查结果进行比较。结果肺癌病变组织端粒酶检出率为８１％,明显高于肺癌对侧支气管组织（１４％）（Ｐ〈０．０１）及非癌性肺疾病支气管组织（１０％）的检出率（Ｐ〈０．０１）;肺癌组织     

支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群和细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值

目的　探讨支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群和细胞DNA含量分析对肺癌的诊断价值。方法　用流式细胞仪对 3 0例肺癌和 12例肺良性病变患者的支气管肺泡灌洗液 (BALF)作T淋巴细胞亚群和细胞DNA含量分析 ,并与纤维支气管镜活检和刷检比较。结果　中央型肺癌组BALF中CD3 + (11.473± 3 .677) %、CD4+ (3 .660± 1.60 5 ) %、CD8+ (2 .3 49± 0 .880 ) %和CD4+ /CD8+ (1.411± 0 .3 0 9) ,周围型肺癌组BALF中CD3 + (12 .2 73± 4.42 5 ) %、CD4+ (2 .897±0 .695 ) %、CD8+ (2 .2 5 9± 0 .5 91) %和CD4+ /CD8+ (1.3 0 7± 0 .2 45 ) ;肺良性病变组BALFCD3 +(2 5 .0 78± 7.13 8) %、CD4+ (13 .2 44± 4.15 9) %、CD8+ (7.63 1± 3 .713 ) %和CD4+ /CD8+ (2 .2 78±0 .619) ,前两组显著低于后组 (肺良性病变组 ) (P <0 .0 0 1)。以异常二倍体为阳性标准 ,诊断肺癌的敏感性为 83 % ,特异性为 92 % ;中央型肺癌异常二倍体阳性率为 89% ,与活检 (95 % )和刷检(68% )比较 ,差异无显著性 (P >0 .5和P >0 .1) ;周围型肺癌异常二倍体阳性率为 82 % ,显著高于活检 (2 7% )和刷检 (2 7% )阳性率 (P均 <0 .0 5 )。结论　肺癌患者免疫功能低下 ,是肿瘤发生发展的原因之一 ,支气管肺泡灌洗液细胞DNA含量分析是诊断肺癌 (尤     

表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术对周围型肺癌差异蛋白表达的研究

目的 筛选周围型肺癌患者血清、肺组织活检前后BALF中的差异蛋白,探讨其表达特点、影响因素及其临床意义.方法 选择2008年3月至2009年11月周围型肺癌及肺部良性病变患者各20例,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测患者血清、活检前后BALF中的蛋白质质谱并初步建立分类树诊断模型.结果 (1)两组患者血清中检出6个差异蛋白峰,以质荷比为6637的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为70%(14/20),特异度为90%(18/20),正确率为80%(32/40),阳性预测值为88%(14/16),阴性预测值为75%(18/24),受试者工作曲线(ROC曲线)下而积(AUC)为0.73;(2)两组活检前BALF中检出11个差异蛋白峰,以质荷比为7982的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为85%(17/20),特异度为90%(18/20),正确率为88%(35/40),阳性预测值为89%(17/19),阴性预测值为86%(18/21),AUC为0.94;(3)两组活检后BALF中检出14个差异蛋白峰,以质荷比为7671的差异蛋白建模诊断周围型肺癌的敏感度为85%(17/20),特异度为100%(20/20),正确率为93%(37/40),阳性预测值为100%(17/17),阴性预测值为87%(20/23),AUC为0.93.结论 周围型肺癌活检前后BALF中检出的差异蛋白较血清中多,活检后BALF中的差异蛋白较活检前多.活检前质荷比为7982的差异蛋白与活检后质荷比为7671的差异蛋白在周围型肺癌患者BALF中的AUC值均＞0.9,高于血清;这2种差异蛋白可作为较好的早期诊断周围型肺癌的标志蛋白.

Abstract：

Objective To scan the protein mass spectra in the sera and bronchoalvolar lavage fluid (BALF) from patients with peripheral lung cancer, screen out the differential proteins, and explore the clinical significance of the differential proteins. Methods SELDI-TOF-MS was used to detect the protein mass spectra and to screen out the differential proteins in the sera and BALF collected before and after lung biopsy in 20 patients with peripheral lung cancer and 20 patients with benign pulmonary diseases. The differential proteins were analyzed and the initial diagnostic models were set up. Results ( 1 ) There were 6 differential protein peaks in the sera of the 2 groups ( P ＜0. 05 ＝. The protein with a mass/charge ratio ( M/Z) of 6637 was selected to establish the diagnostic model. The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 70% (14/20) ,the specificity 90% ( 18/20), the accuracy 80% (32/40), the positive predictive value ( PV + ) 88% ( 14/16), the negative predictive value( PV - ) 75% ( 18/24), and the area under the ROC curve (AUC)was 0.73. (2) There were 11 differential protein peaks in the BALF collected before lung cancer biopsy of the 2 groups ( P ＜ 0. 05 ＝. The protein with a M/Z of 7982 was selected to establish the diagnostic model. The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 85% ( 17/20 ), the specificity 90% ( 18/20), the accuracy 88% (35/40), the PV + 89% ( 17/19), the PV - 86% ( 18/21 ), and the AUC was 0. 94. (3) There were 14 differential protein peaks in the BALF collected after lung cancer biopsy of the 2 groups ( P ＜0. 05 ＝. The protein with a M/Z of 7671 was selected to establish the diagnostic model.The sensitivity of diagnosing peripheral lung cancer was 85% (17/20) ,the specificity 100% (20/20), the accuracy 93% (37/40), the PV + 100% (17/17), the PV- 87% (20/23), and the AUC was 0. 93. Conclusions There were more differential proteins in BALF as compared with sera. There were more differential proteins in the BALF collected after lung biopsy as compared to that before lung biopsy. The AUC of the diagnostic models set up by proteins in BALF collected before and after lung biopsy were all above 0. 9 and showed higher efficiency for the diagnosis of peripheral lung cancer as compared to proteins in sera.These differential proteins may be better tumor markers for the diagnosis of peripheral lung cancer at the early stage.     

食管癌端粒酶活性的研究

目的　探讨食管癌端粒酶活性检测的临床意义。方法　建立并应用ＰＣＲ 技术为基础的端粒重复序列扩增,对３６ 例食管癌及其癌旁组织进行检测。结果　３６ 例食管癌组织中２９ 例端粒酶活性呈阳性,阳性检出率为８０ ．５０ ％ ,癌旁组织中２ 例呈阳性,阳性检出率为６．００％ ;二者比较差异有非常显著性（χ２ ＝ ４１．３０,Ｐ＜０ ．００１）;３６ 例食管癌均为鳞状细胞癌,其中１７ 例伴随淋巴结转移的标本中端粒酶活性均呈阳性,而在１９ 例未伴随淋巴结转移的病人中仅有１２ 例检出端粒酶活性,其活性检出率为６３．１５％ ,二者比较差异有非常显著性（ Ｐ＝ ０ ．００６）。结论　端粒酶活性的检测可作为食管癌诊断的指标之一,同时对判断食管癌的预后具有重要参考价值。     

卡氏肺孢子虫肺炎肺灌洗液细胞和生化成分变化的研究

目的 研究卡氏肺孢子虫肺炎（ＰＣＲ）支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中细胞和生化成分的变化及与细菌性肺炎的差别。方法 采用清洁级Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠５０只,每周２次皮下注射泼尼松建立ＰＣＰ模型（１４只）,阴性对照组（６只）,细菌性肺炎组（１１只）为实验组,并设正常对照组（６只）。     

外周血端粒酶活性对肺癌血转移诊断的探讨

目的：探讨以端粒酶重复序列扩增法(PCR—TRAP)检测血中肺癌端粒酶活性对于肺癌血转移诊断、分型分期的临床意义。方法：选取24例肺癌、26例肺良性疾病患，应用PCR—TRAP法测定端粒酶活性，磁分离酶免法检查癌胚抗原(CEA)及血沉。结果：肺癌组端粒酶活性阳性率明显高于肺良性疾病组(p＜0．01)，按肺癌恶化程度分，Ⅲ-Ⅳ期比Ⅰ-Ⅱ期高。CEA和血沉在肺癌与肺良性疾病组异常率无显性差异(p＞0．05)。22．2％(4／18)晚期肺癌外周血端粒酶活性呈阴性，肺良性疾病患中19．2％(5／26)外周血端粒酶活性呈阳性，肺癌患外周血端粒酶活性敏感性比CEA、ESR高(p＜0．01和p＜0．05)，特异性无显性差别(p＞0．05)。结论：端粒酶对于肺癌分期分型及预后判断有临床应用价值。改进检测方法，对提高肺癌血转移诊断的特异性和敏感度显得重要。     

端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性和诱导细胞凋亡

目的 研究端粒酶逆转录酶（hTERT)基因反义寡核苷酸（ASODN）对肺癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法 实验分为ASODN组、正义寡核苷酸（SODN）组和空白对照组,所用ASODN和SODN的浓度分别为10μmol/L,脂质体为16mg/L,采用端粒重复扩增法、逆转录－聚合酶链反应、Western Blot及流式细胞术分别观察各组端粒酶活性、hTERP mRNA和蛋白质表达以及细胞凋亡。结果 ASODN组显著下调或抑制肺癌细胞端粒酶活性和hTERT表达,但直到第21天才出现细胞凋亡增多。结论 端粒酶活性与hTERT表达密切相关。     

间质性肺疾病患者血清和支气管肺泡灌洗液中内皮素1活性的变化

目的评价内皮素对肺纤维化发生、发展作用的影响。方法利用同位素放射免疫直接测定法,检测１０例肺结节病和８例特发性肺纤维化（ＩＰＦ）患者外周血和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中内皮素１（ＥＴ１）的活性,并与８名健康非吸烟者进行对照。结果肺结节病和ＩＰＦ患者血清和ＢＡＬＦ中的ＥＴ１活性分别为（６２±２９）ｎｇ／Ｌ,（１７０±２４）ｎｇ／Ｌ和（７７±７１）ｎｇ／Ｌ、（１０±３）ｎｇ／Ｌ,与正常对照组（２０±８）ｎｇ／Ｌ、（４０±０６）ｎｇ／Ｌ比较,差异有显著性（Ｐ＜００１）;血清中ＥＴ１活性与动脉血氧分压（ＰａＯ２）呈明显负相关（ｒ＝－０５３８,Ｐ＜００１）;结节病组和ＩＰＦ组ＢＡＬＦ中的ＥＴ１水平与ＢＡＬＦ中细胞总数呈正相关（ｒ＝０６４９,Ｐ＜００１）,肺结节病患者、ＩＰＦ患者ＢＡＬＦ中ＥＴ１与淋巴细胞、中性粒细胞呈正相关（ｒ＝０７１２,０８１３,Ｐ均＜００１）。结论ＥＴ１在肺结节病和ＩＰＦ发病机制中起着重要作用,并可作为疾病活动性判定的一项重要参考指标。