糖基化终产物对大鼠肾系膜细胞结缔组织生长因子作用的研究

目的：探讨糖基化终产物（AGEs）对大鼠肾系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF) mRNA表达及细胞外基质（ECM）合成的影响。方法： 在培养的大鼠肾系膜细胞中，分别加入不同浓度的糖化牛血清白蛋白(AGE-BSA)及牛血清白蛋白(BSA)进行刺激，ELISA法检测培养上清中的纤连蛋白（FN）及Ⅳ型胶原（ColⅣ）含量，RT-PCR检测细胞CTGF mRNA表达。结果： 与加入BSA组比较，AGE-BSA组CTGF mRNA表达明显增强（P<0.01），上清中FN及ColⅣ合成增加（P<0.01）， 与CTGF mRNA表达量之间呈正相关（r=0.83）。 结论： AGEs能明显诱导大鼠肾系膜细胞CTGF mRNA的表达，提示AGEs可能通过上调CTGF mRNA的表达引起ECM积聚。     

糖基化终产物与心脑肾疾病的关系

８０年代初Ｇｅｒａｍｉ和Ｂｒｏｗｌｅｅ等首先报道糖尿病患者持久的高血糖状态会导致许多结构功能蛋白和核酸蛋白非酶糖基化，这在糖尿病慢性并发症的发生中占有重要地位，且与衰老过程密切相关。近两年来的研究表明,其病理意义比原来预计的更广泛。不仅与衰老、尿毒症与透析相关疾病和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ病密切相关,且与胞浆及核蛋白如转录因子、原癌基因和肿瘤抑制因子的糖基化有关,很可能是一种以前未发现的类似于蛋白质磷酸化的重要调控方式。本文就这一领域的国际研究动态并结合我们的初步研究结果作一报告。１糖基化终产物及其…     

糖基化终产物与糖尿病血管并发症

糖尿病时糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)生成与蓄积不仅加速糖尿病本身的发展,还与糖尿病肾病、视网膜病、神经性疾病和心血管疾病等慢性并发症密切相关。AGEs与糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)相互作用诱导氧化应激,促进炎症反应,影响凝血系统,在糖尿病及其并发症的病理生理过程中起重要作用。抑制AGEs生成、交联结构及阻断AGEs与RAGE相互作用为寻找治疗糖尿病血管并发症的药物提供了新的途径。     

糖基化终产物对人单核细胞源树突状细胞糖基化终产物受体表达的研究

目的：探讨糖基化终产物 (AGEs）)对人单核细胞源树突状细胞（MDCs）糖基化终产物受体（RAGE） 表达的影响。 方法： 用免疫磁珠分离人外周血CD14+单核细胞，经含rhGM-CSF（100 μg/L）和rhIL-4（50 μg/L）的RPMI-1640培养，使其分化为MDCs，采用RT-PCR和Western blotting法，观察糖基化-白蛋白（AGE-BSA）对MDCs RAGE mRNA和蛋白表达的影响，同时检测培养液上清中IFN-γ和IL-12的浓度。 结果： AGE-BSA诱导DCs RAGE mRNA和蛋白的表达（P＜0.05），高于空白对照组，并且明显促进了DCs IFN-γ和IL-12的分泌（P＜0.05）。BSA干预组与空白对照组相比差异无显著（P＞0.05）。 结论： AGEs能够上调DCs RAGE的表达，并且促进了DCs IFN-γ和IL-12的分泌，这可能是糖尿病通过DCs促进动脉粥样硬化发生的重要机制之一。     

糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达韵影响

目的：观察糖基化终末产物（AGEs）对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）表达的影响及其与细胞外基质（ECM）成分含量的关系。方法：体外培养正常大鼠肾系膜细胞，分别用糖化牛血清白蛋白（AGEs）及未经糖化的牛血清白蛋白（BSA）处理，以常规培养的肾系膜细胞作为对照，检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用，ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量，逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测系膜细胞PAI-1 mRNA的表达。结果：与相应浓度的BSA比较，AGEs（0—200mg／L）对系膜细胞增殖无明显影响，但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT—PCR检测显示，给予AGEs（100mg／L）的系膜细胞PAI-1 mRNA的表达明显增加（P〈0．01）。结论：AGEs促进系膜细胞PAI—1的表达，提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解，可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及其与细胞外基质(ECM)成分含量的关系。方法:体外培养正常大鼠肾系膜细胞,分别用糖化牛血清白蛋白(AGEs)及未经糖化的牛血清白蛋白(BSA)处理,以常规培养的肾系膜细胞作为对照,检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用,ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测系膜细胞PAI-1mRNA的表达。结果:与相应浓度的BSA比较,AGEs(0-200mg/L)对系膜细胞增殖无明显影响,但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT-PCR检测显示,给予AGEs(100mg/L)的系膜细胞PAI-1mRNA的表达明显增加(P<0.01)。结论:AGEs促进系膜细胞PAI-1的表达,提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解,可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞产生一氧化氮量及其合酶 …

目的和方法：利用体外培养的人脐静脉内皮细胞，观察糖基化终产物对该细胞产生一氧化氮（ＮＯ）及其对一氧化氮合酶ＮＯＳ活性的影响。结果：发现糖基化终产物组一氧化氮含量明显降低而一氧化氮合酶活性却明显增高，并随浓度，作用时间而发生相应变化。结论：糖基化终产物对内皮细胞产生一氧化氮的影响并不是通过降低ＮＯ合酶活性而起作用。     

糖基化终产物对糖尿病微血管病变的作用

糖尿病不仅是一种慢性终身性疾病,它又是多脏器疾病并累及多数脏器,已成为仅次于脑血管和肿瘤之后,第三位的常见病、多发病和慢性非传染性疾病.根据流行病学调查,糖尿病的发病率呈逐年上升的趋势.     

盐酸氨基胍对糖基化终产物诱导的人肾小球系膜细胞调节活化蛋白表达的影响

目的探讨盐酸氨基胍对糖基化终产物（AGEs）促进人肾系膜细胞（HRMC）趋化因子RANTES表达和分泌的干预效应。方法常规方法制备糖基化终产物（AGEs-BSA）和盐酸氨基胍干预体外培养的HRMC,收集培养上清和细胞,ELISA法检测上清中RANTES浓度,实时定量RT-PCR检测RANTES mRNA表达水平,western blot检测RANTES蛋白表达。结果盐酸氨基胍干预组HRMC RANTES的mRNA和蛋白表达以及蛋白分泌明显低于AGE-BSA组（P〈0.05）;且降低水平呈浓度依赖性。结论盐酸氨基胍能抑制AGEs诱导的HRMC RANTES的表达和分泌。     

晚期糖基化终产物对血管通透性的影响和作用机制

血管通透性的增高是糖尿病血管并发症的一个标志性事件[1],是其发生的最初表现和导致其他后续改变的病理基础.随着对晚期糖基化终产物(advanc-ed glycation end products,AGEs)及其特异性受体(rece-ptor for advanced glycation end products,RAGE)的结构及其病理机制研究的深入,AGEs在血管通透性增高中所起的重要作用引起了广泛的关注,我们就此作一综述.     

可溶性趋化因子对人单核细胞表达及基质金属蛋白酶-9的影响

目的观察趋化因子Fractalkine（CX3CL1,Fkn）对人单核细胞株U937细胞表达与分泌基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的影响。方法使用不同浓度的人重组Fkn干预U937细胞,RT-PCR法检测细胞MMP-9基因表达,明胶酶谱法检测细胞上清中MMP-9水平。结果不同浓度人重组Fkn干预U937细胞MMP-9基因表达及上清中MMP-9水平低于空白对照组。结论Fkn可抑制U937细胞表达与分泌MMP-9。     

Demonstration of Actomyosin in Mesangial Cells of the Renal Glomerulus

Antisera to human uterine actomyosin were prepared in rabbits and conjugated with fluorescein (F-AUAM). When F-AUAM was applied to frozen sections of normal human kidney which were then examined by ultraviolet light microscopy, it was observed that vascular smooth muscle, endothelium of arteries, veins, and peritubular capillaries and glomerular mesangial cells were immunofluorescent. Neither glomerular endothelium nor epithelial cells of Bowman's capsule or renal tubules were stained by F-AUAM. The specificity of antisera for actomyosin was confirmed by absorption and blocking studies, examination of a wide variety of tissues and immunodiffusion in agarose gel. It may be inferred from these data that mesangial cells are contractile. Contraction of the mesangium may play a significant role in regulating glomerular blood flow and in the reaction of the glomerulus to injury.     

Fractalkine overexpression suppresses tau pathology in a mouse model of tauopathy

Alzheimer’s disease is characterized by amyloid plaques, neurofibrillary tangles, glial activation, and neurodegeneration. In mouse models, inflammatory activation of microglia accelerates tau pathology. The chemokine fractalkine serves as an endogenous neuronal modulator to quell microglial activation. Experiments with fractalkine receptor null mice suggest that fractalkine signaling diminishes tau pathology, but exacerbates amyloid pathology. Consistent with this outcome, we report here that soluble fractalkine overexpression using adeno-associated viral vectors significantly reduced tau pathology in the rTg4510 mouse model of tau deposition. Furthermore, this treatment reduced microglial activation and appeared to prevent neurodegeneration normally found in this model. However, in contrast to studies with fractalkine receptor null mice, parallel studies in an APP/PS1 model found no effect of increased fractalkine signaling on amyloid deposition. These data argue that agonism at fractalkine receptors might be an excellent target for therapeutic intervention in tauopathies, including those associated with amyloid deposition.     

金雀异黄素对氧化低密度脂蛋白刺激大鼠系膜细胞的保护作用

探讨金雀异黄素(Gen)作为抗氧化剂对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)刺激SD大鼠肾小球系膜细胞(MC)的保护作用.以体外培养的SD大鼠MC为研究对象,分为对照组、OX-LDL组和Gen组.检测胞浆内活性氧物质(ROS)、抗氧化酶(AOEs)活力和丙二醛(MDA)水平,以及核转录因子-kB(NF-kB)亚基P65核转位的表现,并明确量效关系.结果表明:OX-LDL刺激的MC与对照组相比胞浆内ROS明显增多,AOEs活力显著下降,MDA显著增加,p65发生了核转位,而Gen则能抑制上述效应,且具有时间和浓度依赖性.说明在体外培养条件下,OX-LDL刺激的MC呈现氧化应激状态.Gen能够减少实验组ROS和MDA生成,升高AOEs活力,抑制NF-kB的活化,且具有时间和浓度依赖性,其机制可能均与Gen灭活氧化应激有关,提示Gen对OX-LDL刺激下的MC具有保护作用.     

IL-10对人肾小球系膜细胞细胞周期负调控蛋白p27的调节

观察白细胞介素 10 (IL 10 )对体外培养的人肾小球系膜细胞 (HMC )增殖影响 ,并探讨IL 10对HMC细胞周期负调控蛋白p2 7的影响 ,旨在了解其调节HMC增殖的内在机制。HMC用含 5 %FCS的RPMI16 4 0培养 ,加入IL 10刺激后 ,应用流式细胞术分别测定HMC细胞增殖周期的变化以及p2 7的水平。结果表明IL 10可抑制血清诱导的HMC增殖 ,IL 10显著减少了HMCG0 /G1期细胞进入S期和G2 /M期 ;2 5ng/mlIL 10明显地上调细胞周期负调控蛋白p2 7水平 ,是血清刺激组的 1 7倍 (P <0 0 5 )。IL 10抑制血清诱导的HMC增殖的作用机制可能部分是通过上调细胞周期负调控蛋白p2 7来实现的 ,提示IL 10在增殖性肾小球肾炎中可能发挥重要的调节作用     

The Emerging Role of the Receptor for Advanced Glycation End Products on Innate Immunity

Cells from innate immune system are activated by the engagement of germ-line encoded pattern-recognition receptors (PRRs) in response to the microbial insult. These receptors are able to recognize either the presence of highly conserved microbial components called pathogen-associated molecular patterns or endogenous danger-associated molecular patterns. These danger signals are recognized by different types of (PRRs), including the receptor for advanced glycation end products. This new PRR share both ligands and intracellular signaling with Toll-like receptors and thus may cooperate with each other as essential partners to strength inflammatory response. This review summarizes recent advances in understanding the promiscuity of this receptor as well as its role in the context of innate immunity by triggering an inflammatory response when innate immune cells detect infection or tissue injury.