致倦库蚊幼虫中枢神经系统的乙酰胆碱酯酶定位观察

目的：观察致倦库蚊幼虫中枢神经系统结构.方法：用硫代胆碱整体染色法定位乙酰胆碱酯酶.结果：致倦库蚊幼虫中枢神经系统是由脑和位于消化道腹面的腹神经索构成.脑较发达,包括前脑、中脑和后脑;腹神经索包括食道下神经节,3对胸神经节和8对腹神经节.结论：乙酰胆碱酯酶组化定位法可清楚显示致倦库蚊幼虫的神经系统结构.     

以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶

目的 探讨以甲壳胺为载体固定乙酰胆碱酯酶的最佳条件及固定化酶的理化性质.方法 以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱酯酶固定在甲壳胺上,并分别测定固定化酶与溶液酶的活力.结果 固定化酶与溶液酶的最适温度相同,均为37℃;固定化酶与溶液酶最适pH分别为8.2、8.0;固定化酶在50℃仍有较高热稳定性,而溶液酶活力明显下降;固定化酶的米氏常数Km=0.84 mmol/L,溶液酶的Km=1.16 mmol/L;固定化酶活力回收为44.66%,在重复使用8次后仍能保持原有活力的50%.结论 该固定化酶与溶液酶相比,其热稳定性提高,与底物的亲和能力增大,且重复使用性较好.     

氯胺酮对新生大鼠海马乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶的影响

目的探讨氯胺酮对新生大鼠学习记忆和海马乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法 80只7 d龄大鼠随机分为C、K1、K2、K3组,每组20只。C组给予生理盐水2 ml;K1组单次腹腔注射氯胺酮80 mg/kg,K2、K3组分别按同等剂量注射2、3 d。末次给药后1 d各组处死10只、余大鼠至21 d龄行Morris水迷宫实验。迷宫实验后检测海马AchE和ChAT水平。结果水迷宫结果:C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义;K2、K3组较C、K1组潜伏期延长且穿越平台次数减少(P<0.05)。酶测定:8 d龄,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。27 d龄,C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义,K2、K3组较C、K1组差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯胺酮引起新生大鼠空间辨别记忆能力下降,可能与海马胆碱能系统有关;单次给药能引起短期内海马胆碱能系统变化,而重复给药则会导致较长时间的影响。     

乙酰胆碱酯酶的磁效应研究

目的：建立光纤光度法测定乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的方法。方法：以酶的催化活性为检测指标,研究磁场对酶活力的影响。结果：影响程度与磁场强度、磁化时间及温度有关。结论：为磁场调控酶开辟了新途径。     

人乙酰胆碱酯酶表位的预测

应用“Goldkey”软件,预测出人乙酰胆碱酯酶的8个抗原决定簇位点,可用于指导抗原多肽的合成或PCR引物设计。     

破坏RBC膜对乙酰胆碱酯酶测定的影响

乙酰胆碱酯酶(AchE),是化学传导介质乙酰胆碱的水解酶。昔日主要用于诊断有机磷中毒,现今成为诊断多种疾病的重要指标。目前测定AchE活性的方法较多,     

长沙市2013年致倦库蚊抗药性测定报告

【目的】了解长沙市致倦库蚊对主要化学杀虫药剂的抗药性水平,以指导科学合理地使用杀虫剂。【方法】选择常用拟除虫菊酯类、敌敌畏等五种杀虫剂,按幼虫浸渍法测定受试致倦库蚊半数致死量（LC50）,并与2004年、2010年的测定结果进行比较。【结果】2013年致倦库蚊的抗药性与2010年相比,五种药物中四种有所降低,与2004年比有三种有所降低。【结论】长沙市在蚊虫防治中应减少溴氰菊酯的使用,加强整体规划,延缓蚊虫抗药性的发展。     

IRE-BP 1基因在三种淡色库蚊体内表达量的比较分析

目的进行不同品系淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在淡色库蚊抗性品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因片段,荧光定量PCR表明该基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的8.22倍,现场品系是敏感品系的5.17倍。结论淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。     

转铁蛋白基因在三种淡色库蚊体内表达量的比较分析

目的进行不同品系蚊转铁蛋白基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在淡色库蚊抗性品系品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增淡色库蚊转铁蛋白基因片段,荧光定量PCR表明转铁蛋白基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的13.52倍,现场品系是敏感品系的7.48倍。结论淡色库蚊转铁蛋白基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。     

三种抗性品系淡色库蚊对五种杀虫剂的交互抗性

目的了解淡色库蚊对化学杀虫剂的交互抗性,为合理有效地进行蚊虫化学防治提供依据。方法采用WHO生物测定方法测定3种抗性品系淡色库蚊对5种杀虫剂的抗性。结果DDVP抗性品系淡色库蚊抗性水平为8．38倍,对氯氰菊酯、三氯杀虫酯、残杀威和溴氰菊酯的抗性分别为52．50倍、7．61倍、4．74倍和0．75倍;残杀威抗性品系淡色库蚊抗性水平为11．34倍,对氯氰菊酯、DDVP、三氯杀虫酯和溴氰菊酯的抗性分别为8．08倍、2．85倍、2．00倍和1．80倍;氯氰菊酯抗性品系淡色库蚊抗性水平为243．00倍,对溴氰菊酯、三氯杀虫酯、残杀威和DDVP的抗性分别为28．90倍、17．28倍、1．49倍和1．38倍。结论蚊虫对某种杀虫剂产生抗性后,可能对其它杀虫剂也产生不同的交互抗性,用药前应作抗性测定,注意选择药物品种和确定使用剂量。     

残杀威选育淡色库蚊抗药性研究

目的实验选育抗性品系的蚊虫，探讨抗药性的发生发展规律，为抗性媒蚊的防制研究提供依据。方法在实验室条件下，用残杀威以LC50的剂量处理IV龄幼虫，选育残杀威抗性品系。按照WHO生物测定法，测定抗残杀成品系对多种杀虫剂的敏感性。结果选育到23代时，抗性比敏感品系增加11．12倍，之后抗性趋于稳定。通过测定发现残杀威抗性品系对其它化学杀虫剂有交互抗性。讨论使用杀虫剂可在短期内使蚊虫产生抗性，抗性水平增长较快，而且对作用机理相近的杀虫剂也产生交互抗性。     

抗溴氰菊酯淡色库蚊RNA电泳图谱初步分析

采用酸性异硫氰胍－酚－氯仿－步法提取了抗溴氰菊酯淡色库蚊成虫ＲＮＡ。经琼脂糖凝胶电泳，该ＲＮＡ呈现５Ｓ、１８Ｓ和２５Ｓ三条主带。对２５ＳｒＲＮＡ进行了讨论。     

溴氰菊酯选育淡色库蚊和中华按蚊的研究

淡色库蚊经溴氰菊酯选育１０代，Ｌｅ５０由０．０４０２ｐｐｍ上升至２１．２７３８ｐｐｍ，抗性高达５２９．２０倍，抗性呈指数曲线上升；中华按蚊被处理８代，Ｌｅ５０由０．０２５６ｐｐｍ至第４代（Ｆ３）时的０．０４８ｐｐｍ，抗性指数为１．８８，其后逐比下降至处理起点水平上波动。溴氰菊酯与增效醚混用后，毒效明显增加，表明多功能氧化酶活力增强是拟除虫菊酯类抗性机理之一。     

杀虫剂复配对淡色库蚊毒力的测定

目的了解杀虫剂复配对不同抗性品系淡色库蚊的杀灭效果。方法采用WHO生物测试法，测定了五种杀虫剂两两复配对三种抗性品系蚊虫的增效效果。结果残杀威十三氯杀虫酯、残杀威十氯氰菊酯、DDVP十三氯杀虫酯三种复配形式对抗残杀威品系蚊虫增效效果较明显。DDVP十三氯杀虫酯、DDVP十氯氰菊酷、残杀威十三氯杀虫酯、残杀威十氯氰菊酯四种复配形式对抗DDVP品系蚊虫增效效果较明显。氯氰菊酯十残杀威、氯氰菊酯十DDVP、DDVP十三氯杀虫酯、残杀威十三氯杀虫酯四种复配形式对抗氯氰菊酯品系蚊虫增效效果较明显。结论当淡色库蚊产生抗药性后，应用有机磷类或氨基甲酸酯类杀虫剂与拟除虫菊酯类或有机氟类杀虫荆混用，能取得较好的杀虫效果。     

冬期淡色库蚊种群生理生态的研究

本文报告作者于1987年5月至1988年9月分别在扬州,上海奉贤等地对冬期淡色库蚊种群生理生态变化的初步研究。结果表明,该蚊在上述地区于10上旬出现滞育,翌年3月上旬开始解除。在上海雄蚊于2月份消失,新蚊于4月中旬出现。冬期各月份都可捕到吸血蚊,吸血蚊生殖营养协调。越冬蚊中大部分未吸血滞育蚊(98%),个别吸血蚊与经产蚊(2%)也可越冬。冬期该蚊具有变换越冬场所以及再次补充营养等现象。     

淡色库蚊性别差异表达cDNA文库的构建和分析

目的为探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用,建立传播疾病的淡色库蚊性别差异表达cDNA文库。从而筛选阻断疾病传播的疫苗候选分子。方法以淡色库蚊雌蚊成蚊为检测方（Tester）、雄蚊成蚊为驱动方（Driver）,进行正向抑制性消减杂交;以雄蚊成蚊为Tester、雌蚊成蚊为Driver,进行反向抑制性消减杂交。将获得的正向抑制性消减杂交产物克隆入pGEM-T easy vector,并以菌液PCR扩增鉴定插入片段。随机抽取100个阳性克隆进行DNA序列分析,并将所得ESTs序列进行在线BLAST分析。结果从100个阳性克隆中测得98个ESTs序列,在测定的序列中与已知基因具有同源性的有57个,其余41个ESTs与已知基因不具有同源性。结论抑制性消减杂交技术建立雌蚊特异性基因文库,发现了淡色库蚊雌蚊新的ESTs序列,为性别相关基因的功能及性别调控。探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用及其筛选传播阻断疫苗候选分子的研究奠定了基础。     

糖原分支酶基因体外增强淡色库蚊抗药性的研究

目的构建淡色库蚊糖原分支酶基因(GBE)的昆虫表达载体,通过细胞转染法鉴定其与蚊虫抗药性相关的关系。方法用基因重组方法构建GBE的昆虫表达载体;通过脂质体转染法将昆虫表达载体转入伊蚊C6/36细胞,继而通过观察细胞形态及3H TdR掺入法检测稳定表达GBE基因的细胞对溴氰菊酯杀虫剂的敏感性。结果成功构建GBE基因的昆虫表达载体同时通过筛选获得稳定表达该基因的细胞株。3H TdR掺入法结果显示转染GBE基因能够提高细胞的存活率,并与对照组差异有显著性(P<0.05)。结论 GBE基因在与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关,且其在细胞对抗溴氰菊酯的毒性作用中有保护作用。