人肺腺癌干细胞源自肺脏细支气管肺泡干细胞的初步研究

背景与目的已有的研究提示肺腺癌源自肺脏细支气管肺泡干细胞(BASC)的恶性转化,但该假说在人体中尚未得到证实。本研究旨在对人肺腺癌干细胞的BASC特征进行分析。方法人肺腺癌干细胞经流式细胞纯化或无血清悬浮培养获得,所得细胞采用免疫荧光检测BASC特征性标志并经尾静脉注射至免疫缺陷小鼠观察肿瘤转移。结果人肺腺癌细胞A549和SPC-A1均表达Ⅱ型肺泡细胞标志SP-C,但少数细胞表达支气管非纤毛柱状细胞标志CCSP和胚胎干细胞基因OCT4,提示此类细胞属于BASC样癌干细胞。采用流式细胞分选技术纯化其中的CD24 CD22 肺腺癌干细胞后,发现此类细胞属于CCSP SP-C OCT4 细胞,其表型与BASC相同。此外,肺腺癌细胞在无血清培养条件下经EGF/IGF-1/FGF-10刺激能够形成悬浮生长的球体,这类肺球体细胞的特征也与BASC相同。肺球体细胞在含血清条件下培养2周即发生分化,表现为CCSP和OCT4表达丢失。动物实验揭示肺球体细胞具有高转移能力。结论人肺腺癌干细胞具有BASC特征并表达胚胎干细胞基因OCT4,此类肺癌细胞可能与小鼠肺腺癌一样,源自肺脏BASC的恶性转化。     

肺腺癌中HLA-G的表达及其与患者预后的关系

目的 探讨HLA-G在肺腺癌中的表达及其与患者预后的关系。方法 使用cBioPortal数据分析工具,分析HLA-G分子在肺癌中的表达;Kaplan-Meier Plotter数据库分析HLA-G分子在肺腺癌中的表达及与预后的关系;免疫组织化学法检测HLA-G蛋白分子在223例肺腺癌组织中的表达,分析其与临床病理特征的相关性。结果 HLA-G基因的改变主要表现为扩增和错义突变,其中,扩增突变主要在肺腺癌中。 HLA-G分子的表达与肺腺癌的预后呈负相关,HLA-G高表达组患者总生存期明显短于低表达患者。结论 HLA-G分子在肺腺癌中高表达,在肺腺癌中是一种不良预后因素。     

肺腺癌细胞核形态与预后关系的定量研究

目的探讨肺腺癌细胞核形态变化在不同临床病理条件下与预后之间的关系。方法应用多功能计算机图像分析仪选择８项参数（细胞核ＤＮＡ含量，核面积，核周长，最大、最小和等效直径，核轴比和核形状因子）对３４例术后生存时间有明差异的肺腺癌标本进行检测。结果淋巴结转移阴性、组织学Ⅰ、Ⅱ级和肿瘤长径＜５ｃｍ组，细胞核大者生存期短；淋巴结转移阳性、组织学Ⅲ级和肿瘤长径≥５ｃｍ组，细胞核大小与患者预后的关系不明显。生存组细胞核形状因子较大，且与各临床病理因素无明显相关。结论细胞核形态定量，尤其是细胞核形状因子对肺腺癌患者预后的评估有重要意义。     

肺腺癌组织中IGF-IR表达与患者临床病理因素及预后的相关性

背景与目的 肺腺癌发病率不断升高,而胰岛素样生长因子Ⅰ受体(insulin-like growth factor Ⅰ receptor,IGF-IR)是多种生长因子的调控枢纽,在肿瘤细胞的分化、增殖过程中起重要调节作用.本研究旨在为检测肺腺癌组织中IGF-IR表达,并分析其与肺腺癌患者临床病理因素及预后的相关性.方法 采用免疫组化方法检测肺腺癌组织IGF-IR表达.卡方检验分析IGF-IR表达与临床病理因素的关系,Kaplan-Meier生存曲线计算生存率,采用Cox分析评估各指标与患者生存期之间的关系.结果 126例肺腺癌组织中,89例可观察到IGF-IR阳性细胞.IGF-IR表达与肺腺癌患者肿块大小及T分期相关,而与年龄、性别、吸烟史、病理分期、分化及CEA等因素及患者的疗效及生存期无明显相关.结论 肺腺癌患者表达IGF-IR,与患者的肿块大小和T分期有关,而与预后无关.     

影响肺腺癌预后因素的研究

应用多功能图像分析仪，地３４例术后生存时间有明显差异的肺腺癌标本进行检测，并应用免疫组化方法检测了Ｐ＾５３蛋白的异常表达；探讨与预后之间的关系，结果显示：ＤＮＡ含量，核面积（ＮＡ）、核周长（ＮＰ）、最大直径（Ｄｍａｘ）、最小直径（Ｄｍｉｎ）、等铲直径ＥＤ、核形态指数（ＮＦＩ）、核面积标准差（ＮＡＳＤ）及核周长标准差（ＮＰＳＤ）９项参数与患者预后有显著关系，核积分光密度标准差（ＮＩＳ）和核轴比（ＮＡ     

肺腺癌组织中OCT4表达与患者临床指标及预后的相关性

背景与目的肺腺癌发病率不断升高,而OCT4是调控干细胞自我更新的关键基因,在癌干细胞的增殖分化过程中起重要调节作用。本研究目的为检测肺腺癌组织中OCT4表达,并分析其与肺腺癌患者转移、化疗疗效及预后的相关性。方法采用免疫荧光方法检测肺腺癌组织OCT4表达。卡方检验OCT4表达与临床病理指标的关系,Kaplan-Meier生存曲线计算生存率,采用Cox分析评估各指标与患者生存之间的关系。结果 126例肺腺癌组织中,91例可观察到OCT4阳性细胞。OCT4表达与肺腺癌患者转移及化疗耐药密切相关,且与患者无病生存期和生存期呈明显负相关。结论 OCT4表达与肺腺癌患者的转移及化疗耐药相关,提示预后不良。     

肺腺癌患者癌组织中MAP4的表达水平及其与病理参数、预后的关系

目的:分析肺腺癌患者癌组织中微管关联蛋白4(MAP4)的表达水平及其与病理参数、预后的关系.方法:选取我院2014年1月至2015年1月82例非小细胞肺癌(NSCLC)患者,利用免疫组织化学染色法对手术切除的癌组织及其癌旁正常组织的MAP4蛋白表达水平进行检测,并分析MAP4蛋白表达与患者临床病理参数和预后的关系.结果...     

CDHR2在肺腺癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨CDHR2在肺腺癌(LUAD)组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系,并分析CDHR2与LUAD肿瘤免疫浸润的关系。方法挖掘TCGA、GEPIA数据库中CDHR2在LUAD中的表达及与预后的关系;免疫组织化学染色检测83例LUAD患者的癌组织及癌旁正常组织中CDHR2的表达情况,并分析其与患者临床病理特征及无病生存期(DFS)的关系。通过TIMER和CIBERSORT数据库分析CDHR2与LUAD肿瘤免疫浸润水平之间的关系。结果 TCGA数据集中515例LUAD组织的CDHR2表达水平显著高于59例癌旁正常组织(P<0.05)。GEPIA数据库发现CDHR2高表达与较差的总生存期(OS)有关(P<0.05)。免疫组化显示CDHR2蛋白在LUAD组织中的高表达率为66.3%(55/83),高于癌旁组织的37.3%(31/83),差异有统计学意义(P<0.05)。CDHR2蛋白表达与TNM分期有关(P<0.05)。CDHR2蛋白高表达患者的中位DFS为44.6(95%CI:39.5～49.7)个月,短于低表达患者的57.3(95%CI:49.9～64.8...     

人肺腺癌干细胞的分离及鉴定

目的：从人肺腺癌细胞株中分离及鉴定具有干细胞特征的高致瘤性癌干细胞。方法：采用磁性细胞分选（magnetic activated cell sorting，MACS）技术将肺腺癌细胞分成多个亚群，然后应用流式细胞及RT-PCR技术检测干细胞相关标志表达，通过NOD-SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：在A549和SPC-A肺腺癌细胞中发现一个新颖的癌细胞亚群，此类癌细胞的表型特征为CD24^＋IGF-1R^＋，具有高侵袭性和高致瘤性，在NOD-SCID小鼠中仅需移植100个细胞即可形成肿瘤，其致瘤能力是上述标志阴性细胞的1000倍。此外，这些细胞表达胚胎干细胞标志（OCT4和Bmi-1）及肺干细胞标志（CCSP，SP-C，TTF-1和Gremlin），类似小鼠肺脏细支气管肺泡干细胞（bronchioalveolar stem cells，BASC），并具有自主生长特性，能够在无血清条件下长期培养。结论：人体肺腺癌中CD24^＋IGF-1R^＋细胞属于BASC样癌干细胞。     

肺腺癌肿瘤免疫微环境及其与疗效和预后的关系

肿瘤免疫微环境（TIME）及其对肺腺癌患者预后和治疗的影响已成为近年来肺腺癌研究的新热点。为了明确TIME的动态变化和其中各个组分对治疗和预后的影响,本综述分析近年来利用单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术在肺腺癌中进行的TIME相关研究,发现肿瘤细胞、免疫细胞、各种调控因子及其在TIME中的相互作用影响着肺癌的发生、发展和治疗结果。TIME的异质性受各种癌细胞、免疫细胞、细胞因子/趋化因子环境、细胞毒活性或免疫抑制因子等影响。与TIME异质性相关的细胞亚型的特定组成可能促进或阻碍机体对免疫治疗的反应,并影响患者预后。目前,已发现多种标志物,包括差异表达基因、特异性细胞标志物、细胞性质相关标志物,均可对患者预后分层或预测治疗效果。另外,多种亚型的免疫细胞亦可对肺腺癌免疫治疗耐药性进行分层和预测。本文综述了TIME对预后分层、疗效预测和耐药性分层的相关标志物或模型,希望对未来肺腺癌治疗策略的制定和生物标志物的开发提供启发。     

胃腺癌临床病理及相关基因与预后

 【摘要】　目的　进一步探索影响胃癌患者生存因素的有用指标。方法　采用流式细胞仪（FCM）和免疫组织化学（IHC）技术分别检测98例胃腺癌P- 糖蛋白（P-gp）、CD44、CD25和C-erbB-2、p16、p53抗体表达水平,并结合临床病理和随访资料进行相关性分析。结果　以随访3年内死亡60例（其中失访11例按死亡计）为死亡组,生存3年以上38例（38.3 %）为生存组。死亡组临床Ⅰ～Ⅱ期5例,Ⅲ～Ⅳ期55例;淋巴结无转移3例,转移57例;无瘤栓或累及神经21例,有瘤栓或累及神经39例;无浆膜浸润6例,有浆膜浸润54例。与相应生存组比较分别为21、17例;17、21例;26、12例;12、26例。均显示差异有统计学意义（P＜0.01）;死亡组肿瘤组织学分级中分化9例,低分化51例;瘤体≤5 cm 18例,＞5 cm 42例;肿瘤1个部位累及16例,2～3个部位累及44例;血型A 10例,O 31例与相应生存组比较分别为14、24例;21、17例;18、20例;14、13例,均显示差异有统计学意义（P＜0.05）。而胃癌相关基因C-erbB-2、p16、p53、P-gp、CD44、CD25的表达在两组间比较均显示差异无统计学意义。结论　胃癌患者临床分期、淋巴结转移、瘤体及神经受侵、浆膜浸润、瘤细胞分化程度、瘤体大小和累及范围是影响患者生存的重要因素。胃癌相关基因表达的确切意义和作用尚有待更多资料的研究。     

OCT4在卵巢无性细胞瘤中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性

目的:探讨OCT4在卵巢无性细胞瘤中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常卵巢组织、54例卵巢原始生殖细胞肿瘤（28例无性细胞瘤、10例卵黄囊瘤、6例未成熟畸胎瘤、10例成熟畸胎瘤）中OCT4表达情况,并分析其与卵巢无性细胞瘤临床病理学特征的关系及对患者预后的影响。结果:OCT4在卵巢无性细胞瘤中全部呈阳性表达,而在成熟畸胎瘤、未成熟畸胎瘤、卵黄囊瘤及正常卵巢组织中不表达,差异有统计学意义（P＜0.01）。OCT4表达与卵巢无性细胞瘤临床分期（P=0.002）、肿瘤大小（P=0.019）、腹水情况（P＜0.001）、淋巴结转移（P=0.005）明显相关,与年龄及肿瘤单双侧无相关性。OCT4表达与卵巢无性细胞瘤患者生存期呈负相关。结论:OCT4的高表达可能在卵巢无性细胞瘤的发生、发展过程中起重要作用。检测OCT4的表达水平可协助卵巢无性细胞瘤的诊断及判断预后。     

OCT-4, an embryonic stem cell marker, is highly expressed in bladder cancer

OCT-4 (also known as POU5F1) is a key regulator of self-renewal in embryonic stem cells. Regarding the new cancer stem cell concept, the expression of such genes is potentially correlated with tumorigenesis and can affect some aspects of tumor behavior, such as tumor recurrence or resistance to therapies. Although OCT-4 has been introduced as a molecular marker for germ cell tumors, little is known about its expression in somatic cancers. Here, we have investigated the potential expression of OCT-4 in bladder cancer. We used semiquantitative RT-PCR to examine the expression of OCT-4 in 32 tumors, 13 apparently nontumor tissues taken from the margin of tumors and 9 normal urothelial tissues. The expression of OCT-4 at protein level was further determined by Western blotting and immunohistochemical (IHC) analysis. OCT-4 expression was detected in almost all examined tumors (31/32), but at much lower level (p<0.001) in some nonneoplastic samples (6/22). A significantly strong correlation of 0.6 has been observed between OCT-4 expression and the presence of tumors (p<0.001). Western blot analysis further confirmed the expression of OCT-4 in tumor biopsies. According to IHC results, OCT-4 is primarily localized in the nuclei of tumor cells, with no or low immunoreactivity in nontumor cells. Our study demonstrated, for the first time, the expression of OCT-4 in bladder cancer and a further clue to the involvement of embryonic genes in carcinogenesis.     

eIF4E在食管鳞状细胞癌中表达及其与预后关系的研究

目的：研究真核细胞翻译起始因子4E（eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E）在食管癌的表达及其与预后的关系。方法：采用RT-PCR及免疫组化SP法检测食管癌组织及正常食管黏膜组织中eIF4E的表达,分析其表达与食管癌临床病理特征及预后的关系。结果：eIF4E mRNA在食管癌及癌旁组织中相对表达量分别为0.561±0.079,0.442±0.061（P〈0.05）;不同分化的食管鳞癌eIF4E表达量不同（P=0.012）,多重比较显示低分化鳞癌的表达量高于高分化鳞癌的表达（P〈0.05）;不同浸润深度的eIF4E mRNA的表达量不同（P=0.003）,多重比较显示在深肌层和纤维膜的表达量高于黏膜层的表达量（P〈0.05）。eIF4E蛋白在食管癌和正常食管黏膜中的阳性表达率分别为75.00%、30.80%（P=0.001）;与病理学分级呈正相关（rs=0.228,P〈0.05）;不同浸润深度的eIF4E蛋白表达量不同（P〈0.05）。而两者均与食管癌的患者年龄、性别、淋巴结转移和临床分期等临床病理学特征无关（P〉0.05）。eIF4E蛋白高表达组及低表达组5年累积生存率分别为31.8%、53.3%（P〈0.05）。Cox模型分析得出eIF4E蛋白不能作为判断食管鳞癌预后的独立指标（P＝0.211）。结论：eIF4E表达与食管鳞状细胞癌的发生密切相关,其可能参与了肿瘤的浸润和发展,并可以和其他指标共同判断预后。     

ASCL-1在肺腺癌组织中的表达及与预后相关性研究

  目的  ASCL-1基因表达与肺神经内分泌肿瘤(小细胞癌、非典型类癌、典型类癌、大细胞神经内分泌癌)密切相关。本研究旨在分析ASCL-1蛋白在肺腺癌组织中的表达情况及与预后的相关性。  方法  采用免疫组织化学法检测南京医科大学附属肿瘤医院2008年1月至2010年1月283例肺腺癌组织中ASCL-1、神经内分泌标志物嗜铬蛋白A (chromogranin A,CgA)、突触素(synaptophysin,Syn)和CD56的表达并进行对比分析,采用Western blot法检测对肺腺癌及癌旁组织中ASCL-1的表达进行检测。采用单因素χ2检验和Logistic多因素回归分析探究影响ASCL-1表达的相关因素,并采用Kaplan-Meier法对肺腺癌患者进行预后评估。  结果  ASCL-1在肺腺癌中的表达阳性率为16.9% (48/283),与神经内分泌标志物的表达呈正相关(0＜r＜1,P＜0.05)。采用Western blot法检测63例患者的肺腺癌组织,9例ASCL-1蛋白表达,而对应癌旁肺组织均无蛋白表达。经单因素χ2检验和多因素Logistic回归分析,发现ASCL-1的表达与肺腺癌患者的吸烟、肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关。经Kaplan-Meier生存分析显示,ASCL-1蛋白表达阳性组患者总生存期(overall survival,OS)低于阴性组。  结论  ASCL-1蛋白表达可能是肺腺癌患者预后的危险因素之一。      

卵巢浆液性肿瘤中OCT4蛋白的表达及与化疗耐药的关系研究

目的:探讨OCT4蛋白在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达与卵巢肿瘤发生发展及与化疗耐药的关系。方法:采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP法）检测OCT4蛋白在10例正常卵巢组织、10例卵巢良性浆液性囊腺瘤、10例卵巢交界性浆液性囊腺瘤和67例卵巢浆液性腺癌（其中化疗耐药30例,化疗敏感37例）的石蜡病理切片中的表达情况。结果:OCT4蛋白的阳性表达率在正常卵巢组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤、卵巢交界性浆液性囊腺瘤和卵巢浆液性腺癌组织中分别为0、40.00%、50.00%和62.69%,差异有显著统计学意义（P=0.002）。在卵巢浆液性腺癌化疗耐药和化疗敏感组织中分别为83.33%和45.95%,差异有显著统计学意义（P=0.002）。OCT4蛋白的阳性表达率与卵巢浆液性腺癌的临床病理特征无明显相关性（P＞0.05）。结论:OCT4蛋白可能在卵巢浆液性肿瘤发生发展和卵巢癌化疗耐药中发挥重要作用,可能作为卵巢癌化疗耐药预测的一个重要参考指标。     

COUP‐TFII in pancreatic adenocarcinoma: Clinical implication for patient survival and tumor progression

Despite the accumulating knowledge of alterations in pancreatic cancer molecular pathways, no substantial improvements in the clinical prognosis have been made and this malignancy continues to be a leading cause of cancer death in the Western World. The orphan nuclear receptor COUP‐TFII is a regulator of a wide range of biological processes and it may exert a pro‐oncogenic role in cancer cells; interestingly, indirect evidences suggest that the receptor could be involved in pancreatic cancer. The aim of this study was to evaluate the expression of COUP‐TFII in human pancreatic tumors and to unveil its role in the regulation of pancreatic tumor growth. We evaluated COUP‐TFII expression by immunohistochemistry on primary samples. We analyzed the effect of the nuclear receptor silencing in human pancreatic cancer cells by means of shRNA expressing cell lines. We finally confirmed the in vitro results by in vivo experiments on nude mice. COUP‐TFII is expressed in 69% of tested primary samples and correlates with the N1 and M1 status and clinical stage; Kaplan–Meier and Cox regression analysis show that it may be an independent prognostic factor of worst outcome. In vitro silencing of COUP‐TFII reduces the cell growth and invasiveness and it strongly inhibits angiogenesis, an effect mediated by the regulation of VEGF‐C. In nude mice, COUP‐TFII silencing reduces tumor growth by 40%. Our results suggest that COUP‐TFII might be an important regulator of the behavior of pancreatic adenocarcinoma, thus representing a possible new target for pancreatic cancer therapy.