基于TGF-β1信号通路的抗肾脏纤维化药物研究现状

慢性肾脏疾病和肾纤维化是威胁人类健康的重要公共卫生问题之一。转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)是促进肾脏纤维化和慢性肾脏疾病进展并进入终末期肾脏疾病的重要因子之一。因此,TGF-β1信号通路已成为抗肾脏纤维化研究的热点。本文综述了近20年来对肾脏纤维化有抑制作用的TGF-β1信号通路抑制剂以及通过各种途径影响TGF-β1信号通路的药物。     

endophilin A2抑制小鼠肾间质纤维化的形成

目的探讨endophilin A2(EndoA2)对肾间质纤维化的抑制作用,为评估EndoA2是否可作为肾脏纤维化防治的新靶点提供实验室依据。方法 EndoA2转基因小鼠通过单侧输尿管结扎手术,形成肾间质纤维化。造模结束后,分离小鼠肾脏并作石蜡切片。Masson染色检测小鼠肾间质纤维化程度,并检测纤维胶原相关分子的蛋白表达情况。另外,HK2细胞过表达EndoA2,观察细胞形态变化与上皮间质转分化(EMT)标志物的蛋白表达以及TβRI与TβRⅡ的mRNA和蛋白表达;检测EndoA2对TGF-β/smad通路的影响。结果造模后的EndoA2转基因小鼠肾间质纤维化程度明显减弱,而且肾皮质中多个纤维胶原相关分子的蛋白表达均明显降低;EndoA2可明显抑制TGF-β1诱导的HK2细胞EMT及TGF-β/Smad通路,而且TβRⅠ的mRNA和蛋白表达均明显降低;EndoA2可抑制TβRⅡ的蛋白表达但并不影响其mRNA水平。结论 EndoA2可通过抑制TβRⅠ和TβRⅡ的蛋白表达,从而抑制TGF-β/Smad通路,最终抑制肾间质纤维化的形成。     

整合素连接激酶在抗体介导的慢性排斥反应患者肾组织中的表达及意义

目的研究移植肾组织中整合素连接激酶(ILK)及Ⅳ型胶原、转化生长因子β1(TGF-β1)表达和抗体介导的慢性排斥反应的关系。方法 用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统半定量检测46例抗体介导的慢性排斥反应(Chronic active antibody-mediated rejection,ABMR)患者移植肾组织中ILK、Ⅳ型胶原和TGF-β1的表达情况,分析3者间及与ABMR的间质纤维化与肾小管萎缩(IF/TA)的病理分级之间的关系。15例正常肾组织作为对照。结果 ABMR移植肾组织中ILK、Ⅳ型胶原、TGF-β1的表达比正常肾组织明显增加(P<0.001),并随ABMR中IF/TA病理分级呈逐渐递增的趋势。移植肾组织中ILK的表达与TGF-β1、Ⅳ型胶原呈正相关(r分别为0.830、0.707,P<0.001)。结论 ILK可能是介导TGF-β1促进移植肾间质纤维化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)异常沉积的发病机制,Ⅳ型胶原的异常沉积是ABMR中IF/TA患者移植肾纤维化的重要表现。转化生长因子β1已经证明了与移植肾纤维化显著的相关性,ILK在抗体介导的排斥反应的移植肾纤维化进程中起重要作用。     

结缔组织生长因子、血管内皮生长因子与肾脏纤维化的关系

肾脏纤维化的发病机制十分复杂,目前尚不完全清楚.各种肾脏疾病发展至肾纤维化都是一个缓慢的动态过程,涉及到细胞、细胞因子和ECM等多种因素、多个环节的相互作用和相互调节.肾脏纤维化以过量细胞外基质在肾间质积聚、肾脏组织结构破坏及功能丧失为特征,是多种慢性肾脏疾病最终导致肾功能衰竭的主要病理改变和共同通路.肾脏纤维化涉及肾小管间质细胞的活化、炎症细胞浸润、肾小管上皮细胞转分化为成纤维细胞,生长因子和细胞因子网络失调,肾脏上皮细胞的凋亡,血管活性物质导致细胞因子、生长因子表达过多等因素,其中转化生长因子-β (transforming growth factor-β,TGF-β)可能是促进肾组织纤维化最重要的细胞因子,而结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor,CTGF)是TGF-β的下游分子,介导TGF-β的部分作用,在生理状态时,机体组织细胞可有基础量CTGF的分泌;病理状态下,CTGF过度表达与某些增生性或纤维化性疾病的发生密切相关.     

黄芪对左肾静脉狭窄大鼠肾组织病理学与转化生长因子-β1表达的影响

目的 观察黄芪对左肾静脉狭窄大鼠肾脏病理学及纤维化因子的影响,为临床治疗左肾静脉受压综合征提供实验依据。 方法 将大鼠分为假手术组、模型组和黄芪治疗组。模型组和黄芪治疗组采用左肾静脉不全结扎的方法建立大鼠左肾静脉狭窄模型,黄芪治疗组采用黄芪进行干预,于治疗6周后处死大鼠,取肾组织行病理学检查及免疫组化法检测转化生长因子β1（TGF-β1）表达。 结果 模型组大鼠左肾组织病变较假手术组严重,TGF-β1表达显著增加。黄芪治疗可减轻病理学改变,减少TGF-β1的表达。 结论 左肾静脉狭窄大鼠可出现肾小球系膜细胞增生、小管萎缩、间质炎性细胞浸润和纤维化等病理变化,黄芪可通过减少TGF-β1的表达来减轻肾脏病理学损伤。     

盐酸贝那普利对TGF-β1诱导的子宫内膜上皮及间质细胞纤维化的保护作用研究

目的探索盐酸贝那普利对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人子宫内膜上皮及间质细胞纤维化的保护作用及其可能机制。方法将人子宫内膜上皮细胞(AN3CA)及人子宫内膜间质细胞(hESC)用TGF-β1诱导纤维化。分为对照组、实验组(TGF-β15 ng/ml处理)、BNPL5组(TGF-β15 ng/ml+盐酸贝那普利5μmol/L处理)和BNPL8组(TGF-β15 ng/ml+盐酸贝那普利8μmol/L处理),AN3CA细胞共培养48 h,hESC细胞共培养72 h,镜下观察细胞形态,CellTiter-Glo检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测相应纤维化蛋白。结果盐酸贝那普利可部分逆转TGF-β1对AN3CA细胞的形态学改变,hESC细胞经过TGF-β1处理后形态无明显变化;促进TGF-β1诱导后的AN3CA细胞的增殖活力,降低AN3CA细胞凋亡水平(实验组:12.11±0.465,BNPL8组:7.68±0.818,P<0.001);抑制TGF-β1诱导后的hESC细胞的增殖活力,促进其细胞凋亡(实验组:7.553±0.688,BNPL8组:11.047±0.118,P=0.016);盐酸贝那普利诱导后AN3CA及hESC细胞相关纤维化因子Fibronectin、TGF-β1、smad3的表达均有下降。结论盐酸贝那普利可以改善TGF-β1诱导的子宫内膜上皮及间质细胞的纤维化改变。     

β-转化生长因子和结缔组织生长因子与低氧致组织纤维化关系研究进展

低氧条件下,人体某些组织和器官可发生纤维化改变,导致其功能受损,甚至丧失,在这个过程中,转化生长因子β(Transforming growth factor-beta,TGF-β)一直被认为是致纤维化关键的细胞因子,它除致纤维化作用外,还有抗炎、抗肿瘤及抑制免疫等生物学效应,但是单纯干扰TGF-β的正面效应限制了抗TGF-β抗体的应用,可能引起许多难以预料的不良反应.而结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor,CTGF)是近年来新发现的TGF-β下游的一个信号介质,主要介导TGF-β的促细胞增生和细胞外基质合成,掌握TGF-β及其CTGF的促纤维化机制及其与低氧的调节关系,为应用TGF及CTGF的抑制剂及其抗体等抗纤维化治疗提供更好的依据.     

IgA肾病患者与转化生长因子β_1相关性研究

<正>IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)主要病变特点是弥漫性系膜细胞(MC)增生及细胞外基质(ECM)聚集和扩张,最终会导致肾小球的硬化和慢性肾衰竭。而在众多促纤维化的因子中,已有大量研究表明转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)形成或活性升高是肾脏纤维化过程中的最终的共同调节因子,它具有强烈促纤维化作用。它能     

黄芪当归合剂对肾间质纤维化的多靶点抑制作用

目的动态观察复方中药黄芪当归合剂(A&A)对肾间质纤维化大鼠的抗纤维化治疗作用,了解A&A在疾病过程中的起效时间及不同阶段的主要作用环节。方法♂W istar大鼠随机分为对照(Control)、假手术(Sham)、单侧输尿管结扎(UUO)和UUO+A&A治疗组(UAA)。在给药(A&A 12 g.kg-1.d-1)后d 0、3、7、10处死动物,观察肾功能变化,对肾间质细胞浸润、肾小管萎缩和肾间质纤维化情况进行半定量评分。采用免疫组化、ELISA和W estern B lot分别分析肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA),转化生长因子β1(TGF-β1),纤粘连蛋白(FN)表达。结果与假手术组相比,各时间点的UUO大鼠肾功能受损、病理损害进行性加重,肾小管间质中TGF-β1、α-SMA、FN表达均增高(P<0.01)。A&A治疗后d 3,可观察到其明显减轻UUO大鼠的肾间质炎性细胞浸润、肾小管萎缩及肾间质纤维化(P<0.05),同时可使肾组织中的TGF-β1表达减少(P<0.05),但此时并不影响α-SMA和FN表达。治疗后d 7,A&A的上述治疗作用持续存在,同时进一步使UUO大鼠肾间质的α-SMA表达减少(P<0.05)、FN表达下降(P<0.05)。治疗10 d后,UAA组肾小管萎缩和肾间质纤维化程度、TGF-β1、α-SMA、FN的表达仍较UUO组分别减轻18.95%,28.7%,39.6%,26%。结论在UUO模型中,A&A的肾保护作用从病变早期开始,主要表现为减少炎症细胞反应和TGF-β1表达分泌,随后可减少肾脏固有细胞转化、分化及细胞外基质成分沉积,其作用的高峰时间是在造模后d 3~7,并持续存在至d10,特征是通过减轻肾间质纤维化而改善肾功能。     

辛伐他汀抑制肾间质纤维化的实验研究

目的观察辛伐他汀在体内对细胞增殖、肾间质肿瘤坏死因子(TGF)-β1表达的影响。方法36只Wistar大鼠随机分为假手术组(SOR组,12只),模型对照组(UUO组,12只),辛伐他汀治疗组(SIM组,12只),SIM组术前1 d开始给予辛伐他汀20 mg.kg-1.d-1灌胃,其余两组以等量蒸馏水灌胃,术后14 d处死大鼠,留取血标本实验室检查血清胆固醇和甘油三酯,取术侧肾脏行HE、Masson染色比较各组肾组织病变,免疫组织化学SP法检测肾小管间质增殖细胞核抗原(PCNA)、TGF-β1的表达。结果SIM组肾组织纤维化病变减轻,肾小管间质细胞增殖受抑,TGF-β1表达下调。结论辛伐他汀能够抑制肾小管间质纤维化早期细胞的增殖,减少间质中炎性细胞的浸润,并通过下调TGF-β1的表达,削弱细胞增殖与细胞因子间相互促进的恶性循环来抑制肾小管间质纤维化的进展。     

益肾化湿颗粒通过miR-339-5p靶向调控TGF-β1/Smad通路对慢性肾小球肾炎模型大鼠的肾脏保护作用及其机制研究

目的:探讨益肾化湿颗粒通过miR-339-5p靶向调控转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路对慢性肾小球肾炎模型大鼠的肾脏保护作用及其机制。方法:将SD大鼠分为假手术组、模型组、益肾化湿颗粒组、贝那普利组、益肾化湿颗粒+antagomir阴性对照(NC)组、益肾化湿颗粒+miR-339-5p antagomir组、益肾化湿颗粒+SRI-011381组。全自动生化分析仪检测大鼠24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平；ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平；qRT-PCR检测肾组织中miR-339-5p表达；免疫组化检测大鼠肾组织中核因子E2相关因子2(NRF2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达；HE、Masson染色分别检测大鼠肾组织病理变化、纤维化程度；Western blot检测肾组织中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达；验证miR-339-5p与TGF-β1的关系。结果:与假手术组比较，模型组大鼠肾功能异常，氧化应激增强，肾组织病理损伤及纤维化严重，炎性因子、TGF-β1、p-S...     

丹参对体外培养肝星状细胞TGF-β的影响

肝纤维化是指由各种致病因子所致肝内结缔组织异常增生,导致肝内弥漫性细胞外基质过度沉淀的病理过程,是所有慢性肝病共有的病理改变。目前认为肝星状细胞(HSC)的活化与增生是肝纤维化进展的中心环节,其中以转化生长因子β(TGF-β)最为重要[1]。为此我们拟观察注射用丹参(冻干)对体外培养HSC增殖及TGF-β1表达的影响。     

转化生长因子-β及其Smad信号转导的研究进展

<正>转化生长因子-β(TGF-β)是具有多种生物学活性的多肽类细胞因子,在细胞的增殖、分化、凋亡等过程中起重要的调节作用,与炎症、纤维化、肿瘤等关系密切。Smads蛋白作为TGF-β下游的信号蛋白分子,是将TGF-β信号从细胞外转导到细胞核内的关键因子,在细胞水平介导TGF-β的生物学效应。本文就近年来国内外在TGF-β及其Smad跨膜信号转导、主要生物学作用及与风湿性疾病关系的研究进展作一综述如下。     

抗肾纤维化药物高内涵筛选模型的建立及应用

目的建立可用于高内涵分析的肾纤维化体外的细胞模型,为抗肾纤维化中药化合物的筛选和机制研究奠定基础。方法本研究通过TGF-β1诱导正常大鼠肾成纤维细胞NRK49F,以肌成纤维细胞标志α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)作为检测指标,通过高内涵成像分析系统对α-SMA荧光表达强度进行检测分析,并对细胞种板密度、诱导时间、诱导培养基中血清浓度等各种条件进行优化,建立稳定的肾纤维化体外模型。在此基础上以TGF-β1受体阻滞剂SB525334和姜黄素、大黄素对模型进行验证。并进一步探讨吡非尼酮是否具有抗肾纤维化功效。结果实验通过对细胞密度、诱导时间、培养基中血清浓度进行优化,确立了可用于高内涵分析的NRK49F肾纤维化体外模型的建立条件。SB525334、姜黄素、大黄素和吡非尼酮均能减少TGF-β1诱导的α-SMA过表达,抑制NRK49F的活化。结论实验建立了可用于高内涵筛选技术的肾纤维化体外模型,并能相对稳定地筛选具有抗肾纤维化作用的药物。吡非尼酮在本模型中抑制了成纤维化细胞向肌成纤维细胞转化,提示其可能具有抗肾纤维化作用,为抗肾纤维化药物初筛对象的选择提供了思路。     

伊贝沙坦对胰岛素抵抗大鼠肾间质中TGF-β1表达的影响

在肾脏病患者中,转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)可调节炎性反应,促进细胞外基质(ECM)的合成和沉积,减少ECM的降解,肾间质纤维化主要是由于细胞外基质产生与降解失衡以及成纤维细胞过度增生所致[1].伊贝沙坦对胰岛素抵抗肾组织中TGF-β1表达的影响与肾间质纤维的关系和机制尚不清楚.为此进行了相关研究.     

转化生长因子β1和α-平滑肌肌动蛋白在肾间质纤维化小鼠肾组织的表达

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化模型中肾组织的表达。方法 36只小鼠平均分为假手术组与模型组,术后3、7、14d处死小鼠,取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色、免疫组化与RT-PCR检测。结果与假手术组比,模型组TGF-β1及α-SMA表达呈进行性升高,肾间质纤维化程度明显增高(P<0.O1)。结论 TGF-β1及α-SMA在肾间质纤维化过程中发挥重要作用。     

慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF-β1及BMP-7蛋白的表达

目的:研究慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠TGF-β1及BMP-7蛋白的改变。为探讨防治肾间质纤维化(RIF)的治疗机理提供参考依据和实验支持。方法:采用关木通免煎剂建立马兜铃酸肾病大鼠模型。将大鼠随机分为分两组,空白对照组和慢性马兜铃酸肾病模型组(CAAN)。检测血清尿素氮(BUN)及血清肌酐(Scr)的差异,采用HE和Masson染色检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织TGF-β1和及BMP-7的表达,比较两组肾间质纤维化程度。结果:与空白对照组相比,CAAN组血清尿素氮、血清水平升高(P<0.05),肾间质损害分值增加(P<0.05),肾组织TGF-β1表达增加(P<0.05),BMP-7表达减少(P<0.05)。结论:慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化的机制可能与TGF-β1及BMP-7蛋白表达有关。     

TGF-β/Smads信号通路在心力衰竭心肌纤维化中的作用及中医药干预研究现状

在心力衰竭(HF)进展过程中,转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路的异常转导是HF心肌纤维化(MF)的重要机制。TGF-β是MF的关键因子,在HF MF过程中处于过度表达状态。Smads是TGF-β下游的主要效应因子,TGF-β/Smads通路诱导肌成纤维细胞异常增殖,加重心肌细胞外基质沉积,使心脏组织抗纤维化能力减弱,在HF MF的发病机制中发挥复杂作用。中医药在防治HF MF方面具有明确抑制心肌胶原沉积、抗心肌纤维化、保护心肌和改善心脏功能等功效。TGF-β/Smads通路是中药单体、中药复方、中成药发挥HF心肌保护作用的关键通路之一。本文对近10年来中医药干预TGF-β/Smads通路治疗HF MF现有的实验研究成果进行综述,以期为HF MF的防治及新药开发提供理论依据。     

MMP2和TGF-β1在人肾透明细胞癌组织中的表达及其意义

目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP2)和转化生长因子β1(TGF-β1)在肾透明细胞癌组织中的表达及其意义.方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测43例肾透明细胞癌患者癌与癌旁组织MMP2和TGF-β1的表达水平.结果 在不同的病理分级和临床分期的43例肾透明细胞癌组织中,MMP2表达水平均显著高于痛旁组织;癌与癌旁MMP2表达的差值随临床分期的升高而呈上升趋势.TGF-β1在肾透明细胞癌组织巾的表达阳性率为32.56%(14/43),而癌旁组织均无表达;TGF-β1表达阳件的.肾透明细胞癌病理分级和临床分期均处于Ⅰ或Ⅱ级(期).结论 MMP2和TGF-β1在肾透明细胞癌组织过度表达参与其浸润生长,侵袭转移等病理过程,对其检测为预后判断提供了帮助.     

系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织TGF-β1的表达与临床病理意义

目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白在系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)肾组织中的表达及其临床意义。方法应用即用型免疫组化方法(Elivision二步法)检测MsPGN25例、微小病变(MCNS)10例、局灶性节段肾小球硬化(FSGS)8例、对照组5例,观察TGF-β1蛋白在系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织中的表达情况。结果 (1)在不同病理类型患儿肾小球上皮细胞及肾小管间质细胞均有不同程度的TGF-β1蛋白的阳性表达,TGF-β1的表达以FSGS为最强,其次为MsPGN、MCNS。与正常肾组织比较差异有统计学意义(P<0.001);(2)MsPGN组TGF-β1蛋白表达随着系膜增生程度明显增加(P<0.01);(3)MsPGN组随肾小管间质损伤和炎症细胞浸润程度及纤维化程度加重,TGF-β1蛋白表达明显增加(P<0.01);(4)MsPGN肾组织TGF-β1表达水平与蛋白尿严重程度相关。结论 MsPGN肾组织内TGF-β1的表达增强,并与肾脏病理损伤程度密切相关。