高效液相色谱法测定去甲万古霉素血药浓度

目的：建立人血浆中去甲万古霉素反相高效液相色谱测定法,为临床监测血药浓度提供方法学基础。方法：采用液－液萃取法并选用２万古霉素为内标,以ＹＷＧ－ＲＰ１８色谱柱,流动相为乙腈－０．０５ｍｏｌ．Ｌ＾－１磷酸二氯（８：９２）,紫外２３６ｎｍ检测。结果：本法在０．８１～８１ｕｇ．ｍｌ＾－１间线性良好,相关系数ｒ＝０．９９９８（ｎ＝６）。日内日间精密度ＲＳＤ均小于３％,提取回收率均大于７５％。结论：本方法在     

HPLC法快速测定万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度

目的建立快速测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC法。方法以Hypersil BDS-C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱为分析柱,流动相:磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-甲醇（86:14,V/V）,流速1 mL·min^-1,检测波长236nm,柱温35℃,进样量20μL,万古霉素和去甲万古霉素互为内标;血清样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白离心后进行色谱分析。结果本法万古霉素和去甲万古霉素均在2～100 mg·L^-1间线性关系良好,两者平均回收率均为95%～105%,日内及日间RSD均<5%。结论本法操作简便、快速、准确,适用于临床血药浓度测定及人体药动学研究。     

反相高效液相色谱法快速测定去甲万古霉素血药浓度

目的 :建立去甲万古霉素血药浓度的快速高效液相色谱测定法。方法 :血样处理采用 Zn SO4 沉淀法 ,色谱分析采用 Diam onsil TM(钻石 ) C1 8色谱分析柱 ,流动相为甲醇 -磷酸二氢钾缓冲液 (p H 3.2 ) =2 4∶ 76 ,紫外检测波长 2 36 nm ,灵敏度为0 .0 15 AUFs,实验数据用 Gilson715液相色谱工作站处理 ,以峰面积、外标法定量。结果 :本法在万古霉素浓度 (x)为 0 .5～6 0 μg/ ml间呈良好线性关系 ,相关系数 r=0 .9998(n=6 ) ,血浆最低检测浓度为 0 .2 μg/ m l(S/ N≥ 2 ) ,日内、日间 RSD均 <6 %。结论 :此法采血量少、快速简便、灵敏度和准确度高 ,适合临床常规血药浓度监测及实验课题研究。     

HPLC法测定万古霉素血药浓度

目的 利用高效液相色谱法(HPLC),旨在建立一种快速、方便、准确的人血浆中万古霉素的浓度测定方法 .方法内标物:去甲万古霉素;色谱柱:Axxlaim?PolarAdvantageⅡ-C18(4.6×250mm,5μm);流动相为甲醇:磷酸二氢钾(pH 3.1)=19:81;检测波长:281nm;流速:1.0mL·min-1;柱温:30℃;进样量:10μL;血浆样品采用10%(w/v)的硫酸锌直接沉淀蛋白后进样检测.结果 万古霉素在1.5~150μg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.0136X-0.009(R2=0.9989).日内精密度在0.08%~1.29%之间,日间精密度在1.28%~3.56%之间,样品稳定性符合方法学要求.结论 本方法操作简便、线性范围广、结果准确,可用于临床监测万古霉素血药浓度.     

互为内标法测定去甲万古霉素与万古霉素的血药浓度

目的:建立人血清中去甲万古霉素与万古霉素HPLC测定法.方法:血样处理采用10%三氯醋酸沉淀法,色谱分析采用Agilent C18分析柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(8:1:91,pH 3.2),紫外检测波长236 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,去甲万古霉素和万古霉素互为内标.结果:去甲万古霉素和万古霉素的线性范围均为1～80 mg·L-1;平均回收率分别为100.6%和100.8%;日内、日间RSD均＜5%.结论:此法具有采血量少,检测快速、稳定、灵敏度高而成本低等特点,适合临床常规血药浓度的监测.     

离子对色谱法同时测定万古霉素、去甲万古霉素血药浓度

目的测定盐酸万古霉素,盐酸去甲万古霉素血药浓度。方法采用离子对高效液相色谱法。色谱柱为ShimpackC18柱(150×6mm,5μm),加AlltechC18保护柱;流动相为乙腈-离子对缓冲液(115∶885,pH3.1);流速1mL·min-1;检测波长236nm,柱温40℃。结果盐酸去甲万古霉素在0.80~80.19μg·mL-1;盐酸万古霉素在1.08~108.00μg·mL-1浓度范围内呈良好的线性关系,两者低、中、高回收率在97%~110%之间,RSD在2%~6%之间。结论本方法简便可行,快速可靠,适合于临床血药浓度监测。     

高效液相色谱法测定血浆中去甲万古霉素和万古霉素浓度

目的：建立HPLC方法测定血浆去甲万古霉素和万古霉素浓度，并应用于治疗药物监测。方法：采用Zorbax SB C18色谱柱，采用梯度流动相．流动相组成甲醇：pH7．3磷酸缓冲盐水溶液，检测波长230nm，流速1．0ml&#183;min-1柱温32℃。采用高氯酸和二氯甲炕去蛋白的方法处理样品。结果：去甲万古霉素和万古霉素与血浆中其他成分分离良好，在2．5～100μg&#183;ml-1范围内线性关系良好，低、中、高3个浓度的绝对回收率去甲万古霉素分别为79．57％，76．46％，84．88％，万古霉素分别为86．52％，87．05％，83．47％，两者的日内、日间RSD均〈7％，血浆样品室温放置4h，冷冻解融2次，处理好的样品室温放置24h均稳定．结论：该方法灵敏、准确、快速，可用于去甲万古霉素和万古霉素人体血药浓度监测和药物动力学研究。     

HPLC法测定人血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度及临床应用

目的建立同时测定血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法.方法：采用Diamonsil C18 色谱柱（250mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-磷酸二氢钾缓冲液（pH = 3.2）（7.5∶92.5）;流速：1 mL·min-1;检测波长：236 nm;柱温：30 ℃;进样量：25 μL;二极管阵列检测.内标法定量,万古霉素与去甲万古霉素互为内标.结果：去甲万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为98.5%、102.2%、103.1%,万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为96.2%、100.8%、103.5%,日内精密度RSD 小于3.24%,日间精密度RSD 小于6.12%.结论：本方法准确度高,灵敏度好,操作简便,符合万古霉素及去甲万古霉素血药浓度监测和药代动力学研究的要求.     

高效液相色谱法测定血清去甲万古霉素与万古霉素浓度

目的 建立测定人血清去甲万古霉素与万古霉素浓度的高效液相色谱法。方法全血经过20%硫酸锌沉淀，以Agilent ZORBAX SB C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（pH值=3.2）－甲醇－乙腈（87：10：3）为流动相，检测波长236 nm，流速为1.0 mL·min^-1。去甲万古霉素和万古霉素互为内标。结果去甲万古霉素和万古霉素在1～100 μg·mL^-1内线性关系良好（r＝0.999 9，r＝0.999 7）；平均回收率分别为99.90%和100.90%；日内、日间RSD均＜5%。结论所建立的方法简便、快速、准确可靠，灵敏度高，适合两药临床血清浓度的监测。     

HPLC法测定人血清中去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中去甲万古霉素浓度的高效液相色谱测定方法及临床应用。方法以万古霉素为内标,采用10%高氯酸溶液直接沉淀蛋白后进样。色谱柱为SHIMADZUVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(92∶8),流速1 mL.min-1,柱温40℃,检测波长236 nm。结果去甲万古霉素血清浓度Y与内标峰面积比X进行线性回归,回归方程为Y=32.544 56X-3.147 39,r=0.999 3;线性范围2.5-80.0μg.mL-1;日内RSD小于3.0%;日间RSD小于5.7%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为97.36%、99.51%、101.17%;平均提取回收率分别为86.82%、89.84%、92.68%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度监测及人体药动学研究,尤其适于ICU或NICU患者接受去甲万古霉素治疗时的血药浓度监测。     

HPLC法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的 建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法,便于指导临床血药浓度的监测.方法 色谱柱为symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈(85∶10∶5);流速为1.0mL·min-1;检测波长为236nm,柱温为35℃,采用乙腈-6%高氯酸=1∶6的沉淀剂处理后进样,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为6.065min和4.958min;标准曲线回归方程分别为Y=28.34X+0.33,r=0.9998(n=3),Y=91.41X-0.24,r=0.9992(n=3),线性关系良好;方法回收率均＞95%,绝对回收率均＞95%,日内RSD均＜4.0%.结论 本测定方法快速、准确、简便,为万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度监测提供依据.     

HPLC测定人脑脊液中的万古霉素和去甲万古霉素

目的 采用HPLC法测定人脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的含量.方法 采用Diamonsil C18柱(150 mm ×46 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3) (20∶80),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长236 nm,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的线性范围分别为0.0977～97.68(r2=0.9995)、0.104～104μg·mL-1 (r2 =0.9996),检测限分别为0.0484、0.0524μg·mL-1;方法回收率分别为99.8％ ～ 109.0％、99.6～107.0％,绝对回收率为95.6％ ～ 100.0％、95.9％ ～ 99.6％,批内、批间RSD均≤4.0％;室温下放置8h、冻融循环3次和冰冻21d的稳定性均良好.结论 所用方法简便准确,适宜于临床脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的分析.     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

万古霉素与去甲万古霉素不良反应文献分析

目的：探讨万古霉素与去甲万古霉素所致不良反应的一般规律和特点,促进临床合理用药。方法：在CHKD期刊全文数据库、中文科技期刊数据库,检索1994～2009年有关万古霉素及去甲万古霉素不良反应的文献,并进行统计分析。结果：共收集万古霉素不良反应病例98例,去甲万古霉素不良反应病例106例,涉及的反应及系统有过敏反应、血液系统、泌尿系统、消化系统、肝胆系统、药物热等。结论：万古霉素与去甲万古霉素引起的不良反应相似,但应注意某些特殊不良反应。医生应当注意合理用药,减少不良反应和不良事件的发生。     

我院2012年万古霉素和去甲万古霉素的用药分析

目的:了解我院万古霉素类药物的临床应用情况。方法:以《抗菌药物临床应用指导原则》《万古霉素临床应用中国专家共识》及万古霉素和去甲万古霉素说明书为评价依据,采用回顾性分析方法,对2012年我院住院患者用万古霉素、去甲万古霉素的病历共216份进行用药分析。结果:216份病历中合理用药32例(14.81%),基本合理用药87例(40.28%),不合理用药97例(44.91%),没有发生严重不良反应。结论:我院万古霉素类不合理用药情况比较严重。今后应严格控制适应证,减少经验用药及采取其他措施,进一步规范万古霉素类药物的使用。     

反相高效液相色谱法测定血液中去甲万古霉素浓度的研究

目的：建立去甲万古霉素血药浓度的反相高效液相色谱（RP －HPLC）测定法。方法以替硝唑或甲硝唑为内标,血液样品处理采用15％ HClO4沉淀、高速离心,NH4 Ac 溶液稀释后进样。色谱分析使用 Kromasil C18柱（150 mm ×4．6 mm,5μm）,流动相组成为甲醇—乙腈—40 mmol·L －1 KH2 PO4缓冲液（含0．1％磷酸）＝15∶5∶80（v／v）,进样量为20μL,流速为1．0 mL· min －1,柱温35℃,紫外检测波长236 nm。灵敏度 AUFs ＝0．02,以峰面积、内标法定量。结果该法在去甲万古霉素浓度（X）为5．0～160 mg·L －1间呈良好线性关系,相关系数 r ＝0．9985（n ＝6）,血清最低检测浓度为2．5 mg·L －1（S ／N≥3）,日内、日间 RSD ＜10％,一个月内、反复冻融后的稳定性考察 RSD ＜10％。结论此法快速、简便、灵敏、可靠,适用于去甲万古霉素血药浓度监测。     

207例次万古霉素与去甲万古霉素血药浓度监测及个体化给药

目的：分析207例次万古霉素和去甲万古霉素血药浓度监测情况,为临床合理用药提供依据方法：采用高效液相色谱法测定万古霉素和去甲万古霉素血药浓度,对本院2005～2011年207例次万古霉素和去甲万古霉素血药浓度监测结果进行回顾性分析。结果：35例使用万古霉素的患者中监测血峰、谷浓度103例次,峰浓度和谷浓度在治疗窗范围内的各占65.31%和42.60%。35例使用去甲万古霉素的患者中监测血峰、谷浓度104例次,峰浓度和谷浓度在治疗窗范围内的各占32.65%和16.36%。〉60岁组的万古霉素和去甲万古霉素谷浓度均显著高于〈18岁组（P〈0.05）。应用万古霉素或去甲万古霉素前后,肾功能无明显差异（P〉0.05）。不良反应发生率为21.42%。结论：万古霉素和去甲万古霉素血药浓度监测有利于实现个体化给药,从而保证临床用药的安全有效。     

高效液相色谱法测定人脑脊液中万古霉素浓度及临床应用

目的：采用HPLC-DAD快速有效地测定人脑脊液中万古霉素浓度,为颅内感染患者鞘内注射调整剂量提供依据。方法：前处理采用乙腈: 6%高氯酸（1∶1,v/v）沉淀萃取,采用Eclipse XDB C18柱（250 mm × 4.6 mm,5 μm）;流动相：A-pH3.2磷酸二氢钾缓冲液,B-乙腈,梯度洗脱;流速：1 mL·min-1;检测波长：236 nm;柱温：30 ℃;进样量：20 μL;二极管阵列检测。内标法定量,去甲万古霉素为内标。结果：万古霉素低、中、高3个浓度（3.125、25、50 mg·L-1）方法的绝对回收率分别为95.4%、97.5%、100.7%,日内精密度RSD小于2.76%,日间精密度RSD小于5.24%,基质效应小于1.08%。结论：本方法准确简便,符合万古霉素药物浓度监测的要求。     

HPLC法同时测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的:建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC测定方法.方法:色谱柱为Hypersil BDS C18 (250mm×4.6mm,5μm)柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(85:15),流速1ml·min-1;检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用高氯酸直接沉淀蛋白后进样.结果:万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0106+0.0202X,r=0.999 7;去甲万古霉素回归方程为Y=-0.0164+0.0286X,r=0.999 9;线性范围2.0～100.0mg·L-1.日内RSD小于7.2%,日间RSD小于6.9%;万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为97.73%,97.58%,103.91%,平均提取回收率分别为86.80%,85.50%,87.63%;去甲万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为100.23%,92.63%,97.57%,平均提取回收率分别为90.84%,87.82%,89.68%.结论:方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用.