左旋千金藤碱对大鼠旋转模型的作用

大鼠脑内单侧黑质注射6羟基多巴胺(6OHDA)后,受损侧纹状体DA及其代谢物二羟苯乙酸和高香草酸含量分别下降88.4%,81.0%和60.1%。5HT与对侧相比略有增加(+13%),5羟吲哚醋酸无显著差异,提示6OHDA选择性地损毁了单侧黑质—纹状体DA神经通路。皮下注射阿朴吗啡(APO)后能诱发损伤大鼠向健侧方向旋转。阿朴啡类生物碱(1-STP)(10mg/kg)能拮抗APO的上述旋转作用,增大剂量(15mg/kg)作用增强,呈剂量—效应依赖关系。结果提示1-STP具有突触后DA受体阻滞作用。     

左旋千金藤啶碱对左旋多巴诱导运动障碍的作用研究

帕金森病（PD）是常见的中枢神经系统退行性疾病，55岁以上人群发病率约为1％，临床症状表现为静止震颤、肌肉僵硬、运动迟缓和姿势反射受损．其病因和发病机制目前还不完全明确，主要的病理学变化是中脑黑质多巴胺能神经元进行性变性、死亡，导致黑质-纹状体通路失去其运动调节功能。目前PD治疗策略仍以对症治疗为主，多巴胺（DA）前体——左旋多巴（L-DOPA）替代DA疗法是PD治疗的首选方案。在长期的L—DOPA治疗过程中发现，患开始接受治疗2—5年内出现了疗效减低和一系列副反应，其中最严重的是L—DOPA引起的运动障碍（LID）。LID很大程度地削弱了L—DOPA的治疗作用，甚至部分患不能忍受而停止治疗。运动障碍的神经机理还很不清楚，当前的研究表明，LID与多巴胺受体受到间歇性刺激有关，下游的蛋白、基因表达改变以及非DA神经递质系统功能异常也参与了LID的病理过程。     

左旋四氢巴马汀和左旋千金藤啶碱对吗啡处理

目的：研究慢性吗啡处理大鼠相关脑区神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的改变，以及左旋四氢巴马汀和左旋千金藤啶碱的干预作用。方法：以剂量递增给药方式建立吗啡慢性依赖模型后分别给予左旋四氢巴马汀、左旋千金藤啶碱和等体积蒸馏水(作为自然戒断组)治疗30 d。制备相关脑区的冰冻切片，进行GFAP的免疫组织化学染色，测定阳性细胞的平均吸收度。结果：自然戒断组大鼠前额叶皮质、伏隔核壳区、海马CA1区、黑质、杏仁核的GFAP表达与正常对照组无显著差异，但中脑腹侧背盖区(VTA）GFAP表达较正常对照组显著升高。左旋四氢巴马汀及左旋千金藤啶碱组大鼠脑VTA区GFAP表达较自然戒断组均显著降低，且可达到正常水平。结论：GFAP表达持续升高反映吗啡处理对VTA区的损伤，左旋四氢巴马汀及左旋千金藤啶碱可以使GFAP表达恢复正常，可能是它们对成瘾药物的精神依赖性有干预作用的机制之一。     

环孢素A和血管平滑肌细胞的Ca~(2+)调控

环孢素Ａ和血管平滑肌细胞的Ｃａ２＋调控李劲梁关永源（中山医科大学药理学教研室，广州５１００８９）中国图书分类号Ｒ３３１．３２；Ｒ９７９．５环孢素Ａ（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ，ＣｓＡ）是一种有效的免疫抑制剂，主要用于抗器官移植的免疫排斥反应和治疗自身免...     

左旋千金藤啶碱对外周血管多巴胺DA_1和DA_2受体亚型的作用

用家兔离体血管环方法，研究左旋千金藤啶碱（ｌＳＰＤ）对外周血管ＤＡ１和ＤＡ２受体亚型的作用。结果表明，ｌＳＰＤ使ＤＡ１受体激动剂ＦＯＤＡ诱发的肾、肺和肠动脉以及ＤＡ２受体激动剂ＰＢＤＡ诱发的肠和股动脉舒张反应的量效曲线非平行右移，最大反应（Ｅｍａｘ）降低，均呈非竞争性拮抗；ｌＳＰＤ本身还可使肾和肺血管产生轻度的浓度依赖性舒张反应，表现为ＤＡ１受体激动剂的作用特性。提示ｌＳＰＤ为外周血管ＤＡ１和ＤＡ２受体的混合性阻滞剂并兼有ＤＡ１受体部分激动剂的双重作用特性。     

钾通道开放剂降低血管平滑肌细胞内游离钙浓度(英文)

目的:研究PCO—Pin,Nic,Lem及RP对VMSC内[Ca~(2 )]_i的改变及其可能机制。方法:VSMC加入Fura-2 AM 2.5μmol·L~(-1)37℃下孵育50min,[Ca~(2 )]_i用荧光分光光度计检测。结果:4种PCO能较弱地抑制K~ 30 mmol·L~(-1)诱导的[Ca~(2 )]_i增加,但明显抑制ATP 0.1mmol·L~(-1)诱导的[Ca~(2 )]_i峰相及持续相增加,且呈剂量依赖性。格列苯脲完全阻断Pin,Lem及RP的作用,只部分抑制Nic的作用。无钙液中先给4种PCO,能显著抑制ATP诱导的[Ca~(2 )]_i峰相增加。结论:4种PCO均抑制ATP诱导的[Ca~(2 )]_i增加,此作用与减少细胞外钙内流及细胞内钙释放有关。     

醋柳黄酮对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度的影响

目的 :探讨醋柳总黄酮 (TFH)对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度 ([Ca2 ]i)的影响。方法 :采用新一代钙荧光探针Fluo 3 AM检测在高钾、去甲肾上腺素 (NE)、血管紧张素II(AngⅡ )刺激下单层兔主动脉平滑肌细胞内游离钙水平的改变 ,并与传统的钙拮抗剂Verapamil(Ver)进行对照研究。结果 :TFH(10 0mg·L-1)对静息状态的血管平滑肌细胞[Ca2 ]i 无明显影响 ;TFH(6 0～ 10 0mg·L-1)呈剂量依赖性抑制高K 去极化引起的 [Ca2 ]i 升高 ,与Ver作用相似 ,但弱于Ver ;TFH (80、10 0mg·L-1)对NE、AngⅡ通过受体介导引起 [Ca2 ]i 升高均具有明显的抑制作用 ;在无细胞外Ca2 存在下 ,TFH (80、10 0mg·L-1)对NE引起的 [Ca2 ]i 升高也具有一定程度的抑制效应。结论 :醋柳总黄酮通过对电压依赖性钙通道和受体操纵型钙通道双重抑制降低血管平滑肌细胞内游离钙水平 ,这可能是醋柳黄酮产生舒血管降压作用机制之一。     

小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。其作用与维拉帕米相似     

Effects of advanced glycosylation end products on proliferation and cytosolic free calcium in cultured rat aortic smooth muscle cells

目的：研究糖基化终产物（ＡＧＥＰ）对主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其与［Ｃａ２＋］ｉ的关系．方法：采用同位素掺入法分别测定ＤＮＡ和蛋白质合成；Ｆｕｒａ２ＡＭ测定［Ｃａ２＋］ｉ．结果：ＡＧＥＰ以浓度、时间相关的方式促进［３Ｈ］ＴｄＲ与［３Ｈ］Ｌｅｕ掺入细胞，随ＡＧＥＰ作用时间、糖化时间延长，掺入率增加明显．ＡＧＥＰ增加［Ｃａ２＋］ｉ，与时间、浓度相关，但随ＡＧＥＰ作用时间延长（４０分钟后）而有所降低，ＢＳＡ修饰中葡萄糖浓度的增加，糖基化时间延长，［Ｃａ２＋］ｉ也呈上升趋势．结论：ＡＧＥＰ刺激平滑肌细胞增殖，并与细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度增加有关．     

Effect of tetramethylpyrazine on potassium channels to lower calcium concentration in cultured aortic smooth muscle cells

1. Tetramethylpyrazine (TMP) is one of the active principles contained in Ligusticum chuanxiong Hort. (Umbelliferae), a herb that has been used widely in China to treat vascular disorders. 2. In an attempt to elucidate the possible mechanisms of action of TMP, the effect of TMP on intracellular calcium concentrations ([Ca2+]i) was investigated in cultured vascular smooth muscle (A7r5) cells using the Ca(2+)-sensitive dye Fura-2 as an indicator. 3. The increase in [Ca2+]i in A7r5 cells produced by vasopressin (1 micromol/L) or phenylephrine (1 micromol/L) was attenuated by TMP in a concentration-dependent manner. Only inhibitors specific to ATP-sensitive potassium (KATP) channels or small conductance calcium-activated potassium (SKCa) channels attenuated the action of TMP (10 micromol/L) on [Ca2+]i. However, blockers of other K+ channels failed to modify the inhibitory action of TMP (10 micromol/L) on [Ca2+]i. 4. The action of TMP on membrane potential in A7r5 cells was monitored by the fluorescence of bisoxonol. Tetramethylpyrazine caused a concentration-dependent inhibition of changes in membrane potential elicited by KCl (20 mmol/L) or phenylephrine (1 micro mol/L), an effect that was totally reversed by glibenclamide (100 micromol/L) and apamin (100 nmol/L) in combination. 5. The results obtained indicate that the decrease in [Ca2+]i in A7r5 cells produced by TMP is mediated mainly by opening of KATP and/or SKCa channels.     

西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法以Fluo-3/AM作为Ca²⁺荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)均能明显抑制1×10^-2 mol·L^-1 H₂O₂引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%, 57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷 (1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)能抑制70 mmol·L^-1 CHCl₃导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%, 27.8%和50.0% (P<0.01)。结论西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。     

埃他卡林对兔肺动脉平滑肌内皮细胞钙浓度的影响

目的观察埃他卡林(IPT)对内皮素1(ET-1)诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法应用细胞培养、氚-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)参入实验、Fluo-3和激光扫描共聚焦显微镜技术评价IPT对ET-1诱导的兔PASMC增殖及PASMC[Ca2+]i调节的作用。结果ET-1(10-7mol.L-1)使PASMC[3H]-TdR参入量增加146.8%,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);在相同条件下,加入ET-1的同时,分别向培养基中加入IPT10-7、10-6、10-5mol.L-1,细胞[3H]-TdR参入量分别下降(19.8±4.6)%、(41.2±9.5)%、(54.7±10.1)%,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01);对照组PASMC[Ca2+]i荧光强度和荧光光密度值较低;ET-1组中[Ca2+]i荧光光密度值明显增高,从73.7±10.1增加到143.8±28.2,两者比较差异有显著性(P<0.01);而IPT组细胞内荧光光密度值明显降低,仅从74.30±10.2增加到86.03±9.82,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01)。结论IPT可明显抑制ET-1诱导的兔PASMC增殖、DNA合成;减少钙通道的开放时间,抑制细胞内Ca2+浓度增加。     

细胞内游离钙在辛伐他汀诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡中的作用

目的　研究 3 羟 3 甲戊二酰辅酶A (HMG CoA)还原酶抑制剂辛伐他汀诱导血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的机制。方法　以荧光染料Fura 2 /AM负载后荧光分光光度计法检测细胞内游离钙浓度 ,以DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪PI/膜联蛋白 (an nexin)V染色及半胱天冬酶 3激活来检测细胞凋亡。结果　辛伐他汀 30 μmol·L- 1孵育VSMC后 ,细胞内游离钙浓度显著升高 ,6h时达对照的 3倍以上 (P <0 .0 1) ,维拉帕米 80 μmol·L- 1与辛伐他汀 30 μmol·L- 1共同孵育VSMC 6h后细胞内游离钙浓度为 (14 4± 34)nmol·L- 1(P <0 .0 1)。辛伐他汀可诱导细胞凋亡率增高、“DNA梯状”样改变及半胱天冬酶 3的激活 ,这些变化均可被维拉帕米所逆转。结论辛伐他汀通过使细胞外钙大量内流而诱导VSMC凋亡。     

普洛托品对兔胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　观察普洛托品 (Pro)对正常和内皮素 (ET)诱导的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　采用组织块贴壁法培养兔胸主动脉VSMC ,应用细胞计数、[3 H] TdR参入量、微量MTT比色测定及电镜法 ,观察Pro对VSMC增殖、DNA合成和细胞超微结构的变化。结果　ET对VSMC的增殖和DNA合成有显著的促进作用 ;1、10、10 0μmol·L-1浓度Pro能够逆转ET所致的 [3 H] TdR参入量、MTT比色的吸光度、细胞计数的增多及电镜下细胞超微结构的改变 ,且随着浓度的增加及时间的延长 ,抑制作用愈显著 ;10、10 0 μmol·L-1浓度Pro对未经ET处理的VSMC有抑制其增殖作用 ,但其抑制作用弱于ET处理组。结论　Pro可显著地抑制正常及ET诱导的VSMC增殖 ,并且对ET诱导的VSMC增殖抑制作用更明显 ,提示Pro可作为临床防治动脉粥样硬化的有效药物。     

超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响

目的研究超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法采用Ｆｕｒａ－２测定牛肺动脉平滑肌细胞内钙及采用胶原凝胶实验方法分析平滑肌细胞的收缩性。结果超氧阴离子作用于平滑肌细胞后使ＡＴＰ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导的细胞内钙浓度的增加从（２０６± １０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１４７±１５） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。 ５ ｍｉｎ内细胞内钙浓度增加的积分（∫　△［Ｃａ２＋］ｉ·ｄｔ）从（１２．２± ０．５）μｍｏｌ· Ｌ－１·ｓ－１降至（９．８± ０．８）μｍｏｌ·Ｌ－１·ｓ－１。ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ在无钙溶液中诱导的细胞内钙浓度的增加不受超氧阴离子的影响,而在含钙的Ｋｒｅｂａ溶液中,超氧阴离子能使随后的钙释放激活的钙进入（△［Ｃａ２＋］ｉＣＲＡＣ）从（２７．３ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１３．５ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。ＡＴＰ诱导的凝胶面积减少的百分比从２４％±５％降到 ７．４％ ±０．２％;在无钙 Ｋｒｅｂｓ溶液中,ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ诱导的凝胶面积减少的百分比从 ３．５％± ０．６％降到－０．５％±０．７％。结论超氧阴离子通过影响平滑肌细胞的内钙动员而降低它的收缩性。