眼镜王蛇(Ophaiophagus hannah Cantor)毒的分离及毒性组分的研究

眼镜王蛇毒用CM-C11柱层析,醋酸铵缓冲液洗脱,分出15个蛋白组分,其中组分Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ和ⅩⅢ为毒性较大的致死组分。实验证明眼镜王蛇全毒及四个毒性组分都不具有心脏毒及突触前神经毒活性。它们阻断小鸡颈二腹肌神经肌标本对间接刺激及对外源性乙酰胆碱的反应;神经肌传递阻滞后,标本对直接刺激及对氯化钾的反应不受影响。组分Ⅸ、Ⅻ和ⅩⅢ对神经肌传递的阻滞容易逆转,组分Ⅷ则较难逆转。这四个毒性组分均为突触后神经毒,其毒力依次为Ⅷ>Ⅸ>Ⅻ>ⅩⅢ,眼镜王蛇毒的主要毒性成分是突触后神经毒。     

眼镜王蛇(Ophaiophagus hannah Cantor)毒的分离及毒性组分的研究

眼镜王蛇毒用CM-C11柱层析,醋酸铵缓冲液洗脱,分出15个蛋白组分,其中组分Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ和ⅩⅢ为毒性较大的致死组分。实验证明眼镜王蛇全毒及四个毒性组分都不具有心脏毒及突触前神经毒活性。它们阻断小鸡颈二腹肌神经肌标本对间接刺激及对外源性乙酰胆碱的反应;神经肌传递阻滞后,标本对直接刺激及对氯化钾的反应不受影响。组分Ⅸ、Ⅻ和ⅩⅢ对神经肌传递的阻滞容易逆转,组分Ⅷ则较难逆转。这四个毒性组分均为突触后神经毒,其毒力依次为Ⅷ＞Ⅸ＞Ⅻ＞ⅩⅢ,眼镜王蛇毒的主要毒性成分是突触后神经毒。     

平颏海蛇神经毒组分Ⅷ的分离纯化及毒理的初步研究

平颏海蛇毒腺提取物用CM-Sephadex C25柱层析,经醋酸铵缓冲液梯度洗脱,获得19个蛋白组分。经离体小鸡颈二腹肌标本检验,其中14个具有突触后神经毒作用。组分XⅡ再经Sephadex G 50和CM-Sephadex C 50层析纯化后得到组分XⅢ-2-4,该组分用Sephadex G 50过滤呈单一蛋白吸收峰,经三种不同类型的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为电泳纯蛋白。其等电点为8.3,表观分子量为8200。小鼠ipLD_(50)为94μg/kg(86～102μg/kg)。其对小鸡颈二腹肌标本的神经肌肉传导的阻断作用经反复冲洗360min,结果表明是难于逆转的。根据氨基酸组成分析、分子量测定以及对神经肌肉传导阻断的难逆转结果,推测平颏海蛇神经毒素XⅢ-2-4可能属于突触后长链神经毒。     

福建眼镜王蛇蛇毒柱层析分离及生化药理特性

应用CM—Sephadex C—50离子交换柱层析分离福建眼镜王蛇毒,获得17个蛋白峰。该蛇毒具有磷脂酶A_2、蛋白水解酶、精氨酸酯酶、L-氨基酸氧化酶、胆碱酯酶、磷酸单酯酶和磷酸二酯酶等酶活力。组分Ⅰ,Ⅳ对ADP诱导的兔血小板聚集功能有抑制作用,组分Ⅰ还有降压作用,组分Ⅳ则有心脏毒性作用。Ⅵ,Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ,Ⅹ,Ⅺ和Ⅻ等7个组分具突触后神经毒活性,组分ⅩⅫ呈现局部出血效应,粗毒及各组分对家兔血浆的复钙时间和凝血酶时间无影响。     

龙葵碱对小鼠睾丸生殖细胞线粒体损伤的研究

目的：研究龙葵碱对小鼠睾丸的毒性作用。方法：30只雄性小鼠,体质量20～24 g。随机分成5组,每组6只。采用ip龙葵碱对小鼠进行染毒,染毒剂量分别是1/8 LD₅₀（5.25 mg/kg）、1/4 LD₅₀（10.5 mg/kg）、1/2LD₅₀（21 mg/kg）。另设阴性对照组（生理盐水组）,阳性对照组（环磷酰胺,CP,给药剂量40 mg/kg）,龙葵碱不同浓度组连续染毒14 d。应用紫外分光光度法测定睾丸中SDH、MDA、SOD、GSH的活力。结果：龙葵碱染毒两周后,GSH的量仅1/2LD₅₀染毒剂量组与空白组相比较呈非常显著性差异（P＜0.01）;随着染毒剂量的增加, MDA含量增加,1/2 LD₅₀、1/4 LD₅₀、1/8 LD₅₀染毒剂量组与空白组比较呈非常显著性差异（P＜0.01）;随着染毒剂量的增加SOD的活性降低明显,1/2 LD₅₀、1/4LD₅₀染毒剂量时,SOD活性的降低与空白组比较呈非常显著性差异（P＜0.01）;随着染毒剂量的增加SDH的活性降低明显,1/2LD₅₀、1/4LD₅₀染毒剂量时,SDH活性的降低与空白组比较呈非常显著性差异（P＜0.01）。结论：龙葵碱能够使SDH、MDA、SOD、GSH活力降低,从而导致自由基增多,呼吸链和氧化磷酸化脱偶联,三羧酸循环被阻断,线粒体基质渗透压升高,内膜肿胀,使线粒体的功能发生障碍,线粒体氧化损伤。     

补骨脂素和异补骨脂素的急性毒性和相互作用

目的 探究补骨脂素、异补骨脂素的急性毒性及两者（1∶1）混合使用后的相互作用。方法 补骨脂素（1 125、843、633、475 mg/kg）、异补骨脂素（475、404、343、292 mg/kg）以及两者1∶1的混合物（633、538、457、389、330 mg/kg）1次性ig给予小鼠,连续观察并记录14 d小鼠的毒性反应和死亡情况,用SPSS计算补骨脂素、异补骨脂素以及两者混合使用后的半数致死量（LD₅₀）,用等效线图解法判断两者的相互作用。结果 给药组小鼠均出现僵直、腹部贴地、活动力减弱,甚至抽搐、口眼周有分泌物,心率减慢直至死亡的现象,与助溶剂组比较,体质量呈降低趋势;补骨脂素LD₅₀为638.69 mg/kg,95%可信限为526.91～785.78mg/kg;异补骨脂素LD₅₀为351.72 mg/kg,95%可信限为248.17～394.57 mg/kg;两者1∶1混合给药的LD₅₀为454.66 mg/kg,95%可信限为422.58～489.59;两者合用的LD₅₀在补骨脂素和异补骨脂素相加等效线上。结论 补骨脂素和异补骨脂素大剂量给予小鼠时,引起药物急性毒性反应,1∶1混合给药具有相加作用。     

舟山眼镜蛇毒神经毒素的分离纯化及镇痛作用研究

目的从舟山眼镜蛇毒中分离纯化神经毒素,并测定其部分理化性质及镇痛活性。方法应用SP-Sephadex C-50离子交换色谱法分离眼镜蛇毒粗毒,用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、CM-Sephadex C-25离子交换色谱纯化神经毒素;SDS-PAGE(Tris-Tricine系统)鉴定纯度;用Meier方法测定毒性;用热板法观察神经毒素的镇痛作用。结果应用SP-Sephadex C-50离子交换柱层析,从舟山眼镜蛇毒中分离得到14个蛋白峰,其中6个组分(NNAV-Ⅶ ~Ⅻ)经鉴定为含有神经毒素组分,将神经毒活性最强的组分XI经Sephadex G-50、CM-Sephadex C-25纯化得神经毒素纯品NTⅪ。该纯品分子量12.3kD,小白鼠静脉注射和腹腔注射的LD50分别为1.9875、2.2217 mg·kg-1。NTXI能显著提高小鼠对热板刺激的痛阈。腹腔注射0.2mg·kg-1NTXI可使小鼠的热板痛阈提高84.35%。NTXI的镇痛作用具有时效性,给药后2h起效,4h作用达峰值。结论舟山眼镜蛇毒中分离得到一个神经毒素纯品NTⅪ,具有镇痛作用。     

眼镜王蛇神经毒素的镇痛作用研究

神经毒素(neurotoxin，NTX）是眼镜王蛇毒(Ophiophagus hannah Venom)的主要活性成分，我们应用离子交换层析、凝胶过滤及疏水层析等色谱方法从眼镜王蛇毒中分离纯化得到一种突触后神经毒素，暂定名为Neurotoxin-K(NTX-K)。经SDS-PAGE电泳鉴定为均一蛋白，分子量约为7776道尔顿，其小鼠静脉注射的LD50     

新型抗心梗药物果糖二磷酸镁的安全性研究

目的　探讨新型抗心肌缺血药———果糖二磷酸镁(FDP-Mg)的安全性。方法　采用Bliss法和QUANTAL程序测定和计算了FDP-Mg的LD₅₀和95%可信限并对其过敏性、溶血性和血管刺激性进行研究。结果　FDP-Mg小鼠静脉注射的LD₅₀为284.81mg/kg ,95%可使限为267.42～302.20mg/kg ;FDP-Mg大鼠静脉注射的LD₅₀为335.15mg/kg ,95%可信限为315.75～354.55mg/kg ;FDP-Mg大鼠静脉滴注[1000mg/(kg·h)]的MLD为(2509.9±226.8)mg/kg。FDP-Mg不引起全身过敏反应和溶血现象,对血管也无刺激性。结论　FDP-Mg用于静脉给药安全可靠。     

抗眼镜王蛇毒卵黄抗体的免疫活性及其对眼镜王蛇毒的中和作用

目的：探讨抗眼镜王蛇毒卵黄抗体的免疫活性及其在体内外对眼镜王蛇毒的中和作用。方法：采用嗜硫色谱法一步分离纯化抗眼镜王蛇毒卵黄抗体,通过间接ELISA法对制备的抗眼镜王蛇毒卵黄抗体进行免疫活性检测,采用小鼠体内外保护实验评估抗眼镜王蛇毒卵黄抗体对眼镜王蛇毒的中和作用。结果：嗜硫色谱法制备的卵黄抗体具有良好的免疫活性,并且对眼镜王蛇毒素显示较好的中和效应,在体外6mg/kg抗眼镜王蛇毒卵黄抗体可有效地中和约4LD50（约1.6mg/kg）的眼镜王蛇毒素,而在体内可有效地中和约3LD50（约1.2mg/kg）的眼镜王蛇毒素。结论：抗眼镜王蛇毒卵黄抗体对眼镜王蛇毒具有良好的中和作用,本项目为抗眼镜王蛇毒卵黄抗体的进一步研究开发提供实验依据。     

克班宁急性毒性与抗心律失常活性的初步研究

目的研究克班宁(crebanine,Cre)的急性毒性与抗心律失常作用。方法以改良寇氏法考察小鼠静注LD₅₀,以BaCl₂致大鼠心律失常模型观察Cre的治疗与预防作用。结果LD₅₀为9.382mg/kg,95%可信限为8.314～10.600mg/kg;治疗组与预防组iv Cre2.5mg/kg可使大鼠恢复窦律,与对照(生理盐水)组相比,差异有显著性意义。结论Cre有一定的毒性,对大鼠实验性心律失常具有治疗与预防作用。     

2-乙酰氧基-5-乙酰氨基苯甲酸的合成及镇痛抗炎作用

目的　合成2-乙酰氧基-5-乙酰氨基苯甲酸并进行镇痛、抗炎作用的初步研究。方法　以水杨酸和苯胺为原料,经重氮、偶合、还原及酰化合成目标化合物,化学结构经元素分析、IR和¹H-NMR确定;采用小鼠醋酸扭体、耳部肿胀法研究镇痛和抗炎作用。结果　目标化合物的熔点为170～173℃,中和法测含量99.2% ,收率42.7% (以水杨酸计)。小鼠灌胃后抑制醋酸所致疼痛的ED₅₀为1.2mmol/kg ,抑制二甲苯所致耳廓炎症的ED₅₀为2 .3mmol/kg ,LD₅₀为2598mg/kg。结论　2-乙酰氧基-5-乙酰氨基苯甲酸合成简单,收率稳定,具有比阿司匹林和对乙酰氨基酚更强的镇痛和抗炎作用。     

5-氟尿嘧啶毫微型胶囊的研究

用氰基丙烯酸正丁酯制备了毫微型胶囊——抗癌药物新剂型。以5-氟尿嘧啶为模型药物所制得的毫微囊最大粒子直径为338nm。建立了凝胶色谱法测定包封率的新方法,5-氟尿嘧啶的包封率达40.9%。通过小鼠尾静脉注射,测得氰基丙烯酸正丁酯的LD₅₀=267.7 mg/kg。制成毫微囊后,5-氟尿嘧啶对S₁₈₀,Hep S以及EAC的抗癌活性明显提高。     

盐酸关附甲素注射液对实验性心律失常的作用

关附甲素是从关白附子块根中提取的一种新生物碱。实验表明IGFAH(50　g/ml)对大鼠离体心脏结扎冠脉诱发的室性心律失常有明显的保护作用,IGFAH3、6、12mg/kgiv能显著提高电刺激麻醉兔心室致颤阈值,IGPAH13.4,16.8,21.0mg/kgiv能明显对抗Cal₂-Ach液诱发小鼠房扑(颤),其ED₂为12.4±1.5mg/kg。IGFAH10,25,40mg/kgiv对乌头碱诱发的大鼠室性心律失常有明显的保护作用。IGFAH小鼠iv的LD₅₀为163.9mg/kg,其96%可信限为151.9—176.7mg/kg。     

金环蛇神经毒组分Ⅸ的研究

从金环蛇毒中分离得到一个作用于突触后膜的神经毒——组分Ⅸ。与通常的蛇毒突触后神经毒不同,组分Ⅸ对蛙腹直肌的乙酰胆碱量效曲线呈现非竞争性抑制。在有新斯的明存在时,高浓度乙酰胆碱使腹直肌产生相反的效应。在实验用浓度下,组分Ⅸ对¹²⁵Ⅱ标记的眼镜蛇神经毒与电鳐电器官膜碎片的结合无显著影响。应用电压固定技术的研究表明,组分Ⅸ能够抑制终板电流,最后使其完全消失,且能缩短终板电流的半衰期。增加衰减速率常数α值;对终板电流的平衡电位无显著影响.实验提示组分Ⅸ是通过乙酰胆碱受体以外的作用方式产生阻断作用的,作用部位可能在终板离子通道。     

氧杂蒽-2-羧酸及氧杂蒽酮-2-羧酸类衍生物的合成

本文合成了一系列7位拉电子基团取代的氧杂蒽-2-羧酸及氧杂蒽酮-2-羧酸化合物。经大鼠被动皮肤过敏试验(PCA),显示化合物(Ⅷ),(Ⅻ_b)和(Ⅻ_e)有50～60%的抑制率(PO,200mg/kg),(Ⅻ_d)有54%的抑制率(ⅳ,10mg/kg)。氧杂蒽酮-2-羧酸(Ⅷ)经黄鸣龙还原反应生成(Ⅸ),但收率低,推测副产物2,2′-二羟基二苯基-甲烷(Ⅹ)的生成机理,改变反应条件,从而提高了(Ⅸ)的收率。化合物(Ⅻ_d)的元素分析和质谱均证明其结构为(Ⅻ_d),但核磁共振谱(溶剂为三氟醋酸)出现异常,而与(Ⅻ_d)在醋酐中回流所得产物(Ⅻ_d)的图谱相同。表明(Ⅻ_d)在三氟醋酸中环合、脱水产生了(Ⅻ_d)。     

二苯乙烯(芪)的一些药理作用

芪(二苯乙烯)通常用于化学工业,对其药理活性的研究很少。通过动物实验我们发现芪能明显保护CCl₄引起的小鼠肝损害,表现在使高的SGPT及SGOT降低、BSP潴留减少、肝组织病变减轻等。芪明显促进肝糖元生成,此作用强度与可的松相近,但芪没有可的松那样的抗炎作用。在去肾上腺小鼠,芪仍能明显促进肝糖元生成,故此作用似乎不通过体内的垂体-肾上腺系统。芪对小鼠戊巴比妥睡眠时间影响不明显。根据实验资料分析,芪对CCl₄肝损害的保护机制大概不是通过酶诱导,也不象某些抗氧化剂那样直接对抗CCl₄的作用,但有可能与其促进肝糖元生成有某种关系。芪有微弱的雌激素作用(约为己烯雌酚的数万分之一)。芪的毒性很低,小鼠一次腹腔注射LD₅₀为6.5 g/kg,灌胃LD₅₀大于8 g/kg,但油溶液毒性较大(灌胃LD₅₀为0.92g/kg)。长期大量给予芪,对雄小鼠的生长及睾丸发育有抑制作用,给狗服芪50 mg/kg/天连续一个月以上未见明显异常反应。     

硫辛酸对酒石酸锑钾解毒作用的研究

本文研究了国产硫辛酸对酒石酸锑钾的解毒作用.结果证明硫辛酸对酒石酸锑钾的急性及亚急性毒性均有非常显著的解毒作用.小白鼠腹腔注射酒石酸锑钾后,立即以130毫克/公斤的硫辛酸灌胃或皮下注射,可分别使酒石酸锑钾的急性LD₅₀提高1.6和1.9倍.在急性试验中,酒石酸锑钾为LD₉₅时,2-3分子硫辛酸可对抗1分子酒石酸锑钾;在亚急性试验中,酒石酸锑钾为LD₅₀时,1分子硫辛酸即可对抗1分子酒石酸锑钾.腹腔注射酒石酸锑钾LD₅₀后3小时皮下注射硫辛酸,可完全保护小白鼠免于死亡.硫辛酸性质稳定,口服吸收良好,在锑剂中毒出现症状后仍然有效,值得在临床试用.     

碘化二甲基木防己的降压作用

本文报告碘化二甲基木防己碱(DTI)降压作用的研究。DTI给麻醉动物静脉注射,对狗0.05～0.1 mg/kg使血压下降42.3～61.5%,持续1小时左右恢复至原血压水平;对猫0.00625～0.0125 mg/kg使血压下降26.5～43.5%,持续2～4小时恢复至原血压水平;对兔0.005～0.01 mg/kg使血压下降24.3～61.0%,5小时不能恢复至原血压水平;0.5～1.0 mg/kg使大鼠血压下降27.2～41.1%。DTI的降压作用机制主要与其对神经节的阻断作用有关。本药对小鼠口服和静注的LD₅₀分别为522.0 mg/kg及2.23 mg/kg。     

选择性κ阿片激动剂K-Ⅱ与U-50488的药理作用比较

K-Ⅱ系k阿片激动剂U-50488的同类物。通过部分离体和整体实验比较了K-Ⅱ与U-50488的药理作用。实验发现,K-Ⅱ抑制电刺激兔输精管收缩的IC₅₀值为0.42 nmol/L,U-50488为26.5 nmol/L;K-Ⅱ抑制小鼠运动功能(横筛法)的ED₅₀值为1.7 mg/g,U-50488为15.3 mg/kg;K-Ⅱ的小鼠LD₅₀值为152.5 mg/kg,U-50488为118.4 mg/g;K-Ⅱ明显降低小鼠自发活动的作用比U-50488强5倍。结果表明,K-Ⅱ是一个药理作用较U-50488强的k受体激动剂。