负载紫杉醇壳聚糖纳米粒的制备、表征与释药性能

背景：紫杉醇是一种天然抗肿瘤药物,但其水溶性极低。壳聚糖经接枝改性,生成的共聚物可在液相中生成纳米粒,可用于药物的缓释和控释。目的：对制备的负载紫杉醇的壳聚糖纳米粒进行表征,分析其体外药物释放能力。设计、时间及地点：重复测量设计,于2008-01/07在华北煤炭医学院医学系实验室完成。材料：壳聚糖,平均相对分子质量为2.0×105,脱乙酰度为92%,为浙江省玉环海洋生物化学有限公司产品。紫杉醇,批号082329802,为中国药品生物制品检定所产品。方法：采用引发接枝效率高、引发反应条件温和的二羟基二过碘酸合镍钾为引发剂,在壳聚糖上接枝醋酸乙烯酯,该聚合物在水溶液中直接生成具有疏水核心、亲水表面的纳米粒,即壳聚糖纳米粒,再利用超声振荡技术将0.5~5.0 mg紫杉醇与上述纳米粒混合制成负载紫杉醇的壳聚糖纳米粒。主要观察指标：激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布及Zeta电位,透射电镜观察纳米颗粒的外观形态,高效液相色谱法分析负载紫杉醇的壳聚糖纳米粒的包封率、载药量和释药性能。结果：壳聚糖纳米粒和负载紫杉醇的壳聚糖纳米粒,其粒径分别为196.2 nm和320.8 nm,粒径分布较窄,纳米粒表面均带正电荷,Zeta电位比较差异无显著性意义（F=0.818,F=3.38,P均>0.05）。稳定的纳米粒呈球形,粒径均匀。紫杉醇的加入量可影响纳米粒的包封率,紫杉醇的加入量为纳米粒的量2%时,达到最大包封率93.6%。体外模拟释药结果表明药物释放曲线分为两个阶段,突释阶段微球释药量在24 h内达48.3%,缓释阶段微球释药持续时间长,在175 h时释药量达75.9%,载药纳米粒的药物释放速率持续稳定。结论：接枝共聚法制备壳聚糖纳米粒简便可靠,负载紫杉醇后纳米粒径明显变大,表面带有正电荷,且纳米粒对紫杉醇有很高的包封率,体外释药具有明显的缓释作用。     

壳聚糖-siRNA纳米粒的制备及其特征分析

目的 探讨离子凝胶法制备壳聚糖（CS）-siRNA纳米粒的特点，并分析其理化性质。方法 将CS、三聚磷酸钠（TPP）和siRNA通过离子凝胶法制备CS—siRNA纳米粒：透射电镜观察其形态，zeta电位／粒度分析仪测定纳米粒的平均粒径和zeta电位；分光光度计测定上清中siRNA含量．计算包封率、siRNA的体外控释能力；凝胶电泳分析与胎牛血清作用后纳米粒中siRNA的稳定性。结果 成功制备的CS—siRNA纳米粒经电镜观察发现纳米粒呈球形，大小均匀；zeta电位／粒度分析仪测定其平均粒径为83．3nin．zeta电位＋24．2mV；包封率为95％，24h内siRNA的体外释放率不足20％；电泳结果表明CS—siRNA性质稳定，能够阻止RNase对siRNA的降解，具有保护siRNA的作用。结论 离子凝胶法制备CS—siRNA纳米粒方法简单、条件温和，包封率高、稳定性好：纳米粒体外能显著延缓siRNA释放，保护siRNA免受降解。     

壳聚糖纳米粒的制备及体外抗幽门螺杆菌效果评价◆

背景：壳聚糖是甲壳素的脱乙酰产物,这种碱性氨基多糖具有天然抗菌活性,且抗菌广谱,但将其纳米化后抗幽门螺杆菌作用的报道较少。 目的：制备壳聚糖纳米粒并评价其体外抗幽门螺杆菌的疗效。 设计、时间及地点：体外对比观察实验,于2008-03/10在中南大学湘雅医院卫生部纳米生物技术重点实验室完成。 材料：采用聚合物分散法用脱乙酰度分别为88.5%和95%的2种壳聚糖粉末制备壳聚糖纳米粒。 方法：取0.5 mL含幽门螺杆菌(NCTC11639和NCTC11637)5×108 CFU/mL的布氏肉汤菌液均匀涂布于培养基上待干燥后,采用打孔法检验不同质量浓度(5,10,15,20 g/L),不同pH值(pH=6,5,4)和不同脱乙酰度(88.5%和95%)壳聚糖纳米粒溶液的抑菌效果。 主要观察指标：抑菌环直径。抑菌环直径越大,说明该菌对此药敏感性越大,抗菌效果越好;反之越小,抗菌效果越差;若无抑菌环,则说明该菌对此药具有耐药性。 结果：pH值在4~6时,壳聚糖纳米粒的抑菌作用与pH值呈负相关(P < 0.01),且在pH值为4时的抑菌效果最强。2种不同脱乙酰度壳聚糖对幽门螺杆菌的抑菌作用差异有显著性意义(P < 0.05),壳聚糖纳米粒(脱乙酰度95%)的抑菌效果优于壳聚糖纳米粒(脱乙酰度88.5%),在质量浓度处于5~20 g/L时抗幽门螺杆菌的作用差异无显著性意义(P > 0.05)。 结论：壳聚糖纳米粒提高了在体外对幽门螺杆菌的抑菌作用,且此作用在酸性条件下明显增强。用脱乙酰度为95%的壳聚糖粉末制备的壳聚糖纳米粒具有更好的抑幽门螺杆菌的作用。     

包裹pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒的制备以及特性研究

摘要背景：壳聚糖是生物可降解性天然多糖,其生物相容性好,安全无毒,故而在基因成为基因传递方面展现巨大潜力。目的：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒,观察研究其相关特性。设计、时间及地点：对比观察实验,于2009-02/2009-08在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。材料：pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70由国家卫生部纳米生物技术重点实验室构建,壳聚糖 (批号060306,上海伯奥生物科技有限公司,脱乙酰度>90.0%,粘度<100cps) ,B16细胞由中南大学肿瘤研究所惠赠。方法：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒,将壳聚糖基因纳米粒转染B16细胞,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测体外转染效果;应用噻唑蓝(MTT)评价壳聚糖基因纳米粒子的体外细胞毒性。 主要观察指标：激光粒度仪测定壳聚糖基因纳米粒径、Zeta电位;紫外分光光度计检测包封率;凝胶阻滞实验观察壳聚糖和质粒DNA的聚合;DNaseⅠ的保护试验分析壳聚糖基因纳米粒抗核酸酶降解能力。结果：壳聚糖基因纳米粒的平均粒径约为223 nm,zeta电位为16mV; DNA包封率为92.3%,B16细胞转染实验显示其效率与Lipofectamine 2000相近, 而其毒性远低于Lipofectamine 2000。 结论：壳聚糖纳米粒子可高效装载质粒DNA转染B16细胞,而且对细胞基本无毒。     

包裹EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米粒的制备方法及特性研究

目的制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统,检测其物理性能。方法制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统并检测颗粒大小、形态、包装容量、包装效率、稳定性、包裹方式。结果 EphrinA1-PE38/GMCSF壳聚糖纳米颗粒大小50~100nm,类似球形,分布较为均匀,呈聚集团块状,4℃条件下状态稳定。电泳显示纳米颗粒上清中EphrinA1-PE38/GM-CSF与游离EphrinA1-PE38/GM-CSF在同一分子水平。CLSM图像证实EphrinA1-PE38/GMCSF不仅仅与其表面结合,且包裹于壳聚糖纳米颗粒内。结论 EphrinA1-PE38/GM-CSF可与壳聚糖结合形成纳米颗粒,且包装容量、包装效率、稳定性均较高。     

负载两性霉素B壳聚糖-聚乳酸纳米粒的制备及其释药性能*☆

背景：两性霉素B为治疗深部真菌感染的首选药物,但该药无法通过血脑屏障而对隐球菌性脑膜炎的治疗效果甚微。利用纳米粒子作为药物载体的优势,通过相分离透析技术制备负载两性霉素B的壳聚糖-聚乳酸纳米粒子,有望克服两性霉素B的不足。 目的：对负载两性霉素B的壳聚糖-聚乳酸纳米粒进行表征,分析其体外药物释放能力。 设计、时间及地点：重复测量设计,于 2008-11/2009-04 在国家纳米科学中心纳米医学与生物实验室完成。 材料：壳聚糖,平均相对分子质量为3.4×105,脱乙酰度为93%,为上海卡伯工贸有限公司产品。两性霉素B为Sigma公司产品。 方法：在二甲基亚砜溶液中,在三乙胺存在下,通过壳聚糖和D,L-丙交酯的开环聚合反应能够生成壳聚糖-聚乳酸共聚物。该共聚物由亲水壳聚糖段和疏水聚乳酸段组成,在水中能够组装形成纳米粒子。两性霉素B通过相分离透析技术包载于纳米粒子中。 主要观察指标：激光粒度分析仪测定纳米颗粒的粒径大小、粒径分布,环境扫描电镜观察纳米颗粒的外观形态,紫外光谱分析负载两性霉素B的壳聚糖-聚乳酸纳米粒的包封率、载药量和释药性能。 结果：壳聚糖-聚乳酸纳米粒和负载两性霉素B的壳聚糖-聚乳酸纳米粒,其粒径分别为114 nm和153 nm(当丙交酯与壳聚糖摩尔比为11∶1时)。纳米粒子粒径分布较窄,呈球形。共聚物中丙交酯与壳聚糖摩尔比影响药物的包封率和载药量,随着丙交酯与壳聚糖摩尔比从11∶1到20∶1,包封率从(62.3±3.5)%增加到(90.7±2.8)%,载药量从(7.8±1.2)%增加到(12.3±1.4)%。随着聚乳酸段质量比增加,纳米粒子尺寸、包封率和载药量增加,而药物释放降低。 结论：开环聚合制备壳聚糖-聚乳酸共聚物及用相分离透析方法制备负载两性霉素B纳米粒简便可靠,负载两性霉素B后纳米粒径明显变大,且纳米粒对两性霉素B有很高的包封率,体外释药具有明显的缓释作用。 关键词：两性霉素B;壳聚糖;聚乳酸;纳米粒子;包封率;体外释放     

载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜的制备及体外释药评价

背景：纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无需缝合生物移植材料还无法有效地在局部长时间缓释药物,特别是对于一些不稳定的生物活性蛋白药物。 目的：构建新型的能有效缓释蛋白药物的载表皮生长因子壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶羊膜复合体。 方法：制备表皮生长因子/壳聚糖载药纳米粒并考察其表征,然后将载药纳米粒掺入纤维蛋白胶,再将载纳米粒的纤维蛋白胶和羊膜胶联黏合,制备出负载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜,并进行形态学和体外释药观察,检测释放出的表皮生长因子生物活性。 结果与结论：表皮生长因子/壳聚糖纳米粒的粒径为(275.7±6.8) nm,Zeta电位为(32.7±0.6) mV,包封率为(67.03±1.22)%,多分散指数为0.23±0.04,形态圆形均一,载纳米粒纤维蛋白胶能够很好地与羊膜胶联黏合,表面呈网状结构,纳米粒充斥其中。载表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜体外释药可达14 d,释放的表皮生长因子生物活性可保持7 d以上。说明制备的载重组人表皮生长因子/壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜作为一种无缝合生物移植材料可在局部缓慢释放表皮生长因子。     

负载As2O3壳聚糖纳米粒的药代动力学及其毒性观察

摘要 背景：As2O3作为抗肿瘤药物具有不同程度的不良反应,目前尚没有可以较好降低As2O3不良反应的方法。 目的：观察负载As2O3壳聚糖纳米粒在体内是否有缓释作用,是否可以延长药物作用时间,减低As2O3毒副作用。 方法：将20只SD大鼠以抽签法随机分为As2O3组和壳聚糖纳米粒-As2O3组进行药代动力学测定,于给药前和给药后不同时间点测定血液中砷浓度;将40只SD大鼠随机分为壳聚糖纳米粒组、壳聚糖纳米粒- As2O3组、As2O3组、生理盐水组进行毒理学检测,检测血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酐、尿素氮水平,并结合苏木精-伊红染色形态学观察心、肝、肾组织形态学变化。 结果与结论：壳聚糖纳米粒- As2O3组较As2O3组半衰期明显延长(P < 0.05)。除肌酸激酶外,As2O3组其他各指标均高于其他各组(P < 0.05);而含相同浓度As2O3的壳聚糖纳米粒As2O3组与壳聚糖纳米粒组、生理盐水组各项指标差异无显著性意义(P > 0.05)。As2O3组大鼠肝脏和肾脏均有较明显的病理学改变,壳聚糖纳米粒- As2O3组未见明显形态学改变。4组大鼠心脏均未见明显形态学改变。说明负载As2O3壳聚糖纳米粒在体内有缓释作用,可以延长药物作用时间,减轻As2O3的毒副作用。 关键词：壳聚糖纳米粒;As2O3;负载As2O3壳聚糖纳米粒;药代动力学;药物毒理学 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.019     

壳聚糖纳米粒载体转染Cu-SOD对缺血再灌注脑组织的作用

目的 制备适用的壳聚糖纳米粒,并连接上SOD质粒,研究壳聚糖纳米粒-SOD联合体对脑缺血再灌注脑组织氧自由基的清除能力及对脑组织内SOD含量的影响。方法 以分子交联法制备壳聚糖纳米粒;通过静电吸附作用连接上Cu-SOD质粒;经琼脂糖凝胶电泳分析载体与SOD-DNA的结合能力,并通过紫外分光光度计检测其包埋率。将壳聚糖纳米粒-SOD联合体输注到缺血再灌注大鼠体内,然后测定大鼠脑海马组织内丙二醛及超氧化物歧化酶含量。结果经壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体治疗的大鼠,其海马组织丙二醛含量明显低于生理盐水对照组及生理盐水＋SOD组（P〈0.05）（P〈0.01）。其海马组织超氧化物歧化酶含量明显高于生理盐水对照组及生理盐水＋SOD组（P〈0.05）（P〈0.01）。结论 壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体在接近临床应用的实验中具有较强氧自由基清除能力,其较强的氧自由基清除能力在于壳聚糖纳米粒能助SOD质粒通过血脑屏障及细胞膜,使SOD-DNA在脑细胞内表达,增加了超氧化物歧化酶在脑细胞中的含量。     

壳聚糖季铵盐包裹甲状旁腺激素相关肽制备纳米缓释颗粒

摘要 背景：小范围研究显示,低剂量、间歇性应用甲状旁腺激素相关肽能有效治疗绝经后妇女骨质疏松症。但其存在着易变性、半衰期短、价格昂贵等缺陷,因此研制应用缓释系统控制甲状旁腺激素相关肽的释放速度,提高其生物利用效率极为必要。 目的：制备一种新型纳米载药颗粒,探讨其对甲状旁腺激素相关肽的包封及体外释放特性。 方法：采用离子交联法制备壳聚糖季铵盐纳米载药颗粒,用傅里叶红外光谱、透射电镜等进行表征,检测纳米颗粒的包封及体外释放特性。 结果与结论：在常温磁力搅拌条件下,当壳聚糖季铵盐与三聚磷酸钠投药量为5︰1~2︰1时可形成纳米颗粒,粒径100~ 180 nm,为规则球形,甲状旁腺激素相关肽投药质量浓度越高时包封率增大但载药量有所减少,体外PBS溶液中纳米载药颗粒表现出缓慢释放特性。 关键词：壳聚糖;壳聚糖季铵盐;纳米粒子;甲状旁腺激素相关肽;体外释放 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.019     

幽门螺杆菌全菌蛋白抗原壳聚糖微球体外释放特性

背景：不同方法制备出的幽门螺杆菌全菌蛋白抗原壳聚糖微球,其包裹率和控释效果也不同。 目的：探讨幽门螺杆菌全菌蛋白抗原壳聚糖微球的最佳制备方案,观察其体外释放特性。 方法：使用Berthold沉淀法制备壳聚糖微球,筛选最佳制备方案;使用扫描电镜及粒径分析仪观察壳聚糖微球的形态及粒径分布;冻干后的壳聚糖微球包裹幽门螺杆菌全菌蛋白抗原,使用BCA蛋白定量试剂盒测量分析微球的抗原包裹率、包裹量及释放率。 结果与结论：从32种壳聚糖微球制备方案中筛选出了以海得贝壳聚糖为原料、冰乙酸的浓度为1%、硫酸钠为沉淀剂、pH值为5.0、不进行超声处理方案为最佳制备方案,扫描电镜示微球光滑圆整、致密,粒径分布在1.0~5.0 μm;抗原包裹率为79.92%,包裹量为16.47%;体外释放实验表明,总抗原释放率为20.39%,呈缓慢释放状态。     

巯基化羧甲基壳聚糖微凝胶的制备及其生物黏附性能*☆

摘要：巯基化羧甲基壳聚糖是羧甲基壳聚糖的衍生物。它既保留了羧甲基壳聚糖的优良生物特性,具备水溶性和pH敏感性,同时也具备了优良的生物黏附性,是制备生物凝胶材料的优良原料。利用L-半胱氨酸进行巯基反应制备巯基化羧甲基壳聚糖,通过1-乙基-3- (3-二甲胺基丙基)-碳二亚胺盐酸盐交联和自体交联等方式制备了微凝胶,并以猪胃黏蛋白为模型,测定微凝胶的体外生物黏附性。实验表明巯基化羧甲基壳聚糖粉末在pH3.0的介质中有最大黏附率(120.25%),表现出了优良的生物黏附性能,在相同的介质中,自身交联的巯基化羧甲基壳聚糖微凝胶的黏附能力要大于1-乙基-3- (3-二甲胺基丙基) -碳二亚胺盐酸盐交联的微凝胶。     

两亲性壳聚糖衍生物负载及缓释醋酸曲安奈德的性能

背景：醋酸曲安奈德是一种长效肾上腺糖皮质激素,具有较强的抗炎作用。近年来在眼内疾病的治疗中取得了较好的效果,但同时带来一些不良反应,且需多次注射,以防止疾病复发。壳聚糖经接枝改性,生成的共聚物可在水溶液中生成纳米粒,用于药物的缓释载体,延长药物作用时间,降低不良反应,提高生物利用度。目的：合成含脱氧胆酸基团的两亲性壳聚糖衍生物作为醋酸曲安奈德的载体材料,制备具有缓释功能的载药纳米胶束,研究其负载和缓释醋酸曲安奈德的性能。方法：通过酰胺化反应在壳聚糖上偶联脱氧胆酸基团,合成两亲性壳聚糖衍生物。透射电镜观察纳米粒的外观形态和粒径,Zeta电位分析仪测定纳米粒的Zeta电位,体外释放实验检测负载醋酸曲安奈德的壳聚糖-脱氧胆酸纳米粒的包封率、载药量和体外释药性能。结果与结论：合成出含脱氧胆酸基团的两亲性壳聚糖衍生物,它能与醋酸曲安奈德形成载药纳米胶束,载药量可高达82%。随着载药量的增加,载药纳米胶束的粒径逐渐增大,而Zeta电位则呈下降的趋势。体外释放的结果表明载药纳米胶束能起到72 h缓释醋酸曲安奈德的作用。提示以两亲性壳聚糖衍生物为载体的载药纳米胶束显示出较好的缓释醋酸曲安奈德性能,将有希望提高醋酸曲安奈德的治疗效果。关键词：醋酸曲安奈德;两亲性壳聚糖衍生物;脱氧胆酸;纳米胶束;体外药物释放doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.29.013     

壳聚糖纳米混悬剂的研制和表征**

背景：实验于2006-07/2007-06在浙江省医学科学院生物工程研究所完成。壳聚糖（脱乙酰度为87.85%，黏度为195 mPa?s，水分7.13%，灰分0.82%，批号：050621160）由浙江金壳生物化学有限公司提供。运用化学酸解、60Co γ射线辐照、高压、超声波及稳定剂等综合理化手段制备壳聚糖纳米粒子。透射电镜观察制备的壳聚糖纳米粒子为类圆球形；激光动态光散射仪检测壳聚糖纳米粒子平均粒径25.3 nm，占总粒子数99.1%，粒径分布图形较窄，表明颗粒大小均匀。实验结果表明运用以60Co γ射线辐照为主要手段进行壳聚糖纳米混悬剂的制备，是一种简便、快速、无污染、重复性好的方法，具备可行性。     

乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性

摘要 背景：医用纳米粒作为药物传递的新型载体,目前已经成为医药领域研究的重点。 目的：构建以生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,负载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶的载药纳米粒。 方法：利用复乳-溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒。场发射扫描电子显微镜观察纳米粒表面形态;激光粒度分析仪测定粒径分布并计算成球率;紫外分光光度计测定5-氟尿嘧啶载药量、包封率,并对体外释药进行评估。 结果与结论：纳米粒呈球性,平均粒径为(186±14) nm,成球率、载药量和包封率分别为70.8%、6.6%、28.1%,体外释药有突释现象,24 h内5-氟尿嘧啶累积释药量达36.2%,10 d达83.6%。提示成功制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒,其具有缓释效应。 关键词：乳酸-羟基乙酸共聚物;5-氟尿嘧啶;纳米粒;体外释药;缓释 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.017     

重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球的制备及体外细胞毒性*☆

背景：通过各种微球负载骨生长因子使骨形态发生蛋白达到缓释效果逐渐成为研究热点,但关于载药壳聚糖纳米微球的生物相容性特别是细胞毒性的报道较少。 目的：对重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球进行细胞毒性检测,评估应用壳聚糖纳米微球作为重组人骨形态发生蛋白2缓释载体的生物安全性。 方法：通过离子交联法制备空白壳聚糖纳米微球,应用透视电镜观察微球的形态,激光粒径分析其粒径分布;通过重组人骨形态发生蛋白2壳聚糖纳米微球体外细胞毒性试验评估微球的生物安全性。 结果与结论：离子交联法制备的壳聚糖微球,球形规整,分散均匀,微球平均粒径为230 nm,分布较集中。载药及空白微球的反应分级为0或1级,均为合格。提示,离子交联法制备可成功制备出负载重组人骨形态发生蛋2的纳米微球,且微球细胞毒性检测合格,为进一步的骨组织工程研究提供理论实验基础。     

Estrogen-induced efflux of endogenous catecholamines from the hypothalamus in vitro

Short-term organ cultures of the intact hypothalamus were used to study the effects of various estrogenic compounds on catecholamine release. Estradiol-17 beta (0.1--20 microM) produced a concentration-dependent efflux of norepinephrine and dopamine while its biologically inactive enantiomer, estradiol-17 alpha, was ineffective at concentrations up to 20 microM. Diethylstilbestrol, a potent non-steroidal estrogen, was as effective as estradiol-17 beta in inducing catecholamine efflux. In contrast, weakly or non-estrogenic steroids such as estrone, estriol, and corticosterone were without effect. The time course of the estrogen-induced efflux of hypothalamic catecholamines was similar to that previously reported for the estrogen-induced accumulation of hypothalamic cAMP, providing further evidence for the involvement of catecholamines in this effect. Theses results suggest that estrogen may facilitate the release of catecholamines within the hypothalamus.