肺泡巨噬细胞活化在急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤中的作用

目的　探讨肺泡巨噬细胞活化在急性坏死性胰腺炎 (ANP)肺损伤中的作用。　方法30只成年SD大鼠随机分为正常对照组、ANP后 1、3、6、12h组 ,每组 6只。逆行性胰胆管注射 3%牛磺酸钠建立ANP大鼠模型 ,正常对照组大鼠自胆胰管内逆行注入生理盐水。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞 ,检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶 (MPO)水平、肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNFα)及一氧化氮 (NO)水平。以反转录聚合酶链反应 (RT PCR)法测定肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达情况。行肺、胰腺组织病理学检查并评分。结果　ANP大鼠肺损伤随着病情进展而逐渐加重 ;肺组织MPO及支气管肺泡灌洗液中蛋白含量逐渐升高 ,12h达最高值 ,分别为 (10 78± 0 5 8)U/g和 (2 0 11 0± 10 5 5 ) μg/ml;肺泡巨噬细胞分泌TNFα、NO水平逐渐升高 ,至 6h达到高峰 ,分别为 (16 2 4 2± 149 2 )pg/ml和 (88 8± 6 5 ) μmol/L ,12h又回落。ANP发生后 ,肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、iNOSmRNA的表达情况与TNFα、NO的变化趋势相似。ANP大鼠各组指标与正常对照组相比差异均有显著性意义 (P <0 0 5 )。组织学评分结果表明 ,随着胰腺损伤的加重肺损伤也逐渐加重。肺泡巨噬细胞TNFαmRNA、iNOSmRNA     

S-腺苷甲硫氨酸对大鼠重症急性胰腺炎的保护作用

目的：探讨S-腺苷甲硫氨酸（SAM）对大鼠重症急性胰腺炎（SAP）的保护作用及机制。方法：采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备SAP大鼠模型,将雄性SD大鼠40只,随机分为4组,假手术组（SO组）、急性胰腺炎组（SAP组）、SAM低剂量治疗组（LSAM组）、SAM高剂量治疗组（HSAM组）,每组10只。LSAM组和HSAM组大鼠造模前2 h分别腹腔内注射100mg/kg及200mg/kg SAM,其余各组注射等量生理盐水。造模后6h开腹下腔静脉取血,采用全自动生化分析仪检测各组血清淀粉酶水平,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的浓度;取大鼠胰腺组织送病理检查,常规HE染色,胰腺病理组织评分采用Schmidt法。结果：与SO组比较,SAP组、LSAM组和HSAM组胰腺病理组织评分及血清淀粉酶、TNF-αI、L-6水平均升高（P〈0.01）;干预性使用SAM后,胰腺病理组织评分及血清淀粉酶、TNF-αI、L-6水平均较SAP组降低（P〈0.01）。HSAM组血清淀粉酶、TNF-α水平低于LSAM组（P〈0.05）,胰腺组织病理评分及血清IL-6水平与LSAM组比较差异无统计学意义。结论：外源性补充SAM能降低炎性因子的表达,对重症急性胰腺炎具有保护作用。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响

目的:观察白藜芦醇(Res)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞功能的影响。方法:36只大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎模型组(SAP)和白藜芦醇治疗组3组。制模后6h行肺、胰腺组织病程学检查。经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,检测支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)及一氧化氮(NO)水平。以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺泡巨噬细胞TNF-αmRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况。结果:Res处理组6h肺支气管肺泡灌洗液中蛋白含量为(844.7±198.2)μg/mL,显著低于SAP组(P<0.05);Res处理组肺泡巨噬细胞分泌TNF-α和NO水平分别为(544.7±98.4)pg/mL和(31.7±9.8)μmol/L,显著低于SAP组(P<0.05)。Res组肺泡巨噬细胞TNF-αmRNA、iNOSmRNA的表达相对强度,亦显著低于SAP组。SAP大鼠各组指标与假手术组相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:Res能显著减轻SAP时肺和胰腺组织损伤,其机制与抑制巨噬细胞功能,抑制TNF-α和iNOSmRNA表达有关。     

FasL在重症急性胰腺炎肺泡巨噬细胞凋亡机理中的作用

目的 探讨FasL在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肺泡巨噬细胞（AM）凋亡机理中的作用。方法 SD大鼠按数字表法随机分为对照组、SAP组及氯化钆（GdCl3）组3组,每组16只。SAP模型制成6 h后,经支气管肺泡灌洗获取AM。取右肺下叶行HE染色检查,透射电镜观察和双染色法检测AM凋亡情况,用蛋白免疫印迹法（Western blot法）检测各组AM中FasL蛋白表达水平。结果 GdCl3组电镜下可见AM典型凋亡形态学特征,AM凋亡率为 （22.48±1.44） %,明显高于对照组 〔（11.28±1.01）%〕 及SAP组 〔（6.86±1.35）%〕 , 其差异有统计学意义 （P＜0.05）;GdCl3组FasL蛋白相对表达量为（1.230±0.041）%,较对照组 〔（0.936±0.024）%〕 和SAP组〔（0.704±0.011）%〕 明显增高 （P＜0.05）。AM 凋亡率与AM中FasL蛋白表达水平呈线性正相关关系（R2=0.766,P＜0.01）。结论 GdCl3可能通过激活FasL蛋白表达诱导SAP大鼠AM发生凋亡。     

大鼠重症急性胰腺炎时IL-6、TNF-α变化及小剂量多巴胺干预作用的实验研究

目的探讨大鼠重症急性胰腺炎时IL-6、TNF-α的变化及小剂量多巴胺对重症急性胰腺炎（SAP）的治疗作用。方法将Wistar60只大鼠随机分为三组,假手术组、SAP组和多巴胺组。假手术组（n=20）开腹后仅轻揉胰腺及十二指肠,其余两组向大鼠胰管注射牛磺胆酸钠建立SAP动物模型,多巴胺治疗组（n=20）静脉给予多巴胺（5ug·kg^-1·min^-1）,SAP组（n=20）静脉给予生理盐水。分别于实验前和实验后2、4、6、12h经颈静脉取血,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子仅（TNF-α）水平,术后12h处死大鼠,取胰腺组织行病理检查。结果实验前假手术组、SAP组、多巴胺组的血清IL-6和TNF-α水平差异无显著性（t=0．64～1．38,P〉0．05）。术后IL-6、TNF-α水平均升高,差异有显著性（t=3．12～69．46,P〈0．01）;多巴胺组血清IL-6、TNF-α水平较SAP组低,差异有显著性（t=6．23～32,32,P〈0．01）。胰腺病理组织学评分多巴胺组明显低于SAP组,差异有显著性（t=3．92～9．94,P〈0．01）。结论SAP时机体血IL-6、TNF-α水平明显升高是加重SAP病情的损伤性因子,而小剂量多巴胺干预可降低上述炎症介质水平,从而减轻胰腺病理损害,为阻断SAP病情发展的有效药物之一,其机制可能与小剂量多巴胺能增加胰腺血流量和降低胰腺微血管通透性有关。     

腹膜透析对重症急性胰腺炎的治疗作用

目的 探讨腹膜透析对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的治疗效果.方法 将29例SAP病人随机分成腹膜透析组(PD组,n=17)和非腹膜透析组(N组,n=12).N组入院后予常规综合治疗,PD组在常规综合治疗基础上立即行腹膜透析.观察2组病人的腹痛缓解时间、血、尿淀粉酶及白细胞恢复至正常的时间、平均住院时间、并发症发生率及治愈率.用放免法测定两组病人入院时和术后1,3,7,M d血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)水平,以APACHEⅡ评分衡量病情变化.结果 PD组APACHEⅡ评分在术后1 d即显著下降,术后第3天起显著低于N组.PD组各观察指标值较对照组降低.治疗前两组病人的血清TNF-α,IL-10和IL-10/TNF-α比值比较差异无显著性;术后PD组各时点的IL-10水平和IL-10/TNF-α比值都比N组高(P<0.01),TNF-α水平比N组低(P<0.01).结论 腹膜透析治疗SAP安全有效、恢复快、并发症少,能降低SAP病人体内TNF-α水平,升高IL-10水平及IL-10/TNF-α比值,促使促抗炎细胞因子失衡得到纠正.     

大黄丹参对实验性重症急性胰腺炎大鼠肝胰组织TNF-a mRNA和IL-10 mRNA表达的影响

目的:观察中药大黄丹参治疗重症急性胰腺炎大鼠肝胰组织TNF-α mRNA和IL-10 mRNA表达的影响 .方法:SD大鼠30只,随机平均分成假手术组、重症急性胰腺炎对照组及大黄丹参治疗组.造模后6 h后用荧光PCR方法测定各组大鼠肝脏及胰腺组织TNF-α mRNA和IL-10 mRNA.结果:肝脏组织中,重症急性胰腺炎组大鼠TNF-α mRNA和IL-10 mRNA的表达均较假手术组有明显升高(P<0.05);中药治疗后TNF-α mRNA的表达下降(P<0.05),IL-10 mRNA的表达升高(P<0.05).胰腺组织中,重症急性胰腺炎组TNF-α mRNA和IL-10 mRNA表达同样升高(P<0.05),中药治疗后TNF-α mRNA的表达降低(P<0.05),但IL-10 mRNA表达与急性胰腺炎组比较无统计学差异.结论:SAP大鼠在肝脏和胰腺组织中,TNF-α mRNA和IL-10 mRNA均有明显升高,两者呈同一化的进程.大黄丹参治疗能够使肝胰组织的TNF-α mRNA表达下降,使肝IL-10 mRNA升高,显示了中药的调节作用.     

中药腹腔灌洗对急性出血坏死性胰腺炎大鼠血和腹水中细胞因子水平的影响及其对胰腺的保护作用

目的 探讨白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子a (TNF-a）在急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）发病中的作用,观察各种腹腔灌洗液对AHNP的治疗效果。方法 将160只大鼠随机分成：假手术组、对照组、抗生素灌洗组和中药灌洗组。采用5%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠AHNP模型,并于模型制成后24h、48h、72h取血液、腹水、胰腺组织,测定血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平,作胰腺病理检查。结果 对照组大鼠血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平较假手术组明显增高,并随病情加重而升高,胰腺组织学改变进行性加重。经腹腔灌洗治疗后各组上述指标水平有所降低,胰腺病理损害减轻,以中药腹腔灌洗组改善最为明显。结论 IL-6、IL-8、TNF-a参与AHNP发病机理,检测上述指标有助于对AHNP病情轻重程度的评估。中药腹腔灌洗能够更好地降低血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平,减轻胰腺组织的损害。中药腹腔灌洗治疗AHNP方法简单、安全、有效。     

干扰素α对重症急性胰腺炎治疗作用的实验研究

目的　探讨干扰素α(interferon α,IFN α)对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis ,SAP)的治疗作用及机理。　方法　雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、IFN α治疗组和生理盐水对照组 ,每组 10只。胰管内逆行注射 5 %牛磺胆酸钠建立SAP模型。治疗组大鼠 ,自制模后 0 5h开始每小时皮下注射IFN α 5× 10 5U/kg。按随机原则在制模后 4h和 12h分批处死动物 ,观察胰腺、肺和肾病变 ,测腹水量、血和腹水淀粉酶活性 (碘比色法 )、血肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素 10 (IL 10 )浓度 (ELISA法 )。　结果　IFN α组胰腺、肺和肾病变程度减轻。血和腹水淀粉酶活性显著降低。血TNF α显著降低 ,IL 10升高。　结论　IFN α可有效减轻重症急性胰腺炎局部病变和器官损害程度 ,疗效与其对细胞因子的调控有关     

中药胰必清对急性出血坏死性胰腺炎急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞的作用

目的 观察TLR4、核转录因子(NF)-κB在急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠肺泡巨嗜细胞的表达及应用胰必清(YBQ)治疗前后的变化.方法 72只SD大鼠平均随机分为3组:A组(假手术对照组)、B组(AHNP)及C组(AHNP+YBQ),开腹胰胆管注入5%牛磺胆酸钠法建立大鼠AHNP模型,分别于术后3、6、12、24 h处死大鼠,逆转录·聚合酶链反应(RT-PCR)法、免疫荧光共聚焦法分别检测支气管灌洗液肺泡巨噬细胞中TLR4 mRNA、NF-KB表达水平的变化,肺组织病理检查行病理学评分.结果 C组肺泡巨噬细胞3、6、12、24 h TLR4 mRNA表达水平结果为0.54、0.65、0.65、0.54,NF.KB免疫荧光检测结果为49.54、68.67、74.27、59.23,与肺组织的病理学评分相一致,随时间的延长而逐渐升高,6～12 h左右达高峰,与时间明显相关,与B组比较明显降低,差异有统计学意义(P《0.05).结论 中药胰必清能通过调节肺泡巨噬细胞中TLR4的基因表达,进一步调节NF-KB的活化来改善AHNP-ALI.     

肿瘤坏死因子-α对大鼠坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的　探讨肺内肿瘤坏死因子 α(TNF α)在大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)所致肺损伤中的作用。方法　将大鼠分为正常对照、ANP和TNF α抗体预处理 3组 ,后两组又分为 1、3、6、12h 4组 ,每组 6只。胰胆管注入 3 %牛磺酸钠诱发ANP。肺灌洗获得巨噬细胞 ,培养后检测TNF α水平、肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量 ,取肺组织测髓过氧化物酶 (MPO)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测巨噬细胞TNF αmRNA表达。结果　ANP和TNF α抗体预处理组各指标均较正常对照升高 (P <0 .0 5 )。TNF α水平与MPO及BALF蛋白含量呈正相关 (P <0 .0 1) ,TNF αmRNA的表达及TNF α水平与肺损害程度呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　肺泡巨噬细胞TNF α的过表达与ANP大鼠所致肺损伤有密切关系。     

Cytokine storm in acute pancreatitis

Efforts to unravel the events in the evolution of tissue damage in acute pancreatitis have shown a number of inflammatory mediators to be involved. The pathways of damage are similar, whatever the etiology of pancreatitis, with three phases of progression: local acinar injury, systemic response, and generalized sepsis. The proinflammatory response is countered by an anti-inflammatory response, and an imbalance between these two systems leads to localized tissue destruction and distant organ damage. Cytokines lie at the heart of the problem and are involved in all aspects of the cascade leading to systemic inflammatory response syndrome and multiple organ dysfunction syndrome. This review discusses the present knowledge about the role of various mediators in this process, their genetic control, and the effects of their modulation. The major proinflammatory mediators are tumor necrosis factor, interleukins 1, 6, and 8, platelet activation factor, and the chemokines. The major anti-inflammatory factors include interleukin 10, and interleukin 1 receptor antagonist. Emerging knowledge of new mediators as well as future strategy of damage control is discussed. Received: February 19, 2002 / Accepted: March 8, 2002 Offprint requests to: A.N. Kingsnorth     

吡咯烷二硫氨基甲酸酯对大鼠重症急性胰腺炎的影响

目的　探讨核转录因子 (NF κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯 (PDTC)对大鼠重症急性胰腺炎 (SAP)的影响。方法　将 3 6只Wistar大鼠随机分组 :假手术组 (n =6) ,假手术 静脉注射组 (n =6) ,SAP组 (n =12 )和试验组 (n =12 )。各组于造模 6h后 ,测定血清淀粉酶及脂肪酶含量 ,取胰腺组织进行病理学评分 ,采用免疫组织化学法检测NF κB激活水平及胰腺细胞凋亡情况。结果　SAP组和试验组的胰腺细胞内NF κB呈激活状态 ,存在胰腺细胞凋亡 ,与前两组差异有显著性 (P <0 .0 1) ,试验组大鼠的胰腺组织病理学评分、血清淀粉酶及脂肪酶含量、NF κB激活及细胞凋亡水平与SAP组差异存在显著性 (P <0 .0 5 )。结论　在SAP发病机制中 ,NF κB是多种炎症介质的始动因子 ,PDTC可以有效抑制胰腺细胞中NF κB的激活 ,促进胰腺细胞凋亡 ,减少胰酶释放 ,减轻胰腺组织的病理损害。     

重症急性胰腺炎腹水对正常肾细胞影响

目的通过观察重症急性胰腺炎(SAP)腹水对正常肾细胞影响,探讨SAP时急性肾功能损伤的机制。方法SD大鼠54只分成SAP组(n=30)和假手术组(n=24),SAP组以5%牛磺酸胆酸钠溶液胆管逆行注射诱导模型,术后6h、12h、24h采集血清、腹水。ELISA法检测血清、腹水TNFα水平,RT PCR检测肾细胞TNFαmRNA表达。将24h采集的血清和腹水处理体外培养NRK细胞,MTT法检测细胞活性,流式细胞术测定NRK细胞凋亡率。结果SAP组6h、12h、24h血清和腹水TNFα水平渐进性升高,各时间段差异显著(P<0.05)且较假手术后明显升高(P<0.01)。SAP组大鼠血清和腹水处理后NRK细胞活性均低于假手术组。SAP组大鼠腹水和血清处理24h后,NRK细胞培养液中TNFα水平较假手术组明显升高(P<0.01);NRK细胞TNFαmRNA表达上调,显著高于假手术组;凋亡率分别为29.67%±4.12%和59.95%±2.11%,假手术组大鼠血清和腹水处理24h凋亡率分别为3.72±2.90%和4.11±3.30%,差异显著(P<0.01)。结论SAP时肾损伤可能与肾细胞过度凋亡有关,而肾细胞过度凋亡与血清和腹水TNFα升高及肾细胞过多分泌TNFα有关,SAP腹水对肾的直接损伤可能比血清明显。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎早期大鼠肠黏膜机械屏障的影响及其意义

目的:观察大黄附子汤(DHFZT)对早期重症急性胰腺炎肠黏膜机械屏障的影响。方法:24只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组：假手术(SH)组、假手术-DHFZT(SH-DHFZT)组、重症急性胰腺炎(SAP)组、DHFZT治疗(SAP-DHFZT)组,每组6只。SH组、SH-DHFZT组大鼠开腹后,翻动胰腺数次后关腹...     

外源性脂多糖在大鼠急性胰腺炎中的作用

目的　观察外源脂多糖(LPS)在水肿性胰腺炎(AEP)重症化的作用及其对核因子(NF) κB激活的水平的影响。方法　用LPS(10mg/kg体重)对AEP大鼠进行干预,并与未干预AEP大鼠和正常大鼠进行比较。在复模后分别于12、2 4、3 6、72h用流式细胞术(FCM )检测了NF κB激活的水平。同时进行胰腺病理分级。结果　LPS干预组中的NF κB激活的水平在各个时间段均有所增高(P <0 .0 5 )。LPS加剧了组织炎性浸润程度,使AEP大鼠发生重症化。结论　NF κB的活化作为始动因子激活一系列的炎症介质,引起胰腺组织快速的炎症反应。LPS可以作为研究AEP重症化的预处理剂     

氯膦酸二钠脂质体对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的影响及与Akt、MAPK（ERK1/2）通路的关系

目的:探讨氯膦酸二钠脂质体(LC)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的影响及与Akt、MAPK(ERK1/2)通路的关系。方法:将48只SD大鼠随机均分为假手术组、SAP模型组(模型组)、SAP模型+LC处理组(LC组),后两组采用膜下注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型,并分别于造模后尾静脉注射空白脂质体与LC。各组分别于术后2、6h后检测血清淀粉酶(AMS)、IL-6、TNF-α的含量,观察肺组织病理学变化,及肺组织中Akt和MAPK(ERK1/2)的表达。结果:与假手术组比较,模型组与LC组血清AMS、IL-6及TNF-α含量、肺组织病理学评分,肺组织Akt和MAPK(ERK1/2)表达水平均明显升高,且均随时间延长而更加明显(均P0.05),但LC组的上述指标在各时间点上均明显低于模型组(均P0.05)。结论:LC有减轻大鼠SAP肺损伤的作用,机制可能与肺泡巨噬细胞吞噬LC后,Akt和MAPK(ERK1/2)信号通路抑制,从而减少炎症细胞因子的释放有关。     

中性粒细胞对大鼠急性重症胰腺炎胰腺腺泡凋亡的作用

目的探讨中性粒细胞在大鼠急性重症胰腺炎时对胰腺的病理损害及对胰腺腺泡凋亡的作用。方法氨甲蝶呤（MTX）腹腔注射制成大鼠低中性粒细胞模型，然后以脱氧胆酸胰胆管注射诱发急性重症胰腺炎，造模后0、3、6、9、24、48、72h随机分批处死动物，按各时间点检测胰腺组织髓过氧化物酶活性（MPO），血清淀粉酶，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的DUPT末端标记染色（TUNEL）和电镜技术检测胰腺腺泡凋亡情况，胰腺组织的病理学检查。结果实验组MPO在造模24h开始明显低于对照组（P〈0．01），胰腺组织的病理损害程度也较对照组轻。两组胰腺腺泡凋亡在造模3和6h均仅出现少量凋亡，在24和48h显著增多，以后逐渐下降；实验组胰腺腺泡凋亡指数明显高于对照组胰腺腺泡凋亡指数（P〈0．01）。结论适当地降低外周血的中性粒细胞水平能够增加胰腺腺泡凋亡，从而减轻急性重症胰腺炎时胰腺的病理损害程度。