人类流感病毒的多重RT-PCR方法分析

目的对人类流感病毒的多重RT-PCR方法的应用进行分析探讨。方法对40份疑似swineH1N1的临床标本采用多重RT-PCR方法进行检测,将检测结果进行统计分析,同时对该方法的特异性以及敏感性进行了评价。结果多重RT-PCR方法能够同时分析A型流感病毒M基因203bp、B型流感病毒M基因296bp。特异性实验表明多重RT-PCR法没有检测出存在非特异扩增的PCR产物,并且该方法在40份标本中检测出新甲型H1N1阳性标本4份（10.0%）,季节性H1N1亚型2份（5.0%）,H3N2亚型12份（30.0%）。结论多重RT-PCR方法具有快速、敏感性强、特异性强等优势,值得推广。     

郴州市2006～2008年流行性感冒病原学监测结果分析

目的了解郴州市2006～2008年流感流行状况及流感毒株的型别分布,分析其流行趋势,为流感防制提供科学依据。方法采集流感样病例（ILI）的咽拭子标本,用传代狗肾细胞（MDCK）进行病毒分离,采用血凝抑制实验（HI）进行流感病毒型别鉴定。结果3年全市4家哨点医院三年共采3124份ILI咽拭子标本,分离到毒株383株。分离阳性率为10．82％,经国家流感中心最后复核鉴定的结果为：H1N1亚型76株,H3N2亚型181株,B型105株,未分型21株;流感及IU暴发疫情病例咽拭子标本78份,分离到流感病毒39株,分离阳性率为50．00％,分型鉴定结果为：H1N1亚型2株,H3N2亚型5株,B型32株。结论郴州市流感监测地区2006-2008年均有流感活动,2006年。HIN1亚型为优势株,2007年H3N2亚型为优势株,2008年,HIN1亚型和H3N2亚型为优势株。而暴发疫情则主要由B型流感病毒引起。     

2006～2007年泰安市流感病毒检测结果分析

目的对2006—2007年度泰安市流行性感冒的病原学监测结果进行分析，了解泰安市流感流行情况，为流感防治提供科学依据。方法采集流感样病例（ILI）的咽拭子标本，用狗肾细胞（MDCK）进行病毒分离，采用血凝抑制方法（HAI）进行流感病毒型别鉴定。结果检测的国家级流感监测医院ILI咽拭子标本243份，分离到流感病毒25株，阳性分离率为10．29％，经分型鉴定A（H3N2）亚型14株，A（H1N1）亚型1株，B型Victoria系10株；结论2006～2007年度泰安市有流感流行，流行的优势毒株为A（H3N2）亚型和B型Victoria系，同时有A（H1N1）亚型毒株的存在，B型Victoria系主要在幼儿中流行。     

成人急性下呼吸道感染中病毒感染情况分析

目的探讨成人急性下呼吸道感染中病毒感染的病原学特征及流行病学特点。方法采集2011年7月～2012年6月202例急性下呼吸道感染患者的咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的8种（14个亚型）呼吸道病毒。结果202例患者检出44株病毒,阳性率21．8％,其中检出病毒流感A型26例,流感病毒B型8例．人冠状病毒5例,呼吸道合胞病毒3例,鼻病毒2例。病毒感染者中临床诊断急性气管一支气管炎18例。社区获得性肺炎12例,慢性阻塞性肺疾病急性加重期5例,支气管哮喘急性发作5例。结论哈尔滨地区下呼吸道病毒感染以流感A型（H3）、流感B型及人冠状病毒感染为主,2～4月发病率高。     

广西2004～2007年流行性感冒监测分析

目的了解广西流感的流行病学特征,评价流感监测工作方法并为流感防治提供科学依据。方法对广西2004～2007年哨点医院流感样病例监测数据、流感样病例暴发疫情监测数据、实验室病原学监测数据进行分析。结果2004～2005年度监测医院流感样病例每周平均为291．72例,就诊百分比为18．39％;2005～2006年度监测医院流感样病例每周平均为158．59例,就诊百分比为8．16％,2006—2007年度监测医院流感样病例每周平均为213．45例,就诊百分比为9．21％。2004～2005年度检测流感样病例标本280份,分离出15株毒株,阳性率5．36％,其中H1N1亚型13株（86．67％）,H3N2亚型2株（13．33％）;2005～2006年度检测流感样病例标本3115份,分离出381株毒株,阳性率12．23％,其中H1N1亚型40株（10．50％）,H3N2亚型115株（30．18％）,B型为226株（59．32％）。2006～2007年度检测流感样病例标本2815份,分离出213株毒株,阳性率7．57％,其中HIN1亚型150株（70．41％0,H3N2亚型7株（3．3％）,B型56株（26-29％）。结论流感监测工作应重点关注新型流感毒株的出现,同时加强学校暴发监测。敏感的新型综合性监测方法与手段有待探索。     

河池市2010年流感病原学监测结果分析

目的 对河池市2010年流感病毒进行病原学监测,及时了解河池市流感病毒优势株的变化,分析预测流感流行的趋势和特点,为流感防治提供科学依据.方法 采集监测哨点医院、流感疫情常规监测流感样病例的咽拭子标本,先用real-time PCR法完成流感病毒核酸检测,病毒核酸阳性标本再用MDCK细胞进行病毒分离.结果 2010年共检测标本490份,流感病毒核酸阳性75份,检出率为15.31%;其中B型60份,季节性流感H3亚型3份,甲型H1N1流感12份;75份病毒核酸阳性标本经MDCK细胞培养后,有2份阳性,阳性率为2.67%,其中甲型H1N1流感1株,B型(Yamagata系)1株.结论 2010年河池市有甲型H1N1流感、B型流感及季节性流感H3亚型流感病毒共同流行,流行特点是春季、夏季两个高发季节,流行优势株为甲型H1N1流感和B型流感病毒,1月以甲型H1N1流感病毒为流行优势株,4～7月以B型流感病毒为流行优势株,8月份后则各型流感病毒活动明显减弱.     

568份疑似甲型H1N1流感病例标本病原学检测结果分析

目的对河池市568份疑似甲型H1N1流感病例标本进行核酸检测,为甲型H1N1流感疫情的防控提供依据。方法对疑似甲型H1N1流感病例标本用实时荧光定量RT-PCR法（Real-time RT-PCR）检测,检测项目为A型流感病毒核酸、B型流感病毒核酸和甲型H1N1流感病毒核酸,对A型流感病毒核酸阳性而B型流感病毒核酸和甲型H1N1流感病毒核酸均阴性标本再进行季节性流感病毒H1N1、H3N2亚型流感病毒核酸检测。结果检测疑似病例标本568份,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性334份,季节性流感病毒H1N1亚型核酸阳性14份,季节性流感病毒H3N2亚型核酸阳性25份,A未分型流感病毒核酸阳性40份。结论实验室检测为甲型H1N1流感疫情的确认、防控以及病人的处理提供了依据,对提高实验室检测技术的敏感性、特异性和实效性具有重要的意义。     

深圳市福田区2007年流感监测结果分析

目的分析深圳市福田区2007年流感流行特征。方法对深圳市福田区人民医院流感样病例进行监测，并对部分流感样病人采集咽拭子进行流感病毒分离和型别鉴定。结果2007年全年共监测样品273份，分离出流感病毒62株，阳性率22．8％，其中H1N1亚型2株，H3N2亚型41株，B（Victoria）亚型13株，B（Yamagata）亚型6株。结论2007年深圳市福田区流感流行情况较为平稳，流行优势株为H3N2亚型，与全市流行株型相同。     

江西省2004-2005年流感病原学监测结果分析

目的 对流感病毒进行病原学监测，进一步了解流感病毒的变异特点，探索流感流行的规律。方法 采集国家级监测哨点医院流感样病人的鼻咽拭子标本，用MDCK细胞分离流感病毒。结果 2004年共采集标本551份，分离出流感病毒65株，分离率11．81％，其中H3N2亚型53株；B型（Yamagata系）12株。2005年共采集标本926份，分离出流感病毒140株，分离率15．12％，其中H1N1亚型36株；H3N2亚型85株；B型（Yamagata系）28株。结论 2004年江西省有H3N2亚型和B型（Yamagata系）流感病毒流行，H3N2亚型流感病毒为流行优势株。2005年江西省有H3N2亚型、H1N1亚型和B型（Yamagata系）流感病毒流行，虽然于3月出现HlNl亚型流感病毒，但H3N2亚型流感病毒仍然为全年的流行优势株。     

2005年湛江市流感病原学和血清学监测结果分析

目的了解湛江市2005年流感病原学变化的特点和人群流感抗体水平,为制订防控措施提供依据. 方法采用MDCK细胞进行病毒分离方法和采用微量半加敏红细胞抑制试验对湛江市流感监测哨点医院和局部爆发疫点流感样病例的咽拭子与于3月和10月按0～、5～、15～、25～、60岁以上5个年龄组分层随机抽取普通人群和于1月份抽取禽类和猪类的饲养、屠宰、销售行业人员进行采集的血清标本进行培养和检测. 结果全年共检测437份流感样病例标本,分离出流感病毒42株,其中A（H1N1）亚型占总病毒株的7.14%, A（H3N2）亚型占 50.00%,B型占 42.86%;一般人群血清A（H3N2）型抗体阳性率较高（ 68.00%～79.05%）,B型抗体阳性率较低（1.00%～6.00%）;职业暴露人群检测H5N1抗体,全部为阴性. 结论 2005年湛江市流感流行优势毒株为H3N2和B型,人群H3N2型血清抗体水平较高.     

儿童与成人呼吸道病原体九联检结果对比分析

目的了解呼吸道感染儿童与成人非细菌性感染病原体情况,为临床合理选用抗微生物治疗药物提供依据。方法采集静脉血4.0 ml,离心分离血清,采用间接免疫荧光法（IFA）检查嗜肺军团菌血清1型（LP）;肺炎支原体（MP）、Q热立克次体（CB）;肺炎衣原体（CP）;腺病毒（ADV）;呼吸道合胞病毒（RSV）;甲型流感病毒（Influenza A virus）;乙型流感病毒（Influenza B virus）;副流感病毒1、2、3型（HPIVs1、2、3）病原体Ig M抗体,分析该院2013年1~12月1 650例儿童患者与2 656例成人患者呼吸道感染病原体Ig M抗体检出情况。结果 1 650例儿童患者Ig M抗体阳性775份,其Ig M抗体阳性检出率为46.97%,2 656例成人患者Ig M抗体阳性835份,其Ig M抗体阳性检出率为31.44%;儿童患者同时检出两种Ig M抗体296份,三种54份,两种及以上病原体抗体检出率45.16%。成人患者同时检出两种Ig M抗体162份,三种16份,两种及以上病原体抗体检出率21.32%,儿童与成人均未检出三种以上Ig M抗体;儿童乙型流感病毒Ig M抗体占第一位,成人肺炎支原体Ig M抗体占第一位,嗜肺军团菌血清1型、腺病毒、甲型流感病毒Ig M抗体以成人为主,儿童检出率低。结论呼吸道病原体九联检结果儿童与成人有差异,临床应根据检测结果合理选用抗微生物治疗药物。     

乌鲁木齐市2011年呼吸道感染患儿病原检测分析

目的了解2011年乌鲁木齐地区小儿呼吸道感染中,肺炎支原体,沙眼衣原体,呼吸道合胞病毒,腺病毒,甲型流感病毒,乙型流感病毒,副流感病毒1、2和3型,Q热立克次体,嗜肺军团菌的感染情况。方法对2011年1月～12月在新疆自治区人民医院门诊、病房诊断为呼吸道感染的患儿1 026例,采用间接免疫荧光法,测定患儿血清中上述9种病原特异性IgM抗体。采用EXECL2003和SPSS13.0软件,分析9种病原体感染在小儿呼吸道感染者中的年龄、性别、民族等方面的分布情况以及感染发生的季节特点。结果1 026例呼吸道感染患儿中,九种病原特异性IgM抗体总阳性率为39.5%（405/1 026）,肺炎支原体为31.0%（318/1 026）,沙眼衣原体为0.2%（2/1 026）,呼吸道合胞病毒为4.7%（48/1 026）,腺病毒为1.4%（14/1 026）,甲型流感病毒为0.3%（3/1 026）,乙型流感病毒为2.6%（27/1 026）,副流感病毒1型、2型和3型为4.5%（46/1 026）,Q热立克次体为0.0%（/1 026）,嗜肺军团菌为4.2%（43/1 026）。肺炎支原体IgM抗体阳性率明显高于其它病原体（χ2=1 527.967,P〈0.01）。9种病原总检出率秋冬季高于春夏季（χ2=12.184,P〈0.01）。3岁以上儿童组肺炎支原体检出率明显高于其它年龄组（χ2=57.923,P〈0.01）。结论乌鲁木齐地区小儿呼吸道感染者中,肺炎支原体感染达31.0%,尤其以3岁以上儿童多见;其次为呼吸道合胞病毒感染占4.7%,而副流感病毒1、2、3型感染率为4.5%。呼吸道感染患儿中九种病原体检出率秋冬季高于春夏季。     

0～2岁婴幼儿呼吸道病毒监测及临床特征分析

目的 了解绍兴市妇幼保健院0～2岁婴幼儿急性呼吸道感染病毒病原学构成及临床特征,为临床诊疗提供参考。方法 2011年10月—2013年9月绍兴市妇幼保健院住院的呼吸道感染患儿共3677例。采集每例患儿鼻咽吸取物1份,用荧光免疫方法进行病毒检测,包括呼吸道合胞病毒、流感病毒A和流感病毒B、副流感病毒1、2、3、腺病毒。结果 总的病毒阳性检出率25.40%。检出率较高的前3位病毒分别为呼吸道合胞病毒55.03%（514/934）,其流行月份在1～2月和11～12月;副流感病毒3,占17.24%（161/934）,其流行月份在5～8月;流感病毒A,占10.06%（94/934）,其流行月份在3～5月。0～3月患儿主要感染呼吸道合胞病毒（22.84%）,1～2岁患儿流感病毒A感染（3.82%）及腺病毒感染（3.73%）也较常见。呼吸道合胞病毒主要引起肺炎及毛细支气管炎,临床表现以咳嗽、气喘为主;流感病毒A、腺病毒主要引起上呼吸道感染,临床表现以发热为主。结论 病毒是0～2岁婴幼儿急性呼吸道感染的主要病原,以呼吸道合胞病毒、副流感病毒3较为多见,其感染存在季节性特征,临床特征有差异,在临床诊疗时应加以注意。     

呼吸道病毒特异性IgM抗体检测在儿童ALRI诊断中的临床应用价值

目的：探讨本地区急性下呼吸道感染（ALRI）的流行病学特点,并研究呼吸道病毒特异性免疫球蛋M（IgM）抗体检测在儿童ALRI诊断中的临床应用价值。方法：选择我院646例儿童ALRI为研究对象,回顾性分析呼吸道病毒特异性IgM抗体的检测情况。结果：646例ALRI患儿腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、柯萨奇病毒（CBV）、甲型流感病毒（IFVA）、乙型流感病毒（IFVB）及副流感病毒1,2,3型（PIV1、PIV2、PIV3）检测单一病毒感染率46.0%,复合感染率11.8%,其中以RSV 20.0%、ADV 10.1%、PIV 38.8%、IFVA 8.5%感染率较高;4种主要病毒IgM抗体检测阳性率年龄分布以6个月～1岁（81.3%）、1～3岁（45.7%）较高;季节分布RSV、IFVA、PIV3以冬春季高发;在不同临床诊断中ADV引起的支气管炎较为多见,IFVA、PIV3以支气管炎、支气管肺炎多见。结论：呼吸道病毒特异性IgM抗体检测在儿童ALRI诊断中有重要的临床应用价值。     

人类博卡病毒致成人急性呼吸道感染的临床研究

目的：探讨人类博卡病毒（HBoV）致成人急性呼吸道感染（ARI）的临床特征,分析成人病毒性肺炎与HBoV感染的相关性。方法收集2013年5月至2014年1月在北京中医药大学东方医院感染科发热门诊就诊的81例ARI患者的鼻咽拭子,应用多重RT-PCR及PCR技术进行HBoV、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、鼻病毒（RhV）、流感病毒（Flu）、副流感病毒（PIV）、人类偏肺病毒（hMPV）、人冠状病毒（HCoV）、肠道病毒等9种病毒及肺炎支原体、肺炎衣原体的核酸检测,分析HBoV致成人ARI的临床特点。结果 HBoV阳性14例（17.3％）,其中10例（71.4%）为肺炎,4例（28.6%）为上呼吸道感染。 HBoV单独感染10例,混合感染4例。 HBoV感染者咳嗽10例（71.4%）,咳嗽伴喘憋1例（7.1%）,咯痰6例（42.9%）,发热14例（100.0%）,肺部闻及湿性啰音者4例（28.6%）。外周血白细胞正常或降低者11例（78.6%）,升高者3例（21.4%）。10例肺炎患者胸部X线片表现为斑片状模糊影9例,大片致密影1例。单侧肺炎7例,双侧肺炎3例,病变均位于中下肺叶。重症肺炎1例,为HBoV混合感染ADV及肺炎支原体。结论 HBoV是引起成人ARI的病原体之一,感染部位以下呼吸道为主。     

深圳市龙岗区2013年急性呼吸道感染病毒病原谱监测分析

目的了解深圳市龙岗区急性呼吸道感染病例的病原谱构成,为呼吸道传染病的诊断、预防与控制提供病原学依据。方法采用RT-PCR和细胞培养/鸡胚培养分离的方法,对384份ILI或暴发疫情咽拭子标本同时开展流感病毒、腺病毒、鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒和人偏肺病毒共7种15个亚型常见呼吸道病毒的检测。结果2013年深圳市龙岗区ILI的病毒阳性检出率为40.89%,A型流感病毒100株,占63.69%,为优势毒株,其它依次为HRV 21株,占13.38%,和B型流感病毒19株,占12.10%,上半年呼吸道病毒检出率显著高于下半年(χ2=5.01,P=0.03)。就其它呼吸道病毒而言,男性ILI标本检出率显著高于女性(χ2=6.24,P=0.01);随着年龄的递增,病毒阳性检出率呈递减趋势,且各年龄组其它呼吸道病毒检出率的差异有统计学意义(χ2=6.46,P=0.04)。结论流感病毒、鼻病毒是深圳市龙岗区急性呼吸道感染的主要致病原,且随年龄不同、流行季节不同而有一定的流行规律。     

新疆部分地区一般人群流行性感冒抗体水平监测分析

目的了解新疆南、北疆两地区不同人群的流行性感冒（流感）流行状况，为预防和控制疫情提供依据。方法2006年10月在南疆地区喀什市及北疆地区伊宁市共采集一般人群血清430份，应用新疆2005～2007年度流感监测所分离病毒作为抗原，以微量半致敏血凝抑制方法进行抗体检测。结果人群对H1N1及H3N2亚型毒株的抗体阳性率明显高于B（Yamagata）及B（Victoria），其中H1N1抗体阳性率为82．79％，H3N2抗体阳性率为86．74％，B（Yamagata）为55．81％，B（Victoria）为57．91％。且H1N1、H3N2、B（Yamagata）、B（Victoria）抗体阳性率及保护率在各年龄纽及地区间均有显著性差异。结论加强流感病毒抗原变异株和人群流感抗体水平的监测。     

呼吸道九联检IgM检测对儿童急性下呼吸道感染的早期诊断价值

目的 探讨昆明地区小儿急性下呼吸道感染（ALRI）主要病原体及其流行特点,分析本地区小儿ALRI病原体与年龄的相关性,同时,评价呼吸道九联检IgM检测对ALRI的早期诊断价值.方法 ALRI患儿625例,按年龄将患儿分为3组：～1岁（婴儿组）,～3岁（幼儿组）,＞3岁,～ 10岁（儿童组）.同时,健康儿童100例作为对照组.应用间接免疫荧光法（IFA）检测九项主要病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌（LP）、肺炎支原体（MP）、Q热立克次体（COX）、肺炎衣原体（CP）、腺病毒（ADV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）及副流感病毒1、2和3型（PIVS）.结果 625例ALRI患儿中,检出病原体感染345例,总检出率为55.2％.单一病原体感染132例,占阳性病例数的38.26％,以MP最多,其次为IFV、RSV和ADV,检出率依次为62.88％、27.27％、5.30％及4.55％;2种病原体混合感染148例,阳性检出率为69.48％;3种及以上混合感染65例,阳性检出率为30.52％.单一呼吸道病原体感染中,随着年龄增长,MP和IFB感染率呈上升趋势,而RSV和ADV感染率呈下降趋势,但3个年龄组间仅RSV差异有统计学意义（x^2=8.143,P=0.017）;而在2种/≥3种病原体混合感染中,随着年龄增长,感染率呈上升趋势,3个年龄组间差异有统计学意义（x^2=26.899,P＜ 0.001）/（x^2=6.138,P＜0.046）;而且,随着年龄增长,总的混合感染（2种及≥3种）趋势更明显,各组间差异统计学意义（x^2=30.930,P＜0.001）.结论 九项呼吸道病原体IgM抗体联合检测对明确昆明地区ALRI的病原体种类、流行病学特点、早期诊断和治疗很有帮助,具有经济、高效、便于操作和易于判读结果等优点。     

广州市某区2008年度流行性感冒的流行情况调查

目的了解广州市某区2008年度流感发病及抗原变异情况,为制定流感防治策略提供科学依据。方法利用流感监测点定期采集的流感样标本,以MDCK细胞分离病毒,并应用红细胞凝集抑制法进行型别鉴定,对流感的病原学以及流感疫情监测情况进行统计分析。结果全年共监测咽拭子763份,分离病毒株80株,其中A（H1N1）型37株,A（H3N2）14株,B（Victoria）23株,B（Yamagata）6株。15岁以下人群发病最多,占流感样病例的65．00％。全年发生流感疫情2起。春季以B（Victofia）为主,夏季以A（H1N1）为主。结论全年广州市某区流感发病呈散发,并以H1N1亚型为主,15岁以下人群为流感高危人群,流感发病高峰出现在3月份和7月份。