乌鸡白凤丸有效成分对帕金森病模型小鼠的神经保护作用

目的探讨乌鸡白凤丸有效成分（BFP）对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）诱致C57BL小鼠黑质神经元凋亡的保护作用及其可能机制。方法C57BL小鼠连续5d皮下注射MPTP（30mg／kg）制备帕金森病小鼠模型。给予BFP预处理后，用酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学法观察黑质神经元的变化；同时应用免疫组织化学法检测Bax蛋白表达; 应用高效液相-电化学方法检测纹状体（Str）多巴胺（DA）及其代谢产物二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的含量变化。结果BFP预处理能使黑质致密带（SNc）TH免疫阳性神经元数目较MPTP组明显增多，而Bax蛋白表达较MPTP组明显减少；可使Str区DA及其代谢产物DOPAC、HVA含量明显增加。结论BFP有效成分可以拮抗神经毒性物质MPTP对C57BL小鼠黑质多巴胺能神经元的损伤，其作用机制可能与其抗凋亡作用有关，Bax表达的降低可能是BFP抗凋亡作用的途径之一。     

CD14 mRNA、TLR4 mRNA在急性和亚急性MPTP帕金森病小鼠模型中的表达

目的 研究急性和亚急性1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)帕金森病小鼠模型腹侧中脑与纹状体中脂多糖受体CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达.方法 腹腔注射MPTP制作急性(20 mg/kg,4次,每次间隔2 h)和亚急性(20 mg/kg,每天1次,共7 d)帕金森病小鼠模型.实验分为4组:正常对照组(8～10周龄小鼠)、中年小鼠组(8月龄)、急性模型组(8～10周龄)、亚急性模型组(8～10周龄),每组6只C57BL/6小鼠.模型组小鼠在末次注射MPTP 1 d后取脑组织.用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色,观察亚急性小鼠模型黑质多巴胺能神经元数目改变情况.用RT-PCR方法检测CD14 mRNA 、TLR4 mRNA的表达水平.结果 亚急性小鼠模型黑质TH阳性细胞减少.急性和亚急性模型组小鼠黑质与纹状体CD14 mRNA表达水平明显增高,高于正常对照组和中年小鼠组(均 P ＜0.05),TLR4 mRNA表达各组间没有明显差异(P ＞0.05).结论 CD14 mRNA作为内毒素受体在MPTP帕金森病小鼠表达增高,可能涉及脂多糖介导的免疫反应,从而参与神经损伤和帕金森病病理生理过程,针对CD14的阻断中和处理可能作为一种新的帕金森病治疗措施.     

依达拉奉对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的探讨依达拉奉(edaravone)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的C57BL/6J帕金森病模型小鼠的保护作用及相关机制。方法 90只雄性C57BL/6J小鼠随机分为依达拉奉组(ED组)、帕金森病模型组(PD组)和生理盐水对照组(NS组),每组30只。ED组和PD组小鼠给予皮下注射MPTP建立PD模型后,ED组给予依达拉奉(3mg/kg)治疗。用滚轴实验检测小鼠的旋转次数,用免疫组织化学实验检测小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达,用RT-PCR和免疫印迹实验分别检测小鼠黑质脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA与蛋白的表达。结果与NS组比较,ED组、PD组小鼠在滚轴实验中的旋转次数下降(P<0.05,P<0.01),黑质TH表达减少(P<0.05,P<0.01),黑质BDNF的mRNA(P均<0.01)和蛋白(P均<0.05)表达降低;与PD组比较,ED组小鼠在滚轴实验中的旋转次数增加(P<0.05),黑质TH表达增加(P<0.05),黑质BDNF的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达升高。结论依达拉奉可增加C57BL/6JPD模型小鼠黑质区BDNF的mRNA及蛋白表达,降低MPTP对小鼠黑质的损伤,对多巴胺能神经元有保护作用。     

MPTP作用下小鼠黑质和纹状体中不同时期基因表达变化

目的了解帕金森病小鼠模型黑质和纹状体中差异表达的基因以及在MPTP作用后不同时间点基因表达变化的规律。方法取16只SPF级C57BL/6J小鼠,用数字表法随机分为2组。MPTP组:30mg/kgMPTP腹腔注射1次。对照组:注射等量生理盐水。制模后分别在1d和2个月时分离黑质和纹状体。抽提总RNA,利用寡核苷酸芯片分析1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)作用下不同时间点的差异表达基因。结果所检测的1200个基因中,黑质在制模后第1天有13个基因差异表达,2个月时有6个基因差异表达;纹状体中第1天有12个基因差异表达,2个月时有13个基因差异表达。差异表达的基因与多种生理过程,如应激反应、蛋白质磷酸化、蛋白酶体系统、信号转导等密切相关。结论帕金森病的发生、发展过程涉及到多种基因表达水平和多个生理过程的改变。黑质中γ-氨基丁酸通路以及纹状体中蛋白质的磷酸化水平和正确折叠在MPTP小鼠模型中发生了显著变化。     

MPTP诱导PD小鼠黑质及前额叶皮质铁相关蛋白表达变化

目的 研究1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠模型黑质(SN)及内侧前额叶皮质(mPFC)铁代谢相关蛋白的表达变化.方法 将12只9周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组和MPTP组.对照组小鼠给予生理盐水腹腔注射,MPTP组小鼠给予MPTP 30 mg/kg腹腔注射,...     

2,3-吲哚醌对小鼠PD模型黑质BAX基因表达影响

目的探讨2,3吲哚醌（isatin,ISA）对MPTP制备的C57BL/6J小鼠帕金森病（PD）模型黑质中BAX基因表达影响。方法 C57BL/6J小鼠随机分为五组,空白对照组,MPTP损伤组,ISA低（50 mg/kg,ig）、中（100 mg/kg,ig）、高剂量（200 mg/kg,ig）预处理＋MPTP组。结果与对照组相比,MPTP损伤的小鼠黑质中BAX免疫反应阳性表达增加（P〈0.01）;在ISA 100 mg/kg和200 mg/kg预处理组与MPTP损伤组相比,黑质中BAX免疫反应阳性表达显著降低（P〈0.05）。结论表明ISA对MPTP造成的PD小鼠有明显的保护作用。     

镇肝熄风汤对帕金森模型小鼠脑黑质 Bcl-2家族mRNA 表达的影响

目的：观察镇肝熄风汤对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine ,MPTP）诱导的帕金森病（ PD）模型小鼠脑黑质Bcl-2家族蛋白表达的影响。方法采用连续灌胃给予C57BL/6小鼠不同剂量镇肝熄风汤（12．5、25和50 g/kg）14天,于第11天开始,给药前1 h皮下注射MPTP（30 mg/kg）,连续4天,造模后运用实时定量PCR法检测Bax、Bad、Bcl-2和Bcl-xl mRNA的表达。结果 PCR结果显示,镇肝熄风汤下调了Bax mRNA表达（P＜0．05）,同时上调了Bcl-2和Bcl-xl mRNA表达（P＜0．05）,对Bad mRNA表达无影响。结论镇肝熄风汤具有抑制PD模型小鼠脑黑质Bax mRNA表达,促进Bcl-2和Bcl-xL mRNA表达的作用。     

MPTP对小鼠黑质纹状体神经递质代谢相关基因表达的影响

目的 研究1－甲基－4－苯基－1，2，3，6－四氢吡啶（1－methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的的黑质纹状体系统神经递质代谢相关基因表达的变化。方法 通过MPTP注射诱导C57BL小鼠神经元损伤，利用逆转录PCR方法检测酪氨酸羟化酶（TH），单胺氧化酶B（MAO－B），多巴胺转运体（DAT），胆碱乙酰基转移酶（ChAT)以及谷氨酸脱羟酶（GAD65）五种神经递质代谢相关基因的表达变化。结果 在小鼠黑质与纹状体中，MPTP导致TH基因表达显著降低以及GAD65基因表达的上升。MAO－B，DAT，ChAT基因的表达变化在黑质与纹状体则有所不同，在黑质MPTP导致MAO－B与ChAT基因表达的上升以及DAT基因表达下降，在纹状体MPTP导致MAO－B与ChAT基因表达下降，而对DAT基因表达没有明显影响。结论 MPTP对不同神经递质代谢相关基因表达有不同的影响，且具有一定的脑区特异性。     

MPTP对C57BL/6J小鼠脑时钟基因mPer1 mRNA表达的影响

目的研究神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四羟基吡啶(MPTP)对小鼠脑组织中时钟基因mPer1mRNA表达的影响。方法将C57BL/6J小鼠用计算机辅助法随机分为MPTP组和对照组,MPTP组腹腔注射MPTP-HCl,对照组注射0.9%氯化钠注射液,连续5d,第11天连续24h按6个时间点取材。用HPLC-ECD检测纹状体中多巴胺(DA)含量,用实时定量RT-PCR检测纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平。结果MPTP组纹状体DA水平较正常对照组减少了80%,并维持低水平长达10d;纹状体mPer1mRNA在24h内呈明显节律性变化,而其余脑组织mPer1 mRNA无明显节律性变化;MPTP处理导致纹状体和其余脑组织mPer1 mRNA水平增高及纹状体mPer1 mRNA表达高峰提前。结论MPTP引起小鼠纹状体时钟基因的表达水平和节律性发生改变,提示MPTP可能通过改变细胞内的节律控制中心而影响机体的生物节律。     

淫羊藿总黄酮对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元保护作用

目的探讨淫羊藿总黄酮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体系统多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法 C57BL/6去卵巢小鼠随机分为对照组、MPTP组及淫羊藿总黄酮25mg/kg+MPTP给药组、淫羊藿总黄酮50mg/kg+MPTP给药组和淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组,应用高效液相色谱法检测各组纹状体内DA的含量,免疫印记法检测纹状体内Bcl-2蛋白的表达情况。结果 MPTP组小鼠纹状体内DA含量较对照组明显降低(F=31.92,q=14.16,P<0.001),淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组纹状体DA含量较MPTP组明显增加(q=5.48,P<0.01)。MPTP组纹状体内Bcl-2蛋白的表达较对照组明显降低(F=10.73,q=3.99,P<0.05),淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组可逆转上述改变(q=6.49,P<0.001)。结论淫羊藿总黄酮具有神经保护作用,能够对抗神经毒素MPTP对黑质纹状体系统DA能神经元的损伤,其机制可能与抗凋亡有关。     

新生儿高胆红素血症时血IL—6的观察研究

目的了解新生儿高胆红素血症时血白细胞介素－６（ＩＬ－６）的改变。方法应用ＥＬＩＳＡ法测定２０例新生儿高胆红素血症患儿与同期１１例对照组正常足月新生儿血ＩＬ－６含量。结果新生儿高胆红素血症组血ＩＬ－６浓度增高,其均值±标准差（ｘ±ｓ）为（４３２．２３±２５６．８４）ｎｇ／Ｌ,对照组为（２８．８２±９．６６）ｎｇ／Ｌ,Ｐ＜０．００１。结论新生儿高胆红素血症时细胞因子白细胞介素－６增高,白细胞介素－６可能在新生儿高胆红素血症的发病中起一定的作用。     

小鼠β-防御素6与甲型流感病毒M2e基因融合表达及其免疫特性研究

目的构建小鼠β防御素6（mBD6）与甲型流感病毒M2蛋白胞外功能区（M2e）真核表达质粒,并研究其在真核细胞中的表达与免疫特性。方法通过重叠延伸PCR法（overlap-PCR）将M2e与mBD6通过一段多肽接头Gly4Ser融合成为mBD6-M2e。将其插入载体pcDNA3．1（＋）,构建成pcDNA3．1（＋）／mBD6-M2e。鉴定正确后,转染MDCK细胞,免疫荧光、MTT检测mBD6-M2e表达和分泌。免疫小鼠,半定量PCR检测脾细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α、CCR7表达。结果融舍基因mBD6-M2e真核表达载体pcDNA3．1（＋）／mBD6-M2e构建成功,在MDCK细胞膜上成功表达融和蛋白,转染细胞的培养上清刺激淋巴细胞增殖。免疫小鼠细胞因子表达改变。结论融合基因mBD6-M2e真核表达载体成功构建,为研究防御素在流感病毒核酸疫苗中的佐剂作用奠定了基础。     

急性脑梗死患者血清IL-6含量和周围血WBC计数的相关研究

目的:研究急性脑梗死患者血清IL-6含量和周围血WBC计数的动态变化及二者的相关性.方法:采用双抗体夹心ELISA法对30例急性脑梗死患者,分别在卒中后1天、3天、7天、14天进行连续检测血清IL-6和周围血WBC计数,并与30例健康人作对照.结果:与正常对照组比较,在病程1天、3天、7天3个时间点上血清IL-6水平和周围血WBC计数均增高(P<0.05),血清IL-6在病程第1天明显升高且达到高峰(P<0.05),周围血WBC计数以病程第3天升高最明显并达到高峰(P<0.05),二者与梗死面积大小、神经功能受损程度呈正相关(P<0.05),且二者之间显著相关(r=0.4,P<0.05).结论:脑梗死伴发炎症反应,炎症反应参与缺血性脑损伤,WBC、IL-6在此过程中起重要作用,且二者成正相关.IL-6是介导炎性反应的细胞因子,起免疫调节作用.如何阻断炎症反应过程,将是研究脑梗死保护治疗的新的有效途径.     

阿托伐他汀、氯吡格雷、普罗布考合用对兔动脉粥样硬化病变进展的抑制作用

目的:观察阿托伐他汀、氯吡格雷、普罗布考合用对兔动脉粥样硬化病变进展的抑制作用.方法:将47只雄性新西兰白兔随机分为正常对照组(A组,n=9)及高脂饮食组(N组,n=38).高脂饮食组以1%胆固醇饲料喂养6周,6周后随机抽取2只,观察主动脉组织病理形态,以明确动脉粥样斑块形成.6周时高脂饮食组依据兔子体重随机分为高脂组(高脂饮食)(B组,n=12)、阿托伐他汀组[高脂饮食+阿托伐他汀5 mg/(kg·d)](C组,n=12)、联合治疗组[高脂饮食+阿托伐他汀5 mg/(kg·d)+氯吡格雷10 mg/(kg·d)+普罗布考0.25 g/(kg·d)](D组,n=12),药物与高脂饮食同步干预.实验前、实验6、14周取血清,测定血脂(TC、TG、LDL、HDL)浓度.14周时取胸主动脉行苏木精-伊红染色(HE),测定内膜、中膜厚度及粥样斑块面积;免疫组化测定IL-6的阳性细胞百分比,染色结果行定量分析.结果:高脂饮食各组血脂显著增高,主动脉见典型脂质条纹,局部斑块形成,病变处IL-6显著表达.与单纯高脂组相比,①阿托伐他汀组、联合治疗组主动脉内膜增厚显著减轻,粥样斑块面积缩小(P<0.05),联合治疗组则更为明显(P<0.01).②阿托伐他汀及联合治疗组均能降低斑块中IL-6百分数,联合治疗组更为显著,两者比较,有显著性差异.③阿托伐他汀及联合治疗组均能降低血清胆固醇水平,但两者无显著性差异.结论:阿托伐他汀、氯吡格雷及普罗布考均有抑制内膜增生和动脉粥样硬化病变进展的作用,联合使用抗动脉粥样硬化效果更佳.     

柴胡止血液对置IUD子宫异常出血患者子宫内膜组织IL-6的影响

目的:研究柴胡止血液治疗宫内节育器(IUD)所致子宫异常出血的机制。方法:观察柴胡止血液对置IUD子宫异常出血患者子宫内膜组织IL-6含量的影响,并与归脾丸、逍遥丸以及消炎痛进行比较。结果:柴胡止血液能够降低置IUD子宫异常出血患者子宫内膜组织IL-6的含量,其中大、中剂量效果最好,与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:柴胡止血液可能通过改善子宫局部组织IL-6的活性,促进子宫内膜组织的修复,故可用于治疗置IUD所致子宫异常出血。     

AMP对IEC-6细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨外源AMP对IEC-6细胞增殖和凋亡的影响。方法IEC-6细胞分成4组,1个对照组和3个实验组（A1、A2、A3组）,实验组分别添加10、100、1000μmol/L的AMP,在第2、3、4、5、6天分别检测细胞增殖情况。收集培养48 h后的细胞,检测细胞周期,细胞凋亡和细胞内Ca^2＋水平。结果不同浓度的AMP都能够抑制IEC-6的增殖（P〈0.01）,改变细胞周期中各期细胞的相对构成,使得S期细胞数量减少,G0/G1期细胞数量增多。AMP能够诱导细胞凋亡,尤其是1 000μmol/L的AMP,使得细胞凋亡率明显高于对照（P〈0.01）。添加AMP后Ca2＋水平与对照组略有提高,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论外源AMP能抑制IEC-6细胞增殖,影响细胞周期,促进细胞凋亡,且作用与其补充浓度有关,但与钙离子浓度无关。     

FOLFOX6方案治疗45例进展期胃癌的临床观察

目的观察FOLFOX6方案治疗晚期胃癌的临床疗效和毒副反应。方法45例晚期胃癌采用L-OHP135mg/m^2,d1;CF200mg/m^2,d1;5-Fu400mg/m^2,d1,5-Fu2400~3000mg/m^2,CIV（46h）,每14d为1周期,完成2周期后评价疗效。结果总有效率（CR＋PR）44.45%,CR6.67%,PR37.78%,NC40.00%,PD13.33%,主观症状缓解率73.4%。最常见的毒性反应为血液学毒性、神经毒性及胃肠道毒性。结论FOLFOX6方案治疗晚期胃癌疗效可靠,毒性反应可以耐受。     

不同方法减少红霉素静滴副作用的临床观察

目的观察思密达、山莨菪碱、腹舒对减少红霉素副作用的效果。方法将162例下呼吸道感染患儿随机分成4组,观察组分别予以口服思密达(40例),静滴山莨菪碱(38例),外敷腹舒(41例),对照组(42例)加用VitB6静滴,观察各组患儿静滴红霉素后主要副作用的发生情况。结果各观察组与对照组副作用的发生率间差别有显著性意义(P<0.01),在改善副作用方面思密达与山莨菪碱、腹舒间差别有显著性意义(P<0.05)。结论山莨菪碱、腹舒较思密达能明显减轻红霉素的副作用,腹舒则更具安全性。     

子午流注纳甲法治疗急性缺血性脑血管病及对IL-6水平的影响

目的 :观察子午流注纳甲法治疗急性缺血性脑血管病的临床疗效及对IL - 6水平的影响。方法 :子午流注纳甲法治疗急性缺血性脑血管病 30例 ,与循经辨证取穴、药物输液治疗的对照组作临床疗效对比研究。治疗前、治疗早期及治疗后检测IL - 6,观察其变化。结果 :纳甲组、循经组、药物组的有效率分别为 ( 96.67%、90 .0 0 %、73.33 % ) ,纳甲组的有效率优于药物组 ,有极其显著差异 (P <0 0 0 1 ) ,纳甲组的基本痊愈率 ( 5 3.33 % )及显著进步率 ( 30 .0 0 % )优于循经取穴组 ( 30 .0 0 %、2 3 33 % ) (P <0 .0 5 )。三组治疗早期、治疗后IL - 6指标均有改善 ,三组治疗后与治疗前相比均有显著差异 (P <0 . 0 1 ) ,其中纳甲组治疗早期与治疗前亦有显著差异 (P <0 . 0 5 )。结论 :子午流注纳甲法能显著提高治疗急性缺血性脑血管病的临床疗效 ,而且能降低IL - 6水平 ,促进脑神经功能的恢复     

外源性NO在细胞水平对GluR6 S-亚硝基化的作用

目的观察外源性一氧化氮（NO）供体硝普钠（SNP）和亚硝基谷胱甘肽（GSNO）在细胞水平对GluR6 S-亚硝基化的影响。方法将本事构建的pEGFP—GluR6质粒转染HEK293细胞24h后,加不恫浓度外源性NO供体SNP和GSNO处理30min后收集蛋白,用生物素转换法检测GluR6S—亚硝基化水平。结果给了不同浓度SNP时GluR6的s一亚硝基化均增高,并存给予1mmol／LSNP时其亚硝基化水平达最高。另外,给予200μmoL／L GSNO时GluR6的S-亚硝基化也增高。结论在过表达GIuR6的HEK293细胞中,外源性NO供体SNP和GSNO均能使GluR6 S-亚硝基化水平增高。结果提示,在体外,外源性NO能直接诱导GluR6 S-亚硝基化。