银杏叶提取物对AD模型小鼠海马谷氨酸转运体GLAST表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对AD模型小鼠海马谷氨酸转运体GLAST表达的影响。方法采用双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)法测定正常对照组、AD模型组、AD+银杏叶提取物低剂量组(30 mg·kg~(-1)·day~(-1))、中剂量组(60 mg·kg~(-1)·d~(-1))、高剂量组(120 mg·kg~(-1)·d~(-1))动物海马中GLAST的变化。结果经银杏叶提取物处理后,模型组动物存活率增加;小鼠海马组织中Aβ_(1-42)阳性沉积明显减少,且高剂量组减少最为明显;AD模型组GLAST阳性表达明显减少(P0.05);银杏叶提取物处理组小鼠海马区GLAST阳性表达出现增加,银杏叶提取物中剂量组GLAST阳性表达增加最为显著(P0.05)。结论银杏叶提取物具有缓解Aβ诱导神经毒性的作用,对AD模型小鼠海马中谷氨酸转运体GLAST具有调节和保护作用。     

金纳多对血管性痴呆小鼠海马结构NOS表达的影响

目的观察银杏叶提取物(EGB)金纳多对血管性痴呆(VD)小鼠海马结构神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,探讨银杏叶提取物对血管性痴呆的治疗作用。方法复制VD小鼠模型,利用Y-迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力及不同剂量EGB治疗组的改善作用,实时定量PCR方法检测不同剂量EGB对VD小鼠海马结构中NOSmRNA转录水平的影响,组织化学和免疫组化方法研究其对NOS和nNOS蛋白表达的影响。结果行为学结果显示VD模型组和各治疗组小鼠均比对照组小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多(<0.05),高低两个剂量EGB治疗组迷宫学会次数与模型组相比明显减少(<0.05),有剂量依赖性。实时定量PCR结果显示在背侧海马VD模型组nNOS mRNA转录水平显著提高,而高低EGB治疗组的nNOS mRNA转录水平显著降低(<0.05)。组织化学和免疫组化结果显示在海马结构CA1区VD模型组比对照组NOS和nNOS阳性神经元的数量明显增多(<0.05),高低两个EGB治疗组与VD模型组相比阳性神经元数量明显减少(<0.05)。结论银杏叶提取物对VD小鼠神经元有保护作用,可能与减少海马结构NOS的表达相关。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠空间学习记忆和海马NMDAR1表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆(VaD)大鼠空间学习记忆和海马N-甲基-D-天冬氨酸型离子型谷氨酸受体1型亚单位(NMDAR1)表达的影响。方法:采用四血管阻断法制备VaD大鼠模型,设立假手术组、模型组、尼莫地平组(10 mg/kg/d,灌胃30 d)和银杏叶提取物组(50 mg/kg/d,灌胃30 d)。利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆的改变,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠海马神经元NMDAR1蛋白水平的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NMDAR1的mRNA表达变化。结果:与假手术组相比,模型组大鼠水迷宫逃避潜伏期延长,撤后台靶象限平均探索次数减少(P<0.05),银杏叶提取物明显改善了VaD大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与银杏叶提取物组之间比较无统计学差异(P>0.05)。模型组大鼠的NMDAR1蛋白及其mRNA在海马CA1区的表达水平较假手术组明显降低(P<0.05);银杏叶提取物组大鼠海马的NMDAR1蛋白及mRNA表达水平较模型组明显升高(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可以减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤,这可能与上调海马组织内NMDAR1蛋白及mRNA的表达密切相关。     

雄激素对快速老化小鼠海马神经元凋亡及超微结构的影响

目的:探讨雄激素对快速老化小鼠海马神经元凋亡及超微结构的影响.方法:7月龄雄性快速老化小鼠(SAMP8)随机分为假手术对照组、去势组及去势 雄激素补允治疗组.十一酸睾酮(TU)剂量为37.4 mg·kg-1·15 d-1.雄激素补充治疗45 d后,通过Nissl染色观察海马神经元数量和形态的变化;TUNEL法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;透射电镜观察超微结构的改变.结果:去势组海马神经元数量明显减少,凋亡数量和凋亡率显著增加,超微结构病理变化严重.雄激素补充治疗后,观察结果与假手术对照组相比无统计学意义.结论:去势后雄激素缺乏可导致海马神经元异常凋亡增加,数目减少,结构受损.雄激素补充治疗可减轻神经元损伤,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆功能作用机制之一.     

高血黏度对小鼠脑细胞线粒体含量及超微结构的影响

目的：观察高血黏度对脑细胞线粒体含量及超微结构的影响。方法：采用高分子右旋糖酐法建立小鼠高血黏度动物模型,以Mito Tracker Green FM对线粒体进行标记,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞线粒体含量的变化;透射电镜观察小鼠大脑顶叶皮质及海马CA1区神经元线粒体超微结构的变化。结果：高血黏度小鼠脑细胞线粒体含量非常明显地减少;线粒体超微结构发生明显变化,且海马CA1区较皮质部变化明显。结论：高血黏度可导致脑细胞线粒体含量的减少及超微结构的变化。     

慢性癫痫模型动物海马内GABA能神经元的超微结构改变

用马桑内酯诱发小鼠性性癫痫模型，借助免疫电镜方法对海马的ＧＡＢＡ能神经元的超微结构进行观察，可见小鼠海马内ＧＡＢＡ免疫反应阳性神经元弥散分布于除锥体细胞层和颗粒细胞层外的各部。慢性癫痫上鼠海马内的ＧＡＢＡ免疫反应性神经元胞体和末梢均呈现程度不同的结构损伤，包括线粒体肿胀，细胞器崩解和神经末梢变性，ＧＡＢＡ样轴突末梢可与免疫反应阴性的树突构成传出性轴－树突触，也可接受免疫反应阴性轴末梢的传入性轴－轴     

亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的海马CA1区神经元超微结构的影响

目的探讨亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的海马CA1区神经元超微结构的影响。方法采用夹闭双侧颈动脉法制备沙土鼠前脑缺血再灌注模型,双重染色,电镜下观察各组海马CA1区神经元的超微结构变化。TUNEL染色光镜下观察和计数凋亡神经元,计算凋亡密度。结果硒处理组沙土鼠脑缺血再灌注后,神经元超微结构的病理形态损伤减轻,凋亡细胞减少,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。结论亚硒酸钠对沙土鼠脑缺血再灌注损伤的海马CA1区神经元超微结构及凋亡细胞具有保护作用,可能存在对脑缺血耐受的机制。     

苦参碱注射液对老年痴呆模型大鼠脑组织白细胞介素1β含量及海马神经元超微结构的影响

目的:观察苦参碱注射液对老年痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠脑组织中IL-1β含量及海马神经元超微结构的影响。方法:采用鹅膏蕈氨酸(ibotenic acid,IBO)双侧海马立体定位注射造模,用苦参碱注射液治疗30d后,放射免疫法测定IL-1β含量;电镜观察大鼠海马神经元超微结构的变化。结果:模型组与空白组比较,大鼠大脑皮质和海马内IL-1β的含量非常显著升高;高剂量治疗组与模型组比较,大鼠大脑皮质和海马内IL-1β的含量显著降低,且大鼠海马神经元线粒体超微结构的损伤有较大改善。结论:苦参碱注射液能降低大鼠脑内IL-1β的含量,从而保护线粒体结构,改善能量代谢,延缓神经元凋亡,进而控制AD的发展。     

银杏叶提取物对大鼠脑出血后神经元保护作用的研究

目的:探讨银杏叶提取物对大鼠脑出血(ICH)周围神经元的保护作用。方法:胶原酶注入大鼠尾壳核建立ICH模型,然后将大鼠随机分为脑出血后治疗组,模型组和正常对照组。模型组和治疗组动物均于注射后6、24 h,3、7、14 d后处死。对各组大鼠进行神经功能评分;用干/湿重法测定脑组织的含水量;透射电镜观察神经元的超微结构并对线粒体进行体视学分析。结果:治疗组大鼠神经功能评分较模型组明显增加(P<0.05);模型组大鼠脑出血后24 h脑含水量开始升高,72 h达到高峰。银杏叶提取物治疗组脑含水量较模型组明显下降(P<0.05);与模型组相比治疗组神经元线粒体的数量明显增多(P<0.05);线粒体肿胀明显减轻(P<0.05)。结论:银杏叶提取物能保护神经元,促进神经功能恢复。     

持续糖皮质激素增高对海马的毒性作用

大鼠皮下注射糖皮质激素持续一个月后，观察海马神经元内超微结构的变化，并与对照组及老年组进行比较。结果显示：给药组的海巴神经元呈现细胞固缩，胞质内脂褐质较对照组增多。上述变化在老年组虽然也存在，但在形态变化上有差异。     

银杏叶对阿尔茨海默病(AD)治疗作用的实验研究

目的　探讨银杏叶对AD的治疗作用。方法　 30只SD大鼠随机均分为模型组、对照组和银杏叶治疗组 ,用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力 ,用旷场实验观察大鼠探究活动能力和紧张度 ,用硫磺素 S法和镀银法检测大鼠海马中老年斑和神经原纤维缠结形成情况。结果　模型组大鼠的学习、记忆功能和探究活动与对照组和银杏叶治疗组相比均明显下降 (P <0 .0 5 ) ,银杏叶治疗组与对照组相比无明显差异(P >0 .0 5 )。模型组大鼠海马可见到老年斑沉积和神经原纤维缠结形成 ,银杏叶治疗组仅有少量的老年斑沉积和神经原纤维缠结形成 ,而对照组大鼠未见老年斑沉积和神经原纤维缠结形成。结论　银杏叶提取物可提高大鼠的学习和记忆能力并明显减少老年斑沉积和神经原纤维缠结形成。     

产前应激对发育海马神经元及其超微结构的影响

目的:观察产前应激(PS)对子鼠海马神经元和神经元超微结构是否有损伤作用, 以及这种损伤是否与氧化物的过度生成有关。方法:采用束缚应激模型, 观察出生后1个月雄性子鼠的海马神经元数量、神经元超微结构及神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的变化。结果:晚期应激(LS)引起子鼠海马CA1和CA4区的细胞数量明显减少;电镜可见PS使子鼠海马CA1区神经元超微结构发生改变, 表现为线粒体肿大、边界不清、电子密度不均, 脂褐素增多, 偶见核变形;中期应激(MS)使子鼠海马CA1、CA2、CA3区和DG内nNOS阳性表达量显著升高, LS使子鼠海马CA1、CA2、CA3、CA4区和DG内nNOS阳性表达量也显著升高。结论:结果提示, PS对子鼠海马神经元及神经元超微结构有损伤作用, 这种损伤可能由氧化物过度生成引起。     

Alteration of the CNS pathway to the hippocampus in a mouse model of Niemann-Pick, type C disease

Niemann-Pick type C disease (NPC) is an autosomal recessive disorder that results in premature death due to progressive neurodegeneration including dementia. To understand neuronal pathways connecting to the hippocampus, retrograde transneuronal labeling method with Bartha strain of pseudorabies virus (PRV) was employed in 40 NPC+/+, NPC+/− and NPC−/− mice. Immunohistochemistry using polyclonal antibody against PRV and streological counting were used. The number of neurons and synapse in CA2&3 regions of the hippocampus decreased dramatically in the NPC−/− mouse compared to the NPC+/+ or +/− mouse. The number of PRV positive cell was significantly decreased in several regions including the entorhinal and piriform cortex in the NPC−/− mouse. More severely, lateral septal dorsal nucleus, dorsal entorhinal cortex and medial geniculate body showed no positive labeling in the NPC−/− mouse. However, the hippocampus, medial septal and supramammilary nuclei showed increased immunoreactivity in the NPC−/− mouse. Our data suggest that the synaptic loss and discontinuity of the CNS hippocampal pathway may contribute to understanding the mechanism of symptoms and functional disabilities such as memory and learning disturbance in NPC patients.     

手机电磁辐射对小鼠自由基影响的研究

目的 :研究经手机电磁辐射后的小鼠血清中SOD、MDA含量的变化 ,推断手机电磁辐射可能对人体造成的早期损害。方法 :应用分光光度比色法检测手机辐射后血清SOD、MDA含量 ,并与对照组进行统计学比较 ,同时电镜下观察大脑皮层、海马、小脑超微结构的变化。结果 :实验组小鼠血清SOD低于对照组 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,而实验组MDA含量明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;电镜下 ,实验组大脑皮层、海马、小脑超微结构与对照组相比较没有明显改变。结论 :手机辐射使小鼠体内自由基生成增多 ,对机体细胞造成早期损伤。     

Chronic mild stress damages mitochondrial ultrastructure and function in mouse brain

Increasing evidence implicates mitochondrial failure as a crucial factor in the pathogenesis of mental disorders, such as depression. The aim of the present study was to investigate the effects of exposure to chronic mild stress (CMS), a paradigm developed in the late 1980s as an animal model of depression, on the mitochondrial function and mitochondrial ultrastructure in the mouse brain. The results showed that the CMS regime induced depressive-like symptoms in mice characterized by reduced sucrose preference and body weight. Moreover, CMS exposure was associated with a significant increase in immobility time in the tail suspension test. Exposure to the CMS paradigm inhibited mitochondrial respiration rates and dissipated mitochondrial membrane potential in hippocampus, cortex and hypothalamus of mice. In addition, we found a damaged mitochondrial ultrastructure in brains of mice exposed to CMS. These findings provide evidence for brain mitochondrial dysfunction and ultrastructural damage in a mouse model of depression. Moreover, these findings suggest that mitochondrial malfunction-induced oxidative injury could play a role in stress-related disorders such as depression.     

重组PAI-2基因抑制纤维肉瘤细胞侵袭转移的超微结构研究

目的：研究重组ＰＡＩ－２（纤溶酶原激活剂抑制剂－２）基因在裸鼠皮下纤维肉瘤移植瘤细胞中的表达及其对超微结构的影响。方法：应用常规诊断电镜和免疫电镜技术，观察肿瘤细胞的结构变化，定位研究ＰＡＩ－２蛋白的表达。结果：重组ＰＡＩ－２基因转染的纤维肉瘤细胞，其移植瘤具有ＰＡＩ－２蛋白的表达，以活性形式存在于细胞表面，同时细胞超微结构的恶性特征减弱，分化趋向成熟，侵袭转移能力下降。结论：ＰＡＩ－２基因的表达在肿瘤细胞侵袭转移机制中起负调控作用     

选择性深低温血流阻断猴海马超微结构和波形蛋白表达的变化**

背景：前期研究显示,选择性深低温顺行脑灌注能提高猴脑对缺血缺氧的耐受性。 目的：观察选择性深低温血流阻断对猴海马超微结构和波形蛋白表达的影响。 方法：将8只健康成年恒河猴随机分为两组：深低温组(n=5)在常温下阻断猴双侧颈总动脉及颈内静脉10 min,然后通过一侧颈内动脉灌注4 ℃林格氏液,同侧颈内静脉回流,使脑温维持在18 ℃以下,60 min后恢复脑血流;常温组(n=3)除灌注液改为37 ℃林格氏液外,其余与深低温组相同。 结果与结论：深低温组猴全部成功复苏,海马组织形态及超微结构未见明显异常。常温组猴全部死亡,未能成功复苏,海马组织形态及超微结构有不同程度异常。与常温组比较,深低温组海马波形蛋白表达显著降低(P < 0.01)。说明阻断双侧颈总动脉10 min后行选择性深低温顺行脑灌注可下调海马波形蛋白表达,保护海马组织,减轻脑缺血损害。     

雌激素撤退大鼠海马和基底前脑神经元线粒体超微结构的观察

目的观察在去卵巢后海马CA1区锥体细胞和基底前脑外侧隔核神经元线粒体超微结构的变化情况。方法雌性SD大鼠8只,随机分为正常对照组(4只)和OVX组(4只)。采用去卵巢(ovariectomized,OVX)SD大鼠模型,OVX组行双侧卵巢切除术,术后第12天,常规固定、包埋,透射电镜观察海马CA1区锥体细胞和基底前脑外侧隔核神经元线粒体结构。结果与正常对照组相比,OVX组海马CA1区锥体细胞部分线粒体肿胀较明显,嵴出现断裂和脱落,部分线粒体空泡化;但基底前脑线粒体基本正常。结论大鼠去势12d后,其海马易感区神经元线粒体超微结构发生改变,并可能引起神经元退变,为女性更年期后老年性痴呆易感性增加提供了有益的线索。     

APP/PS1转基因AD鼠海马CA1区神经元突触超微结构

目的:探讨携带5个家族性基因突变的APP/PS1转基因阿尔茨海默病(AD)(5×FAD)模型小鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变。方法:应用透射电镜观察和形态计量学分析5×FAD转基因AD鼠海马CA1区GrayⅠ型突触界面结构参数,包括突触间隙长度、突触间隙面积、突触后致密物浓度和突触界面曲率的变化。结果:5×FAD转基因AD鼠海马CA1区神经元突触活性区长度显著小于对照组,差异有统计学意义;突触后致密物厚度、突触界面曲率及宽度与对照组差异无统计学意义。结论:5个家族性突变基因导致小鼠海马CA1区神经元突触可塑性的改变,这可能是该突变基因导致的发病机制之一。     

急性应激大鼠脑边缘系统生化病理变化

目的 :探讨急性应激时NO等自由基对脑损害作用及超微结构的影响。方法 :建立急性应激大鼠模型 ,分别取边缘系统额叶、海马、下丘脑组织 ,电镜观察神经细胞超微结构变化、测定组织匀浆NO含量和SOD活力。结果 :急性应激组大鼠额叶、海马及下丘脑SOD活力均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,NO含量在海马、下丘脑升高明显 (P <0 0 5 ) ,光镜和电镜下的海马、下丘脑神经细元减少 ,核仁碎裂、胞质内细胞器减少。结论 :急性应激脑组织NO含量和SOD活力增高 ,可对边缘系统下丘脑、海马造成损害。这可能是应激反应过度的病理生理学基础