天山大黄发根培养物中蒽醌化合物的产生

目的；探索用发根培养法生产植物次生代谢物的途径。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２所含Ｒｉ质粒遗传转化药用植物天山大黄以诱导发根用纸电泳法检测发根中冠瘿碱的存在，用高效液相色谱法测定发根中芦荟大黄素，大黄素，大黄酚，大黄素，大黄素甲醚，大黄酚－８甲醚等游离蒽醌化合物的含量。结果：诱导出天山大黄发根，并建立了发根离体培养系，从发根中检测到甘露碱，农杆碱的存在的，     

掌叶大黄发根及愈伤组织、悬浮细胞中蒽醌类成分的比较研究

目的：比较Ｒｉ质粒转化的掌叶大黄发根与愈伤组织、悬浮细胞以及掌叶大黄生药中游离蒽醌成分的含量。方法：用发根农杆菌Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ９４０２野生型菌株感染掌叶大黄外植体以诱导发根，建立发根离体培养系，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定发根；分别诱导掌叶大黄愈伤组织和悬浮细胞；用高效液相色谱法测定发根、愈伤组织、悬浮培养细胞以及掌叶大黄生药中芦荟大黄素等游离蒽醌化合物的质量含量。结果：从子叶柄上诱导出了发根，并建立了培养体系；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果证明Ｒｉ质粒ＴＤＮＡ转移并整合到植物细胞基因组中；用叶片作外植体诱导出了愈伤组织；悬浮培养细胞用叶片、叶柄外植体诱导的愈伤经液体培养获得；掌叶大黄发根中各种游离蒽醌化合物含量普遍高于愈伤组织，但低于生药和悬浮培养细胞。结论：用掌叶大黄发根培养物生产蒽醌化合物是一条值得探索的新途径。     

不同产地大黄质量分析

目的：分析不同产地大黄的质量。方法：测定不同产地大黄的总灰分、酸不溶性灰分,检查土大黄苷,薄层检识大黄游离蒽醌类成分,HPLC法测定大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。结果：18批样品中,各项指标均符合药典规定的有10批;不合格的8批样品中,5批土大黄苷检查不合格,2批灰分测定不合格,1批含量测定不合格。比较芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚分别与大黄素峰面积的比值,可以发现大黄酚与大黄素的比值变化最大。结论：不同产地大黄的质量有较大差异,部分产地大黄的质量不符合药典规定。通过含量测定可以看出,控制好大黄酚和大黄素的总量及其比值,对保证大黄药材质量具有重要意义。     

大黄游离蒽醌的制备与纯化

从中药大黄中提取总蒽醌（结合和游离２类）,经水解后用水化学试剂或大孔树脂制备总游离蒽醌（含大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）,进一步纯化得大黄酸和大黄素。     

泻心汤不同配伍中蒽醌类成分的变化研究

目的建立测定泻心汤中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚游离与结合型的方法,并探索配伍对各成分的影响。方法采用AgilentHypersilODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(75∶25);体积流量:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:440nm,进样量:50μL。不同配伍中蒽醌类成分的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果建立了同时测定5种蒽醌类成分的方法,这5个成分线性关系良好,加样回收率稳定。与单味大黄相比,大黄-黄芩中5种蒽醌类成分增加;黄连-大黄中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的总量增加,而大黄酸和大黄素甲醚总量减少;泻心汤中大黄酸总量减少,大黄素、大黄酚和大黄素甲醚总量增加,5种蒽醌类成分总和增加。结论本法准确可靠,重现性好,结果稳定,适合于泻心汤中蒽醌类成分的分析。并且不同配伍对泻心汤中蒽醌类成分有影响。     

基于SREBP1的制何首乌抗肝癌脂代谢蒽醌类活性成分的筛选

目的:通过筛选制何首乌抗肝癌蒽醌类活性成分,为其降脂抗癌作用及其机制研究提供实验依据。方法:MTT法检测制何首乌主要蒽醌类成分对肝癌细胞Bel-7402活力的影响;RT-qPCR及Western blot检测对肝癌细胞脂代谢关键因子SREBP1(Sterol regulatory element binding protein 1)mRNA和蛋白的影响。结果:制何首乌蒽醌类成分对肝癌细胞抑制作用排序为:大黄素>大黄酸>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷>大黄酚,其中大黄素甲醚、大黄素和大黄酸抑制SREBP1 mRNA和蛋白水平的表达。结论:制何首乌中蒽醌类成分对肝癌细胞作用各异,鉴于大黄素在制首乌中含量最高,大黄素可能在制何首乌抑制肝癌脂代谢中发挥主要作用。     

HPLC法测定大黄提取物中5种蒽醌的含量

目的测定大黄溶剂萃取工艺提取物与SFE-CO2工艺提取物中大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚等5种蒽醌含量。方法先用CHCl3超声振荡提取游离蒽醌,再将残渣中结合蒽醌进行水解,CHCl3热回流提取;采用HPLC法测定含量。结果与结论从5种蒽醌的转移率来看,SFE-CO2工艺优于溶剂萃取工艺。     

大黄临床应用机制及其与西药的相互作用

中药大黄含有多种游离和结合的蒽醌类，包括大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酚等成分。其中主要的泻下成分为；大黄酸、大黄素和芦荟大黄素。此外尚含有大黄鞣甙类，包括儿茶素、葡萄糖没食子鞣甙、没食子酸、桂皮酸鞣质和蒽醌鞣质等，为收敛成分。临床上常用单方、复方、含大黄的成药来治疗病毒性肝炎、上消化道出血、慢性肾功能衰竭、急性胰腺炎等疾病，作者就其应用机制与西药的相互作用概括如下。     

大黄中蒽醌类化合物薄层层析方法的改进

大黄的主要成分为大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素及其甙类。大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定是我校中药系学生必做实验之一，薄层层析又是鉴定大黄类成分必不可少的方法，但是以往的实验教材中所采用的薄层层析条件不能将大黄酚和大黄素甲醚分开。近...     

大黄-3颗粒水提工艺的优化

摘要 目的：通过单因素实验优化大黄-3颗粒的水提工艺。方法：以饮片粉碎粒度、浸泡时间、液固比以及提取时间为影响因素,总蒽醌含量（包括芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚与大黄素甲醚）和干浸膏得率为评价指标,以单因素实验的方法优化大黄-3颗粒的提取工艺。结果：得出最佳条件为大黄-3粉末过10目筛,加16倍水,浸泡0.5 h,回流提取10 min。在此条件下总蒽醌含量为2.04 mg·g-1（芦荟大黄素0.33 mg·g-1、大黄酸0.35 mg·g-1、大黄素0.11 mg·g-1、大黄酚1.02 mg·g-1与大黄素甲醚0.23 mg·g-1）,干浸膏得率为76.99%。结论：该方法稳定、合理、可行,可用于制备大黄-3颗粒。     

稀土元素镧对掌叶大黄毛状根和非转化根生长及葸醌产量的影响

目的 研究不同浓度的稀土元素镧(La2 )对3种大黄根生物量和蒽醌次生代谢产物产量的影响。方法采用统计学分析方法,研究稀土元素La3 对两种掌叶大黄单克隆毛状根DH5c、DH7a和液体培养非转化根NOR生物量和蒽醌化合物合成的影响。结果 La3 浓度对大黄根生物量积累有显著影响,培养基中La3 为10 mg/L时,对大黄根生长表现出明显的抑制作用;La3 浓度对3种大黄根的蒽醌产量有极显著影响,当培养基中La3 1.0mg/L时,蒽醌产量最高;经稀土离子处理的3种大黄根中芦荟大黄素和大黄酸显著高于大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。结论 培养基中添加适宜浓度的稀土离子La3 对掌叶大黄单克隆毛状根的生物量积累和蒽醌类化合物的合成具有明显的促进作用。     

两种纯化工艺对大黄水提液中蒽醌类成分的影响研究

目的：探索壳聚糖絮凝澄清工艺与醇沉工艺对大黄水提液中蒽醌类成分的影响规律。方法以大黄中5种蒽醌类成分的保留率为评价指标,考察两种纯化工艺在不同条件下对大黄水提液中蒽醌类成分的影响。结果两种纯化工艺在不同的条件下,大黄水提液中5种蒽醌类成分的保留率大小几乎具有一致的规律,即大黄酸>芦荟大黄素>大黄素>大黄酚>大黄素甲醚,醇沉工艺对于大黄蒽醌类成分的保留率优于壳聚糖絮凝澄清工艺。结论醇沉工艺对极性小的成分的保留优于壳聚糖絮凝澄清工艺,而对极性高的成分的保留则相反。     

应用发根农杆菌Ri T-DNA建立菘蓝的毛状根优质株系和植株再生系统

目的：建立菘蓝（Ｉｓａｔｉｓ ｉｎｄｉｇｏｔｉｃａ Ｆｏｒｔ）的毛状根离体培养系统,并诱导毛状根再生植株。方法：分别用发根农杆菌Ａ４,Ｒ１６０１和ＡＴＣＣ１５８３４三种菌株感染菘蓝的子叶外植体,获得毛状根,并筛选了优质株系;测定了毛状根的生长曲线;在含不同激素的培养基上诱导毛状根再生植株;利用高压纸电泳法对毛状根和再生植株进行Ｔ－ＤＮＡ转化的检测。结果：首次利用发根农杆菌Ａ４,Ｒ１６０１和ＡＴＣＣ１５８３４三种菌株成功地从菘蓝中诱导出毛状根;菘蓝毛状根在含ＢＡ的ＭＳ培养基中成功地诱导出再生植株;经高压纸民泳检测,菘蓝毛状根及其再生植株中均含有甘露三,表明Ｒｉ质粒的Ｔ－ＤＮＡ已整合进毛状根和再生植株中。结论：菘蓝毛状根离本培养和植株再生系统的建立,为进一步进行药用活性成分的工业化生产和引入外源基因改良性状奠定了基     

虎杖蒽醌类成分抗前列腺增生活性的效果比较

目的:比较虎杖不同蒽醌类成分抑制前列腺增生的效果,初步探索虎杖蒽醌类成分的结构与抑制前列腺增生作用的关系。方法:利用溶剂法分离虎杖提取液中的游离蒽醌和结合蒽醌,比较结合蒽醌与游离蒽醌以及5种游离蒽醌对前列腺增生模型小鼠前列腺系数的影响。结果:虎杖游离蒽醌可显著降低前列腺增生模型小鼠的前列腺系数,而结合蒽醌无此作用;5种游离蒽醌中,大黄素、芦荟大黄素、大黄酚降低前列腺系数的效果明显(P<0.05),尤以大黄素、芦荟大黄素效果最为显著(P<0.01),大黄酸和大黄素甲醚无此作用(P> 0.05)。结论:虎杖中的游离蒽醌大黄素、芦荟大黄素、大黄酚有抗前列腺增生作用,机制可能与此3种成分的3,6位引入了供电基团如-CH3、-OH、-CH2OH有关。     

RP-HPLC法测定小儿清热片中大黄5种蒽醌类成分含量

目的建立测定小儿清热片中大黄5种蒽醌类成分含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法,固定相为Diamonsil—C18柱,甲醇-0．2％（体积分数）H,PO。水溶液（体积比86．5：13．5）为流动相,流速为1．0mL·min^-1,检测波长为430nm,柱温为30℃。结果大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素质量浓度分别在2．0—12．0、3．6～21．6、16．0—96．0、5．4～32．4、3．0—18．0μg·mL^-1范同内具有良好的线性关系,平均回收率分别为102．1％、100．5％、103．1％、100．7％和99．3％（I=6）。结论该法可用于小儿清热片中大黄5种蒽醌类成分的含量测定。     

不对称1,8-二羟基-9,10-蒽醌化合物的单甲基化反应

本文以硫酸二甲酯、重氮甲烷和碘甲烷-氧化银为甲基化试剂,对芦荟大黄素、大黄酸甲酯和1,8-二羟基-3-乙酸甲酯-9,10-蒽醌三个结构不对称化合物的C_1和C_8羟基进行单甲基化反应。研究了这些异构体的分离方法,并应用核磁共振NOE效应确定了甲氧基在蒽醌母核上的位置。     

毛细管区带电泳测定大黄提取物中有效成分的含量

目的 采用毛细管区带电泳测定大黄提取物中大黄素、大黄酚和大黄酸的含量.方法 以熔融石英毛细管柱(67.4cm×75.0 μm,有效长度51.0 cm)为分离柱,60 mmol/L Na2B4O7,40 mmol/L Na2CO3,40 mmol/L β-环糊精(pH 8.9)为缓冲溶液,检测波长254 nm.结果 大黄提取物含量测定中大黄素、大黄酚和大黄酸精密度的相对标准偏差(RSD)分别为1.79％、4.46％和2.30％;3组分共同线性范围为1.1～19.0 mg/mL;大黄素、大黄酚和大黄酸的平均回收率分别为100.14％、99.65％和98.44％,RSD分别为2.43％、2.54％和2.02％(n=3).结论 该方法可用于大黄提取物的含量检测.     

用生物反应器培养决明发根合成游离蒽醌化合物

目的 :探索批量培养植物发根以生产次生代谢物的方法。方法 :用容量 5L的生物反应器培养决明发根 ,连续观测液体培养基 pH值变化 ,用分光光度计连续测定培养基中游离蒽醌类化合物的含量。 结果 :在 36d培养期内收获决明发根 76 1g ,发根鲜重增殖了 42倍。结论 :培养基 pH值的高低变化在一定程度上反映了生物反应器中游离蒽醌类化合物的合成情况。