荧光原位杂交技术在Down综合征基因诊断中的应用

本文对10例正常人和46例Down综合征患者外周血,12例正常绒毛(孕6～11周)及8例羊水细胞(孕16～20周)分别进行常规细胞培养G显带核型分析,应用地高辛标记的21号染色体特异性 DSCR Cosmid DNA探针对外周血、未经培养的绒毛及羊水细胞进行原位杂交,探讨该技术对Down综合征进行临床及产前诊断的应用价值。结果,外周血和绒毛细胞的杂交率达89％以上,羊水细胞杂交率较低(平均21％),FISH分析与常规G显带结果一致。提示应用荧光原杂交技术可在24 小时内对Down综合征做出快速而准确的临床及产前基因诊断。     

CA125产前诊断Down综合征的意义

ＣＡ１２５存在于浆膜表面，可在血清及羊水中测到。近年来有用于Ｄｏｗｎ综合征的产衣诊断报道。正常妇女血清中ＣＡ１２５水平很低，早期妊娠升高。有Ｄｏｗｎ综合征胎儿的母血清ＣＡ１２５与正常同孕周的早，中期妊娠相比，其水平无明显差异。孕中期有Ｄｏｗｎ综合征胎儿的羊水中ＣＡ１２５水平明显高于正常同孕周的妊娠。ＣＡ１２５产前诊断Ｄｏｗｎ综合征还有待进一步探索。     

青年胃印戒细胞癌细胞免疫状态及γδT细胞应用研究

青年胃印戒细胞癌是临床上预后较差的恶性肿瘤。为了研究该肿瘤患者的免疫状态及应用γδＴ淋巴细胞治疗可能性，对４例青年胃印戒细胞癌患者、６例正常人外周血作了免疫细胞表型分析（ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５、ＣＤ５６、Ｔγδ）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和白细胞介素６（ＩＬ－６）检测。并对４例患者采用γδＴ细胞／ＩＬ－２过继免疫治疗（ＡＣＩＴ），观察细胞免疫动态变化。结果表明：４例青年胃印戒细胞癌患者外周血ＣＤ＋３、ＣＤ＋４、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值均低于正常组。ＴＮＦ、ＩＬ－６水平均高于正常组；γδＴ细胞治疗后，外周血ＣＤ＋３、ＣＤ＋４、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值均升高。随访病人１０～２５个月，未见转移、复发，身体情况均好     

足月前胎膜早破妊娠结局分析

目的：探讨足月前胎膜早破分娩方式和破膜时间长短对妊娠结局的影响。方法收集2008年10月-2013年7月本院足月前胎膜早破住院患者190例，对孕28～32周、32＋1～34周、34＋1～36＋6周不同分娩方式及破膜时间的长短对母婴结局的影响进行回顾性的分析。结果28～32周组剖宫产的新生儿缺血缺氧性脑病（NIE）、脑室内出血（IVH）、新生儿呼吸窘迫综合征（RDS）的发生率（16.7％、16.7％和16.7％）与阴道分娩（76.9％、73.1％和84.6％）比较，32＋1～34周组剖宫产的新生儿窒息与死亡率（18.8％和3.1％）与阴道分娩（42.0％和16％）比较，差异有统计学意义；破膜时间越长，绒毛膜羊膜炎、产褥感染、新生儿感染及剖宫产分娩的发生率越高。结论针对不同孕周的足月前胎膜早破应采取不同的分娩方式，并根据破膜时间的长短给予抗生素治疗，尽量延长孕周以减少母儿并发症，改善妊娠结局。     

产前不同时期三维超声筛查胎儿唇裂的效果比较

目的 探讨产前不同时期三维超声筛查胎儿唇裂畸形的效果。方法 选择2007年8月至2014年6月在衡阳市第一人民医院进行产前检查并确诊胎儿为唇裂的孕妇31例,对其二维图像及三维成像进行对比,研究三维成像对胎儿唇裂的显示率及最佳显示时间。结果 31例唇裂中,孕14～19周5例,面部三维成像满意者3例,唇部结构清晰显示者2例（唇裂的三维超声显示率40．0％）;孕20～27周17例,面部三维成像满意或基本满意者15例,唇部结构清晰显示者15例（三维超声显示率88．2％）;孕28～34周6例,面部三维成像满意或基本满意者3例,唇部结构清晰显示者2例（三维超声显示率33．3％）;孕35周～39周3例,仅1例羊水过多患者面部三维成像满意,唇部结构显示清晰（三维超声显示率33．3％）。孕20～27周胎儿唇裂三维成像显示率明显高于孕14～19周（χ^2=5．119,P＝0．024）、28～34周（χ^2=6．933,P＝0．008）和35～39周（χ^2=4．804,P＝0．028）,差异均有统计学意义。三维成像满意显示的唇裂中Ⅰ度唇裂3例（15．0％）,Ⅱ度唇裂4例（20．0％）,Ⅲ度唇裂7例（35．0％）,唇裂合并上牙槽突裂3例（15．0％）,唇裂合并腭裂3例（15．0％）。结论 三维超声诊断胎儿唇裂存在明显的时限性,最佳时间为孕20～27周。     

羊水中IL-6和TNF-α含量与羊膜腔感染及早产关系的研究

目的探讨羊水中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平高低与绒毛膜羊膜炎及早产发生的关系。方法采用ELISA法对20例孕28-37周的早产孕妇和20例孕37-40周的正常孕产妇羊水中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）进行检测，并对胎膜组织进行病理检查。结果早产组羊水中IL-6、TNF-α的含量明显高于对照组（P〈0.05）。早产感染孕妇羊水中IL-6、TNF-α的含量明显高于正常非感染孕妇组，其差异有统计学意义（P〈0.05）。结论IL-6、TNF-α的产生与早产及羊膜腔感染有关，IL-6、TNF-α的高低可预测早产的发生。     

电荷流分离:孕期母血中有核红细胞的定量分析

目前常用的从绒毛或羊水穿刺中获取胎儿细胞进行产前诊断的方法有潜在的危险,使流产率增加0.5％。这就促进了对母血中寻找胎儿细胞方法的评估。正在实验的方法有流式细胞筛选法和磁化细胞筛选法(mag-netic-activated cell sorting,MACS)。这二种方法已成功地分离胎儿细胞并用于先天缺陷的产前诊断,如21三体的诊断。本研究采用一种新的方法分离胎儿细胞获得成功。 选择225例孕10～18周的孕妇,这些孕妇85％有遗传病家族史或筛选发现阳性及高龄。每例取静脉血15～16 ml,ACD抗凝,     

TIL辅助治疗肾细胞癌9例

肾癌（ＲＣＣ）有着独特的生物学特性，其肿瘤及转移灶对化疗不敏感，而对生物学治疗反应明显。近年来，有人提出肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），具有较强的抗肿瘤效应。本文通过９例肾细胞癌根治术后ＴＩＬ治疗前后患者外周血淋巴细胞表型的测定以验证其抗肿瘤效应。结果显示治疗后患者外周血中ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８细胞及ＣＤ５６（ＮＫ）细胞增殖；ＮＫ活性得到增强。     

通过羊水绒毛细胞酶学与遗传学连锁分析,产前诊断糖缺乏的糖蛋白综合征

糖缺乏的糖蛋白（ＣＤＧ）综合征是一组累及多种器官的先天性疾病，受害部位包括神经系统、肝、肾、心、脂肪组织、骨骼与生殖器。依据临床表现和血清转铁蛋白的等电点聚焦结果，可分为Ⅰ—Ⅳ型。其中以Ⅰ型ＣＤＧ最常见。患者培养的羊水绒毛膜细胞内磷酸甘露糖变位酶（Ｐ...     

妊娠羊水过少307例资料分析

[目的]探讨晚期妊娠羊水过少的相关因素，寻找正确的处理方法，降低围产儿病死率。[方法]对厦门市中医院2006年1月至2007年1月诊断为羊水过少的307例产妇资料进行分析。[结果]3610名产妇中，羊水过少的307例，羊水过少发生率为8．50％。孕周〈40周的为4．39％，40～41周的为9．13％，≥42周的为30．21％，不同孕周羊水过少发生率的差异有统计学意义（P〈0．01）。307例中，267例（占86．97％）产前B超诊断羊水过少。围生儿胎儿宫内窘迫发生率为31．92％，羊水粪染发生率为30．94％，新生儿窒息发生率为16．61％，脐带缠绕发生率为29．64％。分娩时羊水粪染发生率剖宫产者（247例）为16．60％，阴道分娩者（60例）为33．33％，差异有统计学意义（P〈0．01）；新生儿窒息发生率剖宫产者为6．88％，阴道分娩者为15．00％，差异有统计学意义（P〈0．05）。[结论]晚期妊娠羊水过少发生率较高，确诊后应尽量采取剖宫产，以降低围产儿病死率。     

猕猴桃汁抗环磷酰胺致突变作用的机理

目的用大鼠外周血双核淋巴细胞微核测试法（ＣＢＭＮＴ），在哺乳动物整体水平，研究猕猴桃汁抗环磷酰胺（ＣＰ）的致突变作用以及生物转化Ⅱ相酶的作用。方法测定大鼠外周血双核淋巴细胞微核细胞率及肝组织中总谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（ＵＤＰＧＴ）、谷氨酰胺转肽酶（γＧＴ）活性。结果猕猴桃汁对ＣＰ诱发的大鼠外周血双核淋巴细胞微核细胞率有显著抑制作用，能明显诱导大鼠肝脏总ＧＳＴ、ＵＤＧＴＰ活性，但对γＧＴ活性无显著影响。大鼠外周血双核淋巴细胞微核细胞率与总ＧＳＴ、ＵＤＧＴＰ活性呈明显负相关。结论猕猴桃汁抗ＣＰ致微核形成作用的机理可能是通过诱导机体外来化合物代谢解毒酶系，加速ＣＰ的代谢灭活     

反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能的观察

目的 探讨反复呼吸道感染（ＲＲＴＩ）患儿淋巴细胞免疫功能的动态变化。 方法 采用ＬＴＴ,间接免疫荧光法。ＥＬＩＳＡ等方法,对５４例ＲＲＴＩ患我笔２１例对照组儿童的外周血淋巴细胞的增殖应答效应,ＩＬ－２Ｒ的表达能力,Ｔ细胞亚群,ＣＤ４／ＣＤ８比值等项目进行了检测。 结果ＲＲＴＩ患儿与对照儿童的ＰＢＬ增殖应答能力无显著差异（Ｐ〉０．０５）;Ｔ细胞亚群,ＣＤ４／ＣＤ８比值有显著差异（Ｐ〈０．０１）;ＲＲ     

人肺癌组织耐药基因（MDR1）表达及意义

应用ＰＣＲ定量分析技术对１０４例肺癌患者的ＭＤＲ１基因进行了前瞻性研究，结果发现，初治患者６９％（５５／８０）有ＭＤＲ１基因表达增高，而经过治疗的患者１００％（２４／２４）有ＭＤＲ１基因表达增高，其中小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）的增高有显著意义（Ｐ＜０．０１），在没有经过治疗的患者，２１％（１８／８０）ＭＤＲ１表达量处于高水平，而经过治疗的患者，７５％（１８／２４）ＭＤＲ１表达量较高（Ｐ＜０．０１）。ＭＤＲ１基因高表达的患者化疗有效率明显低于ＭＤＲ１不表达或低表达的患者，其中以ＳＣＬＣ患者最为明显（Ｐ＜０．０１）。结果表明，检测肺癌患者尤其是ＳＣＬＣ患者的ＭＤＲ１基因的表达情况，对临床指导化疗非常重要。     

急性白血病血清乳酸脱氢酶测定及其预后意义的研究

检测了６８例初诊急性白血病（ＡＬ）口才血清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）水平，并与部分ＡＬ的细胞核型、疗效及预后进行了相关性分析。追踪观察了２１例ＡＬ化疗前后的血清ＬＤＨ变化。结果表明：（１）ＡＬ的ＬＤＨ明显增高，其主要来源于白血病细胞，可作代表全身白血病细胞负荷的一项重要指标；（２）化疗前ＡＬ血清ＬＤＨ水平与完全缓解（ＣＲ）率、无病生存期（ＤＦＳ）及总生存期（ＯＳ）有相关，提示它作为ＡＬ疗效及预后判断的一     

早期羊膜腔穿刺用于产前细胞遗传学诊断的研究

1970年以来,妊娠中期的羊膜腔穿刺(MA),是产前细胞遗传学诊断的最安全方法。妊娠早期采用绒毛活检的方法行产前诊断,有诸多问题。近十年有许多妊娠早期的羊膜腔穿刺(EA)报告。本研究对EA和MA进行对比分析。 460例羊水穿刺标本中,279例在早期(孕10～14周)进行,181例在中期(孕15周     

孕中期血清AFP、F-βHCG筛查唐氏综合征

目的 探讨孕妇血清标记物甲胎蛋白（AFP）和游离绒毛膜促性腺激素（F－βHCG）对孕中期孕妇进行唐氏综合征为主的先天缺陷筛查的作用。方法 对孕中期（14－20^6W)妇女进行上述二项血清生化指标检测，经过软件计算风险，对可能影响检测结果的部分因素，如孕妇年龄、体重、孕周等加以分析校正，对高风险孕妇，进一步行羊水或脐血染色体检查及B超进行确诊。每例受检的孕妇随访追踪到出生。结果 871例孕妇中，发现唐氏综合征2例，X－三体综合征1例，平衡易位携带者3例，其它胎儿异常6例。结论 孕中期血清AFP、F－βHCG二项血清生化指标联合检测，作为筛查胎儿先天缺陷，尤其是胎儿染色体三体征及表皮缺陷、畸形有效可行。筛查结果高危孕妇应进一步行羊水染色体或B超检查确诊，以减少缺陷儿出生。     

正常人群21号染色体上3个位点的多态性及在染色体数目识别中的应用

目的 探讨正常人群21号染色体S1435，S1270，S3个位点的多态性及三者联合应用于21－三体综合征产前诊断中的可行性。方法 利用3个位点的四聚核苷酸重复序列多态性，用生物素标记聚合酶链反应（PCR），扩增DNA，检测沈阳地区60例孕中期（18－22周）孕妇羊水。结果 21号染色体S1435，S1270和S3个位点杂合率分别为80．00％（48／60），78．33％（47／60），83．33％（50／60），3个位点均纯合占0．75％。结论 正常人群21号染色体上均出现3个位点的四聚核苷酸重复序列，应用PCR方法可方便和快捷地在24h内完成21－三体综合征的产前诊断工作。3个位点联合使用可提高诊断率。     

小儿急性感染性多发性神经根炎T细胞亚群状态的探讨

本文对２０例急性感染性多发性神经根炎患儿外周血Ｔ细胞亚群进行检查及动态观察，结果患儿在急性期ＣＤ３＋、ＣＤ４＋比正常儿减少（Ｐ均＜０．０１）、ＣＤ３＋增多（Ｐ＜０．０５）、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值低于正常儿；在恢复期ＣＤ３＋、ＣＤ４＋比急性期增多（Ｐ均＜０．０５）、ＣＤ８＋减少（Ｐ＜０．０５）．ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值上升并接近正常儿，该结果与细胞介导的迟发性超敏反应为基础的自身免疫学说的理论不相符，提示本病的发生可能与Ｔ细胞亚群平衡的失调，细胞免疫功能低下有关。     

120例不同孕周羊水细胞培养结局及影响因素初探

目的探讨不同孕周羊水细胞培养的结局及相关影响因素。方法对120例不同孕周引产孕妇在B超引导下行羊膜腔穿刺术,取羊水细胞培养;统计不同孕周羊水细胞培养的成功率,并对不同孕周孕妇的年龄、外周血WBC、羊水WBC指标与培养结局进行相关分析。结果 120例羊水细胞培养成功114例,培养成功率为95.0%;18周到22周羊水细胞培养成功率最高,为100%;孕妇的年龄是不同孕周下影响羊水细胞培养成功率相关因素(P<0.05)。结论 18周到22周进行羊水细胞培养能有效提高羊水细胞培养的成功率;不同孕周条件下孕妇的年龄对羊水细胞培养结局有影响。     

孕中期检测血清AFP、Free—β—hCG和inhibin—A产前筛查的临床价值

目的探讨孕中期血清标记物甲胎蛋白（AFP）、游离β-人绒毛膜促性腺激素（Free—β—hCG）和抑制素A（inhibin—A）在产前筛查的实用价值。方法对3728例孕14～20周的孕妇分别采用化学发光法和酶联免疫方法检测血清AFP、Free—β—hCG和inhibin—A浓度,通过训‘算机软件计算危险系数,对高风险率孕妇进行遗传咨询,在知情同意的情况下进行羊水细胞染色体的产前检查。结果在3728例孕妇中筛查出唐氏综合征、β-三体及神经管缺损高危孕妇163例,占筛查总数的4．37％。91例进一步确诊,共检出先天缺陷7例,检出率为7．69％。结论孕中期血清中AFP、Free—β—hCG和inhibin—A用于产前筛查能早期发现和诊断胎儿先天缺陷,对降低其出生率是有效的,可以应用于临床大范围人群的产前筛查。