知母宁体外抗甲型流感病毒作用研究

目的:考察知母宁体外抗甲型流感病毒作用.方法:以利巴韦林作阳性对照药物,用中性红染色法测定知母宁不同加药方式对甲型人流感病毒H1N1的体外抑制作用及其时效关系.结果:知母宁对甲型人流感病毒具明显的综合抑制作用及抑制病毒吸附后的复制增殖作用,这两种作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.70及0.76 mg·ml-1.知母宁对病毒吸附的预防作用弱,无直接杀伤病毒的作用.随药物作用时间延长,知母宁在低浓度抗病毒有效率呈减小趋势,在高浓度时(≥1.4 mg·ml-1)其抗病毒能力基本不变.同时知母宁可明显降低病毒的感染性.结论:知母宁具有明显的体外抗甲型人流感病毒作用.     

中西医结合体外抗甲型流感病毒的实验研究

目的研究中西医结合药物体外对甲型流感病毒的抑制作用。方法体外接种甲型流感病毒鼠肺适应株H1N1于狗肾细胞（MDCK）,观察各组药物体外抗病毒作用。结果根据实验,测得各组药物对甲型流感病毒的选择指数,利巴韦林注射液组为4.68;痰热清注射液组为5.50;达菲组为5.53;中西医结合组为14.48。结论中西医结合组具有明显的体外抗甲型流感病毒的作用。     

通窍止咳液体外抗甲型人流感病毒作用研究

目的:研究通窍止咳液体外抗甲型人流感病毒的作用。方法:以利巴韦林作阳性对照药物,采用存留细胞结晶紫染色法测定通窍止咳液不同加药方式对甲型人流感病毒H3N2的体外抑制作用及其时效关系。结果:通窍止咳液对甲型人流感病毒具有良好的综合抑制作用及抑制病毒吸附后的复制增殖作用;通窍止咳液对病毒吸附的预防作用弱,无直接杀伤病毒的作用;随药物作用时间延长,通窍止咳液在低浓度时的抗病毒有效率呈降低趋势,在高浓度时的抗病毒能力基本不变。结论:通窍止咳液具有较好的体外抗甲型人流感病毒的作用。     

天然多糖在体外抗甲型流感病毒作用的普遍性

目的研究各种天然多糖在体外抗甲型流感病毒的作用,探索多糖未来的抗病毒药学用途.方法 以云芝、虫草、灵芝、猴头菇4种天然多糖和葡聚糖为研究对象,观察天然多糖对狗肾传代细胞(MDCK)上甲型流感病毒的直接灭活作用、治疗作用、预防作用和综合阻断作用:观察天然多糖对鸡胚中甲型流感病毒的直接灭活作用.结果 云芝、虫草、灵芝、猴头菇4种天然多糖对甲型流感病毒有体外灭活作用,这种作用呈剂量和时间依赖关系;毒性低,对病毒感染有一定的治疗作用,安全指数均大于14;没有明显的预防作用;有一定程度的综合阻断作用.结论 在随机获取的5种多糖中,云芝等4种天然多糖具有抗甲型流感病毒的活性,说明天然多糖分子可能普遍具有抗病毒活性,如何在实际中运用多糖这一特征防治病毒感染值得进一步研究.     

蒲公英有机萃取物的抗甲型H1N1流感病毒作用

目的 通过检测蒲公英不同的萃取物体外抗甲型H1N1流感病毒作用,探讨其在甲型H1N1流感治疗上的应用。方法 首先用乙醇萃取而得到蒲公英的乙醇萃取物,然后依次采用乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、水萃取蒲公英的乙醇萃取物,得到不同溶剂的萃取物;选用狗肾传代MDCK细胞作为病毒的宿主对病毒进行培养和扩增;通过血凝效价和Real time RT-PCR实验,间接或直接检测蒲公英不同萃取物对病毒的中和作用和增殖抑制作用。结果 4种不同溶剂的蒲公英萃取物作用病毒后,只有石油醚、乙酸乙酯组的血凝效价数值出现了一定程度的下降,其中乙酸乙酯萃取物组的值下降了2~4倍;而石油醚萃取物在96 h时,中和实验组和增殖抑制组的血凝效价值分别下降了256倍和128倍。Real time RT-PCR检测表明,石油醚和乙酸乙酯萃取物明显抑制病毒的扩增量。作用96 h时,无论是中和实验还是增殖抑制实验,石油醚萃取物的作用都是最显著的,病毒扩增率较阳性对照分别减少了92.4%和95.6%。结论 蒲公英乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物在体外有明显的抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

干扰素诱导跨膜蛋白抗甲型流感病毒的研究进展

干扰素诱导跨膜蛋白（interferoninducibletransmembraneproteins,IFITM）是20世纪80年代人们通过小干扰RNA技术研究中发现的一种抗病毒蛋白,目前该蛋白的抗病毒作用及其机制已成为研究热点。迄今的研究发现,IFITM的抗甲型病毒感染作用是通过多种途径实现的。IFTIM能够有效作用于甲型流感病毒表面糖蛋白血凝素与宿主细胞表面受体结合之后、流感病毒包膜与内吞形成的胞内体膜融合之前的流感病毒感染的胞内体途径。在该作用过程中,IFITM下调网格蛋白的表达,扰乱液泡ATP酶（V型ATP酶,vacuolarATPase,v—ATPase）的酸化功能,破坏胞内体胆固醇的平衡,从而抑制病毒包膜与胞内体膜融合,阻断病毒RNA释放到细胞质中。此外,IFITM也能够影响感染细胞与正常细胞之间的半融合,发挥抑制病毒感染的作用。近年来的研究提示,IFITM通过诱导记忆T细胞选择性高表达该蛋白,继而保护细胞免受甲型流感病毒感诳．     

山银花水提物体外抗甲型H1N1流感病毒的作用研究

目的:考察山银花水提物(SYHW)体外抗甲型H1N1流感病毒(H1N1病毒)的作用。方法:以H1N1病毒感染体外培养的犬肾小管上皮细胞(MDCK细胞),计算病毒的半数组织培养感染剂量(TCID_(50));以不同质量浓度SYHW作用MDCK细胞24 h,考察其最大无毒浓度。然后将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW预防给药组、治疗给药组和直接杀灭给药组(均给予最大无毒浓度的SYHW,并以100 TCID_(50)H1N1病毒感染细胞),测定SYHW的抗病毒有效率(ER);将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW治疗给药组、直接杀灭给药组(给药及病毒感染方法同上),分别测定细胞增殖指数(PI)和细胞凋亡率的变化。结果:H1N1病毒的100 TCID_(50)为1.26×10~(-7),SYHW对MDCK细胞的最大无毒浓度为50μg/m L(细胞存活率为91.3%)。SYHW预防给药组、SYHW治疗给药组和SYHW直接杀灭给药组的ER分别为0、80.3%、52.7%。与正常细胞组比较,病毒对照组细胞的PI值显著降低(P<0.05),早期、晚期凋亡率显著升高(P<0.05);与病毒对照组比较,SYHW直接杀灭给药组细胞的PI值显著升高、早期凋亡率显著降低(P<0.05),SYHW治疗给药组细胞的早期凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:SYHW具有体外抗H1N1病毒的作用,且以治疗给药和直接杀灭给药抗病毒作用较好。     

清热合剂体外抗流感病毒的作用评价

目的:研究清热合剂对流感病毒A3的抑制作用。方法:采用鸡胚实验技术,通过红细胞凝集实验,以流感病毒血凝滴度为指标观察大鼠含药血清对流感病毒抑制作用。结果:大鼠按24g.kg-1剂量灌胃清热合剂后,1,2,3,4h含药血清有抗病毒作用,血凝滴度抑制率为86.37%,82.32%,80.72%和72.74%。按12g.kg-1剂量灌胃清热合剂后,1,2,3h含药血清有抗病毒作用,血凝滴度抑制率为71.53%,67.58%和66.14%。且发现清热合剂对流感病毒A3的抑制作用存在明显的量效关系。结论:清热合剂在鸡胚中对流感病毒A3有显著抑制作用。     

一清胶囊抗甲型H1N1流感病毒作用

目的 研究一清胶囊抗甲型H1N1流感病毒作用。方法 采用小鼠气管内注入甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)病毒液建立病毒感染小鼠模型,以肺指数、肺指数抑制率、小鼠累积死亡率为指标,评价一清胶囊体内抗甲型H1N1流感病毒作用。结果 7.3 g·kg^-1一清胶囊(原生药)可降低病毒感染小鼠的肺脏指数(P<0.05)和小鼠感染病毒后7~9 d内的死亡率(P<0.01)。结论 一清胶囊具有明显的抗甲型H1N1流感病毒作用。     

松针叶绿素-胡萝卜素膏对HP定植的胃溃疡大鼠的作用

目的研究松针叶绿素-胡萝卜素膏对HP定植的乙醇烧灼型胃溃疡大鼠的作用。方法采用幽门螺杆菌多次重复感染乙醇烧灼型胃溃疡大鼠,造成HP感染相关的胃溃疡模型,然后再给药。取血清和胃组织等样本,检测不同处理组溃疡指数及血清和胃组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、前列腺素E2(PGE2)以及胃泌素(GAS)等指标的含量,观察松针叶绿素-胡萝卜素膏的抗胃溃疡作用。结果松针叶绿素-胡萝卜素膏能有效抑制此种胃溃疡模型,可能机制是增强SOD、PGE2的活性,同时抑制MDA、GAS的活性。结论松针叶绿素-胡萝卜素膏对HP定植的乙醇烧灼型胃溃疡具有治疗作用。     

Antiviral activities of diarylheptanoids against influenza virus in vitro

The anti-influenza A/PR/8/34 (H1N1) virus activities of ten diarylheptanoids isolated from Alpinia officinarum were examined using the MTT method. The 50% inhibitory concentration of each diarylheptanoid examined was clearly lower than its 50% cytotoxic concentration determined by the MTT assay and/or maximum non-cytotoxic concentration (MNCC) determined by the morphological change of cells. In particular, the influenza virus was more susceptible to 7-(4″-hydroxy-3″-methoxyphenyl)-1-phenyl-4E-hepten-3-one (3) and (5S)-5-hydroxy-7-(4″-hydroxyphenyl)-1-phenyl-3-heptanone (8) than the other diarylheptanoids. Thus, all diarylheptanoids exhibited potential antiviral activity against influenza virus in vitro.     

临床常用中成药的体外抗流感病毒活性评价

本文旨在研究我国临床常用清热解毒中成药的体外抗病毒活性。通过应用已建立的流感病毒神经氨酸酶 (neuraminidase, NA) 抑制剂筛选模型, 评价了33种临床常用中成药的NA抑制活性, 应用已建立的流感病毒诱导的细胞病变效应模型, 对具有NA抑制作用的部分中成药进行了体外抗病毒活性评价。结果表明, 临床常用中成药液体制剂的NA抑制活性普遍较高, 包括双黄连口服液、清开灵口服液、清热解毒口服液和热毒宁注射液, 其中双黄连口服液在细胞水平对于病毒感染所致细胞病变效应 (CPE) 也具有较高抑制活性; 中成药固体制剂中, 双黄连注射粉针的NA抑制活性最高, 而复方鱼腥草片则显示较高的体外抗病毒活性。综合分析表明, 大多数中成药具有一定的NA抑制活性, 但只有部分药物具有明显的体外抗病毒活性, 其活性结果对于中成药的活性物质基础研究和临床用药将具有指导意义。     

复方柴胡胶囊抗甲I型流感病毒作用的实验研究

目的:观察复方柴胡胶囊抗甲I型流感病毒的作用。方法:以甲I型病毒滴鼻感染小鼠,观察复方柴胡胶囊对小鼠肺指数、病毒致小鼠死亡率及肺部病理切片的影响。结果:复方柴胡胶囊0.5、1.0、2.0g/kg三个剂量组均可明显延长感染甲I型流感病毒小鼠的存活期,其中高剂量组可有效降低感染小鼠的肺指数,对肺组织的病变有一定的保护作用。结论:复方柴胡胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,延长生命率,降低甲I型流感病毒感染小鼠的死亡率,对病毒性感冒有较好的疗效。     

复方柴胡胶囊抗甲Ⅰ型流感病毒作用的实验研究

目的：观察复方柴胡胶囊抗甲Ⅰ型流感病毒的作用。方法：以甲Ⅰ型病毒滴鼻感染小鼠，观察复方柴胡胶囊对小鼠肺指数、病毒致小鼠死亡率及肺部病理切片的影响。结果：复方柴胡胶囊0．5、1．0、2．0g／kg三个剂量组均可明显延长感染甲Ⅰ型流感病毒小鼠的存活期，其中高剂量组可有效降低感染小鼠的肺指数，对肺组织的病变有一定的保护作用。结论：复方柴胡胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状，延长生命率，降低甲Ⅰ型流感病毒感染小鼠的死亡率，对病毒性感冒有较好的疗效，     

扇贝裙边糖胺聚糖体外抗I型单纯疱疹病毒实验研究

目的研究扇贝裙边糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法运用单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSM44株),并以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察病毒感染后的细胞变性反应(cytopathic effect,CPE)和运用MTT比色法,检测不同浓度药物SS-GAG对Ⅰ型单纯疱疹病毒是否有直接的灭活作用、对HSV-Ⅰ感染复制的抑制活性以及对HSV-Ⅰ感染细胞的综合作用等,并观察药物对Vero细胞的毒性作用。结果与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25mg.L-1)能有效地保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制。此作用随着药物浓度的增加而增强。但是SS-GAG对HSV-Ⅰ没有直接的灭活作用;SS-GAG在50~1600mg.L-1浓度范围内对Vero细胞无明显的细胞毒性。结论SS-GAG在体外实验系统中显示出明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅰ病毒感染的活性作用。     

In vitro inhibitory effect of carrageenan oligosaccharide on influenza A H1N1 virus

Carrageenan polysaccharide has been reported to be able to inhibit the infection and replication of many different kinds of viruses. Here, we demonstrated that a 2 kDa κ-carrageenan oligosaccharide (CO-1) derived from the carrageenan polysaccharide, effectively inhibited influenza A (H1N1) virus replication in MDCK cells (selectivity index >25.0). Moreover, the 2 kDa CO-1 inhibited influenza A virus (IAV) replication better than that of 3 kDa and 5 kDa κ-carrageenan oligosaccharides (CO-2 and CO-3). IAV multiplication was suppressed by carrageenan oligosaccharide treatment in a dose-dependent manner. Carrageenan oligosaccharide CO-1 did not bind to the cell surface of MDCK cells but inactivated virus particles after pretreatment. Different to the actions of carrageenan polysaccharide, CO-1 could enter into MDCK cells and did not interfere with IAV adsorption. CO-1 also inhibited IAV mRNA and protein expression after its internalization into cells. Moreover, carrageenan oligosaccharide CO-1 had an antiviral effect on IAV replication subsequent to viral internalization but prior to virus release in one replication cycle. Therefore, inhibition of IAV intracellular replication by carrageenan oligosaccharide might be an alternative approach for anti-influenza A virus therapy.     

武当地区马尾松松针中原花青素含量测定研究

目的 探讨武当地区马尾松松针中原花青素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定松针中原花青素的含量。色谱柱为Sum Fortis C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为乙腈∶水(15∶85),流速为0.6 mL·min-1,柱温30℃,检测波长为280 nm。结果 经方法学考察,原花青素在0.258～2.58 g·L-1范围内,峰面积与所试浓度线性关系良好,准确度高,精密度好。武当地区松针样品中原花青素含量为44.65 mg·g-1。结论 该方法操作简便,有效成分原花青素的含量较高,开发前景广阔,旨在其进一步研究提供依据。     

银翘散主要药物提取物体外抑制流感病毒作用的比较研究

目的:观察并比较银翘散主要药物金银花、连翘、牛蒡子及其配伍提取物体外抗甲型流感病毒FM1株作用.方法:采用血凝试验对中药不同浓度、不同时间点进行体外抗甲型流感病毒的效价测定.结果:金银花、连翘、牛蒡子及其配伍提取物可直接抑制甲型流感病毒FM1株的活性,作用时间从1 h可持续到24 h;各时间点各中药提取物在最大不凝血浓度即金银花25 mg/mL、连翘50 mg/mL、牛蒡子100 mg/mL、配伍组50 mg/mL时均能完全抑制病毒的增殖,其对病毒的抑制作用随着药物浓度的降低而逐渐减弱.结论:金银花、连翘、牛蒡子及其配伍提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株体外增殖.     

Progress in structure-based drug design against influenza A virus

Introduction: The 2009-H1N1 influenza pandemic has prompted new global efforts to develop new drugs and drug design techniques to combat influenza viruses. While there have been a number of attempts to provide drugs to treat influenza, drug resistance has been a major problem with only four drugs currently approved by the FDA for its treatment.

Areas covered: In this review, the drug-resistant problem of influenza A viruses is discussed and summarized. The article also introduces the experimental and computational structures of drug targeting proteins, neuraminidases, and of the M2 proton channel. Furthermore, the article illustrates the latest drug candidates and techniques of computer-aided drug design with examples of their application, including virtual in silico screening and scoring, AutoDock and evolutionary technique AutoGrow.

Expert opinion: Structure-based drug design is the inventive process for finding new drugs based on the structural knowledge of the biological target. Computer-aided drug design strategies and techniques will make drug discovery more effective and economical. It is anticipated that the recent advances in structure-based drug design techniques will greatly help scientists to develop more powerful and specific drugs to fight the next generation of influenza viruses.