柴芩解热颗粒抗菌抗病毒作用的实验研究

目的观察柴芩解热颗粒的抗菌抗病毒作用。方法通过体内外抗菌实验观察柴芩解热颗粒对相关细菌的抗菌作用及对细菌感染的小鼠保护作用;以甲型HlNl流感病毒致MDCK病变,采用MTT比色法检测柴芩解热颗粒体外抗病毒作用,通过体内抗病毒观察其对流感病毒感染小鼠的保护作用和对小鼠肺炎的影响。结果柴芩解热颗粒对金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌有较强的体外抗菌作用,对细菌引起小鼠死亡有一定的保护作用;抑制流感病毒致MDCK细胞病变的半数有效浓度（IC50）为1．57g·L-1,治疗指数（TI）为73．5,能降低感染甲型H1N1流感病毒的小鼠死亡率,有效抑制流感病毒所致的小鼠肺损伤。结论柴芩解热颗粒具有明显的抗菌抗病毒作用。     

桂枝-生姜药对SFE-CO2萃取物体外抗甲型流感病毒（H1N1）及GC/MS研究

目的:探讨桂枝-生姜药对超临界CO2萃取物抗甲型H1N1流感病毒(2009流行株)的有效成分,以期诠释其药效物质基础。方法:采用超临界CO2萃取法提取桂枝-生姜药对的有效物质部位,通过细胞病变效应(CPE)与噻唑蓝(MTT)比色法对其抗甲型H1N1流感病毒感染狗肾细胞(MDCK)的作用进行比较研究,并用GC/MS技术分析鉴定其化学成分。结果:桂枝-生姜超临界CO2萃取物对甲型H1N1流感病毒具有一定抑制作用,且成明显的量-效关系,其半数抑制浓度(IC50)为63.6μg·mL-1,治疗指数(TI)为1.2,阳性对照药利巴韦林对流感病毒直接灭活作用的IC50为453.2μg·mL-1,TI为1.0;从桂枝-生姜药对的超临界CO2萃取物中分离鉴定出55个成分,占成分含量的97.29%,其桂皮醛占62.85%,2-甲氧基肉桂醛占16.03%,邻苯二甲酸二异辛酯占7.99%,主要为醛、酮、烯、酯类化合物。结论:桂枝-生姜药对超临界CO2萃取物具有一定的抗甲型H1N1流感病毒作用,作用形式为直接灭活,且成剂量依赖性。     

鬼针草提取物解热抗菌抗病毒作用的研究

目的观察鬼针草提取物是否具有解热、抗菌、抗病毒作用。方法采用伤寒菌致家兔发热模型及2,4-二硝基苯酚所致大鼠发热2个模型,观察鬼针草提取物解热作用;采用金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌感染小鼠模型,研究鬼针草提取物的体内抗菌作用;通过测定鬼针草提取物对临床分离菌株的最小抑菌浓度值(minimum inhibitory concentration,MIC),研究鬼针草提取物的体外抗菌作用;采用流感甲型和乙型病毒感染的犬肾细胞(madin-darby canine kidney cells,MDCK)模型,通过观察鬼针草提取物对MDCK细胞病变的改善情况,研究鬼针草提取物的体外抗病毒作用。结果家兔解热试验表明,鬼针草提取物能明显抑制伤寒菌苗所致的发热,解热作用显著,呈剂量效应关系;2,4-二硝基苯酚引起大鼠发热作用的试验结果表明,鬼针草提取物解热作用显著,呈剂量效应关系;体内外抗菌试验表明,鬼针草提取物具有抑菌和杀菌作用,体内抗表皮葡萄球菌ED_(50)为24.62 g·kg~(-1),体内抗金色葡萄球菌ED_(50)为29.16 g·kg~(-1);体外抗流感病毒试验表明,鬼针草提取物具有能抑制流感甲型和乙型病毒的作用。结论鬼针草提取物具有解热、抗菌、抗病毒作用。     

知母宁体外抗甲型流感病毒作用研究

目的:考察知母宁体外抗甲型流感病毒作用.方法:以利巴韦林作阳性对照药物,用中性红染色法测定知母宁不同加药方式对甲型人流感病毒H1N1的体外抑制作用及其时效关系.结果:知母宁对甲型人流感病毒具明显的综合抑制作用及抑制病毒吸附后的复制增殖作用,这两种作用的半数有效浓度(EC50)分别为0.70及0.76 mg·ml-1.知母宁对病毒吸附的预防作用弱,无直接杀伤病毒的作用.随药物作用时间延长,知母宁在低浓度抗病毒有效率呈减小趋势,在高浓度时(≥1.4 mg·ml-1)其抗病毒能力基本不变.同时知母宁可明显降低病毒的感染性.结论:知母宁具有明显的体外抗甲型人流感病毒作用.     

苎麻叶萃取物体外抗甲型流感病毒(H1N1)和抗氧化活性测定

目的:研究苎麻叶不同溶剂萃取物对甲型流感病毒(H1N1)的体外抑制作用和抗氧化活性,以扩大苎麻植物的药用部位并开发天然抗病毒、抗氧化药物。方法:取苎麻叶以95%乙醇提取,分别用水加热溶解醇提物浸膏,再以不同溶剂分别萃取,制得苎麻叶石油醚相、三氯甲烷相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物。考察50～400μg/mL的苎麻叶水相萃取物对犬肾细胞(MDCK)的毒性作用;以利巴韦林为阳性对照,采用甲型流感病毒(H1N1)攻击MDCK细胞,并采用Western blotting法检测相同质量浓度的苎麻叶石油醚相、三氯甲烷相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物溶液(均为100μg/mL),不同质量浓度的苎麻叶水相萃取物溶液(50、100、200、400μg/mL)以及不同质量浓度的利巴韦林溶液(0.31、0.63、1.25μg/mL)对病毒感染的细胞中核蛋白(NP)表达水平。以维生素C为阳性对照,采用羟基自由基(·OH)清除试验、DPPH自由基清除试验和还原试验考察各相萃取物的体外抗氧化活性。结果:苎麻叶水相萃取物质量浓度在400μg/mL以内时对MDCK细胞无毒性;苎麻叶石油醚相、三氯甲烷相、乙酸乙酯相、水相萃取物质量浓度在100μg/mL时均能显著降低甲型流感病毒(H1N1)感染的细胞中NP蛋白表达水平(P<0.01);而不同质量浓度(50～400μg/mL)的水相萃取物均能显著降低NP蛋白表达水平(P<0.01),且呈一定浓度依赖趋势;其石油醚相和乙酸乙酯相萃取物的抗氧化活性与维生素C较为接近。结论:苎麻叶水相萃取物具有较好的体外抗甲型流感病毒(H1N1)作用;其石油醚相和乙酸乙酯相萃取物表现出较好的体外抗氧化活性。     

穿心莲内酯磺化物体外抗流感病毒药效学研究

目的探讨穿心莲内酯磺化物（andrographolide sulfonated,ADS）体外对甲型流感病毒H1N1、H3N2以及乙型流感病毒（B）的抑制作用及最佳浓度。方法采用细胞病变观察法（CPE）、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法,观察药物对狗肾传代细胞（MDCK）的毒性作用,计算半数有毒浓度（TC50）和最大无毒浓度（TC0）;3种流感病毒分别接种于MDCK,观察不同浓度的药物对病毒致CPE的影响,测定药物对病毒的增殖抑制率,Probit回归法计算药物的半数有效浓度（EC50）和治疗指数（TI）;红细胞血凝素滴定法测定ADS对流感病毒血凝素抑制作用。结果 CPE、MTT法测得ADS对MDCK的TC0≤0.781 3 mg.mL-1,TC50为2.280 8 mg.mL-1。ADS对H1N1、H3N2、B流感病毒的EC50分别为0.072 6、0.152 7、0.158 5 mg.mL-1,TI分别为31.42、14.93、14.39,此外ADS对不同流感病毒血凝素抑制作用,最低抑制浓度分别为0.048 9、0.097 8、0.097 8 mg.mL-1,且呈现出量效关系。结论 ADS体外抗H1N1、H3N2以及B型流感病毒感染作用,可能是通过药物抑制流感病毒表面的血凝素的活性而实现的。     

中西医结合体外抗甲型流感病毒的实验研究

目的研究中西医结合药物体外对甲型流感病毒的抑制作用。方法体外接种甲型流感病毒鼠肺适应株H1N1于狗肾细胞（MDCK）,观察各组药物体外抗病毒作用。结果根据实验,测得各组药物对甲型流感病毒的选择指数,利巴韦林注射液组为4.68;痰热清注射液组为5.50;达菲组为5.53;中西医结合组为14.48。结论中西医结合组具有明显的体外抗甲型流感病毒的作用。     

山银花水提物体外抗甲型H1N1流感病毒的作用研究

目的:考察山银花水提物(SYHW)体外抗甲型H1N1流感病毒(H1N1病毒)的作用。方法:以H1N1病毒感染体外培养的犬肾小管上皮细胞(MDCK细胞),计算病毒的半数组织培养感染剂量(TCID_(50));以不同质量浓度SYHW作用MDCK细胞24 h,考察其最大无毒浓度。然后将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW预防给药组、治疗给药组和直接杀灭给药组(均给予最大无毒浓度的SYHW,并以100 TCID_(50)H1N1病毒感染细胞),测定SYHW的抗病毒有效率(ER);将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW治疗给药组、直接杀灭给药组(给药及病毒感染方法同上),分别测定细胞增殖指数(PI)和细胞凋亡率的变化。结果:H1N1病毒的100 TCID_(50)为1.26×10~(-7),SYHW对MDCK细胞的最大无毒浓度为50μg/m L(细胞存活率为91.3%)。SYHW预防给药组、SYHW治疗给药组和SYHW直接杀灭给药组的ER分别为0、80.3%、52.7%。与正常细胞组比较,病毒对照组细胞的PI值显著降低(P<0.05),早期、晚期凋亡率显著升高(P<0.05);与病毒对照组比较,SYHW直接杀灭给药组细胞的PI值显著升高、早期凋亡率显著降低(P<0.05),SYHW治疗给药组细胞的早期凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:SYHW具有体外抗H1N1病毒的作用,且以治疗给药和直接杀灭给药抗病毒作用较好。     

复方抗病毒制剂体外抗流感病毒和呼吸道合胞病毒作用及毒性研究

目的 测定复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒的抗病毒作用. 方法 用鸡红细胞血凝素滴定法测定不同浓度复方抗病毒制剂在狗肾传代细胞（MDCK）中对流感病毒的抑制作用;用中和实验测定复方抗病毒制剂在Hep 2细胞中对呼吸道合胞病毒的活性. 结果 复方抗病毒制剂浓度＜1.5 mg&#8226;mL^-1时对MDCK细胞及Hep 2细胞无明显毒性. 浓度＞0.15 mg&#8226;mL^-1能抑制流感病毒的血凝活性和呼吸道合胞病毒对靶细胞的攻击作用. 结论 复方抗病毒制剂体外对流感病毒和呼吸道合胞病毒具有较强的抑制作用,且有较大的安全性.     

天然多糖在体外抗甲型流感病毒作用的普遍性

目的研究各种天然多糖在体外抗甲型流感病毒的作用,探索多糖未来的抗病毒药学用途.方法 以云芝、虫草、灵芝、猴头菇4种天然多糖和葡聚糖为研究对象,观察天然多糖对狗肾传代细胞(MDCK)上甲型流感病毒的直接灭活作用、治疗作用、预防作用和综合阻断作用:观察天然多糖对鸡胚中甲型流感病毒的直接灭活作用.结果 云芝、虫草、灵芝、猴头菇4种天然多糖对甲型流感病毒有体外灭活作用,这种作用呈剂量和时间依赖关系;毒性低,对病毒感染有一定的治疗作用,安全指数均大于14;没有明显的预防作用;有一定程度的综合阻断作用.结论 在随机获取的5种多糖中,云芝等4种天然多糖具有抗甲型流感病毒的活性,说明天然多糖分子可能普遍具有抗病毒活性,如何在实际中运用多糖这一特征防治病毒感染值得进一步研究.