手性衍生化-反相高效液相色谱法测定L-肌肽的光学纯度

目的建立柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法(HPLC)测定L-肌肽对映体的纯度。方法以邻苯二甲醛/N-乙酰基-L-半胱氨酸(OPA/NAC)为手性衍生化试剂,反应生成具有荧光吸收的一对非对映异构体衍生物,采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流速1.0mL·min-1,50mmol·L-1乙酸铵缓冲溶液(pH6.0)-甲醇(70:30,V/V)流动相,柱温35℃,λex=350nm,λem=450nm。结果L-肌肽与其光学异构体分离度大于3,在0.104～2.68mg·L-1范围内,D-肌肽衍生物色谱峰面积与其浓度呈良好线性关系,检测限浓度为0.02mg·L-1。结论建立的L-肌肽光学异构体(杂质)手性衍生化-HPLC拆分检查法方便准确,可用于L-肌肽的光学纯度控制。     

手性衍生化-反相HPLC法测定福多司坦光学纯度

的一对非对映异构体衍生物（λmax=338am），经ODS色谱柱23mmol／L醋酸盐缓冲溶液（pH6．0）-甲醇-乙腈（60：37：3）流动相进行分离，可测定福多司坦的光学纯度。结果：手性衍生化-反相高效液相色谱法测定福多司坦非对映异构体衍生物的色谱峰分离度大于3，最低检测限浓度约为40μg／L（S／N=3），灵敏度高，衍生化产物稳定，方法重现性好。结论：邻苯二甲醛／N-异丁酰基-L-半胱氨酸（OPA／IBLC）手性衍生化-反相高效液相色谱法可用于L-福多司坦光学纯度的准确灵敏的检查控制。     

GITC柱前手性衍生化HPLC测定吡喹胺光学异构体纯度

以乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,用反相高效液相色谱法成功地拆分了吡喹胺(1,3,4,6,7,11b-六氢-2H吡嗪[2,1-a]并异喹啉-4-酮)光学异构体。在此基础上建立了测定吡喹胺光学异构体纯度的方法,并已用于d-和l-吡喹胺纯度的测定。     

GITC柱前手性衍生化HPLC测定吡喹胺光学异构体纯度

以乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,用反相高效液相色谱法成功地拆分了吡喹胺(1,3,4,6,7,11b-六氢-2H吡嗪[2,1-a]并异喹啉-4-酮)光学异构体。在此基础上建立了测定吡喹胺光学异构体纯度的方法,并已用于d-和l-吡喹胺纯度的测定。     

柱前手性衍生化反相高效液相色谱法拆分地佐西平对映异构体的研究

用乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)作柱前手性衍生化试剂,以反相高效液相色谱法成功地拆分了地佐西平对映异构体。在此基础上建立了地佐西平对映异构体纯度和血药浓度测定方法。已用于测定右旋地佐西平的光学纯度和小鼠血药浓度。     

蒜氨酸光学纯度和立体构型的研究

目的:研究国产蒜氨酸的光学纯度及其立体构型。方法:采用邻苯二甲醛/N-异丁酰基-L-半胱氨酸(OPA/IBLC)为柱前手性衍生化试剂,建立了柱前衍生化 RP-HPLC 法测定蒜氨酸的光学纯度,色谱条件为:SHIM-PACK CLC-ODS 柱(5μm,4.6mm×150mm),流动相为甲醇-醋酸盐缓冲液(1000 mL 水,加醋酸铵1 g 和冰醋酸1 mL)(50:50),UV/MS 检测,UV检测波长230 nm,MS 采用 SIM[M H]~ m/z 467检测;流速1.0 mL·min~(-1),UV 检测限约为0.4μg·mL~(-1),MS 检测限约为0.04μg·mL~(-1),采用高效液相色谱制备蒜氨酸工作对照品,测定其比旋度,确定其立体构型。结果:手性衍生化柱前 RP-HPLC 测定结果表明国产蒜氨酸中无光学异构体存在,自制蒜氨酸对照品比旋度测定结果与文献报道值一致。结论:国产蒜氨酸中无手性对映体杂质,其立体构型为( )S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定L-半胱氨酸原料中光学杂质

目的建立左旋半胱氨酸中右旋异构体杂质检查的柱前衍生化高效液相色谱法。方法用衍生化试剂4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并二唑（NBD-Cl）对半胱氨酸进行柱前衍生化,衍生化产物在Sumichiral OA-2500S手性柱上进行分离,流动相为甲醇（含15 mmol/L柠檬酸）-乙腈（10∶90）,检测波长470 nm。结果在优化的色谱条件下,半胱氨酸对映体的分离度大于3.0,D-半胱氨酸质量浓度线性范围是1.2～6.0μg/mL,平均回收率为102.5%,重复性试验中RSD小于1.9%。结论所用方法结果准确、重现性好,可用于左旋半胱氨酸原料药中右旋体杂质的控制。     

柱前手性衍生化-反相高效液相色谱法拆分布洛芬对映异构体

目的：建立一种柱前手性衍生化-反相高效液相色谱紫外法检测布洛芬的异构体。方法：以N′N-羰基二咪唑（CDI）作为活化剂活化布洛芬的羧基基团,再以（R）-（+）-1-（1-萘基）乙胺（R-NEA）作为手性衍生化试剂进行反应。选用Kromasil C18色谱柱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,以乙腈-0.05%磷酸（68∶32）为流动相,检测波长225 nm。结果：布洛芬的非对映异构体色谱峰的保留时间分别为25.6 min和27.9 min。结论：本方法操作简单,条件温和,衍生化产物稳定,且衍生化试剂价格便宜,更准确地实现了对布洛芬对映异构体的分离检测。     

电泳中介微分析法手性分离抗生素制剂中氨基酸的可行性探讨

目的 应用电泳中介微分析(EMMA)技术手性分离抗生素制剂中的氨基酸.方法 以邻苯二甲醛和非手性巯基试剂或手性巯基试剂为衍生化试剂,采用柱上衍生化EMMA技术,以手性毛细管区带电泳或非手性胶束电动色谱为分离手段,分别对抗生素制剂中的4种常用氨基酸进行全自动的在线手性分离.结果 采用新建立的柱上衍生化EMMA技术可手性分离精氨酸、门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸,抗生素或其衍生物均不干扰氨基酸衍生物的检测,分析快速,专属性强,成本低廉,自动化程度高.结论 该方法可应用于抗生素制剂中氨基酸的手性分离.     

手性配体高效液相色谱拆分肌肽对映体

目的建立手性配体高效液相色谱法对肌肽对映体进行拆分。方法在Phenomenex chirex 3126手性色谱柱上,以硫酸铜为手性配体流动相,考察了进样量、流动相有机添加剂、流速、柱温、Cu2+浓度等因素下肌肽色谱拆分行为和热力学特性,并初步探讨了溶质在配体手性柱上的识别机制。结果检测波长在254nm,流动相为2mmol.L 1CuSO4水溶液-乙腈(96∶4),流速1.0mL.min-1可实现肌肽对映体的基线分离。其在色谱柱分离的焓变差值ΔΔHo与熵变差值ΔΔSo对手性识别都有贡献,拆分过程为焓控过程。其中L-肌肽与手性配体及Cu2+形成的络合物呈现出不稳定性,与典型的构像异构色谱行为一致。结论肌肽对映体可采用手性配体色谱法实现基线分离,其中L-肌肽形成的配位体具不稳定性。