烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞核因子κB的影响及机制

核因子κB(NF-κB)是重要的转录调节因子，吸烟作为导致慢性阻塞性肺疾病(COPD)的重要因素．其对NF-κB的影响及作用机制尚不清楚。我们的实验通过在体及离体研究，探讨烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)、NF-κB的作用及相关机制。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者痰巨噬细胞核因子-κB、血清白三烯B4和白细胞介素-8变化及临床意义

在慢性阻塞性肺病(COPD)的发病机制中炎症机制起重要作用,且有多种炎性细胞及细胞因子参与,其中核因子-κB(NF-κB)、血清白三烯(LT)B4、白介素(IL)-8可能作用谱更广、作用强度更大[1].我们观察老年COPD急性加重期和稳定期患者痰巨噬细胞中NF-κB和血清中LTB4、IL-8表达的变化,旨在了解在老年COPD发病中的炎性网络调节体系中三者之间的关系.     

高血压合并慢性阻塞性肺病患者外周血微小RNA-155与Toll样受体4-核转录因子κB通路的相关性

目的 探讨高血压合并慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血微小RNA-155(miR-155)水平与Toll样受体4-核转录因子κB(TLR4-NF-κB)通路的相关性.方法 选择2017年10月-2019年10月收治的高血压合并COPD患者200例作为高血压+COPD组,单纯高血压患者200例和单纯COPD患者200例...     

免疫抑制剂对小鼠肺泡巨噬细胞抗曲霉感染相关受体mRNA表达的影响

目的 探讨免疫抑制剂对小鼠肺泡巨噬细胞抗曲霉感染相关受体mRNA表达的影响.方法 30只昆明小鼠随机分为2组:正常对照组(6只)和免疫抑制组(24只,环磷酰胺150 mg/kg腹腔注射).免疫抑制组小鼠注射环磷酰胺后4 h、8 h、16 h及24 h,分别随机取6只进行支气管肺泡灌洗,收集肺泡巨噬细胞.正常对照组小鼠注射生理盐水24 h后处死,收集肺泡巨噬细胞.使用逆转录-聚合酶链反应检测小鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体2(TLR2)、TLR4、树突状细胞相关C型凝集素1(Dectine-1)mRNA表达变化.结果 与正常对照组比较,腹腔注射环磷酰胺4 h后,TLR2 mRNA表达即出现显著下降(P＜0.01);在腹腔注射环磷酰胺8 h后TLR4 mRNA表达出现显著下降(P＜0.01);Dectine-1 mRNA在腹腔注射环磷酰胺后无明显变化.结论 免疫抑制剂环磷酰胺能够下调肺泡巨噬细胞抗曲霉感染相关受体TRL2和TLR4 mRNA的表达,对Dectine-1 mRNA的表达未见明显影响.     

巨噬细胞炎症蛋白-1α在机械通气大鼠肺泡巨噬细胞中的表达

目的 通过检测不同潮气量机械通气大鼠肺泡巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65蛋白表达水平,探讨肺泡巨噬细胞(AM)活化在呼吸机所致肺损伤(VILI)中的作用.方法 32只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组、常规潮气量组和大潮气量组.采用SABC法分别测定各组大鼠BALF肺泡MIP-1α及NF-κB p65蛋白表达水平.并用100-CX型透射电镜观察其AM的超微结构.结果 大潮气量和常规潮气量组大鼠BALF肺泡MIP-1α及NF-κB p65蛋白染色阳性细胞百分比均明显高于对照组和小潮气量组(P＜0.01);大潮气量组大鼠BALF肺泡MIP-1α及NF-κB p65蛋白染色阳性细胞百分比与常规潮气量组比较亦有显著差异;小潮气量组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).透射电镜下显示,大潮气量和常规潮气量组大鼠AM呈功能激活状态.结论 AM是引起VILI的始动细胞之一,在VILI的发病中具有重要作用;AM活化并释放MIP-1α是引起肺内PMN聚集、活化,导致VIL1发生的一个重要因素;AM表达与释放MIP-1α在某种程度上可能受NF-κB的调控.     

Toll样受体7在抗感染免疫中的作用

Toll样受体7 (Toll-like receptor 7, TLR7)是一种模式识别受体,细胞静息状态下主要定位于浆细胞样树突状细胞、巨噬细胞、 T淋巴细胞、中性粒细胞等免疫细胞,以及上皮细胞、内皮细胞、角质形成细胞等非免疫细胞的内质网上。病原体感染时,TLR7从内质网转移到效应细胞的内体膜上。TLR7可直接识别单链RNA或核酸类似物等配体,与特异性招募蛋白结合并激活核因子-κB、丝裂原活化蛋白激酶和干扰素等调控因子,从而启动固有免疫应答和适应性免疫应答,参与抗感染免疫。本文就TLR7及其配体的结构与功能、 TLR7在抗感染免疫中的作用及其相关信号通路等进行综述,以期为TLR7在抗感染免疫中的作用机制研究提供科学依据。     

肾移植术后患者Toll样受体4的表达及意义

天然免疫相关分子Toll样受体（toll like receptor, TLR）是Medzzhitor和Janewary等[1]在1997年发现的人类模式识别受体,最近研究显示[2],TLR4等分子可能通过调控单核/巨噬细胞、树突状细胞等抗原呈递细胞的活化,CD80等第二信号的表达,在移植免疫中发挥重要角色.为了解TLR4在肾脏移植免疫反应中的作用,我们对肾移植术后患者TLR4和其下游分子CD80＋的表达情况进行了研究.     

单核细胞趋化蛋白1在熏香烟大鼠气道的表达及泼尼松对其的影响

研究显示吸烟者和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中肺泡巨噬细胞(AM )数目显著升高,且COPD患者小气道病变和肺气肿的严重程度与肺组织的AM数量呈正相关[1,2 ] 。单核细胞趋化蛋白1(MCP 1)作为一种重要的趋化因子,对单核巨噬细胞的募集和活化起着重要作用,但MCP 1在COPD中的作用目前尚不清楚。我们的研究目的为观察香烟致大鼠气道MCP 1水平的变化及泼尼松对其的影响。材料与方法　雄性Wistar大鼠(四川大学华西实验动物中心) 2 4只,鼠龄12周,体重180～2 2 0 g ,采用随机排列表法分为:正常对照组(A组,8只) ,…     

肺泡巨噬细胞活化在大鼠呼吸机相关肺损伤中的作用

呼吸机相关肺损伤（ventilator induced ling injury,VILI）是机械通气的严重并发症,发生机制非常复杂.参与VILI的细胞很多，目前研究较多的是中性粒细胞，肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞，而肺泡巨噬细胞（AM）在VILI发生中的作用尚少见报道。本研究通过检测不同潮气量机械气大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α（MIP-1α）和核因子κB（NF-κB）p65蛋白的表达，探讨AM活化在VILI发病中的作用。     

丹皮酚对高血压患者血管内皮细胞Toll样受体4、核因子-κB表达的影响

目的 观察丹皮酚对Toll样受体(TLR)、核因子(NF) -κB信号转导通路的影响,探讨其对高血压患者血管内皮细胞的保护机制.方法 10％高血压患者及健康人血清干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C)24 h,实时荧光定量(PCR)法检测TLR4 mRNA表达.不同浓度的丹皮酚干预脂多糖(LPS)诱导的HUVEC-C TLR4表达(24 h)及NF-κB活化(2 h),PCR法测TLR4 mRNA及NF-κB mRNA的表达,免疫印迹技术测TLR4蛋白及NF-κB蛋白的表达.结果 血清作用24 h后,高血压病组TLR4 mRNA的表达较健康组增高(P＜0.01).丹皮酚可呈剂量依赖性减少LPS诱导的TLR4 mRNA高表达,抑制LPS诱导的TLR4蛋白高表达和IκBα蛋白的降解(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 TLR-NF-κB信号途径介导的炎症反应和免疫紊乱是高血压病血管内皮损伤的机制之一,丹皮酚可通过抑制其表达保护血管内皮细胞损伤.     

硫辛酸调节Toll样受体4途径对帕金森病细胞模型的保护作用和机制

目的 探究硫辛酸调节Toll样受体4(TLR4)/NF-κB/白细胞介素1β(IL-1β)途径对帕金森病细胞模型的保护作用和机制.方法 将PC12细胞分为对照组、脂多糖组、联合组(脂多糖+硫辛酸).检测各组细胞活力、细胞凋亡率、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达以及培养液中IL-1β水平.结果 各组细胞活力、细胞...     

老年慢性阻塞性肺疾病患者吸烟与肿瘤坏死因子-α介导全身炎症反应的关系

吸烟是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要危险因素.长期吸烟引起气道炎症反应,表现为中性粒细胞、巨噬细胞、活化T细胞增生,细胞因子水平上升,包括肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8[1,2].虽然大多数吸烟者均显示有全身细胞和(或)体液炎症反应,仅少数人发生COPD[3],COPD患者全身炎症反应以中性粒细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞数量增多,周围血中高浓度的炎症介质如C-反应蛋白(CRP)、IL-6、IL-8和TNF-α等[4～6].这些促炎因子主要由活化的巨噬细胞产生,在COPD的发病过程中起重要作用,最终导致组织损伤和重构[7].吸烟与COPD患者血浆TNF-α水平上升的确切机制尚不十分清楚[4,8].可溶性TNF受体升高,与全身TNF-α有关联的一种间接介质,能够影响COPD患者的全身炎症反应[9].本文探讨COPD患者吸烟与TNF-α介导全身炎症反应的关系.     

COPD并发肺部感染TLR4/NF-κB通路与细胞因子水平及意义

目的分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发肺部感染Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路与细胞因子变化及临床意义。 方法选择2018年4月至2020年6月我院收治的COPD并发肺部感染患者68例为观察组,选择医院同时间段收治的COPD患者29例为对照组。对比2组TLR4mRNA、NF-κBmRNA及细胞因子表达水平。统计COPD并发肺部感染患者预后,Logistic多因素回归分析COPD并发肺部感染患者预后的影响。 结果两组白血胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-α(IFN-α)、TLR4mRNA、NF-κBmRNA水平对比有显著性差异(P<0.05);68例COPD并发肺部感染患者,病死率为17.64%;病死者肺部感染病原菌为真菌占比、急性生理与慢性健康Ⅱ(APACHEⅡ)评分、TNF-α、TLR4mRNA、NF-κBmRNA水平显著高于存活者(P<0.05);Logistic回归结果显示,APACHEⅡ评分、TNF-α、TLR4mRNA及NF-κBmRNA水平为影响COPD并发肺部感染患者预后的因素(OR＝3.480、3.885、2.959、3.074,P<0.05)。 结论APACHEⅡ评分高、TLR4/NF-κB通路被激活及细胞因子水平升高是影响COPD并发肺部感染患者预后的因素。     

慢性阻塞性肺疾病肺泡巨噬细胞吞噬功能低下机制的研究进展

<正>慢性阻塞性肺疾病(COPD)是目前世界范围内老年人中致死性疾病上升速度最快的疾病之一,造成了严重的经济和社会负担。COPD急性加重(AECOPD)是COPD患者病程中造成病情进展、肺功能恶化的非常重要的过程,是造成COPD患者住院率和死亡率增加的最主要原因。众所周知,多种炎性细胞和肺部的结构细胞参与了COPD的发病,其中肺泡巨噬细胞(AM)因直接暴露于环境中的香烟烟雾、大气可吸入颗粒物     

TLR4激动上调内皮细胞氧化低密度脂蛋白受体LOX-1表达

目的近年研究表明介导先天免疫反应的受体Toll样受体4(TLR4)参与了动脉硬化的发生发展.业已证明氧化低密度脂蛋白受体LOX-1介导内皮细胞活化和功能失调,激发炎症过程,在动脉粥样硬化的发生和发展中起着极为重要作用.本研究观察TLR4激动是否调节内皮细胞LOX-1表达.方法应用脂多糖(LPS)刺激体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h.采用RT-PCR和流式细胞术分别检测TLR4、LOX-1 mRNA和蛋白表达水平.为了观察转录因子NF-κB在调节LOX-1表达中的作用,应用NF-κB特异性抑制剂咖啡酸苯乙酯(CAPE)预处理细胞,然后以LPS刺激,检测LOX-1 mRNA和蛋白变化.结果LPS(10～1 000 ng/mL)上调HUVECs TLR4和LOX-1 mRNA表达,LPS(1 000ng/mL)上调TLR4和LOX-1蛋白表达,CAPE(20μg/mL)可抑制LPS介导的LOX-1表达上调.结论TLR4/NF-κB信号途径可能通过上调内皮细胞LOX-1表达参与动脉粥样硬化的发生及发展.     

腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜Toll样受体4信号通路的研究

目的 研究Toll样受体4(TLR4)、CD14、髓样分化蛋白-2(MD-2)及NF-κB在腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者结肠黏膜的表达,了解TLR4/NF-κB信号传导通路及其在IBS致病机制中的作用.方法 采用免疫组化法半定昔分析30例IBS-D患者及12名健康志愿者结肠黏膜TLR4、CD14MD-2和NF-κB的表达情况.结果 免疫组化结果显示,IBS-D组TLR4的吸光度[A值,(0.3971±0.0996)]高于健康对照组(0.3044±0.0481);IBS-D组的NF-κB阳性率及强度均比健康对照组增高;IBS-D组的黏膜固有层MD-2阳性细胞数高于健康对照组,固有层CD14阳性率高于健康对照组,差异均有统计学意义.两组的肠上皮细胞中MD-2和CD14均为低表达或无表达.结论 IBS-D患者的肠道黏膜存在TLR4/NF-κB信号传导通路的活化,TLR4在IBS-D发病中具有一定作用.     

NF-κB decoy寡核苷酸对结肠癌SW480细胞TLR4表达的影响

目的 探讨核转录子κB(NF-κB)decoy寡核苷酸(ODNs)对结肠癌SW480细胞Toll样受体4(TLR4)表达的影响. 方法 体外培养SW480细胞,LPS(10μL)刺激3 h后,用脂质体Lipofectin2000介导NF-κB decoy ODNs转染6 h,RT-PCR法检测细胞的TLR4 mRNA.设对照组、LPS组、SODN组、Lipofectin2000组. 结果 转染NF-κB decoy ODN的SW480细胞的TLR4 mRNA表达明显高于对照组(P<0.01),但明显低于其他组(P均<0.01). 结论 NF-κB decoy ODNs明显抑制SW480细胞TLR4的表达.     

慢性阻塞性肺疾病气道炎症与肺泡巨噬细胞炎症蛋白1α、明胶酶B活性的研究

目的探讨慢性支气管炎(慢支炎)及慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺泡巨噬细胞(AM)培养上清液中巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)、明胶酶B(MMP-9)的浓度变化.方法用支气管肺泡灌洗技术收集BALF,用ELISA方法测定13例COPD组患者、14例慢支炎组患者和14名正常对照组的BALF和AM培养上清液的MIP-1α、MMP-9浓度.结果慢支炎组及COPD组BALF及AM培养上清液的MIP-1α、MMP-9浓度高于正常对照组(P均<0.05).BALFMIP-1α、MMP-9浓度分别与AM培养上清液MIP-1α、MMP-9浓度呈正相关(r=0.253,P<0.05;r=0.529,P<0.01).BALF中AM数与MIP-1α、MMP-9浓度呈正相关(r=0.558,P<0.01;r=0.405,P<0.01).结论AM是COPD患者肺内MIP-1α、MMP-9的主要细胞来源,MIP-1α及MMP-9通过促进AM等炎症细胞在肺内的聚集而参与了慢支炎及COPD的炎症过程.     

溃疡性结肠炎患者外周血单核细胞中Toll样受体4、NF-κB的表达及其临床意义

目的 分析溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单核细胞中Toll样受体4(TLR4)、核因子-κ,B(NF-κB)水平的变化,探讨两者在UC发病中作用.方法 根据结肠镜检和病理活检结果,106例UC患者分为活动期组(57例)和缓解期组(49例),另同期健康体检患者50例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定所有对象外周血单核细胞中TLR4和NF-κB的表达情况.结果 与对照组比较,UC患者外周血单核细胞TLR4、NF-κBmRNA表达水平显著升高,且活动期组与缓解期组间比较差异有统计学意义(P＜0.05):按病理分级与Ⅰ级比较,Ⅱ级、Ⅲ级患者外周血单核细胞TLR4、NF-κB mRNA表达水平显著升高,且随着病理分级升高,TLR4 、NF-κB mRNA表达依次增加(P ＜0.05).UC患者TLR4与NF-κB mRNA表达均呈线性正相关,相关系数r=0.753(P ＜005).结论 UC患者外周血单核细胞中TLR4及NF-κB呈高表达状态,且TLR4的表达与NF-κB的表达密切相关.     

肝X受体激动剂T0901317对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞炎性因子释放的影响及其机制

目的 观察肝X受体激动剂T0901317对脂多糖诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子释放的影响,并探讨其机制.方法 160 nmol/L佛波酯孵育THP-1巨噬细胞24h后分为四组:对照组、脂多糖组、T0901317组和脂多糖+T0901317组,酶联免疫吸附法检测培养液中炎症因子含量.LipofectarnineTM2000转染ATP结合盒转运子A1(ABCAl) siRNA,定量PCR检测细胞ABCA1、ABCG1和Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达,Western blot检测ABCA1、ABCG1、TLR4和核因子κB (NF-κB) p65的蛋白表达.结果 T0901317抑制脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)释放,促进THP-1巨噬细胞ABCA1和ABCG1表达;转染ABCA1 siRNA后,ABCA1的蛋白表达明显下降,T0901317对炎症因子的抑制作用明显减弱;T0901317下调TLR4和核内NF-κB的表达.结论 T0901317抑制脂多糖诱导的炎症反应,可能与其促进膜转运体ABCA1表达,抑制膜受体TLR4和转录因子NF-κB的表达有关.