重症急性胰腺炎大鼠肾脏1α-羟化酶表达与血钙变化的研究

目的 通过建立大鼠重症急性胰腺炎模型,观察大鼠肾脏1α-羟化酶表达和血清钙水平变化,探讨两者的变化是否有相关性.方法 SPF级雄性Wistar大鼠80只,按随机数字法分为假手术组(SO组)和重症急性胰腺炎组(SAP组),各组分为1、3、6、12h4个时间点,各时间点10只.经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型,在各时间点处死大鼠后检测血清淀粉酶、血清钙及血清肌酐与血清尿素氮水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清1,25-二羟维生素D3水平,免疫组化检测肾脏组织1α-羟化酶表达部位及表达量,Western blotting法对肾脏组织中1α-羟化酶表达进行定量分析,光镜下观察胰腺组织及肾脏组织的病理变化,电镜下观察肾脏近曲小管上皮细胞的超微结构改变.结果 与SO组比较,SAP组肾脏组织病理损伤逐渐加重,1、3、6、12 h各时间点血清淀粉酶、血清肌酐、血清尿素氮水平升高(P＜0.05),3h、6h、12h点血清钙水平及血清1,25-二羟维生素D3水平降低(P＜0.05),Western blotting肾脏1α-羟化酶表达在1h、3h升高,在6h、12h表达降低(P＜0.05).SAP组大鼠血清钙水平、1,25-二羟维生素D3水平、肾脏1α-羟化酶表达随时间点推移逐渐降低,Western blotting结果显示SAP组1、3、6、12 h各时间点肾脏1α-羟化酶表达与血清1,25-二羟维生素D3水平呈正相关(r=0.93,P＜0.01; r=0.95,P＜0.01;r =0.92,P＜0.01;r=0.88,P＜0.01),3、6、12h各时间点肾脏1α-羟化酶表达与血清钙水平呈正相关(r=0.98,P＜0.01;r=0.95,P＜0.01;r=0.75,P＜0.01).结论 SAP病程早期随着病情发展肾脏损伤逐渐加重,肾脏中1α-羟化酶表达逐渐降低,低钙血症的发生可能与肾脏中1α-羟化酶活性下降有关.     

N-乙酰半胱氨酸对重症急性胰腺炎大鼠肾损伤保护作用的研究

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损伤的保护作用及机制.方法 30只SD雄性大鼠,年龄7~8周,随机分为假手术(SO)组、SAP模型组、NAC组,每组10只.采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠(0.1 Ml/100 g)诱导SAP模型,NAC组在造模后30 min腹腔注射5%NAC 2 Ml/kg,SO组和SAP组均在造模后30 min腹腔注射生理盐水2 Ml/kg.造模后12 h分批剖杀大鼠,心脏取血,取胰头及左肾组织冻存,测定血清淀粉酶(AMY)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化,行胰腺和肾脏病理学观察,Western blot法检测肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达.结果 SAP组血清AMY、Cr、BUN、TNF-α、胰腺及肾组织病理损伤、肾组织MPO活性和ICAM-1蛋白表达与SO组比较差异有统计学意义(P<0.01),NAC组各指标与SAP组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 NAC可能通过减轻胰腺损伤、减少血清TNF-α等促炎因子产生、减少肾脏ICAM-1蛋白表达及白细胞聚集,对SAP大鼠肾损伤发挥保护和治疗作用.     

罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎的作用

目的 探讨罗格列酮(ROSI)静脉给药对大鼠重症急性咦腺炎(SAP)的作用及其机制. 方法 雄性Wistar大鼠54只,随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、罗格列酮预处理组(ROSI组),每组18只大鼠.胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型.SO组、SAP组造模前30 min股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)(0.2 ml/100g);ROSI组则注射等量的10%DMSO溶解的罗格列酮(6 mg/kg).术后3、6、12 h分批剖杀大鼠,每个时间点6只.检测血清淀粉酶(AMY)和胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平,取胰头部胰腺组织行病理学检查;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达水平. 结果 SAP组各时间点AMY、MPO及病理评分较SO组升高(P<0.05);ROSI组上述指标较SAP组下降,AMY在6 h、12h时点差异具有统计学意义(P<0.05)、MPO在12 h差异具有统计学意义(P<0.05).SAP组各时间点TNF-α和ICAM-1 mRNA的表达水平均较SO组升高(P<0.05),其中TNF-α在6 h时点达高峰、ICAM-1在12 h时点达高峰.ROSI组各时间点TNF-α mRNA的表达水平较SAP组下降(P<0.05);6h、12 h时点ICAM-1 mRNA的表达水平较SAP组降低(P<0.05). 结论 罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎具有保护作用,其机制与抑制胰腺组织TNF-α和ICM-1 mRNA的表达有关.     

重症急性胰腺炎大鼠模型胰腺组织信号转导与转录激活因子-1的变化

目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织信号转导与转录激活因子-1(STAT-1)活性的动态变化。方法:Wistar大鼠36只随机分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)。采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备SAP模型。术后3、6、12h分别处死大鼠,测定血清淀粉酶水平,胰头部胰腺组织病理切片HE染色检测胰腺病理改变,免疫组化SABC法检测胰腺组织磷酸化STAT-1蛋白的表达情况。结果:SAP组各时间点血清淀粉酶逐渐升高,胰腺病理损伤逐渐加重,与SO组各时间点相比差异均有显著性(P<0.01);SAP组各时间点磷酸化STAT-1蛋白含量均高于SO组(P<0.01),术后3h达高峰,后逐渐下降。结论:SAP时胰腺组织STAT-1的活化可能在其发病过程中起到一定作用。     

依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤保护作用的试验研究

目的：研究依达拉奉对大鼠重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）相关性脑损伤的保护作用。方法：72只健康雄性SD大鼠随机分SAP组、处理组及正常对照组,每组24只。采用胰管穿刺注射5％牛磺胆酸钠制备大鼠SAP模型,处理组加用依达拉奉。分别在术后第3h、6h、12h采集血液、胰腺组织、脑组织标本,观察血浆淀粉酶、胰腺组织病理变化,应用ELISA法检测血浆、脑组织TNF-α的水平,测定脑组织含水量、丙二醛含量及微血管内聚集和附壁的白细胞计数。应用RT-PCR法检测脑组织核因子-κB p65 mRNA的表达情况。结果：SAP组6h、12h脑组织含水量比正常对照组明显升高（P〈0．05）;而处理组6h、12h上述指标比SAP组显著下降（P〈0．05）。SAP组各时间点的胰腺组织病理学评分分值,脑组织NF-κB p65 mRNA表达水平、TNF-α水平,脑组织丙二醛含量及微血管内白细胞聚集和附壁计数,血浆淀粉酶、TNF-α水平,与正常对照组比较均明显增高（P〈0．05）;处理组6h、12h上述各项指标比SAP组明显降低（P〈0．05）。结论：依达拉奉可能通过清除SAP大鼠脑自由基,抑制核因子-κB的激活,减少TNF-α等细胞因子的生成,抑制炎症反应,从而对SAP大鼠脑损伤起保护作用。     

依达拉奉对大鼠重症急性胰腺炎致肾损伤的保护作用

目的 研究依达拉奉(3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮)对大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)所致肾损伤是否具有保护作用.方法 将18只雄性SD大鼠随机分为治疗组(注射依达拉奉组)、对照组(注射生理盐水组)和假手术组,每组6只.制备SAP大鼠模型,造模成功后对治疗组大鼠尾静脉注射依达拉奉(6 mg/kg体质量),术后观察72 h后通过心脏放血来处死大鼠,取出肾及胰腺组织,其余各组大鼠均静脉注射生理盐水(1 mL/100 g体质量).观察大鼠肾脏组织的髓过氧化酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平、血清尿素氮、肌酐水平和组织学变化及依达拉奉对其的影响.结果 对照组的MPO活性增强,MDA水平提高,血肌酐、尿素氮水平均明显升高;依达拉奉可以明显降低血肌酐、尿素氮、肾脏组织的MPO活性和MDA水平,同时依达拉奉可以减轻大鼠肾脏组织的病理损害而并未改善胰腺组织的病理损害.结论 依达拉奉可明显降低SAP大鼠肾脏组织MPO活性、MDA水平,改善肾脏功能,减轻肾脏组织病理损害.     

高迁移率蛋白-1在重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤中的作用

目的:探讨高迁移率蛋白-1(HMGB1)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺中的变化规律及其对胰腺损伤的作用.方法:84只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(36只)、SAP组(48只).SAP模型采用十二指肠壁穿刺经乳头逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠1 mL/kg建立.造模后1、3、6、12、24、48 h处死动物.采用EUSA法检测胰腺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Westem blot测定胰腺HMGB1水平.同时观察胰腺组织病理变化,检测血清淀粉酶(AMY)及腹水量.结果:与对照组相比,SAP组胰腺TNF-α于术后1 h开始明显升高,6 h达高峰,12h即大幅下降,而HMGB1术后12 h显著升高,24 h达高峰.48 h仍维持在较高水平;同时SAP组胰腺病理评分及血清AMY、腹水量亦明显高于对照组(P<0.05).结论:HMGB1作为一种晚期炎症因子参与了SAP大鼠的胰腺组织损伤.     

重组葡激酶对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织缺血的影响

目的观察大鼠重症急性胰腺炎（SAP）时血中内皮素-1（ET-1）、血管性假血友病因子（vWF）、6-酮-前列腺素-F1α（6-keto-PGF1α）、血栓素B2（TXB2）、血小板最大聚集率（PAGm）水平及胰腺组织血流量的变化，评价重组葡激酶（r—Sak）对其的干预作用。方法81只SD大鼠被随机分为假手术组、SAP模型组和r—Sak治疗组，每组27只。采用质量分数为5％的牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立SAP模型。于制模后6、12和18h检测下列指标：用组织血流仪检测胰腺组织的血流量；用放射免疫法检测血中ET-1、TXB2和6-keto-PGF1α含量；用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定血中vWF含量；用全自动血小板聚集仪检测胶原和花生四烯酸诱导的PAGm。结果术后6、12和18h SAP模型组大鼠胰腺组织血流量呈逐渐下降趋势，各时间点胰腺组织血流量均较假手术组显著下降（P均〈0．05），且术后各时间点PAGm及血中ET-1、vWF、TXB2含量均较假手术组显著升高，6-keto-PGF1α显著降低（P均〈0.05）；与SAP模型组比较，r—Sak治疗组术后各时间点PAGm、ET-1、vWF、TXB2含量均显著降低，6-keto-PGF1α则显著升高（P均〈0.05）。结论r—Sak可明显改善SAP大鼠胰腺的微循环，增加胰腺组织的血流量，对SAP大鼠具有积极的治疗作用。     

罗格列酮对重症急性胰腺炎大鼠肝脏的保护作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone,ROSI)对大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肝脏组织高迁移率族蛋白Bl(high mobility group box-1 protein,HMGB1)表达的影响.方法 雄性SPF级 Wistar 大鼠120只,随机(随机数字法)分为3组:假手术组(SO组)、SAP组、ROSI组.其中SAP组随机分为3 h,6 h,12 h和24 h组,每组20只.采用大鼠胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液制备SAP模型.检测血清淀粉酶(amylase,AMY)和肝功能(ALT,AST),观察胰腺和肝脏组织病理变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)mRNA表达水平,免疫印迹法(western blotting)检测肝脏HMGB1蛋白的表达水平.采用SPSS 16.0统计分析软件对数据进行q检验、单向方差分析和相关分析.结果 SAP组各时间点ALT、AST、肝脏组织病理评分和HMGB1蛋白表达均较SO组显著升高(P＜0.01);HMGB1蛋白表达水平与ALT、AST、胰腺和肝脏组织病理评分均呈正相关,与AMY水平无明显相关性(P＞0.05).ROSI组NF-κB mRNA和HMGB1蛋白水平、AMY、ALT、AST、胰腺和肝脏病理评分均低于SAP 24h组(P＜0.01).结论 SAP时,HMGB1作为晚期炎症介质,参与了肝损伤的病理生理过程.ROSI能显著抑制HMGB1的表达,对SAP肝损伤有明显保护作用.     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠血清瘦素的影响

目的观察大黄素对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠瘦素水平的影响,探讨其保护SAP胰腺损伤的机制。方法72只Wistar大鼠随机分为3组,每组12只。模型组（SAP）、大黄素组（EM）均以6％牛磺胆酸钠经胰管内逆行注射（1ml／kg）复制SAP模型,SAP组、EM组分别于造模后30min腹腔注射生理盐水、大黄素溶液（1ml／100g）,每天2次,连续3d。假手术组（SO）于胰胆管内注射生理盐水。测定24h、48h时点血清淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-10以及瘦素水平。结果24h时点SAP组血中淀粉酶[（9784．80±2634．89）U／L]显著高于EM组[（7832．67±2641．29）U／L]及SO组[（611．33±209．75）U／L],P〈0．01;脂肪酶水平有相似变化趋势。24h时点SAP组血中TNF-α[（517．76±98．98）pg／ml]显著高于EM组[（259．10±50．08）pg／ml]及SO组[（249．08±83．02）pg／ml],P〈0.01。24h时EM组血中IL-10为（677．99±154．07）pg／ml,高于SAP组[（637．73±323．90）pg／ml]。SAP组、EM组的瘦素水平上调,24h时点EM组[（23．91±4．61）ng／ml]显著高于SAP组[（13．61±8．75）ng／ml]（P〈0．05）。病理结果显示SAP组胰腺间质水肿、出血,腺泡坏死、炎性细胞浸润严重,EM组病变相对较轻。免疫组化法检测胰腺瘦素表达上调,阳性率增加。结论在重症急性胰腺炎早期,大黄素能够抑制炎性反应,并上调大鼠的瘦素水平,减轻胰腺的病理变化,对胰腺起到保护作用。     

罗格列酮对大鼠重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用

目的 探讨高选择性过氧化物酶体增殖物激活受体-γ的激动剂罗格列酮(ROSI)对大鼠重症急性胰腺炎肾损伤的可能作用。方法 雄性Wistar大鼠54只,随机（随机数字法）分为假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（SAP组）和罗格列酮处理组（ROSI组）,每组大鼠18只。胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备重症急性胰腺炎模型。ROSI组造模前30 min经股静脉注射10％二甲基亚砜(DMSO)溶解的罗格列酮（6mg/kg）;SO组、SAP组则经股静脉注射10％DMSO (0.2 mL/100 g)。术后3,12,24时点分批剖杀大鼠,每个时间点6只。分别检测各组血淀粉酶、血肌酐、血尿素氮、尿微量白蛋白、尿IgG、尿α1-微球蛋白含量,取肾组织行病理学检查。结果 SAP组各时间点血淀粉酶、血肌酐、血尿素氮、尿微量白蛋白、尿IgG、尿α1-微球蛋白等指均较SO组升高(P＜0.05);ROSI组上述指标较SAP组下降,各项指标在12,24h与SAP组差异具有统计学意义(P＜0.05),且随着处理时间的延长,ROSI组与SAP组各项指标的差异更显著。结论 重症急性胰腺炎可导致肾损伤,而罗格列酮可显著减轻重症急性胰腺炎所导致的肾损伤程度。     

乌司他丁联合生长抑素对重症急性胰腺炎大鼠血清炎性细胞因子的影响

目的研究乌司他丁联合生长抑素用药对重症急性胰腺炎(SAP)炎性细胞因子的影响。方法建立大鼠急性胰腺炎模型成功后,将大鼠分为4组:重症急性胰腺炎(SAP)组、乌司他丁(U)组、生长抑素(S)组、乌司他丁组联合生长抑素(U+S)组;另加假手术(SO)组,每组各10只。各组大鼠于造模后12 h下腔静脉取血检测血清淀粉酶(AMY)活性、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子(ICAM-1)、白介素-1β(IL-1β)水平,观察胰腺病理学改变并进行胰腺病理学评分。结果 1血清AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平:与SO组相比,其余4组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平均升高(P0.05);与SAP组相比,乌司他丁、生长抑素单给药组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平均降低,与单给药组相比,乌司他丁组联合生长抑素组AMY、TNF-α、ICAM-1及IL-1β水平进一步降低(P0.05)。2胰腺组织病理学表现:与假手术组相比,其余4组胰腺组织损伤严重;与SAP组相比,单给药组及乌司他丁联合生长抑素组病理损伤减轻;与单给药组相比,乌司他丁联合生长抑素组病理损伤进一步减轻。3胰腺病理学评分:与SO组相比,其余4组胰腺病理学评分均升高(P0.05);与SAP组相比,单给药组乌司他丁组、生长抑素组胰腺病理学评分均降低,与单给药组相比,乌司他丁组联合生长抑素组胰腺病理学评分进一步降低(P0.05)。结论乌司他丁联合生长抑素能够有效减轻SAP大鼠胰腺损伤,其保护机制可能与降低炎性因子的表达有关。     

聚ADP核糖聚合酶抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠肺炎症介质表达和肺损伤的影响

目的 探讨多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤治疗作用的机制.方法 36只Wistar大鼠按随机数字法分为假手术对照组(SO组)、SAP组和3-AB处理组.采用5％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法制备SAP模型,3-AB组在SAP造模前、后30 min分别经静脉注射3-AB (10 mg/kg).术后12 h测定血清淀粉酶、肺组织湿/干比、肺髓过氧化物酶(MPO)水平,光镜观察胰腺和肺脏病理变化,逆转录-聚合酶链反应法检测肺组织IL-1β和IL-6 mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测肺组织TNF-α和ICAM-1蛋白表达.结果 SAP制模后血清淀粉酶、胰腺和肺损伤评分、肺组织湿/干比和MPO值,肺IL-1β和IL-6 mRNA的表达、TNF-α和ICAM-1蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).应用3-AB处理后,上述指标较SAP组均明显下降(P＜0.05).结论 PARP抑制剂3-AB可能通过抑制肺组织MPO,下调IL-1β、IL-6、TNF-α和ICAM-1等炎症介质的表达,对SAP肺损伤发挥保护和治疗作用.     

有氧运动对衰老大鼠肾脏纤维化的影响

目的 观察规律有氧运动对衰老大鼠肾脏纤维化的影响并探讨其作用机制。 方法 采用随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为青年对照组（YC组）、老年对照组（OC组）及老年运动组（OE组）,每组10只大鼠。YC组及OC组大鼠均置于鼠笼内安静饲养,OE组大鼠则给予8周中等强度跑台有氧运动。于实验结束后检测各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮（BUN）及血清肌酐（SCr）含量,采用Masson染色检测肾脏纤维化程度,采用Western Blot技术检测转化生长因子β1（TGF-β1）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）、E-粘钙素及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平。 结果 与YC组比较,OC组大鼠24 h尿蛋白、BUN及SCr明显升高（P<0.05）,肾脏纤维化程度增加（P<0.05）,TGF-β1、p-p38MAPK和α-SMA蛋白表达上调（P<0.05）,E-粘钙素表达下调（P<0.05）;与OC组比较,OE组大鼠24 h尿蛋白、BUN及SCr明显降低（P<0.05）,肾脏纤维化程度减轻（P<0.05）,TGF-β1、p-p38MAPK和α-SMA蛋白表达下调（P<0.05）,E-粘钙素表达增加（P<0.05）。 结论 有氧运动能缓解衰老大鼠肾脏纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1/p38MAPK信号通路及上皮-间质转变有关。     

重症急性胰腺炎核因子-κB及炎症介质与肺损伤的实验研究

目的：观察核因子－κB（NF－κB）在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）时动态表达，探讨NF－κB在急性胰腺炎炎症反应中的信号传导过程以及NF－κB的活化与SAP时肺损伤的关系。方法：108只SD大鼠随机分为假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（ASP组）及 症急性胰腺炎地塞米松处理组（DEX组），采用免疫组织化学的方法检测脯NF－κB活性，同时测定血淀粉酶（AMS）及肿瘤坏死因子－α（TNF-α）和白细胞介素－6（IL－6）水平，并于光镜下观察胰腺及肺脏病理改变。结果：SAP组术后1h NF-κB开始表达，TNF－α和IL－6开始升高，3h达高水平,6h后下降。地塞米松能明显下调NF－κB的表达，抑制TNF-α和IL－6的产生，并能减轻对肺组织的损伤程度，使SAP病情明显缓解。结论：信号转录因子NF－κB参与了大鼠SAP时肺组织的炎症反应，地塞米松发挥了明显的抗炎作用，减轻了SAP时肺组织损伤，这与其对NF－κB表达的抑制及细胞因子的调节作用密切相关。     

大黄素对重症急性胰腺炎大鼠小肠水通道蛋白3表达的调节作用

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）大鼠小肠水通道蛋白3（AQP3）的表达及大黄素的调节作用。方法将80只SD雄性大鼠随机分成假手术组（n=20）、模型组（n=30）、大黄素治疗组（n=30）。采用胰胆管逆行匀速注入牛磺胆酸钠（1ml／kg）方法制作SAP模型;假手术组给予等量生理盐水,大黄素组于制模后予大黄素灌胃（20mg&#183;kg-1&#183;d,分两次给予）,模型组及假手术组给予等量生理盐水。各组分别于制模后24、72、120h处死大鼠,留取标本,采用苏木素-伊红（HE）染色、麦芽糖苷法、免疫组化法、蛋白质免疫印迹法（Western blotting）、实时定量聚合酶链反应（PCR）技术测定胰腺病理评分、血淀粉酶、AQP3蛋白及mRNA表达。结果模型组大鼠胰腺病理评分及血淀粉酶水平均较假手术组明显升高,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;大黄素能明显降低SAP大鼠胰腺病理评分及血淀粉酶水平（均P〈0．05）。SAP大鼠回肠黏膜AQP3蛋白及mRNA表达均较假手术组明显上调,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,且以24h时更为显著;大黄素治疗可明显下调AQP3的蛋白及mRNA表达,蛋白表达于24、72、120h,mRNA表达于24h、72h与模型组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论AQP3可能参与了SAP的病理生理改变;大黄素治疗可通过下调AQP3的蛋白及mRNA表达,明显改善SAP病情。     

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织G蛋白αi2亚单位mRNA表达的影响

目的观察重症急性胰腺炎(SAP)时G蛋折αi2亚单位Gαi2 mRNA在大鼠胰腺组织的表达变化及血小板活化因子(PAF)拮抗剂银杏苦内酯B(BN52021)的影响,从而探讨SAP发病过程中Gαi2与PAF信号转导途径及BN52021治疗机制的关系。方法雄性Wistar大鼠180只,随机分为阴性对照组(NC组),SAP模型组(SAP组)及BN52021治疗组(BN组),每组再分为6个时相点(1、2、3、6、12、24 h),每个时相点10只。观察各组大鼠胰腺组织病理学变化,采用全自动生化分析仪检测血浆淀粉酶,并以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)动态检测Gαi2 mRNA在各组大鼠胰腺组织的表达水平。结果各组大鼠胰腺组织均检测到了Gαi2 mRNA的表达信号。制模后12 h Gαi2 mRNA表达显著上调(t=-7．213,P=0．000),该上调持续到24 h以后(t=-8．597,P=0．000),BN52021治疗未改变这种上调趋势。结论Gαi2 mRNA在正常大鼠胰腺组织有稳定表达,Gαi2有可能参与了SAP的发病过程,但其与SAP时PAF信号转导通路及BN52021治疗SAP信号转导机制的关系尚不十分明确。     

吡格列酮对重症急性胰腺炎血清细胞因子和组织病理学评分的影响

目的探讨TNF-α、IL-6和IL-10在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）早期的动态变化及意义,并观察吡格列酮的干预性作用。方法将54只雄性SD大鼠随机分成假手术组（C组）、SAP组、吡格列酮组（P组）。采用逆行胰胆管注射法建立SAP模型;P组大鼠在造模前2h腹腔内注射吡格列酮溶液50mg/kg。于造模后3h、6h、12h分批处死大鼠,采用全自动生化分析仪检测血清淀粉酶;ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-10的含量;并常规HE染色进行胰腺组织病理学评分。结果 SAP组与C组比较,胰腺组织病理评分、血清淀粉酶、TNF-α及IL-6含量在各时间点均升高（P〈0.01）,IL-10含量无统计学意义（P〉0.05）;干预性使用吡格列酮后,胰腺组织病理学评分、血清淀粉酶、TNF-α及IL-6水平与SAP组相比均有降低（P〈0.05）,IL-10水平高于SAP组（P〈0.05）。结论在SAP早期阶段细胞因子的变化与病情进展密切相关,吡格列酮可通过调节促炎与抗炎因子的平衡,减轻炎症反应。     

大鼠重症急性胰腺炎肺损伤时髓系细胞触发受体-1的表达

目的 探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)引起急性肺损伤(acutelung injury,ALI)时髓系细胞触发受体-1(triggering receptor-1 on myeloid cells,TREM-1)以及相关炎症因子的表达.方法 雄性SD大鼠24只,随机(随机数字法)分为SO组(假手术组)、SAP组和SAP+ LP17组(LP17为人工合成的TREM-1多肽),每组8只,采用逆行胰胆管技术制备SAP大鼠模型.于造模后12 h提取胰腺及左肺组织,苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺和肺组织的病理形态学变化;免疫组织化学法采用巨噬细胞特异性抗体CD68检测巨噬细胞浸润情况;通过荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR法)检测肺组织TREM-1、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α) mRNA的表达量.计量资料采用均数±标准差((-x)±s)表示,采用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析,以P ＜0.05为差异具有统计学意义.结果 HE染色结果显示,SAP组胰腺及肺组织损伤程度均较SO组及SAP+ LP17组增高,其病理评分均较SO组及SAP+ LP17组高(P＜0.05);免疫组化染色结果显示,SAP组肺组织巨噬细胞较SO组浸润明显;SAP组肺组织TREM-1 mRNA的表达水平较SO组及SAP+ LP17组均显著增高(P＜0.01或P＜0.05),IL-1β和TNF-α mRNA表达水平亦较SO组及SAP+ LP17组显著增高(P＜0.01或P＜0.05).结论 TREM-1在SAP急性肺损伤中表达显著增高,可能是SAP引起ALI机制中的一个重要炎症调节介质.LP17可以有效降低TREM-1的表达,减少炎症因子的释放,从而有利于减轻SAP引起的ALI.     

髓系细胞触发受体-1对重症急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的影响

目的 探讨髓系细胞触发受体-1（triggering receptor-1 on myeloid cells,TREM-1）的表达与重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）肠屏障功能障碍的关系。方法 雄性Wistar大鼠64只,随机（随机数字法）分为假手术组(SO)和SAP组,每组32只,采用逆行胰胆管注射5％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型,分别于造模后2,6,12,24h时点取血和回肠组织。改良分光光度法检测血浆D-乳酸、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）和内毒素浓度。逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)方法检测回肠组织TREM-1、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）mRNA的表达水平。对数据进行单因素方差分析和spearman相关性分析,P＜0.05表示差异具有统计学意义。结果SAP组各时点血浆D-乳酸、DAO和内毒素的水平均高于假手术组(P ＜0.01,P＜0.05);SAP组各时点回肠组织TREM-1,IL-1β和TNF-α mRNA的表达水平较假手术组显著增高(P ＜0.01,P＜0.05),TREM-1 mRNA表达水平与IL-1β及TNF-α mRNA表达水平均呈正相关(r=0.956,P =0.044;r =0.986,P=0.015),IL-1β mRNA表达水平与TNF-α mRNA表达水平无明显相关性(P=0.133)。结论 SAP时,大鼠肠组织内TREM-1表达上调,促进炎症介质释放和肠黏膜损伤加重,TREM-1在SAP肠屏障功能障碍的发生发展中起重要作用。